全 文 ：Ⅵ 鉴定为 3′-羟基葛根素。
化合物 Ⅶ : 白色粉末 , mp 188℃～ 190℃ (甲
醇 ) ,分子式: C26H28O13。光谱数据与文献报道 [ 6]的葛
根素芹菜糖苷一致。
化合物Ⅷ : 白色粉末 , mp 216℃～ 217℃ (氯仿 -
甲醇 ) ,分子式: C23H24O10。 FeCl3反应为阴性。 UV
λMeOHmax ( nm ): 255 ( 0. 66 ) , 302 ( sh, 0. 18 ) , IR νKBrmax
( cm
- 1 ): 3 362, 1 626, 1 617, 1 597, 1 513。 ESI-M S
m /z (% ): 461 ( [ M+ 1 ]+ )。 EI-M S m /z (% ): 298
( 100) , 138( 27. 3) , 166( 7. 8)。1HNMR( 300 Hz, DM-
SO-d6 )δ: 3. 79 ( 3H, s, CH3-) , 3. 94 ( 3H, s, CH3-) ,
5. 11( 1H, d, J= 7. 2 Hz, Glc-H1 ) , 7. 01( 21H, d, J=
8. 6 Hz, H-3′5′) , 7. 53( 2H, d, J= 8. 5 Hz, H-2′, 6′) ,
7. 81( 2H, d, J= 9. 1 Hz, H-5) , 7. 37( 1H, d, J= 9. 2
Hz, H-6) , 8. 45( 1H, s, H-2)。 H-H NO ESY( 400 Hz,
DM SO-d6 )显示 4′-OCH3与 H-3′, 5′; H-3′, 5′与 H-
2′, 6′; H-2与 H-2′, 6′; H-6与 H-5存在 NO E关系。
故该化合物鉴定为 8-甲基雷杜辛-7-O-葡萄糖苷。
化合物ⅩⅢ : 白色蜡状物 , mp 70℃～ 72℃ (氯
仿 ) ,具升华性 ,分子式: C28 H56O2。 IRνKBrmax ( cm- 1 ):
3 600～ 2 400, 2 918, 2 849, 1 708, 1 473, 1 299,
724。 EI-M S m /z (% ): 425 ( [ M + 1 ]+ , 1. 11 )。
1
HNM R( 300 Hz, CDCl3 )δ: 0. 88( 3H, s, CH3-) , 1. 25
( 40H, s, -CH2 -× 24 ) , 1. 63 ( 2H, m , -CH2-) , 2. 35
( 2H, t , -CH2-)。 故鉴定为二十八酸。
化合物ⅩⅣ : 白色针晶 , mp> 300℃ (甲醇 ) ,分
子式: C4 H6 N4O3。 IRνKBrmax ( cm- 1 ): 3 439, 3 345,
3 191, 3 062, 1 781, 1 711, 1 659, 1 603, 1 531,
1 430, 1 326。与对照品尿囊素薄层层析 Rf值一致。
故鉴定为尿囊素。
化合物ⅩⅤ :白色粉末 , mp 90℃ (氯仿 ) ,仅碘显
色。分子式: C78 H152O6。 IRνKBrmax ( cm- 1 ): 2 916, 2 849,
1 739, 1 470, 720。与对照品二十五烷酸甘油酯薄层
色谱 Rf值一致。 故鉴定为二十五烷酸甘油酯。
化合物Ⅸ ～ ⅩⅡ ,ⅩⅥ 的数据略。
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黄硬皮马勃的化学成分
王晨英 ,高锦明 ,杨　雪 ,董泽军 ,刘吉开
(中国科学院昆明植物研究所 植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室 ,云南 昆明　 650204)
摘　要: 目的　黄硬皮马勃 Scleroderma citrinum 具有消炎作用 ,对其化学成分进行系统研究并阐明其活性成分。
方法　采用硅胶柱层析进行分离 ,通过理化常数测定和波谱 ( IR, MS, 1 H和 13CNMR)技术进行结构鉴定。结果　分
析鉴定了 8个化合物 ,它们分别为: ( 22E , 24R ) -erg osta-5, 7, 22-triene-3β -o l(Ⅰ ) , 5α-lanosta-8( 9) , 23-diene-3β , 25-
diol-22-aceta te ester (Ⅱ ) , 5α, 8α-epidiox y-( 22E , 24R ) -erg osta-6, 22-diene-3β -o l(Ⅲ ) , ( 2S , 3S , 4R , 2′R ) -2-( 2′-hy-
droxy tetraco sanoylamino ) o ctadecane-1, 3, 4-triol (Ⅳ ) , adeno sine (Ⅴ ) , N , N -dime thy lphenylalanine ( Ⅵ ) , N -
