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用正交试验法优选小果博落回生物碱的提取工艺



全 文 :    图 2  0. 1%蜂胶不同溶剂提取物对
亚油酸抗氧化性的比较
     图 3  0. 02%蜂胶不同溶剂提取物
对亚油酸抗氧化性的比较
的脂质过氧化反应均有阻断作用 ,且随着浓度的增
加 ,阻断作用增强。在第 12天时 ,亚油酸氧化达到最
高值 , 95%乙醇提取物均比同浓度的其他两种提取
物的 A值低 ,表明其抗氧化效果最好。而随着氧化
的后期 ,由于分解的醛类物质受到再氧化生成酸 ,因
此油脂酸败至一定程度时 ,其丙二醛物质生成减少 ,
TBA值有下降的趋势 ,即测得的 A值下降 ,表明油
脂已剧烈酸败 [6 ]。
3 讨论
  蜂胶的各种溶剂提取物均有抗氧化作用 ,在一
定范围内 ,其抗氧化作用与蜂胶提取物的添加量成
正比 ,其中以 95%乙醇提取物的抗氧化性能最强 ,
其抗氧化性能可与维生素 E和芦丁相媲美。
参考文献:
[ 1 ] 万素英 ,赵亚军 ,李 琳 ,等 . 食品抗氧化剂 [M ] .北京:中国
轻工业出版社 , 1998.
[2 ] 陈荷凤 ,韩文辉 ,李 兵 ,等 . 蜂胶各种溶剂提取物的抑菌效果
比较 [ J] .食品研究与开发 , 2001(增刊 ) , 18-19.
[3 ]  Cotel le N, Bernier J, Lcat teau J P, et al . Ant ioxidant proper-
ties of hyd rox yf lavones [ J] . Fre Rad Biol M ed, 1996, 20: 35-
43.
[4 ]  Alexandre C, Kur t H, Wah jo D, et al . Antioxid an t and
lipophi lic cons ti tuen ts of Tinospora . Cr ispa [ J ]. Planta Med,
1998, 64: 363-393.
[5 ] 孟 浩 ,杭 瑚 . 柯子抗氧化作用的研究 [ J ].食品科学 , 2002,
21( 2): 9-12.
[ 6 ]  Inou e T. Specifi c determination of malonald ehyde b y N -
m ethy-2-ph enylindole o r thiobarbituric acid [ J ] . J Am Oil
Ch em Soc, 1998, 75( 5): 597-600.
用正交试验法优选小果博落回生物碱的提取工艺
安彩贤 ,海 松 ,符军梅 ,于红梅
(西安交通大学药学院 ,陕西 西安  710061)
  小果博落回 Macleaya m icrocarpa ( Maxim )
Fedde系罂粟科博落回属植物 ,其地上部分具有清
热解毒、杀虫止痒之功效 [1 ] ,文献报道 [2 ]其有效成分
主要为血根碱 ( sanguinarine)、白屈菜红碱 ( chelery-
thrine)等多种生物碱。目前有关小果博落回生物碱
提取工艺的研究未见报道 ,本研究在前期工作基础
上 ,对乙醇回流提取小果博落回生物碱工艺进行优
化。
1 试药与仪器
1. 1 药材:小果博落回采自陕西青华山 ,经本院生
药教研室吕居娴教授鉴定为小果博落回 Macleaya
m icrocarpa ( Maxim ) Fedde,将药材自然风干 ,取叶
粉碎成粗粉 ,置阴凉干燥处备用。
1. 2 仪器及色谱条件:高效液相色谱仪 ( Agilent公
司 ) ;色谱柱: Kromasil C18柱 ( 150 mm× 4. 6 mm, 5
μm) ,流动相: 乙腈 -0. 1%磷酸 ( 23∶ 77) ;流速: 1. 0
mL /min;检测波长: 270 nm;柱温:室温。
2 方法与结果
2. 1 正交试验:选取乙醇的浓度、加入乙醇的倍数、
回流时间、回流次数 4个因素 ,每个因素选取 3个水
平 ,并以产率、血根碱及白屈菜红碱的含量 [2 ]为指标
进行考察 ,对提取工艺优选进行方差分析 ,结果见表
1~ 3。
  从方差分析表中可以看出:对小果博落回中生
·804· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2002年第 33卷第 9期
收稿日期: 2001-11-20
物碱的产率的影响: 乙醇浓度> 回流次数> 乙醇倍
数> 回流时间 ,最佳因素排列为 A1B3C3D3 ;对血根
碱提取的影响:乙醇倍数> 乙醇浓度> 回流次数>
回流时间 ,最佳因素排列为: A2 B3 C3D1 ;对白屈菜红
碱提取的影响:乙醇倍数> 回流次数> 乙醇浓度>
回流时间 ,最佳因素排列为: A2 B3 C1 D3。综合考虑后
设定进行工艺 1( A2 B3 C3D3 )和工艺 2( A2B3 C1D3 )试
验筛选。 结果见表 4。
表 1 因素水平表
水平
因   素
A乙醇
浓度 (% )
B加入乙
醇倍数
C回流
时间 (h )
D回流
次数 (次 )
1 75 10 1. 0 1
2 85 12 1. 5 2
3 95 14 2. 0 3
表 2  L9 ( 34 )正交试验设计及测定结果
