全 文 ：中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第2期2006年2月·285·
0．5、1．0、2．0、5．0mL置于10mL的容量瓶中加入
甲醇至刻度，制成不同质量浓度的对照液，分别进样
10肛L，以色谱峰峰面积为纵坐标，对照品质量浓度
为横坐标做线性回归，回归方程为Y=657．53X，
r一0．999。结果表明茯苓酸在0．362～9．050Yg
与色谱峰面积呈良好线性关系。
2．5 精密度试验：精密吸取同一样品溶液lo弘L，
连续进样6次，以茯苓酸的峰面积计算，其RSD一
2．3％。结果表明：6次测定的RSD<2．3％，具有良
好的精密度。
2．6稳定性试验：精密吸取同一样品溶液分别于
1、2、4、8、12、24h各进样10弘L，以茯苓酸峰面积计
算，其RSD一2．12％(咒一6)，表明供试品溶液在
24h内稳定。
2．7重现性试验：精密称定同一批药材样品6份，
按样品液制备法制备，各吸取10弘L进样测定，其
RSD=1．12％。结果表明该方法重现性良好。
2．8回收率试验：精密称取已知量的样品约1．0g，
分别加入定量的茯苓酸，按照供试品项下规定制备
并测定其回收率，其平均回收率为99．58oA，RSD=
0．802％(咒=6)。
2．9样品测定：取不同产地茯苓皮粗粉按供试样品
项下进行操作并测定量，结果表明安徽茯苓中茯
苓酸的量最高(0．573oA)，云南茯苓皮次之
(o．451％)，湖北茯苓皮中茯苓酸量最低
(O．3223％)。色谱图见图2。
3讨论
3．1《中国药典))2000年版中没有茯苓药材的量测
定，本研究采用了流动相乙腈一0．5％磷酸水(70：
30，75：25，80：20)及梯度洗脱的方法，结果表明比
流动相为70：30时洗脱效果较好，故本实验流动相
比为70：30。
l
A f＼ B
——^——，一一JL——一一。．t、I～五一— — J、。 ——一r——一JL一— 一一九————川：～五一
o 2 4 6 8 IO 0 2 4 6 8 10
-一JL⋯三一：坐』0』一～0 2 4 6 8 IO 0 2‘46 8 10
图2茯苓酸(A)、安徽产茯苓皮(B)、云南产茯苓
皮(C)和湖北产茯苓皮(D)HPLC图
Fig．2HPLCChromatogramoftumulosicac d(A)，
CortexSclerotiiPor aeinAnhui(B)、Cortex
SclerotiiPor aeinYunnan(C)，andCortex
SclerotiiPodaeinHubei(D)
3．2 提取方法和提取时间的不同对茯苓酸的提取能
力也不一样。结合文献资料和常规提取方法，考察了
冷浸提取法，水浴提取法及超声提取法3种方法的提
取能力。结果表明超声提取法明显优于其他两种提取
方法。考察了超声15、30、45rain时的提取能力，结果
表明超声15rain的提取效果与其他两个时间提取效
果无明显差异，故超声时间确定为15rain。
3．3测定结果表明，不同产地茯苓中茯苓酸的量存
在差异，其中安徽茯苓量最高，云南茯苓量较高，应
用时为保证质量应注意产地。
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RP—HPLC法测定大枣中桦木醇
李 明，李明润，高向耘，王 瑛
(天津市医药科学研究所，天津300070)
大枣为鼠李科植物ZiziphusjujubaMill．的成
熟果实，不仅是味美营养丰富的果品，还是一种常用
中药，具有补中益气、补脾和胃、益气生津、养血安神
等作用。大枣品种较多，化学成分十分复杂。目前国内
外学者对大枣化学成分的研究做了大量工作并取得
了较大进展[1矗]。大枣主要含三萜类、皂苷类、生物碱
收稿日期：2005—04—28
类、黄酮类、环磷酸腺苷(cAMP)等成分。三萜类成分
有一定的药理活性，因此受到广泛关注。中草药中三
萜类的HPLC分析方法已有报道[3“]，但是关于大枣
三萜中的桦木醇分析方法及其应用却未见详细报道。
本研究建立了桦木醇的RP—HPLC法，测定了大枣中
桦木醇，为大枣药材的质量控制提供了依据。
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第2期2006年2月
1仪器与试药
日本岛津LC一6A高效液相色谱仪，SCL一6B
系统控制器，ANASTAR色谱工作站，LC一6A输液
泵，CTO--6A恒温柱箱，SPD一6AV紫外监测器。
桦木醇对照品(自制，HPLC归一化法计算其质
量分数大于98％)，大枣购于天津市药材公司，经本
所鉴定。
