全 文 ：·1076· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
题将结合matK基因作进一步研究。再次是测序与
克隆技术问题，国内普遍采用的是PCR产物直接测
序，由于PCR产物浓度低，易受污染，给测序反应和
读序工作造成了一定困难。本课题将经PCR获得的
目的基因用大肠杆菌克隆后分离、净化，得到的目的
基因不仅浓度高，而且污染少，测序、读序效果好，成
功率显著提高，为目前日本、欧美等国家普遍采用的
方法‘19]，值得推广。
References：
[1]GrogoryMP，DouglasES，PamelaSS．Higherlevelela+
tionshipsofApiales(ApiaceaeandAraliaceae)basedonphy
logenelicanalysisofrbcLsequencesEJ]．AmJBot，1996，
83(4)：99-515．
[2]GregoryMP，DouglasES，PamelaSS．Clarificationofthe
relationshipbetweenApaceaeandAraliaceaebas donmatK
andrbcLsequencedata[J]．AmJBot，1997，84(4)：565—
580．
[3]StephenRD，DeborahKD．Amolecularphylogenyof却i—
d(eaesubfamilyApioideae：evidencefromnucl arribosoma
DNAinternaltranscribedspacersequencesEJ]．AmJBot，
1996，83(2)：234—251．
[4]StephenRD，SeenmntiR，DeborahSKD，eta1．Molecular
systemlaticsofApiaceaesubfamilyApioideaephyolgenetic
analysisofnuclearribosomalDNAinternaltranscribedspacer
andplastidrpoClintronsequencesEJ]．AmJBot，1998，85
(4)：563—591．
[53GregoryMP，StephenRD．MajorlineageswithinApiaceae
subfamilyApioideae；Acomparisonofchloroplastreseriction
siteandDNAsequencedata[J]．AmJBot，1999，86(7)：
1014—1026．
E6]StephenRD，DeborahSKD，MarkFW．Aphylogenyof
thefloweringplantfamilyApiaceaeb sedonchloroplase
DNArpll6andrpoClintronsequences：Towardsasupra—
genericclassificationofsubfamilyApioideae[J]．AmJBot，
2000，87(2)：273—292．
[7]BaldwinBG，SandersonMJ，PorterJM，ela1．TheITSre—
gionofnuclearribosomalDNA：av luablesourceof vidence
onangiospermphylogeny[J]．AnnMoBotGard，1995，82：
247—277．
[8]
[9]
[103
[11]
[12]
[13]
[14]
[15]
[16]
[17]
[18]
[19]
DoyleJL，DoyleJA．ArapidDNAisolationpr cedurefor
smallquantitiesoffreshleafmaterial[J]．PhytochemBull，
1987，19：11—15．
WhiteTJ，BrunsT，LeeS，eta1．AmplificationandDirect
SequencingofFungalRibosomalRNAGenesforPhylogenet—
icsrM]．California：AeademicPress，1990．
SangerF，NicklenS，CoulsonSR．DNASequencingwith
chain—terminationhibitors[J]．ProcNatAcadSciUSA，
1977，74：5463-5467．
TheJapaneseBiochemicalSo iety(JBS)：PracticalBiochem—
istryExperimentation[M]．Taikyo：ChemicalCommissionf
Taikyo，1995．
DowineSR，0lysteadRG，ZurawaskiG，eta1．Six，iude—
