全 文 ：黄芩苷对脑损伤的保护作用
王超云, 蒋王林, 智红英, 田京伟, 傅风华3 , 刘　珂Ξ
(烟台大学药学院、山东省天然药物工程技术研究中心, 山东 烟台　264005)
摘　要: 目的　研究黄芩苷对脑损伤的保护作用。方法　采用小鼠断头法、创伤法、大鼠大脑中动脉栓塞法建立脑
损伤模型, 通过观察断头喘息时间、测定脑含水量及脑组织缺血面积, 观察黄芩苷对脑损伤的保护作用。结果　黄
芩苷 360 m gökg 剂量可显著延长断头小鼠的喘息时间 (P < 0101) ; 90 m gökg 剂量可显著改善创伤性脑水肿 (P <
0105) ; 200 m gökg 剂量可明显降低大鼠脑缺血面积 (P < 0105)。结论　黄芩苷对脑组织具有保护作用。
关键词: 黄芩苷; 脑缺血; 创伤性脑水肿
中图分类号: R 286110　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 02 0188 03
Protective effect of ba ica l in on bra in in jury
W AN G Chao2yun, J IAN G W ang2lin, ZH I Hong2ying, T IAN J ing2w ei, FU Feng2hua, L IU Ke
(Schoo l of Pharm acy, Yantai U niversity, Shandong Engineering R esearch Center fo r N atural D rugs, Yan tai 264005, Ch ina)
Key words: ba ica lin; cereb ra l ischem ia; cereb ra l edem a
　　黄芩苷 (baica lin ) 为唇形科植物黄芩 S cu tel2
la ria ba ica lensis Geo rgi 的主要活性成分之一, 其在
抗炎、降脂、解热、镇静等方面的作用已被大量动物
实验及临床研究所证实, 但其在脑损伤方面的作用
少见报道, 本实验对此进行了研究。
1　材料
111　动物: 普通级W istar 大鼠, 雄性, 体重 (230±
20) g; 清洁级昆明种小鼠, 雄性, 体重 18～ 22 g, 均
由山东省天然药物工程技术研究中心实验动物中心
提供, 合格证号分别为: 鲁动质字 200106005 号; 鲁
动质字 200106003 号。
112　药品与仪器: 黄芩苷注射液, 山东省天然药物
工程技术研究中心制剂室提供, 批号 020826; 红四
氮唑, 购自 Sigm a 公司。数码相机 C—830L ,O lym 2
pu s 公司。
2　方法
211　对小鼠断头呼吸的影响[1 ]: 取雄性小鼠 40 只,
随机分 4 组, 每组 10 只, 正常组尾 iv 生理盐水 (每
只 012 mL ) , 黄芩苷各剂量组分别按 90, 180, 360
m gökg 尾 iv 黄芩苷注射液 (每只 012 mL ) , 给药
20 m in 后断头处死小鼠, 观察小鼠呼吸时间。
2121　对小鼠颅脑损伤性脑水肿的影响[2 ]: 取雄性
小鼠 70 只, 随机分为 7 组, 每组 10 只, 正常对照
组、模型组尾 iv 生理盐水 (每只 012 mL ) , 黄芩苷
一次给药低、中、高剂量组分别按 10, 30, 90 m gökg
尾 iv 黄芩苷注射液 (每只 012 mL ) , 除正常对照组
外, 其他各组给药 1 h 后固定小鼠, 用砝码 (20 g)
撞击头部特定部位, 24 h 后处死, 剥取鼠脑, 称湿质
量, 置 100 ℃ 烘干 24 h, 称干质量, 计算脑组织含水
量。黄芩苷两次给药低、高剂量组分别按 15, 45 m gö
kg 两次给药, 第 1 次给药 1 h 后用砝码撞击, 6 h 后
第 2 次给药, 其他方法同一次给药。
脑组织含水量= (湿质量- 干质量) ö湿质量×100%