甲醇为色谱纯，磷酸、乙醇、正丁醇等均为分析纯。
2方法与结果
2．1测定波长选择：应用紫外分光光度计进行色谱
扫描，结果在213nm处桦木醇成分有一个单一吸
收峰，故选择测定波长为213nm。
2．2对照品溶液的制备：精确称取桦木醇对照品
10mg溶于10raL甲醇，配制成质量浓度为1mg／
mL的对照品溶液。
2．3供试品溶液的制备[5]：取去核大枣20g、洗净、
剪碎、干燥。70％乙醇索氏提取6h，水浴蒸干乙醇，
水饱和正丁醇萃取，正丁醇饱和氨水洗涤，蒸于，甲
醇溶解，得5mL甲醇溶液(即为4g／mL)，作为供
试品溶液。
2．4色谱条件：色谱柱：YWG—C18(250mill×4．6
mm，10pm)；流动相：甲醇一水一磷酸(88：12：01)；
检测波长：215nlTl；灵敏度：0．005AUFS；体积流
量：1．0mL／min；柱温：35‘C；进样量为20pL。桦木
醇对照品及供试品色谱图见图1。
B
蠢
^^一～一一．．久一
图1桦木醇对照品(A)和大枣(B)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfbetulinreference
substance(A)andz．jujuba(B)
2．5线性关系考察：取桦木醇对照品溶液0．5、1、
2、4、6、8、i0mL分别置于10mL量瓶中，以甲醇定
容配制成50、100、200、400、600、800、10#g／mL
对照品溶液，进样20肛L。以进样质量为横坐标，峰
面积值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为y一
553．46X+4345．1，r一0．9996，线性范围为50～
1 000#g／mL。
2．6精密度试验：精确吸取0．6mg／mL桦木醇对
照品溶液20弘L，连续进样5次，测定蜂面积并计算
其质量分数的RSD为0．88％(刀一5)。
2．7稳定性试验：精密吸取供试品溶液20肛L，分
别放置0、1、2、4、24、48h进样，测定桦木醇峰面积
并计算其质量分数RSD为1．71％(行一5)。
2．8重现性试验：称取同一批样品5份，按2．3项
制备试品溶液，进样20弘L，测峰面积并计算其质量
分数RSD为1．49％(咒一5)。
2．9加样回收率试验：精确称取含桦木醇135．10
#g／rag样品6份，各取1．6g分别精密加入桦木醇
对照品100pg，制备供试品溶液，按色谱条件测定，
结果桦木醇的平均回收率为101．87％，RSD为
0．34％(咒一6)。
2．10样品测定：取4批大枣，按2．3项制备供试品
溶液，精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20弘L
进样，按上述色谱条件测定，根据外标法计算桦木醇
的质量分数，测定结果见表1。
表l大枣中桦木醇的测定结果(万一4)
Table1 DeterminationofbetulininZ．jujuba(露一4)
6讨论
本实验提取的桦木醇为五环三萜类化合物，与
皂苷具有同样的母核结构，故采用《中草药成分化
学》中的皂苷提取与分离法进行大枣桦木醇的提取
分离。大枣中桦木醇成分是一个极性较大的五环三
萜类化合物，宜采用C。。为色谱固定相的反相色谱
柱。在常规操作中，反相高压液相C。。柱常用的流动
相为甲醇和水。实验中，经过多次筛选，最后确定了
最适的甲醇一水的比例及流动相最适pH值为4．0。
应用紫外分光光度计进行波长扫描，结果在
213nm处桦木醇成分有最大吸收，且此处无其他干
扰峰，所以确定检测波长为213nm。
桦木醇是大枣中有效的药理活性物质之一，具
抗肿瘤活性r4]。桦木醇成分是补中益气、养血安神等
作用的物质基础，可作为检测大枣的标识成分。
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万方数据
RP-HPLC法测定大枣中桦木醇
作者： 李明， 李明润， 高向耘， 王瑛
作者单位： 天津市医药科学研究所,天津,300070
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(2)
被引用次数： 6次

参考文献(5条)
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6.胡春凤.张平平.刘金福.胡滨.张卫军 红枣皂甙提取工艺及定性分析[期刊论文]-食品研究与开发 2008(2)


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