pendenelossesofthecpDNArplziutronindicotyledons[J]．
MolPhylogImplEvol，1991，45(5)：1245．
HirasnkaJ，ShimadaH，MinoruN，eta1．Thecompletese—
quenceoftherice(orgzasativa)chloroplastgenome：inter—
molecularrecombinationbe weendistinctrRNAtenesac—
countsforamajorplasidDNAinversionduringthevolution
ofthecereals[J]．MolGenGenet，1989，217：185—194．
EditorialBoardofChinaHerbal，StateAdministrationof
TraditionalChineseMedicine．ChinaHerb l(中华本草)
[M]．Shanghai：ScientificandT chnicalPub ishers，1999．
LiuYP，CaoH，HanGR，ela1．MatKandITSnucleotide
sequencingofcruderugChuanxiongandphylogeneticrela—
tionshipbetweentheirspeciesfromChinaandJapan[J]．
ActaPharmSin(药学学报)，2002，37(1)：63—68．
ZhuHF，YangJB，ZhangCQ，eta1．Systematicpositionof
Primulasecundiflora(Primulaceae)inferredfromnucl arri—
bosomalDNAITSsequencedata[J]．ActaPhy otaxonSin
(植物分类学报)，2002，40(2)：133一138．
GaoLM，YangJB，ZhangCQ，eta1．Phylogeneticrela—
tionshipofsubgenusTsutsusi(Rhododendron)basedonITS
sequences[J]．ActaBotYunn n(云南植物研究)，2002，24
(3)：313—320．
JohnsonLA，SoltisDE．Phylogenetici ferencei Saxifra—
gaceaes nsntrictoandGilia(Polemoniaeeae)usingm tK
sequnces口]．AnnMoBotGard，1995，82：149-175．
PetersenG，SebergO，LarsenS．Thephylogeneticandtaxo—
nomicpositionofLilaeopsis(Aaiaeeae)，withnotesonthe
applicabilityofITSsequencedataforphylogeneticr con—
struction[J]．Aust&stBot，2002，15：181—191．
基因枪介导灯盏花遗传转化及几个影响因素的研究
邱 璐1’2，王 波H，罗春梅3，曹光宇2，范战民2，矍礼嘉2
(1．楚雄师范学院，云南楚雄675000；2．北京大学生命科学院蛋白质工程及基因工程国家重点
实验室，北京100871；3．楚雄农业学校，云南楚雄675000)
摘 要：目的 获得具有较强抗虫抗真菌的转基因灯盏花植株。方法 通过PCR聚合酶链式反应得到目的基因
RBBl2—3，通过中间载体PBS及植物载体YY46，得到带有目的基因的质粒，用基因枪轰击法进行遗传转化。对基因
枪轰击受体、轰击压力、抗生素庆大霉素(Gent．)的敏感性进行对照实验。结果用灯盏花的真叶作为基因枪轰击
收稿日期：2005—09—25
作者简介：邱璐(1965一)，女，四川人，硕士，副教授，主要从事植物转基因及植物组织培养研究。
*通讯作者王波(1961一)，男，本科，副教授，主要从事分析化学及化工研究。
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1077·
受体效果最好，其次为Ⅱ型愈伤组织，灯盏花的根、茎，I型愈伤组织作为基因枪轰击受体效果较差；8．96×106Pa
的轰击压力诱导灯盏花的真叶形成转基因不定芽效果最好，Ⅱ型愈伤组织效果次于真叶；使用50pg／mLGent．作
选择压力筛选Gent．标记的阳性转基因灯盏花植株效果最好。结论用基因枪轰击法将水稻RBBl2—3基因转移到
灯盏花中具有较好效果，成功获得转基因灯盏花植株。
关键词：灯盏花；基因枪；遗传转化；轰击受体；轰击压力；庆大霉素(Gent．)
中图分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)07—1076—05
GeneticransformationofErig’eronbreviscapusind cedbyparticlegun