methy lpheny la lanine (Ⅶ ) ,D-allito l (Ⅷ )。 结论　化合物Ⅵ 和Ⅶ 均系首次从高等真菌中分离得到。
关键词: 黄硬皮马勃 ;非蛋白氨基酸 ;高等真菌
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 09 0778 03
·778· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 9期
收稿日期: 2001-09-03基金项目:云南省自然科学基金项目 ( 2000B0066M)作者简介:王晨英 ( 1972-) ,男 ,河南人 ,在读博士研究生 ,主要从事天然有机化学研究。
* 通讯作者
Chemical constituents of Basidiomycetes from Scleroderma citrinum
W ANG Ch en-ying , Gao Jin-ming , YANG Xue , DONG Ze-jun, LIU Ji-kai
( State key Labo ra tary of Ph yto chemistry and o f Successiv e Application of Western Plant Resource,
Kunming Institute o f Bo tany , Chinese Academy o f Sciences, Kunming 650204, China )
Abstract: Object　 To isolate the chemical constituents f rom fruiting bodies of Ba sidiomycetes f rom
Scleroderma citrinum Pers. Methods　 The constituents w ere iso la ted by silica gel column chromatog ra-
phy , and the st ructures w ere elucidated by spect rum analy sis ( IR, M S, 1 HNMR, 13 CNM R) . Results　
Eigh t compounds w ere identif ied as: ( 22E , 24R ) -ergosta-5, 7, 22-triene-3β -ol (Ⅰ ) , 5α-lano sta-8 (Ⅸ ) ,
23-diene-3β , 25-diol-22-aceta te ester (Ⅱ ) , 5α, 8α-epidiox y-( 22E, 24R ) -erg osta-6, 22-diene-3β-o l (Ⅲ ) ,
( 2S , 3S , 4R , 2′R) -2-( 2′-hydroxy tet racosanoylamino ) octadecane-1, 3, 4-triol (Ⅳ ) , adenosine (Ⅴ ) , N .
N -dimethy lpheny lalanine (Ⅵ ) , N -methy lpheny lalanine (Ⅶ ) , D-alli to l (Ⅷ ) . respectiv ely. Conclusion　
Compounds Ⅵ and Ⅶ a re obtained from higher fungi fo r the fi rst time.
Key words: Scleroderma citrinum Pers. ; non-pro tein amino acids; higher fungi
　　黄硬皮马勃 Scleroderma citrinum Per. 属于硬
皮马勃科硬皮马勃属真菌 ,该菌与栲属等树种形成
菌根 ,具有促进树木快速生长的作用 [1 ] ,该菌具有微
毒 ,孢粉有消炎作用 [ 2]。该属真菌广布于世界各地 ,
共有 60余种 ,在我国较常见有 11种 ,该属真菌多有
止血、消肿、清热和解毒等功效。 迄今该属真菌化学
成分的研究较少 ,文献报道从该属金黄硬皮马勃
S. aurantium和多根硬皮马勃 S. polyrhizum 中分
离得到了 ( 23S ) -lano sta-8, 24-diene-3β , 23-diol[3 ] ,
( 22E ) -ergo sta-4, 6, 8( 14) , 22-tet raen-3-one-5α, 8α-
epidiox y-( 22E , 24R ) -ergosta-6, 22-diene-3β -ol以
及亚油酸和棕榈酸 [4 ]。 为了进一步深入研究该属真
菌药理作用的物质基础 ,我们对黄硬皮马勃的化学
成分进行了研究 ,从中分离得到了 8个化合物 ,它们
