全 文 ：中草药 第 卷第 期 年 月
姜茎尖的离体培养与试管苗快繁
缪 静 , 柏新富
烟台师范学院生命科学学院 , 山东 烟台
摘 要 目的 探索姜茎尖组织培养及其试管苗快速繁殖的适宜条件 。 方法 剥取不大于 的姜茎尖生长点
为外植体 , 以 为基本培养基 , 附加不同种类和浓度的植物生长物质进行培养 。 结果 小于 。 的姜茎尖可
进行 良好的分化与生长 在各类激素中 , 以 对姜芽分化最为有效 , 培养基 一
最有利于芽的分化和生长 在生根培养基中添加适量的 不仅不影响不定根的形成 , 且能增加成苗数 , 对
不定根的分化和成苗最适的培养基为 。 结论 试验为姜的茎尖离体培
养提供了有效途径
。
关键词 姜 离体培养 快繁
中图分类号 文献标识码 文章编号 一 一 一
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姜 陇 刀艺‘ ‘ 亦称 “ 生姜 ” , 为姜
科多年生草本植物 , 常作一年生栽培 , 是我国重要的
出口创汇蔬菜之一川 , 不仅是大家熟悉的调味品 , 也
是具有广泛药理作用的常用 中药 , 有发汗解毒 、 温中
止吐 、 温肺止咳 、 解毒等功效 。 近年研究还表明 , 姜具
有抗肿瘤 、抗氧化作用比 〕。 由于姜的药用及保健价
值逐渐被人们所认识 , 姜及其加工品的内 、外贸市场
逐年看好 , 其种植面积逐渐扩大 。 但是 , 在长期利用
根茎进行无性繁殖过程 中 , 栽培姜 已普遍受病毒侵
染 , 导致姜种性退化 , 产量和 品质降低闭 , 严重影 响
了姜的生产与经济效益的提高 。 因此 , 通过组织培养
手段对现有优 良品种进行脱毒和复壮 , 提高品种 自
身抗逆性和增产潜力 已迫在眉睫 。 本试验以莱芜大
姜为材料 , 对其茎尖培养 、 不定芽增殖 、 不定根诱导
进行了研究与探讨 , 旨在为工厂化生产姜脱毒种源 、
最终解决姜品种退化问题奠定基础 。
材料与方法
茎尖剥取与初代培养 供试姜品种为莱芜大姜
记了汽 。 , 取发芽整齐的姜 , 将芽切
下 , 流水冲洗 一 , 酒精消毒 , 置
。 氯化汞中浸泡 , 无菌水洗 次 , 然后无
菌操作剥取直径不大于 的茎尖作为外植体 ,
转接于 的培
养基上培养 。
试管苗快繁与不定根诱导 将初代培养所得试
管苗转接至以 为基本培养基 、 附加不同种类和浓
度的植物生长调节物质 的培养基 中 , 置于光照强度
、 照光 、 光照时温度 士 、 暗时
士 ℃ 条件下培养 , 后观察结果 。
结果与分析
茎尖大小对成活与分化的影响 将茎尖接种到
适宜的培养基中 , 周左右开始变绿 、 膨大生长 , 说
收稿 日期 一 一
作者简介 缪 静 一 , 女 , 河北唐 山人 , 讲师 , 硕士 , 年毕业于江南大学 , 主要从事生物技术的教学与科研工作 。
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中草药 第 卷第 期 年 月 · ·
明茎尖已成活 。一般情况下 , 外植体越大 , 越易成活 ,
污染率也相对升高 。 而在本试验中 , 茎尖较小时污染
率相对较高 表 , 这可能是因为剥取的茎尖较小
时 , 外植体本身带菌 的可能性 已很小 , 而茎尖越小 ,
操作难度越大 , 操作过程造成污染的可能性也越大 。
在成活率上 , 虽然小于 的茎尖成活率较低 ,
但 由于剥取的茎尖生长点愈小 , 脱除病毒的可能性
愈大 , 因此从脱毒复壮的角度 , 取直径 的
茎尖生长点作外植体是可行的 。 表 结果还显示 , 分
化起始时 , 茎尖 的分化较慢 , 随后加快
而茎尖在 以上 的则变化不大 , 这说明茎尖
大 , 启动快 , 但分化率低 茎尖小 , 启动慢 , 但分化速
率快 , 分化率高 , 更利于分化 。
不 同种类细胞分裂素对姜芽增殖与生长 的影
响 为了研究细胞分裂素对姜芽分化和生长的影响 ,
在 培养基上 进行 了不 同浓 度 的 一 节基腺膘 吟
表 茎尖大小对成活率和分化率的影响
介
茎尖大 外植体 污染数 污染率 成活数 成活率 分化率 ‘
小 数 个 个 个
, 分化率的计算以成活的外植体为基数 。
釜
、玉米素 和激动素 的试验 。 结果表
明 , 在蔡 乙 酸 为 的情况下 ,
对促进姜芽分化和生长的效果最好 , 其次是 、
的表现最差 表 , 方差分析表明三者差异极显著
。 。 就 而言 , 以 一
效果较优 。
与 配比对芽增殖和生长的影响 试
表 不同细胞分裂素对姜芽分化和生长 的影响 ’
· 一 ‘ · 一 · 一 ‘
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分化芽数 个 · 株 一 ’
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芽苗高“
’ 转接后 调查 ”指最高芽苗的高度 。
