全 文 ：中草璃ChineseTraditionalandHerbalDrags第37卷第4期2006年4月·565·
(中草药)，2000，31(2)：150一152．
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平律复方对大鼠心肌缺血一再灌注心律失常的影响
安薇1，杨静■张建忠2，汪俊军2，刘茂南4
(1，武汉大学医学院药理学系，湖北武汉430071；2．武汉市薪洲区人民医院，湖北武汉430400)
摘要：目的研究平律复方对大鼠心肌缺血一再灌注心律失常的影响。方法采用结扎冠状动脉左前降支ls
rain，再灌注45rnin造成大鼠心肌缺血再灌注模型，监测标准Ⅱ导联心电图变化，测定心肌细胞膜Ca2_一ATP酶、
Mg抖ATP酶及Na‘，K+一ATP酶的活力，采用RP—HPLC法检测心肌组织ATP水平、腺苷酸池(TAN)水平和
能量负荷值(Ec)。结果平律复方(ig，0．04、02 、1． 0g／kg)能有效降低大鼠心肌缺血一再灌注心律失常的发生
率，显著缩短室性心律失常的持续时间}能对抗缺血一再灌注心肌ATP酶活力的异常变化；各剂量组心肌组织
Aq’P水平恢复为正常对照组的58％、68％和86％．TAN水平和EC值比模型对照组分别增加了25％、49％、66州
和24％、27％、29％。结论平律复方具有抗大鼠心肌缺血一再灌注心律失常的作用，其机制可能与改善心肌组织的
能量代谢有关。
关键词：平律复方；心肌缺血一再灌注；心律失常；能量代谢
中图分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)040565—
EffectofPinglnFormulaonarrhythmiaof yocardialischemia-reperfusioninrats
ANWeil，YANGJin91，ZHANGJian—zhon92，WANGJun—jun2，I。IUMao—nan2
(1．DepartmentofPharmacology，MedicalCollege“WuhauUniwer,￡ity，Wuhan430071，China；
2．WuhanXinzhauPeople
7
sHospital，Wuhan430400，China)
Abstract二ObjectiveTostudytheffectofPingl0Formula(Pl。)onthearrhythmiaof yocardialis—
chemiareperfusioninrats．MethodsRatarrhythmiamodelswereestablishedbyocclusionoftheI，AD
coronarvartervfor15minandthereafterreperfusionfor45min．Atthesametime，thec angesw reob—
seryedOil eadⅡdyrnamieECG．TheactivitiesofCa”ATPase，Mg“一ATPase，andNa+，K。一ATPase
weredetermined．respectively．ThelevelsofATP，totaladeninenucleotides(TAN)，andenergycharge
(EC)ofthemyocardialorganizeden rgystatew reanalyzedbyRP—HPLC．ResultsPI。(ig0．04，0．20，
and1，00g／kg)showedt decreasetheincidenceofarrhythmiainducedbyischemiareperfusion，shorten
thedurationofventriculararrhythmiaandeliminatetheincidenceofventricularfibrillation．Theactivities
ofCa抖ATPase，M92十一ATPase，andNa+，K1一ATPasewereincreasedbyPLInthePL(0．04，0．20，
and1．00g／kg)groups，ATPlevelsrecoveredto58％，68％，and86％ascomparedwithnormalgroup，
simul—taneously，TANva ueswereenhancedto25％，49％，and66％andECvaluestO24％，27蹦，and
29％，respectively．ConclusionPLhasobviousantiarrhythmiceffectOnrat，theprotectiveactionisrelat