分别是: ( 22E , 24R ) -ergo sta-5, 7, 22-triene-3β -ol
(Ⅰ ) , 5α-lanosta-8( 9) , 23-diene-3β , 25-diol-22-ac-
eta te ester (Ⅱ ) , 5α, 8α-epidio xy-( 22E , 24R ) -ergo s-
ta-6, 22-diene-3β-o l (Ⅲ ) , ( 2S, 3S , 4R , 2′R ) -2-( 2′-
hydroxy tet racosanoy lamino ) octadecane-1, 3, 4-tri-
ol (Ⅳ ) , adenosine (Ⅴ ) , N , N -dimethylphenylala-
nine (Ⅵ ) , N -methylphenylalanine ( Ⅶ ) , D-alli tol
(Ⅷ )。 这些化合物均是首次从黄硬皮马勃中分离得
到 ,其中化合物Ⅱ 曾从 Pisolithus tinctotus中分
到 [5 ] ,但没有报道碳谱数据 ,本文补充了该化合物的
碳谱数据 ;化合物Ⅵ 和Ⅶ 是由苯丙氨酸衍生出来的
两个非蛋白氨基酸。化合物Ⅲ具有抗炎 [6 ]、抑制磷酸
酯酶 [7 ] ( IC50∶ 0. 9μmo l /L)和抗结核 ( M IC∶ 1μg /
m L)
[8 ]等作用。
化合物Ⅵ : 无色针状结晶 (丙酮 -水 ) ,碘化铋钾 -
碘反应呈阳性。 FAB-M S给出分子量相关离子 286
( M+ Gly ) , 194( M+ 1) ,表明相对分子质量为 193。
高分辩 EI-M S显示 193. 110 4 ( M+ ) (计算值为
193. 111 3 )得出分子式为 C11 H15 NO2 ,不饱和度
为 5。1HNM R( D2O)中有 5组峰 ,积分比 5∶ 1∶ 1∶
1∶ 6,表明有 14个质子 ,分别是 δ: 7. 65( 5H, m ) ,
4. 13 ( 1H, dd, J= 6. 0, 8. 5 Hz) , 3. 59 ( 1H, dd, J=
5. 5, 14. 0 Hz) , 3. 44( 1H, dd, J= 5. 5, 14. 0 Hz) ,
3. 21( 6H, s) ,此外尚有一个活泼的质子。 EI-M S裂
解碎片 ( m /z: 91, 77和 65)表明含有苯环和苄基。
13
CNM R( DEPT)谱表明有两个季碳 (羰基碳δ169. 0
和芳香烯碳δ132. 4) , 5个芳香烯氢碳 (δ: 2× 126. 1,
2× 125. 8, 124. 3)以及一个与氮和羰基相连的叔碳
(δ69. 0) ,一个与苯环相连的仲碳 (δ38. 6)以及与氮
相连的两个甲基 (δ30. 8)。因此推断化合物的结构为
N , N -dimethylphenylalanine。
化合物Ⅶ :无色针状结晶 (丙酮 -水 ) ,碘化铋钾-
碘反应呈阳性。 EI-M S显示相对分子质量相关离子
179;
1
H和 13 CNM R与化合物Ⅵ 很相似 ,相对分子质
量相差 14(相当于一个 CH2 ) ,说明该化合物的分子
式为 C10 H13NO2 ,不饱和度为 5。 1HNMR( D2O)中有
4组峰 ,积分比 5∶ 1∶ 2∶ 3,表明有 11个质子 ,分别
是 δ: 7. 66( 5H, m ) , 4. 13( 1H, t , J= 6. 5 Hz) , 3. 51
( 2H, d, J= 6. 5 Hz) , 2. 97( 3H, s) ,此外尚有 2个活
泼的质子 (一个为羧基上的活泼氢 ,一个为与氮相连
的活泼氢 )。 EI-M S裂解碎片 ( m /z: 91, 77和 65)表
明含有苯环和苄基。 13CNMR( DEPT)谱表明有两个
季碳 (羰基碳δ169. 7和芳香烯碳δ131. 7) , 5个芳香
烯氢碳 (δ: 2× 126. 3, 2× 125. 9, 124. 6)以及一个与
氮和羰基相连的叔碳 (δ61. 6) ,一个与苯环相连的仲
碳 (δ32. 5)以及与氮相连的一个甲基 (δ29. 0)。因此
·779·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 9期
推断该化合物的结构为 N -methylphenylalanine。化
合物Ⅵ 和Ⅶ 的化学结构式见图 1。
图 1　化合物Ⅵ 和Ⅶ 的化学结构式
1　仪器和材料
XRC-1型显微熔点仪 ,未校正。核磁共振用
Bruker-400和 Bruker-500核磁共振仪测定 ,红外光
谱采用 Bio-Rad FTS型红外光谱仪测定 ,质谱用
VG-Auto Spec-3000型质谱仪。柱层析硅胶以及硅
胶 GF254均为青岛海洋化工厂产品。实验材料购自云
南腾冲市 ,由中国科学院昆明植物研究所刘培贵教
授和王向华女士鉴定。
2　提取和分离