“
验结果表明 , 当培养基中缺乏 时 , 姜芽几乎不增
殖 表 , 在 为 时 , 姜芽的分化
呈增加趋势 , 同时 , 在培养基 中添加适量 的 可
明显促进芽的分化和生长 。 统计分析显示 , 不同浓度
之间增殖系数极差等于 , 差异达极显著水平
一 。 一 。 然而 , 较高的 虽有利
于芽分化 , 但却使芽苗的生长受到明显影响 。 因此 , 选
择适宜的 和 水平对姜芽增殖和生长极为
重要 , 本试验中较适于姜芽分化增殖和生长的激素配
比为 。
姜试管苗不定根的诱导 取继代培养 、 芽
苗 高 。 以 上 的无 根 试 管 苗 转 接 到 含
·
的 培养基中诱导生根 , 结
果表明 , 低浓度 对不定根 的形成有 明显促进
作用 , 但随 浓度升高 , 根愈伤化加粗严重 , 当
浓度达 时则抑制不定根的形成 。 进
一步研究发现 , 在含有一定量 的 的生根培养
基 中附加适量 的 , 不仅可 以消除因 浓度
较高引起的根愈伤化现象 , 而且可使成苗数明显增
加 表 。 当 处于适宜浓度范围内 , 添加
不仅可 以消除根的愈伤化 , 而且
表 与 配比对姜芽增殖及生长的效应 ‘
一
接转芽
· 一 ’ · 一 ‘ 数 个
增殖芽
数 个
增殖
系数
平均株高
士
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’ 转接后 调查
苦
可促进不定根的发生 , 但当 达 时 , 则
会对不定根分化产生不利影响 在生根培养基中添
加 的另一个作用是使成苗数明显增加 , 方差分析
表明各浓度之间差异均达极显著水平
。 一
·
, 说明 对芽的分化成苗具有重要的
作用 , 试验中应将其控制在最适浓度范围内 。 本试验
· · 中草药 肠 群 第 卷第 期 年 月
中 , 当生根培养基 中 为 一 时 ,
最有利于生根和成苗的 为 。
表 与 配比对姜试管苗生根及成苗的影晌
’
外植体 分化成苗数 ” 平均根数 根发育
哩 · 一 ‘ 八吨 · 一 , 数 个 个
· 外值体一 ‘ 八条 · 株一 ’ 情况
士 士 正常
士 士 常
士 土 正常
士 士 正常
士 士 轻度愈伤
,
士 士 正常
士 士 正常
士 士 正常
士 士 严重愈伤化
士 士 轻度愈伤
士 土 正常
士 士 正常
, 转接后 调查 , 生根率均为 “ 指高于 的
芽苗的数量
番 ,
“ 。
讨论
一般认为 , 在试管苗生长与分化过程中 , 细胞分
裂素比率高时利于诱导芽 , 但在实际应用 中不仅要
考虑芽的增殖数量 , 更要注意分化芽苗的质量 , 只有
具有一定高度和粗度的芽苗才是有效芽苗 。 本试验
结果表明 , 细胞分裂素是姜芽分化增殖必不可少的 ,
但过高的细胞分裂素会影响芽苗的生长 。 而适量添
加生长素不仅可促进芽 的分化增殖 , 更有利于芽苗
的生长 表 。 不过 , 质量浓度较高
时 , 姜芽苗生长表现 出细弱徒长趋势 ,
不利于移栽成活及移栽后 的生长 , 这一点与曾令波
等在半夏组培中的结果相似圈 。
在不定根诱导形成中 , 生长素促进生根 , 而细胞
分裂素一般对不定根分化有抑制作用 , ’〕, 多数组培
苗生根单用生长素 , 也有在不含激素的培养基 中诱
导生根的 。 张秀清等 在莱芜片姜组培时将幼芽转
到不含激素的空 白培养基中诱导生根 徐燕等川的
试验结果是在培养基中添加 , 生姜
的生根效果较好
。
但本试验发现 , 单用生长素 , 根易
愈伤化 , 形成不正常根 , 而适 量附加 , 不仅可消
除愈伤化 、促进生根 , 而且可明显增加成苗数 , 当然 ,
较高的 则会对根的分化产生不利影响 。 本试验
中 , 最 适 于 姜 不 定 根 分化 和 成 苗 的 激 素配 比 为
和 。
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中国蔬 菜种业 大 观 〔 〕
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又大品种菊花中不同成分的含量比较
贾凌云 ’ , 孙启 时‘ , 黄顺 旺 ,
沈阳药科大学中药学院 , 辽宁 沈阳 安徽省医药科技实业有限公司 , 安徽 合肥
摘 要 目的 研究八大品种菊花中不同成分的含量 。 方法 以绿原酸 、 木犀草素一 一 一各 一葡萄糖昔及芹菜素一
一各 一葡萄糖昔为指标 , 采用高效液相色谱法对不同品种的菊花进行了含量测定 。 结果 绿原酸含量 以济菊和祁
菊最高 , 川 菊最低 木犀草素一 一 一月一 一葡萄糖昔含量以济菊最高 , 而毫菊最低 芹菜素一 一 一卜 一葡萄搪昔含量以济
菊最高 , 而最低为贡菊
、
毫菊和怀菊
。
结论 绿原酸和黄酮类成分均高者才是优 良品种 。
收稿 日期 一 一
作者简介 孙启时 一 , 男 , 吉林松源人 , 教授 , 博士生导师 , 主要从事中药资源开发和利用的研究 。
一 一