edtotheimprovementofenergymetabolism．
Keywords：Pingl0Formula(PL)；myocardialischemia—reperfusion}arrhythmia；energymetabolism
心肌缺血一再灌注是一种复杂的病理生理过程，
再灌注心律失常是目前临床冠脉搭桥术、血管成形
术及溶栓术等心脏介入性治疗中常见的严重并发
症‘“。平律复方(以下简称PL)是结台中医理论研
制的复方中药制剂，主要由苦参、豆根、黄芩、麦冬、
甘草、五味子、党参、射干等组成，多年临床实践表
收稿日期：2005—07—28
毳喜蓄异；翌北囊蓑器乎骂喜曼誓蓑蔫券苏嚣噩}墨簧2苗00旗36宣00涪20州09入1，硕土研究生，主要旗事分子持理与新药研究。T叱(。2，)s8，5s，盯
．通讯作害谢“蒂”器{3露黔儡；j昌易。⋯“：，。。曲。@，。‰．⋯．。。
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月
明，PL对诊断明确的心律失常患者有较好的疗效，
但其对心肌缺血一再灌注心律失常的影响尚未见报
道。本实验采用大鼠心肌缺血一再灌注模型观察PL
对心肌缺血一再灌注心律失常的作用，并对作用机制
进行了探讨。
1材料
1．1实验动物：SPF级健康SD大鼠，体重(250±
10)g，雌雄各半，由武汉大学实验动物中心提供，合
格证号为SYXK(鄂)2004—0004。
1．2药品与试剂：平律复方(批号20040628)由苦
参、豆根、黄芩、麦冬、甘草、五味子、党参、射干等组
成。以上药物由中国科学院武汉植物研究所江明喜
研究员鉴定，共同煎煮3次，每次1h，合并煎出液，
滤过，静置24h后取上清液，浓缩至含生药1．2g／
mI。，由武汉市新洲区人民医院药剂科制备，经RP
HPI。C法检测，含苦参碱2．8mg／mL、黄芩苷3．84
mg／mL、异甘草素0．45mg／mL。步长稳心颗粒(批
号20040713)，山东步长制药有限公司产品；ATP
酶检测试剂盒(批号20040628)，购自南京建成生
物工程研究所；57一ATP二钠盐、5‘ADP二钠盐和
57AMP，Sigma公司；苦参碱、黄芩苷和异甘草索对
照品由中国药品生物制品检定所提供。
1．3仪器：ECG--6511型心电图机，上海光电医用
电子仪器有限公司；DW2000型动物人工呼吸机，
上海嘉鹏科技有限公司；日本岛津I，c一10ATvp型
高效液相色谱仪和UV一1601紫外分光光度计。
2方法
2．1 动物分组及给药：健康SD大鼠60只，随机分
为6组：正常组、模型组、PL小、中、大剂量(o．04、
0．20、1．00g／kg)组，阳性对照组(步长稳心颗粒
80mg／kg)，ig给药，每天1次，连续5d。
2．2 心肌缺血一再灌注模型的制备：参照文献方
法2’”制备大鼠心肌缺血再灌注模型。以20％乌拉
坦(1．0g／kg)ip麻醉，切开气管，接人工呼吸机
(频率每分钟50次，潮气量1．5mI，／100g)。于左胸
前纵行切开皮肤3cm左右，分离肌层，在心尖搏动
明显处上方开胸。分离心包，暴露心脏，在肺动脉圆
锥与左心耳之间找到与左冠状动脉伴行的心大静
脉，在左心耳下方2mm处用4／0无损伤缝线穿线，
进针深度1～1．5mm，宽2～3mm，采用压管法连
同心大静脉一齐结扎冠状动脉左前降支，同时监测
Ⅱ导联心电图(ECG)。结扎成功的标准为：ST段拾
高，QRS幅度升高，左室前壁缺血区紫绀。缺血15
rain后恢复心脏灌流，45rain后取下心脏，迅速放
入液氮中保存。
2．3 ECG观察：缺血一再灌注性心律失常以室性最
为多见，动态监测标准Ⅱ导联ECG，记录各组动物
室性早搏(prematureventricularbeats，PVB)、室
性心动过速(ventriculartaehycardia．VT)、心室颤
动(ventricularfibrillation，VF)的发生率，心律失
常的持续时问及心率的变化。
2．4心肌细胞膜ATP酶活力分析：ATP酶活力
分析严格按试剂盒说明操作，测定Na+，KLATP
酶、Mg“一ATP酶和Ca”一ATP酶活力。
2．5 心肌组织能量代谢水平的检测：采用RP—
HPLC法测定。
2．5．1样品处理“⋯：称取心肌组织0．2g，加入
0．3mmol／I。高氯酸2mI。，冰水浴中迅速制成匀
浆，4000r／min、4C离心10min。取上清液lmI。，
用1mol／I。K：HPO。0．6mI。中和至pH6．5，再次
以4000r／min、4C离心10min，取}清液，以
0．45”m滤膜滤过，80C保存。I临用时解冻，吸取
10pI．，测定A’FP、ADP和AMP的水平。