withafewaffectingfactors
QIULul’2，WANGB01，LUOChun—mei3，CAOGUang—yu2，FANZhan—min2，QULi—jia
2
(1．ChuxiongNormalUniversity，Chuxiong675000，China；2．NationalLaboratoryfP oteinEngineeringand
PlantGeneticEngineering，CollegeofLifeScience，PekingUniversity，Beijing100871，China；
3．ChuxiongAgriculturalSchool，Chuxiong675000，China)
Abstract：ObjectiveTogetgen ticransformatedErig ronbreviscapusplantletwi htheantiinsect
andantifungieffects．MethodsTheplasmidw thgeneRBBl2—3wasproducedbyPCR，middlecarrier
PBSandplantcarrierYY46．ByusingtheparticleguntobombardE．breviscapus，genetictransformation
wasrealized．Itwasdonewiththecontrolexperimentonbombardedmaterials，bombardingpressures，and
Gent．sensitivity．ResultsTheresultofgeneticransformationbyus ngtrueleavesasbombardedmat ri—
alwasthebest；Ⅱ一typecalluswerethenextinorder；theroots，stems，andI—typecalluswerethelastin
theresult．Thebombardingpressureof8．96×106Pawasthebesttoinducetrueleavesformingadventi—
tiousbud．Theresultofusingthepressureof7．58×106Paand8．96×106PatobombardⅡ一typecallusdid
notshowanydifferencea dwasnexttotrueleaves．Thebestr sultisusing50f_tg／mLGenttochoosethe
E．breviscapusofgeneticransformation．ConclusionThepaddyRBBl2—3transformedintothegenetic
transformationonE．breviscapusbyparticlegunbombardingisthebest．ThegeneticransformatedE．
breviscapusplantlethasbeenobtained．
Keywords：Erigeronbr viscapus(Vant．)Hand．一Mazz．；particlegun；genetictransformation；born—
bardedmaterials；bombardingpressure；Gentamicin(Gent．)
灯盏花又名灯盏细辛，为菊科飞蓬属植物短葶
飞蓬Erigeronbreviscapus(Vant．)Hand．-Mazz．，
主要分布于我国云南、广西、四川、贵州、西藏等地。
其性寒，味微苦、甘温辛，具有散热解表、活血化瘀、
通经活络、舒经治瘫、祛风除湿、抗炎止痛等功效，在
临床上对心、脑血管疾病具有特殊疗效，已收入《中
国药典》。目前，灯盏花已投入大规模的人工栽培，但
种子采收困难，数量少，发芽率低，价位高；植株抗性
差，易感病感虫，死亡率高；生物产量低；有效成分的
量低，严重制约了灯盏花的发展。该项研究的目的在
于有效提高灯盏花的抗病抗虫性，从而有效提高灯
盏花的生物产量，有效控制灯盏花人工栽培中农药
的使用，有效进行无公害生产，保护野生灯盏花，促
进灯盏花的可持续发展。该项研究通过对水稻蛋白
酶抑制基因RBBl2—3的克隆，通过基因枪轰击法实
现对灯盏花的遗传转化。
1材料与方法
1．1材料：灯盏花取自云南省楚雄州星升药业有限
公司。水稻基因片段33HZ、大肠杆菌DH52及相关
转化载体PBS、YY46来自北京大学生命科学院蛋
白质工程及基因工程国家重点实验室。
1．2水稻RBBl2—3基因的克隆：水稻蛋白酶抑制
基因RBBl2—3的基因序列及功能均已研究清楚，它
具有558bp，能有效地抗虫抗真菌，尤其对苗期抗
真菌有较好效果[1]。通过软件设计引物，以带水稻
RBBl2—3基因的片段33HZ为模板，进行PCR聚合