213　对大鼠中动脉栓塞致脑缺血的影响[1 ]: 取雄性
W istar 大鼠 70 只, 随机分为 7 组, 每组 10 只, 即假
手术组, 缺血模型组 (给予生理盐水) , 黄芩苷低、
中、高剂量组 (分别按 45, 90, 200 m gökg 给药) , 缺
血 3 h 后延时给药组 (200 m gökg) , 缺血 6 h 后延
时给药组 (200 m gökg)。除延时给药组尾 iv 给药
外, 其他各组动物于缺血后 30 m in 舌下静脉给予相
应药物 (1 mL ökg)。大鼠水合氯醛 (350 m gökg,
ip ) 麻醉, 分离左侧颈总动脉, 夹闭颈内、颈总动脉,
颈外动脉近心端及远心端结扎, 中间剪开。将颈外动
脉游离端拉至与颈内动脉成一条直线, 将栓线 (直
径 0124 mm 尼龙线, 长度 510 cm ) 由颈外动脉插入
至颅内, 遇轻微阻力时停止, 插入深度约为 2 cm。结
扎颈外动脉开口, 并打开颈总动脉动脉夹, 消毒缝合
伤口, 造成左侧大脑中动脉缺血模型; 假手术组仅进
·881· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 2 期 2004 年 2 月
Ξ 收稿日期: 2003205210
作者简介: 王超云 (1970—) , 男, 安徽人, 硕士, 助理研究员, 现于山东省天然药物工程技术研究中心药理室工作, 从事心脑血管、抗炎、镇
痛方面的研究。T el: (0535) 6706030280043 通讯作者
行左侧颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉的分离 (23
℃～ 25 ℃ 进行)。24 h 后处死大鼠, 取脑, 去掉嗅
球、小脑和低位脑干, 冠状切成 5 片, 脑片用红四氮
唑 (T TC) 染色, 正常组织经染色后呈红色, 梗死组
织呈白色, 染色后照相, 用中国航空航天大学病理图
像分析软件求梗死面积比。
3　结果
311　对小鼠断头呼吸时间的影响: 见表 1。结果显
示, 随着黄芩苷给药剂量的增加, 小鼠断头呼吸时间
延长, 高剂量组 (360 m gökg) 可明显增加断头小鼠
的呼吸时间。
表 1　黄芩苷对小鼠断头呼吸的影响 (x±s, n= 10)
Table 1　Effect of ba ica l in on breath
of decolla ted m ice (x±s, n= 10)
组　别 剂量ö(m g·kg- 1) 呼吸时间ös
正常　 - 　　　21125±3122
黄芩苷 90 21133±2139
180 23118±2148
360 26100±31003 3
　　与正常组比较: 3 3 P < 0101
　　3 3 P < 0101 vs no rm al group
312　对小鼠颅脑损伤性脑水肿的影响: 见表 2。结
果显示, 一次给药低剂量黄芩苷对创伤性脑水肿的
作用不明显, 高剂量可明显减轻撞击引起的脑水肿
小鼠脑含水量, 即具有一定治疗创伤性脑水肿作用;
两次给药较低剂量即可较为明显的对抗脑水肿。
表 2　黄芩苷对脑含水量的影响 (x±s, n= 10)
Table 2　Effect of ba ica l in on water con ten t
of m ice bra in (x±s, n= 10)
组　别 剂量ö(m g·kg- 1) 脑含水量ö%
正常　 - 　　　80104±0129
模型 - 81111±11133 3
黄芩苷一次给药 10 81172±11673 3
30 81134±11223 3
90 80191±0156△
黄芩苷两次给药 15, 15 80121±1105△
45, 45 80102±0189△
　　与正常组比较: 3 3 P < 0101; 　与模型组比较: △P < 0105
　　3 3 P < 0101 vs no rm al group; △P < 0105 vs model group
313　对大鼠中动脉栓塞致脑缺血的影响: 见表 3。
