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马齿苋对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用



全 文 :表 3  LQT对水负荷大鼠排尿量的影响 (x± s, n= 10)
Table 3  Ef fect of LQT on emiction in water-load
rats ( x± s , n= 10)
组别 剂量 /( g· kg- 1 )排尿量 /( m L· 100 g- 1) 尿量增加 /%
对照 -     2. 69± 0. 78 -
LQ T 0. 5 3. 19± 0. 91 18. 6
1. 0 3. 82± 0. 94* * 42. 0
1. 5 4. 00± 1. 34* 48. 7
前列回春 2. 0 3. 81± 0. 87* * 41. 6
  与对照组比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
  * P < 0. 05 * * P < 0. 01 vs cont rol group
3 讨论
  急慢性前列腺炎是泌尿生殖系统常见病 ,属中
医“淋症”“精浊”“白淫”等范畴 ,其病因病机常为内
外湿热之邪侵犯下焦引起 ,湿热之邪长期不清 ,久郁
不泄 ,而致气血瘀滞。LQ T具清热解毒、凉血通淋的
功效。本实验表明该药不仅具有利尿作用 ,而且可明
显减少角叉菜胶所致前列腺炎大鼠前列腺液中白细
胞数目 ,回升低下的卵磷脂小体密度 ,显著降低大鼠
前列腺间质炎细胞浸润和水肿程度 ,并显著抑制消
痔灵所致纤维增生性前列腺大鼠腺体的增生、肥大
及纤维母细胞增生 ,恢复前列腺分泌功能 ,其作用与
前列回春胶囊相近。 本实验结果表明 LQT对非菌
性急、慢性前列腺炎具有较好的预防及治疗作用 ,可
望成为治疗急、慢性前列腺炎的理想药物。
References:
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马齿苋对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用
冯 芳 ,丁志建 ,刘 俊
(浙江养生堂天然药物研究所 ,浙江 杭州  310007)
  溃疡性结肠炎 ( ulcerativ e co li tis , UC)是以结
肠黏膜慢性非特异性炎症和溃疡形成为病理特点的
一种消化道疾病。其发病机制尚未完全明了 ,文献报
道炎症介质的释放、氧自由基的损伤与其发生密切
相关 [1, 2 ]。 马齿苋又名马舌菜或马齿菜 ,为马齿苋科
植物马齿苋 Portulaca oleracea L. 全草。其性味酸
寒 ,入心、归大肠经 ,具有清热解毒、清肠止痢、凉血
止血的功能 ,素有“天然抗菌素”之称。本实验探讨马
齿苋对大鼠 UC的治疗作用。
1 材料
1. 1 药物及制备: 马齿苋原药材 ,购于杭州胡庆余
堂药材门市部 ,经笔者鉴定符合《中华人民共和国药
典》2000年版标准。 药材剪切后 ,加水 6倍量 ,提取
2次 (分别提取 2、 1 h) ,合并水提液 ,浓缩 ,加乙醇至
含醇量达 75% ,静置过夜 ,精滤 ,回收乙醇 ,真空干
燥 (水分小于 2% ) ,粉碎 ,过 100目筛 (马齿苋浸膏
粉有机酸总量以桂皮酸计为 25~ 37. 5 mg /g )。临用
时用水配成相应质量浓度 ( 330、 165、 82. 5 mg /
mL)。阳性药柳氮磺吡啶片 ( S ASP) , 0. 25 g /片 ,上
海三维制药有限公司生产 ,批号 20030306。用时去
除包衣 ,研碎后过 100目筛 ,用水配成 100 mg /mL。
1. 2 主要试剂: 三硝基苯磺酸 ( TNBS) 乙醇液
( Sigma公司 , 5% TNBS 0. 6 mL+ 50% 乙醇 0. 25
mL) ;总蛋白定量测试盒 (考马斯亮蓝法 )、超氧化