酶链式反应，通过琼脂糖电泳凝胶检测并回收目的
基因RBBl2—3。
1．3 通过中间载体构建RBBl2～3PBS质粒：用
BamHI、Sal1分别对中间载体PBS及目的基因
RBBl2—3进行酶切，使用连接酶Taligase进行连接，
用连接产物转化大肠杆菌DH52，筛选阳性克隆。将
阳性克隆的大肠杆菌进行扩大培养，用试剂盒提取
质粒，得到RBBl2—3PBS质粒，通过琼脂糖电泳凝
万方数据
·1078· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
胶检测该质粒。
1．4 通过植物载体YY46构建质粒RBBl2—3
YY46：用BamHI、Sal1分别对质粒RBBl2—
3PBS、植物载体YY46进行酶切，使用连接酶Tali—
gase进行连接，用连接产物转化大肠杆菌DH52，筛
选阳性克隆。将阳性克隆的大肠杆菌进行扩大培养，
用试剂盒提取质粒，得到质粒RBBl2—3YY46，通过
琼脂糖电泳凝胶检测该质粒。
1．5 基因枪轰击受体对照：将灯盏花的种子用
0．2％HgCl：消毒5min，无菌水冲洗10次，接种在
MS0培养基上萌发生根，形成组培苗[2]。取30d组
培苗的真叶、根、茎、I型愈伤组织(使用MS+BA
0．5mg／L+NAA2．0mg／L暗培养30d)、Ⅱ型愈
伤组织(使用MS+BA0．5mg／L+NAA2．0mg／L
光培养2周)[21作为基因枪轰击对象进行对照。轰击
前一天，将轰击材料转移到渗透培养基MS+甘露
醇73g／L上处理16h[3]，材料尽可能摆放紧密，但
不要太厚。
1．6基因枪轰击压力对照：使用Bio—Rad公司生产
的PDSl000／He高压氦气基因枪轰击进行转基因。
无菌状态下制备金粉悬液60mg／mL，轰击前取金
粉悬液50pL，加2．5mol／LCaCl250肛L，0．1mol／
L亚精铵20弘L，5pL的质粒DNA，充分悬浮振荡，
离心弃上清液，加无水乙醇洗2～3次。加80牡L无
水乙醇，充分悬浮振荡，每打一次基因枪取10～12
肛L悬液。设置轰击压力7．58×106、8．96×106Pa进
行对照口~5]。打完基因枪后4～5h将被轰击的材料
转移到MS+BA0．5mg／L+IAA0．5mg／L的过
渡培养基中过渡3d[1]，并进行暗培养，然后转入选
择培养基暗培养4d，再进行光照诱导不定芽形成。
1．7抗性植株筛选：质粒RBBl2—3YY46中带有庆
大霉素抗性基因，因此在MS+BA0．5mg／L+
NAA0．5mg／L[11的培养基中分别加入0、25、50、75
／zg／mL的庆大霉素(Gent．)进行转基因灯盏花抗性
植株筛选压力进行对照。
2结果与讨论
2．1水稻RBBl2—3基因电泳检测结果：通过PCR
方法得到目的基因RBBl2—3，与DNA样品同步电
泳的结果显示，目的基因略小于564bp，符合水稻
RBBl2—3片段大小，见图1。
2．2 质粒RBBl2—3PBS电泳检测结果：RBBl2—3
PBS质粒酶切产物与目的基因RBBl2—3同步电泳的
结果及以RBBl2—3PBS质粒为模板进行PCR的产
物电泳结果显示，RBBl2—3与PBS连接成功，见图2。
4号加样孔为DNA样品，5号及6号加样孔为通过PCR方法
得到的目的基因RBBl2—3
No．4isDNAsample．No．5andNo．6are
aimedgeneRBBl2—3gotbyPCR
图1 目的基因RBBl2—3与DNA样品同步电泳结果图
Fig．1EleetrophorogramofRBBl2-3ndDNA
marksampleinsamestep
1号加样孔为样品DNA，2号加样孔为目的基因，6号加样孔为
质粒RBBl2—3PBS，7号加样孔为质粒RBBl2—3YY46，8号加样
孔为质粒RBBl2—3YY46的酶解产物，9号加样孔为以质粒RB-
B12—3PBS为模板进行PCR的产物，10号加样孔为以RBBl2—3
YY46质粒为模板进行PCR的产物
No．1isDNAsample，No．2isaimedgeneRBBl2—3gene，No．6
is RBBl2—3PBSplasmid，No．7is RBBl2—3YY46plasmid，
No．8isproductionofplasmidRBBl2—3YY46tobecutby
enxyme，No．9isproductionofPCRfromplasmidRBBl2—3
PBS，No．10isproductionofPCRfromplasmidRBBl2—3YY46
图2 质粒RBBl2—3PBS、RBBl2—3YY46与目的基因
RBBl2—3及DNA样品同步电泳圈
Fig．2ElectrophorogramofRBBl2—3，RBBl2-3
PBS，RBBl2—3YY46，andDNAmark
sampleinsamestep
2．3质粒RBBl2—3YY46电泳检测结果：RBBl2—3