结果显示对中动脉栓塞致脑缺血模型, 较低剂量的
黄芩苷对缺血所致的梗死面积无明显影响, 高剂量
(200 m gökg) 可明显减少梗死面积, 而缺血后延时
给药, 即使给予高剂量黄芩苷对缺血所致梗死面积
也无影响。表明黄芩苷对缺血性脑损伤的作用, 既须
给予较高的剂量, 又须在损伤的早期给药。
4　讨论
　　黄芩苷能改善心肌供血供氧不足和需氧量增加
表 3　黄芩苷对大脑梗死面积的影响 (x±s, n= 10)
Table 3　Effect of ba ica l in on infarct area
of rat bra in (x±s, n= 10)
组别 剂量ö(m g·kg- 1) 梗死面积ö%
假手术 - 　　　　　-
模型 - 　　　22164± 9124
黄芩苷 45 20104± 6113
90 20115± 6199
200 11121±101923
延时 3 h 给药 200 21162± 9113
延时 6 h 给药 200 18167± 7118
　　与正常组比较: 3 P < 0105
　　3 P < 0105 vs model group
之间的矛盾, 对实验性心肌缺血具有保护作用[3 ] , 本
实验证实其对脑缺氧亦有保护作用。断头实验中, 脑
血供应中断, 但脑中原有的血和营养物质尚能使脑
功能维持一段时间, 黄芩苷可使脑组织耐缺氧能力增
强, 脑功能维持时间延长, 从而延长小鼠喘息时间。
研究表明氧自由基对创伤性颅脑损伤起着关键
作用。黄芩苷具有抑制脂加氧酶的作用, 可控制花生
四烯酸的瀑布反应, 使氧自由基减少[4 ]; 另外黄芩苷
具有一定的抗氧化作用, 能及时清除体内产生的自
由基, 降低自由基的损伤作用, 使创伤性脑水肿减
轻。实验表明, 黄芩苷在高剂量 (90 m gökg) 或低剂
量 (15 m gökg) 多次给药, 对创伤性颅脑损伤具有
一定的保护作用。
脑缺血不仅造成组织供血不足, 产生大量的氧
自由基, 而且可引起蛋白激酶 (PKC) 从胞浆到胞
膜的移位激活, 使微管运动蛋白活动下降, 增加
CA I 区锥体细胞延迟性死亡 (DND ) 的产生[5 ]。黄
芩苷通过抑制蛋白激酶, 松弛血管平滑肌, 从而增加
组织血液的供给[6 ]; 作为 PKC 的抑制剂, 黄芩苷还
能对抗微管运动蛋白活动的下降, 减少DND 的产
生[7 ] , 从而使缺血所致的损伤减轻。实验中, 黄芩苷
高剂量 (200 m gökg) 能明显降低缺血所致梗死面
积, 对脑缺血具有保护作用。延时给药不能缩小梗死
面积, 说明缺血早期即已形成了致神经损伤的物质
基础, 并可能已产生损伤, 延时给药对已形成的损伤
无治疗作用, 对已形成的致损伤物质可能也无明显
的拮抗作用, 故给药未能明显降低缺血坏死面积, 提
示黄芩苷用于缺血性脑损伤的治疗应及早给药。
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·981·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 2 期 2004 年 2 月
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家兔肛塞前列栓的药动学研究
厉将斌1, 张　壮2, 李曰庆2, 闫彦芳2, 王硕仁2, 那彦群1, 郭应禄1Ξ
(11 北京大学第一医院 泌尿外科, 北京大学泌尿外科研究所, 北京　100034; 21 北京中医药大学东直门医院, 北京　100700)
　　小檗碱是中药复方前列栓[1 ]的有效成分之一,
本研究应用 R P2H PL C 测定小檗碱血清药物浓度,
对兔一次性肛塞前列栓后小檗碱药动学进行研究,
为前列栓的临床合理用药提供实验依据。
1　材料
111　药物与试剂: 前列栓, 2 gö栓, 每粒栓剂含小檗
碱的最低含量为 34 m g, 由北京中医药大学东直门
医院药剂科提供; 盐酸小檗碱对照品, 含量 98114%