2．5．2色谱条件6|：SPD10Avp型可变波长uv
检测器；HypersilC18不锈钢色谱柱(250mnl×4，6
mm，5“m)；流动相：100mmol／l。KH2P04一K2HPO。
缓冲液(pH6．0)；uV检测波长：254nm；柱温
25C；体积流量：1．0mL／min；进样体积：10pL。
2．5．3 腺苷酸池(totaladeninenucleotides，
TAN)及能量负荷值(energycharge，EC)的计
算：TAN—ATP+ADP+AMP；EC=(ATP+0．5
ADP)／TAN
2．6统计学处理：数据以z±s表示，采用SPSS
11．5统计软件进行方差分析。
3结果
3．1对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影响：冠
脉结扎15min，解除结扎后各组大鼠均出现心律失
常，包括PVB、VT、vF，PL和步长稳心颗粒均能显
著缩短心律失常的持续时问，减慢心率，有明显的负
性频率作用(表1和2)，且PL组的VF发生率也
明显低于缺血一再灌注模型组(表2)。
3．2 心肌细胞膜ATP酶活力分析：与缺血再灌
注模型组比较，PL小、中、大剂量组的心肌细胞膜
Na+，K+一ATP酶活力分别升高了11％、61％、
84％，Mg”ATP酶与Ca”一ATP酶活力也有升高
趋势，但小剂量和中剂量组与模型组比较差异无显
著性(表3)。
3．3对缺血一再灌注心肌组织能量代谢的影响：模
万方数据
中革蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月·567·
表1 PL对心肌缺血一再灌注大鼠心率的影响(x±s，n一10)
Table1 EffectofPLonheartateofmyocardial
ischemia—reperfasionrats( ±s，一10)
与模型组比较；’P
表2 PL对心肌缺血一再灌注大鼠心律失常的影响(n--10)
Table2 EffectofPLonarrhythmiaof yocardial
ischemia—reperfusionrats(n—10)
剂量／ 心律失常发生率／％ 心律失常持续
组别 (g．kg-)1元—了r—而_-时间／。i。
摸型 一 100 80 80 3．27士l07
PL 0．04 60+ 60 50 2．25士096。
0．。0 40+。3010+。 1．83士1．03’
1 00 30””10+。0⋯033士58’+
步长稳心颗粒0．08 40一30 0⋯1．8l士1．55。
与模型组比较：。P<0 5一P
表3 PL对心肌缺血一再茬注大鼠心肌细胞膜ATP
酶活力的影响(；土s，n—10)
Table3 EffectofPLonactivitiesofATPaseinmyocardial
cellmembraneofmyocardialischemia—reperfusion
rats(x土j，n一10)
㈣。。苍 !!竺!型!竺：“!：“Na+．K+ATP酶M92+·ATP酶Ca抖-ATP酶
与正常组比较：40P<0．01⋯P<0．001
与模犁组比较：。P
和EC值与正常组相比分别下降了7j％、38％和
53％。PL小、中、大剂量组与模型组相比TAN水平
分别增加了28％、43％、45％，EC值分别增加了
41％、76％、90％，ATP水平分别恢复为正常组的
55％、75％、83％(表4)。
表4 PL对心肌缺血一再灌注大鼠心肌能量代谢的影响(；±s，n一10)
Table4 EffectofPLonmyocardialenergystateinmyocardialischemia—reperfusionrats(j土s，n=10
与正常组比较：△△△P
4讨论
与模型组比较：一P
f临床上尚缺乏理想的治疗药物。因此，积极寻找疗效
高、毒性低的抗心律失常药物具有重要的理论及实
际意义。多年来，应用传统化学药如洋地黄等有一定
疗效，但因其治疗量与中毒量接近，以及个体的差异
性，容易导致新的心律失常，甚至心脏骤停，因此，其
临床应用仍存在不少顾虑。中药抗心律失常具有较
好的临床疗效，而且普遍存在毒性低、副作用小等特
点，所以其研究开发已逐步为人们所重视。平律复方
(PL)由苦参、豆根、黄芩、麦冬、甘草、五味子、党参
等组成，文献报道，党参与苦参益气养心、清热燥湿，
二药合用有调脉律和抗心律失常的功效_“8]；五味子
收敛心气，安神镇静；甘草补益心气，调和诸药，也具
有抗心律失常的作用。本研究结果显示，PL可减少
心肌缺血一再灌注心律失常的发生，缩短其持续时
间，提示PL对心肌缺血再灌注心律失常有明显的
保护作用。
心肌缺血一再灌注损伤是临床上常见的病理生