黄硬皮马勃 1. 2 kg粉碎 ,用氯仿 -甲醇 ( 1∶ 1)
3 L冷浸 3次 ,每次 24 h ,合并提取液并减压浓缩得
提取物 89 g。将所得到的提取物进行硅胶柱层析
( 200～ 300目 ) ,用氯仿 -甲醇 ( 1∶ 0～ 8∶ 2)梯度洗
脱 ,每 500 mL收集 1份 ,根据 TLC合并相同的流
分共 8组 ,组分 2重结晶得化合物Ⅰ 2 g;组分 3重
结晶得化合物Ⅱ 0. 5 g ,母液上硅胶柱用石油醚-乙
酸乙酯 ( 7∶ 3)洗脱得化合物Ⅱ和Ⅲ 10 mg;组分 4
重结晶得化合物Ⅳ 15 mg;组分 5重结晶得化合物
Ⅴ 20 mg;组分 6重结晶得化合物Ⅵ 2. 35 g,母液与
组分 7合并用上硅胶柱用氯仿 -甲醇 ( 9∶ 1)洗脱得
化合物Ⅵ 和Ⅶ 12 mg;组分 8放置得到结晶 ,然后在
水和丙酮中重结晶得化合物Ⅷ 12 g。
3　结构鉴定
化合物Ⅰ : C28 H44 O,无色针状结晶 , EIM S,
1 HNM R和 13 CNMR数据与 ( 22E , 24R ) -ergosta-5,
7, 22-triene-3β -ol一致。
化合物Ⅱ : C32 H52O4 ,白色无定型粉末 , 1 HNMR
和 MS数据与 5α-lano sta-8 ( 9 ) , 23-diene-3β , 25-
diol-22-acetate ester一致 [5 ]。
化合物Ⅲ : C28H44O3 ,无色针状结晶 , IR, EIM S,
1 HNM R和 13 CNMR数据与 5α, 8α-epidiox y-( 22E ,
24R )-erg osta-6, 22-diene-3β -ol一致。
化合物Ⅳ : C42 H85 NO5 ,白色无定型粉末 , mp
140℃～ 142℃ , 1HNM R和 13 CNM R数据与 ( 2S ,
3S, 4R , 2′R ) -2-( 2′-hydroxytet racosanoy lamino )
octadecane-1, 3, 4-trio l一致 [9 ]。
化合物Ⅴ : C10 H13N5O4 ,白色无定型粉末 , mp
233 ℃～ 235℃ , [α]25D - 57. 8°( c, 0. 6M , H2O ) ,
1
HNMR和 13 CNM R数据与 adeno sine一致 [ 10]。
化合物Ⅵ : C11 H15NO2 ,无色针状结晶 , 1HNMR
( D2O)δ: 7. 65 ( 5H, m ) , 4. 13 ( 1H, dd, J= 6. 0, 8. 5
Hz) , 3. 59( 1H, dd, J= 5. 5, 14. 0 Hz) , 3. 44( 1H, dd,
J= 8. 5, 14. 0 Hz) , 3. 2 ( 6H, s) ;
13
CNMR ( D2O)δ:
169. 0, 132. 4, 126. 1, 125. 8, 124. 3, 69. 0, 38. 6,
30. 8; FAB+ -M S m /z: 286( M+ Gly ) , 194( M+ 1) ;
HREI-M S m /z: 193. 110 371 ( M
+
) , calc
193. 110 279; EI-M S m /z: 193 [ M
+
] , 148 [ M -
COOH]
+ , 133 [ M - COOH- M e ]
+ , 102 ( [ M -
PhCH2 ]+ , 100% ) , 91 [M - Me2N CHCOOH]+ , 77
[ Ph ]
+ , 65[C5H5 ]
+ 。
化合物Ⅶ : C10 H13NO2 ,无色针状结晶 , 1HNMR
( D2O)δ: 7. 66( 5H, m ) , 4. 13 ( 1H, t, J= 6. 5 Hz) ,
3. 51( 2H, d, J= 6. 5 Hz) , 2. 97 ( 3H, s ) ; 13 CNMR
( D2O)δ: 169. 7, 131. 7, 126. 3, 125. 9, 124. 6, 61. 6,
32. 5, 29. 0; EI-M S m /z: 179 [ M
+
] , 134 [ M -
COOH ]
+ , 133 [ M - COOH- Me ]
+ , 120 [ M -
COOH- CH2 ]+ , 91 [ M - MeNHCHCOOH ]+ , 88
( [ M - PhCH2 ]+ , 100% ) , 77 [ M - CH2NHM e
COOH]+ , 65[C5H5 ]+ 。
化合物Ⅷ : C6H14O6 ,无色针状结晶 , mp 154. 5
℃～ 155. 5℃ , M S, 1HNMR和 13 CNMR与文献一
致 [11 ]。
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