(供含量测定用) , 购自中国药品生物制品检定所, 乙
腈, 色谱纯; N a2H PO 4、KH 2PO 4、乙醚、乙醇均为分析
纯; 氢氧化钠, 分析纯, 使用前配制为 012 mo löL 氢
氧化钠溶液; 三蒸水; 甲醇, 优级纯。
112　受试动物: 日本大耳白兔 10 只, 雄性, 日龄
90～ 120 d, 30 代次, 体重 (215±013) kg。
113　仪器: H P—1100 型 H PL C 系统, 紫外ö可见可
变波长检测器, JS—3030 型江申通用汉字色谱工作
站, 分析柱采用A lltech, P la t inum EPS 柱, C 8 100A
(3 Λm , 150 mm ×416 mm )。
2　方法
211　色谱条件: 流动相: 乙腈21ö12 mo löL 磷酸盐
缓冲液 (70∶30) , 流速: 018 mL öm in, 柱温: 40 ℃,
检测波长: 345 nm , 灵敏度: 0101 AU FS。采用外标
法定量测定血清小檗碱浓度。
212　样本处理方法: 精取兔子含药血清 500 ΛL , 加
入 012 mo löL 氢氧化钠 100 ΛL , 混匀。取乙醚 6 mL
分 2 次提取, 每次旋混 60 s, 取尽乙醚层共置于另
一试管中。于 40 ℃ 水浴中, 自然蒸发至干, 精取
280 ΛL 流动相溶解定容, 进样 100 ΛL。
213　试验方案: 兔肛塞栓前禁食 12 h, 清醒状态下
肛塞前列栓 2 粒, 随即将兔肛门荷包缝合, 6 h 后拆
缝线。于给药后 0, 5, 10, 20, 30, 45, 60, 90, 120, 180,
360, 540, 1 440 m in 从耳缘静脉穿刺取血, 每次 2
mL , 分离血清。将血清样本预处理后, 进行 H PL C
分析测定, 拟合药动学模型并计算参数。
214　标准曲线: 精取混合空白兔血清 500 ΛL 9 份,
加入不等量的盐酸小檗碱对照品, 成为血清小檗碱
浓度分别为 0172, 3162, 7124, 18109, 36119, 72137,
144175, 289149, 578198 ΛgöL 的系列药物浓度血
清。经预处理后进行 H PL C 测定, 得到小檗碱的面
积 (A bb)。以 A bb值作为 Y 轴, 以血清小檗碱浓度
(C bb) 为X 轴, 得标准曲线回归方程: A bb= 1 451148
C bb - 6131095 (实验系数 r= 0. 998 614, 校正系数
r= 01998 319)。结果表明, 血清小檗碱浓度在
0172～ 578. 98 ΛgöL 线性关系良好, 可满足动物实
验血清药物浓度定量分析的要求。
215　回收率: 取小檗碱对照品溶液分别加入 500ΛL 混合空白兔血清中, 形成小檗碱浓度分别为
10186, 108156, 434124 ΛgöL 的低、中、高浓度血清,
在 10 d 内共做 6 组, 经预处理后, 进行 H PL C 测定
C′bb (实测值) , 同时根据平均标准曲线计算 3 个浓
度所对应的 C bb (理论值) , 计算相对回收率 RC =
C′bböC bb。结果分别为 (91132±3133) % , (97125±
1144) % , (99160±1100) % , 符合定量分析要求。
216　日内、日间精密度: 含小檗碱低、中、高浓度血
清 10186, 108156, 434124 ΛgöL , 在 1 日内测定 6
组, 结果日内 R SD 值分别为 2147% , 1132% ,
·091· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 2 期 2004 年 2 月
Ξ 收稿日期: 2003206228
作者简介: 厉将斌 (1973—) , 男, 浙江省磐安人, 2001 年 7 月毕业于北京中医药大学, 获医学博士学位, 同年进入北京大学泌尿外科研究
所外科学博士后流动站, 一直从事中医药对前列腺疾病的研究和治疗工作。