全 文 ：HPLC 法测定香加皮中杠柳毒苷的含量
刘　虹, 潘桂湘, 高秀梅, 张伯礼Ξ
(天津中医学院中医药研究中心, 天津　300193)
　　香加皮 P erip loca sep ium Bge. 又名北五加皮、
杠柳皮, 功效为祛风湿、强筋骨, 主要用于风寒湿痹、
腰膝酸软、心悸气短、下肢浮肿等, 近年来常用于慢
性充血性心力衰竭的治疗[1～ 4 ]。香加皮的主要化学
成分为 10 余种杠柳苷, 其中杠柳毒苷又名杠柳苷
G、萝 毒苷 (perip locin, perip lo side G) 为强心苷成
分, 其作用与毒毛旋花子苷相似。《中华人民共和国
药典》2000 年版中香加皮的含量测定项下采用 42甲
氧基水杨醛为指标成分。由于杠柳毒苷与香加皮临
床应用的功效具有较好的对应关系, 本实验拟建立
以杠柳毒苷为指标成分的H PL C 含量测定方法, 作
为香加皮的质量控制标准。
1　仪器和试药
A gilen t 1100 液相色谱系统 (DAD 检测器) , 乙
腈、甲醇为色谱纯, 水为超纯水, 乙醇为分析纯; 杠柳
毒苷对照品 (自制, 经熔点、TL C、核磁及光谱分析确
认, 纯度 98% 以上) , 香加皮药材由亳州药材公司提
供, 与其他来源样品一并经天津中医学院中药系张
丽娟副教授鉴定为萝 科植物杠柳 P erip loca sep i2
um Bge. 的干燥根皮。
2　方法与结果
211　色谱条件: H ypersil OD S 色谱柱为 (250 mm ×
416 mm , 5 Λm ) ; 流动相为乙腈2水 (27∶73) ; 流速为
110 mL öm in; 检测波长为 220 nm。色谱图见图 1。
12杠柳毒苷
12perip locin
图 1　杠柳毒苷对照品 (A)及香加皮药材 (B) HPLC 图
F ig. 1　HPLC chromatogram s of per iploc in (A)
and P. sep ium sample (B)
212　标准曲线的绘制: 精密称定杠柳毒苷对照品适
量, 用甲醇配成系列浓度的对照品溶液, 进样 20ΛL。以杠柳毒苷量 (X )为横坐标, 峰面积 (Y )为纵坐
标, 得回归方程为 Y = 1 159151X - 2185, r =
01999 9。杠柳毒苷的线性范围为 0105～ 116 Λg。
213　精密度试验: 取样品供试液重复进样 6 次, 测
得杠柳毒苷峰面积的含量R SD = 019%。
214　重现性试验: 取样品按测定方法平行操作 6
次, 测得杠柳毒苷的平均含量为 01204 4% , R SD =
116%。
215　稳定性试验: 取样品溶液在室温放置 0, 2, 4,
6, 8 h 分别测定, R SD = 017%。表明在本实验条件
下样品溶液在 8 h 内稳定。
216　回收率试验: 取已知含量的香加皮药材 6 份,
加入已知量的杠柳毒苷对照品, 测定, 平均回收率为
10115% , R SD = 310%。
217　样品测定: 分别取不同来源的 25 个市售香加
皮药材粉末 500 m g, 精密称定, 置 50 mL 量瓶内, 加
40 mL 50% 乙醇, 超声提取 40 m in 后, 放冷至室温,
用 50% 乙醇定容至刻度, 微孔滤膜 (0145 Λm ) 滤过,
进样 20 ΛL , 以外标法计算杠柳毒苷的含量。测定结
果见表 1。
表 1　不同来源香加皮中杠柳毒苷的含量
Table 1　Per iploc in in P. sep ium from differen t resources
来源 含量ö% 来源 含量ö%
保康医院　 0. 34 内蒙 0. 19
安舜大药房 0. 18 浙江 0. 06
同辉药店　 0. 19 黑龙江 0. 17
协和药店　 0. 18 陕西 0. 072