理过程，其发病机制与能量代谢障碍、自由基堆积以
及钙离子超载有关。心肌细胞的能量代谢是心脏活
动的物质基础，心肌缺血一再灌注损伤发生的重要原
因之一就在于能量供应不足。ATP酶依靠水解
ATP而获得能量，ATP对于维持ATP酶活性，继
而调节细胞内外离子梯度，维持细胞的兴奋性和传
导性等功能至关重要o]。本实验结果表明，心肌缺
万方数据
·568- 中草祷ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月
血一再灌注时高能磷酸物质生成严重不足，心肌组织
ATP水平较正常时降低了60％，TAN水平仅达到
正常组的48％，Na+，K+一ATP酶、Mg”一ATP酶、
Ca”一ATP酶活力均不同程度下降，而PL各剂量
组心肌组织ATP、TAN水平和能量负荷值(EC)
均显著高于模型组，此结果提示PL可能通过减慢
能量物质的分解，改善心肌有氧代谢而发挥抗心肌
缺血一再灌注心律失常的作用。
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雷公藤甲素对健康人外周血单个核细胞分泌TNF—O[的抑制作用
与TNF一0c基因多态性的关系
涂胜豪，陈缸渡，盛冬云，胡永红，刘沛霖
(华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合科，期北武汉430030)
摘 要r目的探讨雷公藤甲素对外周血单个核细胞(PBMC)分泌肿瘤坏死因子一a(TNF—a)的抑制作用与
TNF—n基因多态性之间的关系。方法采用等位基因特异引物PCR法对健康人TNF一“基因启动子区一308位点
基因多态性进行检测，ELISA法检钡4TNFa的量。结果TNF—a一308非G／G纯台子基因型健康志愿者PBMC经
脂多糖(LPS)刺激后TNF—n的分泌量明显较TNF—a一308G，G纯合子基因型的志愿者高}雷公藤甲京能够抑制
TNF一308G／G纯台子基因型继康志愿者PBMC分越TNF一。，而对TNF—a一308非G／G纯合子基因型健康志愿
者PBMC分泌TNF—a没有明显的抑制作用。结论雷公藤甲素抑制外周血单个核细胞分泌TNF—a的量与
TNF—a基因多态性有关。
关犍词：肿瘤坏死因于a(，INF—a)；基因多态性；雷公藤甲素；外周血单个棱细胞
中圈分类号：R285．5 文献标识码rA 文章编号：0253—2670(2006．)04—0568—04
RelationshipbetweeninhibitionoftriptolideonTNF-ocproductionfromperipheralblood
mononuclearellsinhealthyhumansandTNF—agenepolymorphism
TUShenghao，CHENong—bo，SHENGDong—yun，HUYong—hong，LIUPei—lin
(DepartmentofIntegratedTraditionalChineseandWesternMedicine．TongjiHospitalAffiliatedTongji
MedicalCo lege，ChinaCentralUniversiryofScienceandTechnology，Wuhan430030，China)
Keywords：tumornecrosisfactor—d(TNF—n)；genepolymorphism；triptolide；peripheralblood
mononuclearells(PBMC)
警鍪是冒i普鉴省絮薯学基金赞助项目。。。。。。。。。，
作者筒介：T嚣e胜l：烹譬髫；磊；；嚣；瑚』匕E武ma援il^=s’h博tu士a@t’j副h,教tjm接u’,磺ed士u,生cn导师·主要从事中西医结合治疗风湿病研究
万方数据
平律复方对大鼠心肌缺血-再灌注心律失常的影响
作者： 安薇， 杨静， 张建忠， 汪俊军， 刘茂南， AN Wei， YANG Jing， ZHANG Jian-zhong
， WANG Jun-jun， LIU Mao-nan
作者单位： 安薇,杨静,AN Wei,YANG Jing(武汉大学医学院,药理学系,湖北,武汉,430071)， 张建忠,汪
俊军,刘茂南,ZHANG Jian-zhong,WANG Jun-jun,LIU Mao-nan(武汉市新洲区人民医院,湖北
,武汉,430400)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(4)
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200604032.aspx