物歧化酶 ( SOD)测定试剂盒、丙二醛 ( MDA) 测
定试剂盒 ,均购自南京建成生物工程研究所。
1. 3 主要仪器: Perkin Elmer MBA2000全波段分
光光度计 ; Fisher Scientific涡旋振荡器 ; Biofuge
f resco高速离心机 ;直径 2 mm硅胶管。
2 方法
2. 1 给药途径的选择: 考虑到 UC发病部位在结
肠及动物给药的特殊性 (不能口服肠溶片 ) ,为保证
药物能真正作用到发病部位 ,采用灌肠给药的方式。
2. 2 动物及模型制备: SD大鼠 60只 ,雄性 ,体重
( 300± 20) g ,清洁级 ,由浙江医学科学院实验动物
中心提供 (许可证号: 2001001)。动物随机分为正
·791·中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 35卷第 7期 2004年 7月
收稿日期: 2003-11-25作者简介:冯 芳 ( 1962— ) ,女 ,杭州人 , 1982年毕业于浙江医科大学药学系 ,学士学位 ,工程师 ,现任浙江养生堂天然药物研究所药理组课题负责人 ,从事天然药物开发研究工作。   Tel: ( 0571) 87631205  Fax: ( 0571) 87631202  E-mail: f f eng@ h z. cn
常组、模型组、 SASP ( 0. 5 g /kg ) 组、马齿苋高、中、
低剂量 ( 1. 650、 0. 830、 0. 420 g /kg)组 ,每组 10只。
采用 TNBS法造模 [3 ] ,造模大鼠实验前禁食不禁水
48 h,每只 ip 15mg /m L戊巴比妥钠水溶液 0. 6 mL
麻醉 ,硅胶输液管 (直径 2. 0 mm ,长 12 cm )从肛门
插入肠道深约 8~ 10 cm,注射器缓缓注入 TN BS乙
醇液 0. 7 mL,正常组注入等体积生理盐水。
2. 3 病理组织学检查: 大鼠造模后第 2天开始灌
肠给药 ,连续 14 d,末次给药第 2天全部大鼠股动
脉放血处死 ,立即打开腹腔 ,分离并剪取距肛门 2
cm向上结肠约 6~ 8 cm ,沿肠系膜纵轴剪开肠腔 ,
生理盐水冲洗干净 ,将黏膜向上平展于板上 ,肉眼进
行大体形态观察 ;然后剪取溃疡最严重处结肠组织
约 1 cm2用 10% 福尔马林溶液固定 ,石腊包埋 ,切
片 ( 4μm) , HE染色 ,光镜下观察病理学改变。
2. 4 指标测定:另取结肠组织 0. 1 g,加入 9. 9 mL
PBS,冰浴下匀浆 , 5 000 r /min离心 2次 ,每次 3
min; 1 500 r /min离心 5 min,取上清液 ( 1% 结肠
匀浆液 )测蛋白含量、 SO D活性及 MDA含量 ,操
作按试剂盒说明书进行。
3 结果
3. 1 一般情况改变: 造模后 ,动物即出现懒动、厌
食、大便次数增多 ,且为黄色稀便或肛周体毛被稀便
沾染 ,并有大便潜血现象 ,体重下降。 SASP组和马
齿苋各组用药后与模型组比较有明显改善。
3. 2 大体形态观察:按文献 [4 ]方法对结肠黏膜急性
损伤程度进行目测评分 (分值越高表示损伤越严
重 ) ,结果见表 1。模型组大鼠结肠严重充血、水肿、
黏膜糜烂 ,溃疡多且大 ,呈节段性分布 ,肠壁增厚 ,肠
腔狭窄 ; SASP组与马齿苋低剂量组黏膜糜烂程度
减轻 ,有小溃疡 ,数量少 ;马齿苋高、中剂量组溃疡
小 ,黏膜糜烂轻 ,充血、水肿程度轻。马齿苋各组炎症
损伤评分较模型组显著降低 ( P < 0. 01) ,同时高、中
剂量组防治效果优于 SASP组 ( P < 0. 05)。
表 1 结肠组织形态损伤评分 ( x± s , n= 10)
Table 1  Evaluation on morphological damage
of colon t issue (x± s , n= 10)
组别 剂 量 / ( g· kg- 1) 受损组织评分值
正常      - 0. 00± 0. 00
模型      - 3. 60± 0. 52