YY46质粒酶切产物与目的基因RBBl2—3同步电泳
结果及以RBBl2—3YY46质粒为模板进行PCR的
产物电泳结果显示，RBBl2—3与YY46连接成功，见
图2。在实验过程中发现如果不使用中间载体PBS，
直接使用RBBl2—3与植物载体YY46的酶解产物
连接，均不能成功筛选出阳性克隆。
2．4基因枪轰击受体对照实验结果：轰击2周后，受
体上开始形成不定芽。表1统计结果表明，用真叶作基
万方数据
中草蔼ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1079·
因枪轰击受体效果最好，筛选出3个转基因灯盏花不
定芽；其次为Ⅱ型愈伤组织，筛选出2个转基因灯盏花
不定芽；以灯盏花的根、茎和I型愈伤组织作基因枪轰
击受体效果较差。灯盏花真叶作基因枪轰击受体效果
最好有2个原因：第一真叶叶面积较大，易于排列紧
密，捕获微弹的能力强，微弹有效轰击效率高；第二灯
盏花的真叶易于形成不定芽，尤其在MS+BA0．5
mg／L+IAA0．5mg／L培养基上形成不定芽的的能
力较强[2]。根和茎圆而细长，无论排列多紧密，总有大
量缝隙存在，微弹有效轰击效率降低。I型愈伤组织与
Ⅱ型愈伤组织细胞壁薄，容易被微粒击穿，导致微弹有
效轰击效率低。另外I型愈伤组织与Ⅱ型愈伤组织对
抗生素Gent．更敏感，对真叶最合适的抗生素筛选浓
度对愈伤组织可能偏高，从而导致部分转基因细胞不
能正常形成不定芽。灯盏花的Ⅱ型愈伤组织呈黄绿色，
为胚性愈伤组织，具有较强的形成不定芽的能力。而灯
盏花I型愈伤组织呈现无色，为原胚性愈伤组织，不能
直接形成不定芽，必须转变成Ⅱ型愈伤组织后才能形
成不定芽¨’7]，因此Ⅱ型愈伤组织转基因效果比I型愈
伤组织好，见表1及图3、4。
表1基因枪轰击受体材料对照实验结果
Table1 Controlexperimentresultonbombarded
materialsbyparticlegun
比较内容 筛选出的转基因灯盏花不定芽数 现象
图3 刚打完基因枪的灯盏花真叶
Fig·3Trueleavesafterbombardmentbyparticlegun
2．5基因枪轰击压力对照实验：表2的统计结果显
示，8．96×106Pa的轰击压力对灯盏花真叶形成转
基因不定芽效果较好。对Ⅱ型愈伤组织，效果次于真
叶，且7．58×106Pa与8．96×106Pa轰击压力效果
无显著差异。对根、茎、I型愈伤组织，7．58×106Pa
与8．96×106Pa的效果均不满意。
图4 刚打完基因枪的灯盏花愈伤组织
Fig·4Callusafterbombardmentbyparticlegun
表2基因枪轰击压力对照实验结果
Table2 Controlexperimentresultofbombarding
pressuref omparticlegun
2．6抗性植株筛选对照实验结果：表3的统计结果
显示，使用50／zg／mLGent．作选择压力筛选Gent．
标记的阳性转基因灯盏花植株效果最好，使用相同的
培养基进行3次重复筛选，其结果均较稳定，不定芽
形成较多绿色丛生苗。75、100t-g／mL质量浓度过
高，对细胞造成严重伤害，转基因细胞不能正常生长。
将无根丛生苗移人MS或1／2MS无激素的培养基
中，生根形成完整植株。见表3及图5、6。
表3转基因植物对Gent．敏感性测定结果
Table3 Sensitivityofplantaftergeneticransformation
onGent．
质量浓度／
， ，，、
非转基因植物长势 转基因植物长势
L”g‘mL1，
0 植株绿色，长势较好
25 大多白化，20％出现非白化
50 所有苗均出现白化，无非白化苗
75 所有苗均出现白化，无非白化苗
100 所有苗均出现白化，无非白化苗
植株绿色，长势较好
大多为非白化苗
出现少数非白化苗
无非白化苗出现
无非白化苗出现
图5筛选抗性植株
Fig．5Selectingantiplantlet 万方数据
·1080· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月-
图6抗性植株
Fig．6Antiplantlet
References：
[1]QiuL，QuLJ，YuH，eta1．Advancesinstudieson
Erigeronbreviscapus[J]．ChinTraditHerbDrugs(中草
药)，2005，36(1)：14l—144．
[2]QiuL，QuI。J．Thestudyoftissueculturesystemon
Erigeronbreviscapus(Vant．)Hand．一Mazz．inge eticrans一
[3]
[43
[5]
[6]
[7]
formation[J]．JChuxiongNormUniv(楚雄师范学院学
报)，2004，78(3)：91—96．