试验号 A B C D 产率 (% ) 血根碱含量 (% ) 白屈菜红碱含量 (% ) 总和 (% )
1 1 1 1 1 0. 790 5 0. 147 0. 293 0. 440
2 1 2 2 2 0. 918 6 0. 160 0. 391 0. 551
3 1 3 3 3 1. 213 4 0. 213 0. 450 0. 663
4 2 1 2 3 0. 919 7 0. 163 0. 400 0. 563
5 2 2 3 1 0. 836 5 0. 193 0. 362 0. 555
6 2 3 1 2 0. 909 8 0. 187 0. 467 0. 654
7 3 1 3 2 0. 714 0 0. 127 0. 313 0. 440
8 3 2 1 3 0. 769 0 0. 149 0. 397 0. 546
9 3 3 2 1 0. 780 6 0. 191 0. 346 0. 537
  K 1
  K 2
  K 3
产 率
0. 974 2 0. 808 1 0. 823 1 0. 802 5
0. 888 7 0. 841 4 0. 873 0 0. 847 5
0. 754 5 0. 967 9 0. 921 3 0. 967 4
血根碱
0. 173 0. 146 0. 161 0. 177
0. 181 0. 167 0. 171 0. 158
0. 156 0. 197 0. 178 0. 175
白屈菜红碱
0. 378 0. 335 0. 386 0. 334
0. 410 0. 383 0. 379 0. 390
0. 352 0. 421 0. 375 0. 416
  R 0. 219 7 0. 159 8 0. 098 2 0. 164 9 0. 025 0. 051 0. 017 0. 019 0. 058 0. 086 0. 011 0. 082
表 3 方差分析表 ( SAS软件 )
项目 方差来源 自由度 离均差平方和 均方 F值 P r> F
产率   
血根碱  
白屈菜红碱
A 2 0. 073 54 0. 036 77 5. 08 0. 164 0
B 2 0. 042 69 0. 021 34 2. 95 0. 252 3
C 2 0. 014 47 0. 007 23 0. 33 0. 750 7
D 2 0. 043 56 0. 021 78 3. 01 0. 249 3
A 2 0. 001 01 0. 000 50 2. 38 0. 295 5
B 2 0. 003 98 0. 001 99 9. 38 0. 096 3
C 2 0. 000 42 0. 000 21 0. 65 0. 606 3
D 2 0. 000 65 0. 000 33 1. 54 0. 393 7
A 2 0. 005 00 0. 002 50 0. 47 0. 678 8
B 2 0. 011 06 0. 005 53 2. 23 0. 309 6
C 2 0. 000 17 0. 000 09 0. 03 0. 969 8
D 2 0. 010 57 0. 005 29 2. 16 0. 316 8
表 4 工艺 1与工艺 2比较表
工艺 产率 (% ) 血根碱含量 (% )
白屈菜红
碱含量 (% ) 总和 (% )
工艺 1 0. 782 4 0. 218 0. 357 0. 575
工艺 2 0. 766 3 0. 177 0. 424 0. 601
  结果表明 ,工艺 1与工艺 2之间无显著性差异 ,
本着经济、有效的原则 ,确定 A2B3 C1D3为最佳工艺。
2. 2 最佳工艺验证试验: 优选出最佳工艺后 ,进行
验证试验 ,以确保重复性和正确性。 结果见表 5。
  结果表明 ,验证的最佳工艺产率稳定 ,血根碱和
白屈菜红碱的含量都较高 ,证明正交试验的结果是
可信的。 确定提取小果博落回中生物碱的最佳工艺
是 A2 B3 C1D3 ,即: 用药材 14倍量的 85%乙醇 ,回流
3次每次 1 h。
表 5 最佳提取工艺验证试验结果
试验号 产率 (% ) 血根碱含量 (% )
白屈菜红
碱含量 (% ) 总和 (% )
1 0. 832 4 0. 210 0. 351 0. 561
2 0. 804 4 0. 228 0. 413 0. 641
3 讨论
3. 1 在提取工艺研究中 ,尤其是多指标成分考察
时 ,经常出现结果不一致的情况 ,此时就应注意哪个
指标更为重要一些 ,并参看正交表中成分相对高的
试验号 ,还要结合生产实际找出最佳搭配 ,经对比试
验最后确定出最优工艺条件。
3. 2 应对最优工艺条件进行验证实验 ,以确保工艺
的重复性和正确性。 本研究最优工艺为 A2 B3 C1 D3 ,
即加入药材 14倍量的 85%乙醇加热回流 3次 ,每
次 1 h。
参考文献:
[1 ] 杨 军 ,王 静 ,刘信顺 ,等 . 博落回的药效研究 [ J] . 中药材 ,
1999, 22( 2): 82-84.
[2 ] 曾建国 ,张 胜 ,侯团章 ,等 . 不同生长期博落回果实中血根碱
与白屈碱菜红碱的含量 [ J] .中药材 , 1999, 22( 5): 229.
·805·中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2002年第 33卷第 9期