SASP      0. 500 2. 00± 0. 89* *
马齿苋 1. 650 1. 50± 1. 05* * △
0. 830 1. 85± 1. 13* * △
0. 420 2. 40± 1. 41* *
  与模型组比较: * * P < 0. 01;  与 SASP组比较: △ P < 0. 05
  * * P < 0. 01 vs model g roup;  △ P < 0. 05 vs SASP g rou p
3. 3 肠黏膜病理变化:正常对照组结肠 4层结构
层次清楚 ,未见异常。模型组结肠可见多个大范围溃
疡形成 ,深达浆膜层 ,大量炎性细胞浸润 (中性粒细
胞、浆细胞和嗜酸性粒细胞 ) ,重度纤维化。 SASP组
与马齿苋低剂量组溃疡较小 ,病变深度局限在肌层
以内 ,较多炎性细胞浸润 (主要为中性粒细胞 ,少量
浆细胞和嗜酸性粒细胞 ) ,可见肉芽组织。马齿苋高、
中剂量组肠腔面可见几处较小的溃疡面 ,但周围黏
膜上皮已部分再生 ,有修复的趋势 ,不见渗出物与坏
死组织 ,部分遭破坏肌层已由疤痕组织代替 ,炎性浸
润多局限在黏膜层且炎性细胞多为淋巴细胞和少量
浆细胞、嗜酸性粒细胞 ,而不见中性粒细胞。
3. 4  SOD活性及 MDA含量测定:结果见表 2。各
给药组结肠组织中 SO D活性与模型组比较均有非
常显著性提高 ( P < 0. 01) ,其中马齿苋高、中剂量组
效果略优于 SASP组 ( P < 0. 05)。 而各给药组
MDA含量与模型组比较 ,均有非常显著性降低
( P < 0. 01) ,其中马齿苋高、中剂量组效果略优于
SAS P组 (P < 0. 05)。
表 2 结肠组织 SOD活性、MDA含量 ( x± s, n = 10)
Table 2  Activity of SOD and content of MDA
in colon tissue (x± s , n= 10)
组别 剂 量
/( mg· mL- 1 )
SOD
/ ( nU· mL- 1 )
M DA
/ (μmol· mL- 1 )
正常    - 181. 23± 10. 43 0. 35± 1. 43
模型    - 99. 00± 9. 49 0. 98± 3. 49
SASP   0. 500 130. 64± 5. 98* * 1. 31± 1. 98* *
马齿苋 1. 650 168. 05± 7. 24* * △ 0. 85± 2. 24* * △
0. 830 150. 20± 9. 13* * △ 1. 02± 1. 13* * △
0. 420 126. 87± 11. 41* * 1. 42± 1. 41* *
  与模型组比较: * * P < 0. 01;  与 SASP组比较: △ P < 0. 05
  * * P < 0. 01 vs model group;  △ P < 0. 05 vs SASP group
4 讨论
   U C的病因及发病机制迄今未明 ,多数学者认
为其与免疫障碍、遗传及精神因素等有关 ,近年注意
到 U C的发生与炎症介质增多关系密切。而氧自由
基参与并通过脂质过氧化反应产生这些炎症介质。
脂质过氧化反应和脂质过氧化物的分解产物都能引
起细胞膜结构受损、炎症介质大量释放。因此 ,体内
SOD活性与脂质过氧化反应产生的分解产物 MDA
的含量不仅可反映机体局部或整体的炎症反应情
况 ,也可反映机体抗氧化反应的能力 ,间接评价细
胞、组织受损程度。 UC大鼠结肠黏膜组织中 SO D
活性显著低于正常大鼠 ,同时 MDA含量显著高于
正常大鼠 ,说明 U C大鼠抗氧化能力下降。 马齿苋
高、中剂量组大鼠结肠组织中 SO D活性提高 ,
·792· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 35卷第 7期 2004年 7月
MDA含量下降 ,结肠黏膜组织急性损伤程度减轻 ,
具有明显抗炎效果 ;病理学结果显示对于溃疡面的