华丰药房　 0. 43 华丰药房 0. 43
山西1　　　 0. 097 河北2 0. 11
湖北1 0. 14 江苏 0. 12
重庆 0. 22 安徽2 0. 084
河北1 0. 052 湖北2 0. 15
吉林　 0. 19 山东2 0. 11
山东1　 0. 12 山西2 0. 11
河南 0. 18 宁夏 0. 076
安徽1 0. 14
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·875· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 5 期 2004 年 5 月
Ξ 收稿日期: 2003209211
作者简介: 刘　虹 (1967—) , 女, 主管技师, 天津中医学院 2001 级研究生 (在职)在读, 研究方向为药物研发。
T el: (022) 23051114　E2m ail: seajasm ine2001@yahoo. com. cn
验发现血府逐瘀汤对平阳霉素引起小鼠肺纤维化有明显的
防治作用, 并与目前应用较广泛的强的松进行了比较, 从肺
羟脯氨酸含量、病变肺组织形态学观测, 结果都说明其对肺
纤维化有明显的防治作用, 疗效优于强的松。刘卫敏等 [9 ]观
察了用 25% 当归注射液对大鼠肺纤维化发生、发展过程的
影响及机制。将模型组随机分为 3 组, 每天分别 ip 生理盐水
10 mL ökg, 25% 当归液 10 mL ökg, 氢化可的松 215 m gökg,
第 2, 7, 15, 30 天分 4 批处死, 测算肺指数、肺组织H E 染色、
M asson3 染色、纤维连接蛋白 (Fn)、免疫组化及图像分析仪
定量和电镜观察, 测血清及肺匀浆丙二醛、羟脯氨酸含量。结
果: 当归组急性肺泡炎阶段自由基损伤减轻, 炎性细胞渗出
减少, 炎性介质如 Fn 含量显著下降, 病理上肺纤维化明显
减轻, 电镜下胶原纤维减少, 且反应胶原纤维含量的羟脯氨
酸明显减少, 肺纤维化过程受到阻遏, 疗效与激素无明显差
异, 且长期应用副作用小。
2　结语
综上所述, 肺纤维化属于疑难重症, 现代医学对肺纤维
化的治疗尚无良策, 因此寻求有效的中药治疗具有重要意
义。目前开展的中药治疗肺纤维化药理研究已初步显示了中
药在防治肺纤维化方面的良好前景。但就目前国内研究现状
而言, 尚属起步阶段, 中药治疗肺间质纤维化的实验研究开
展的尚不够广泛, 程度不够深入, 且无统一的量化指标, 对药
物使用的安全性缺乏系统研究观察。今后随着研究的逐步深
入, 中药在治疗肺纤维化方面必将发挥越来越重要的作用。
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3　讨论
311　本方法简便准确, 重现性好, 可作为香加皮中
杠柳毒苷的含量测定方法。
312　提取条件的确定: 药材粉末分别采用回流、冷
浸和超声的方法, 以 50% , 70% , 95% 乙醇及流动相
(乙腈∶水= 27∶73) 为溶剂进行提取, 结果以 50%
乙醇超声提取率为最高。
313　超声时间的选择: 分别超声提取 10, 20, 40, 50
m in 后测定, 40 m in 后测定结果不再增加, 因此本实
验的超声时间为 40 m in。
314　不同来源的香加皮中杠柳毒苷的含量差异较
大, 保证临床用药安全有效, 有必要对该成分进行
质量控制, 建议《中华人民共和国药典》增加香加皮
中杠柳毒苷的含量测定以严格控制药材质量。
315　曾试用甲醇2水、甲醇2乙腈2水、乙腈2水系统为
流动相, 结果以乙腈2水系统的分离效果为好, 且杠
柳毒苷的峰形好, 保留时间适宜。
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