GuHY，QuLJ，MingXT，eta1．PlantGenesandMolecu—
larManipulations(植物基因与分子操作)EM]．Beijing：The
PublishingCompanyofPekingUniversity，1995．
QinXM．YeY，YuL．Factorsaffectingm croprojectile
bombardment—mediatedtransformationofsugarcan[J]．Gui
haia(广西植物)，2003，23(4)：339—342．
LiuWH．LiWX。HuSL．ela1．Studyoninfluencingfac—
torsoftissuecultureandbiolisticbombardmentinwheat
[J]．ActaBotBorealOccidentSin(西北植物学报)，2002，
22(3)：602—610．
ZhiPR．PlantTissueCulture(植物组织培养)[M]．
Guangzhou：PublishingCompanyofHi herEducationin
Guangdong，2003．
MaZH，ZhangYF．XuCX，ela1．Tissuecultureandge—
netictransformationofkentuckybluegrassviamicroprojectile
bombardment[J]．JFudanUniv(复旦大学学报)，1999，38
(5)：541—544．
三七法呢基焦磷酸合酶的基因克隆及序列分析
陈 莉，蓝秀万，李 坤，朱 华，吴耀生’
(广西医科大学生物化学与分子生物学教研室，广西南宁 530021)
摘 要：目的 对三七法呢基焦磷酸合酶(FPS)进行基因克隆及序列分析。方法采用cDNA末端快速扩增法，以
三七根总RNA为模板扩增出三七FPS基因。结果序列分析表明，所克隆的eDNA序列全长1409bp，开放阅读
框共编码343个氨基酸残基，推测的氨基酸序列与积雪草、灰白银胶菊、黄花蒿的FPS的氨基酸序列同源性最高，
分别达95％、87％、86％。结论首次分离并报道了三七FPScDNA克隆，为进一步研究三萜皂苷生物合成机制及
其在提高植物药用价值方面的应用奠定基础。
关键词：三七；法呢基焦磷酸合酶；cDNA末端快速扩增法
中图分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)07—1080—04
Geneticcloninga dsequenceanalysisoffarnesylp rophosphateynthase
inPanaxnotoginseng
CHENLi，LANXiu—wan，LIShen，ZHUHua，WUYao—sheng
(DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology，GuangxiMedicalUn versity，Nanning530021，China)
Abstract：ObjectiveTo lonandsequencethecDNAencodingfarnesylp rophosphateynthase
(FPS)fromPanaxnotoginseng．MethodsTheDNA，encodingFPSinP．notoginseng，wasamplifiedby
RACEstrategywiththetotalRNAofrootasthetemplate．ThefragmentofFPSwasclonedandse．．
quenced．ResultsTheanalysisre ultsrevealedthathefull—lengtheDNAhad1 409bpwithanopen
readingframeencoding343aminoacidsofprotein．TheFPSs quencehad95％，87V0，and86％amino
acidsequencehomologyt theFPSsequenceofC ntellaasiatica，Partheniumarg tatum，andArtemisia
annua，respectively．ConclusionTheDNAencodingFPSfromP．notoginsengisclonedandreported．
收稿日期：2005—09—28
基金项目：广西科学基金(桂科基0342003—3)
作者简介：陈莉(1979一)，女(壮族)，广西柳州人，在读硕士，从事植物基因工程研究。
Tel：(0771)5358817E—mail：flowerhua623@163．tom
*通讯作者吴耀生Tel：(0771)5358817E—magi：wuyaoshen903@sina．com
万方数据
基因枪介导灯盏花遗传转化及几个影响因素的研究