愈合 ,马齿苋组疗效优于 SASP组 ,具明显的修复
作用。马齿苋灌肠治疗 U C的作用机制可能与其含
有丰富的维生素 E、维生素 C、谷胱甘肽等具有抗
菌、抗病毒、抗氧化成分有关 [5 ] ,其通过提高肠壁黏
膜内的 SOD活性 ,加强氧自由基的清除而减轻 U C
炎症反应 ,同时丰富的维生素 A样物质 ,促进上皮
细胞的生理功能趋于正常 ,并能促进溃疡的愈合 [6 ]。
本实验为马齿苋治疗或辅助治疗 UC提供了理论
依据。
References:
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人参抗栓素对大鼠脑缺血及血栓形成的影响
周 鸣 1 ,谢湘林 2 ,张永和 1 ,邓毅峰 1
( 1. 长春中医学院附属医院 新药开发中心 ,吉林 长春  130021; 2. 吉林大学药学院 药理实验室 ,吉林 长春  130021)
  脑缺血是血管性脑病的最主要病种 ,具有较高
的死亡率和致残率。对脑缺血的防治以往都是用扩
张脑血管、增加脑血流量、缩小脑梗死范围或改善神
经功能等方面入手 ,但效果并不十分理想 ,不良反应
亦较多。因此开发一种疗效好、毒性小的治疗脑缺血
新药是备受关注的课题。人参抗栓素是利用现代工
程技术对人参进行定向水解精提而成的 ,其主要成
分为 Rg3和 Rh1。大量实验研究表明 ,它们具有抗
血栓作用 ,故又称为“人参抗栓素”。本实验研究其对
大鼠脑缺血及血栓形成的影响。
1 材料
1. 1 动物: Wista r大鼠 ,体重 280~ 350 g ,由长春
高新实验动物研究中心提供 ,合格证号: SCXK (吉 )
2002— 0003。
1. 2 药品与试剂:人参抗栓素 ( A TE) ,由吉林省人
参研究所提供 ,规格: 200 mg /粒 (含人参一次皂苷
150 mg /粒 )。维脑路通 ,中美山西津华药业有限公
司产品 ,规格: 100 mg /片。阿司匹林水溶片 ,中国无
锡华瑞制药有限公司 ,批号 80073 B88-01。 ADP,海
伯奥生物科技有限公司产品 ,批号 970619;超氧化
物歧化酶 ( SOD)和 AT P酶测试药盒由南京建成
生物工程研究所提供。
1. 3 仪器:江湾二型脑立体定位仪 ,上海第二军医
大学产品。MP— 120— 1微量电子天平 ,上海第二天
平仪器厂产品。 7550—紫外 -可见光分光光度计 ,上
海分析仪器厂产品。 TYXN— 91智能血液凝集仪 ,
上海通用机电技术研究所产品。 TAB—体外血栓形
成仪 ,江西新元技术开发公司产品。
2 方法与结果
2. 1 对大鼠脑缺血的影响:将大鼠随机分为 6组 ,
每组 8只 ,雌雄各半。 分别为假手术对照组、模型
组、维脑路通组 ( 300 mg /kg )、人参抗栓素高、中、低
剂量 ( 200、 100、 50 mg /kg )组。 各组大鼠均 ig 给
药 ,连续给药 14 d,给药结束后 ,按文献方法制备大
鼠脑缺血模型 [1 ]。假手术对照组大鼠手术过程同模
型组 ,但不阻断椎动脉。术后 24 h,称量并记录体重
后 ,将大鼠乙醚麻醉固定在大鼠手术台上 ,分离双侧
颈总动脉 ,大鼠清醒状态下 ,用丝线与 5号针头一
起结扎双侧颈总劝脉 ,结扎后立即将 5号针头抽
出 ,造成大鼠全脑不完全性缺血。 90 min后将动物
处死 ,取脑 ,沿脑正中沟切开平分。 一侧脑用液氮速
冻 ,放入低温冰箱保存 ,用于测定脑组织 SOD活力
和 ATP活力。测试时 ,取脑组织制成 2% 的组织匀
浆液 ,按说明书方法加样测试。分光光度法测定样本
的吸光度 ( A )值。计算 SO D和 A TP酶 ( Na-A TP
酶、 Mg-ATP 酶、 Ca-ATP 酶 ) 的活力 [单位为
·793·中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 35卷第 7期 2004年 7月
收稿日期: 2003-12-21作者简介:周 鸣 ( 1959— ) ,女 ,主管技师 ,主要从事药理学实验研究。