作者： 邱璐， 王波， 罗春梅， 曹光宇， 范战民， 矍礼嘉， QIU Lu， WANG Bo， LUO Chun-
mei， CAO Guang-yu， FAN Zhan-min， QU Li-jia
作者单位： 邱璐,QIU Lu(楚雄师范学院,云南,楚雄,675000;北京大学生命科学院蛋白质工程及基因工程
国家重点实验室,北京,100871)， 王波,WANG Bo(楚雄师范学院,云南,楚雄,675000)， 罗春
梅,LUO Chun-mei(楚雄农业学校,云南,楚雄,675000)， 曹光宇,范战民,矍礼嘉,CAO Guang-
yu,FAN Zhan-min,QU Li-jia(北京大学生命科学院蛋白质工程及基因工程国家重点实验室
,北京,100871)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(7)

参考文献(7条)
1.Qiu L;Qu L J;Yu H Advances in studies on Erigeron breviscapus[期刊论文]-中草药 2005(01)
2.Qiu L;Qu L J The study of tissue culture system on Erigeron breviscapus (Vant.) Hand.-Mazz.in
genetic transformation[期刊论文]-楚雄师范学院学报 2004(03)
3.Gu H Y;Qu L J;MingXT 植物基因与分子操作 1995
4.Qin X M;Ye Y;Yu L Factors affecting microprojectile bombardment-mediated transformation of
sugarcan[期刊论文]-广西植物 2003(04)
5.Liu W H;Li W X;Hu S L Study on influencing factors of tissue culture and biolistic bombardment in
wheat[期刊论文]-西北植物学报 2002(03)
6.Zhi P R 植物组织培养 2003
7.Ma Z H;Zhang Y F;Xu C X Tissue culture and genetic transformation of kentucky bluegrass via
microprojectile bombardment 1999(05)

本文读者也读过(10条)
1. 李廷钊.周萍.刘文庸.张川.苏娟.张卫东 HPLC法测定灯盏细辛中灯盏花乙素的含量[期刊论文]-中草药
2004,35(11)
2. 文富强.刘长庚.罗建国.WEN Fu-qiang.LIU Chang-geng.LUO Jian-guo 灯盏花对体外培养人牙龈成纤维细胞增
殖的影响[期刊论文]-临床口腔医学杂志2008,24(9)
3. 项明洁.应春妹.孙民.倪语星 E试-验检测革兰阴性杆菌的最低抑菌浓度[期刊论文]-上海第二医科大学学报
2001,21(3)
4. 李介华.袁春雷.肖伟民.肖正儒.邱文影 大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶与耐药监测[期刊论文]-中国公共卫生
2005,21(5)
5. 卢兰芬 255株金黄色葡萄球菌的耐药性分析[期刊论文]-华中医学杂志2006,30(1)
6. 刘华.廖维靖.周华.魏黎.LIU Hua.LIAO Wei-jing.ZHOU Hua.WEI Li 灯盏细辛注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤
后梗死面积比和波谱的影响[期刊论文]-中草药2006,37(6)
7. 张俭.肖逢连.阳小燕.ZHANG Jian.XIAO Feng-lian.YANG Xiao-yan 灯盏花生物学特性及其药用功效[期刊论文
]-时珍国医国药2007,18(12)
8. 张晓莉.刘四海.周芳.魏冬云.Zhang Xiao-li.liu Si-hai.Zhou Fang.Wei Dong-yun 灯盏花的药理活性研究[期
刊论文]-四川生理科学杂志2008,30(2)
9. 仲艳丽 灯盏花的利用及无公害栽培技术初探[期刊论文]-安徽农业科学2004,32(1)
10. 杨中保.刘春霞.赵卫敬.崔明昆.严胜柒.杨晓虹.张云峰.YANG Zhong-bao.LIU Chun-xia.ZHAO Wei-jing.CUI
Ming-kun.YAN Sheng-qi.YANG Xiao-hong.ZHANG Yun-feng 灯盏花rDNA ITS序列测定及其在替代资源寻找中的意义
[期刊论文]-时珍国医国药2010,21(10)


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