全 文 ：It is identified by comparison w ith reference data[ 8]

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人工种植高山红景天中抑制脯酰肽内切酶的化学成分
李
俊1,范文哲2, 门田重利2, 义祥辉1

( 1
广西师范大学 资源与环境学系,广西 桂林
541004;
2
日本富山医科药科大学和汉药研究所,日本 富山
2630)
摘
要:目的
研究人工种植高山红景天中具有较强的脯酰肽内切酶( pro lyl endopeptidase, PEP)抑制活性的化学
成分。方法
人工种植高山红景天用甲醇提取,不同极性溶剂分级萃取, 分别用硅胶和 Sephadex LH- 20 柱色谱分
离,测定化合物的理化常数和波谱数据, 鉴定化合物结构。结果
从人工种植高山红景天甲醇提取物的醋酸乙酯
萃取部分分离得到 8 个单体化合物:没食子酸(
)、红景天苷(
)、7- O-
-D-葡萄糖- 3, 4
, 5, 8-四羟基黄酮 (
)、红
景天黄酮苷(
)、表儿茶素(
)、表儿茶素没食子酸(
)、红景天氰苷 A(
)、
-D-葡萄糖- 3, 7-二甲基- 4-羟基- 2, 6-
辛二烯(
)。结论
首次从人工种植红景天分离出显示较强的 PEP 抑制活性组份中分离出 8 个单体化合物。
关键词:高山红景天; 脯酰肽内切酶;红景天苷
中图分类号: R284
1


文献标识码: A


文章编号 : 0253 2670( 2004) 08 0852 03
Chemical constituent as inhibitor to prolyl endopeptidase from underground part
of cultivated Rhodiola sachalinensis
LI Jun1, FAN Wen-zhe2, KADOTA Shigetoshi2, YI Xiang-hui1
( 1
Department of Resources and Environmental Science of Guangxi Normal University , Guilin 541004, China;
2
Research Institute for Wakan- Yaku ( T radit ional Sino- Japanese M edicines) , T oyama Medical
and Pharmaceutical Univ ersity, T oyama, 2630 Japan)
Abstract: Object
To study the chem ical const ituents as inhibitors to prolyl endopept idase f rom the under-
g round part of cult ivated Rhodiola sachal inensis A. Bor. Methods
The compounds w ere isolated on silica gel
column and purified by Sephadex LH-20, and identified by spectral data and physicochemical properties
Results

Eight compounds were obtained from EtOAc extract and identified as gallic acid (
) , salidroside (
) , 3,
4
-trihydroxyflavone-7- O-
- D-glucopyranoside (
) , rhodiof lavonoside (
) , epig allocatechin (
) , epigallo-
catechin gallate (
) , rhodiocyanoside A (
) , 3, 7-dimethy-4-hydroxy-2, 6-octadien- O-
- D-glucoside (
)

Conclusion
The compounds are first isolated as inhibitors to prolyl endopeptidase from the underground part of
cult ivated R . sachalinensis

Key words: Rhodiola sacnal inensis A
Bor
; prolyl endopept idase ( PEP) ; salidroside


高山红景天 Rhodiola sachal inensis A
Bor
为 红景天科多年生草本植物, 具有很高的药用价值。

852
中草药
Chinese T raditional and Herbal Drugs
第 35 卷第 8 期 2004年 8月

收稿日期: 2003-10- 15基金项目:教育部重点基金资助项目( 0194) ;广西省自然科学基金资助项目(桂科基 0144025)作者简介:李
俊( 1964- ) ,男,广西浦北人,广西师范大学资源与环境学系高级工程师,硕士生导师,主要从事天然产物的化学成分及其生物活性研究。
Tel: ( 0773) 5846201
E-mail: lijun9593@ tom
com
其免疫作用强于人参和刺五加而无人参的过度兴奋
和刺五加的致便秘作用, 具有抗疲劳、抗衰老、抗缺
氧、抗辐射、益智之功效, 可治疗多种疾病,有巨大的
经济价值和广阔的开发前景[ 1, 2] , 从而也成为研究
者关注的热点[ 3, 4]。全世界有 90多种高山红景天,
中国有 70 多种, 进行过化学研究的有 20 多种。但
是,对人工栽培的高山红景天的成分研究未见报道,
笔者发现人工栽培的高山红景天的甲醇提取物有较
强的脯酰酞内切酶( prolyl endopept idase, PEP)抑制
活性, 而 PEP 与老年性痴呆有关[ 5]。为此, 对其地
下部分的甲醇提取物化学成分进行了研究, 从其甲
醇提取物显示较强的 PEP 抑制活性的醋酸乙酯萃
取部分得到 8 个单体化合物, 经理化数据对照和波
谱分析鉴定,它们分别是:没食子酸( gallic acid,
)、
红景 天苷 ( salidroside,
)、3, 4
, 5- trihydrox-
y flavone-7- O-
-D-glucopy ranoside (
)、 rhod-i
of lavonoside (
)、表儿茶素 ( epig allocatechin,
)、
表儿茶素没食子酸 ( epigallocatechin gallate,
)、
rhodiocyanoside A (
)、3, 7-dimethy-4-hydroxy-2,
6-octadien- O-
-D-glucoside (
)。
1
仪器与试剂
Kofler- type 熔点测定仪 ( 温度计未校正 ) ;
JASCO DIP- 4旋光度测定仪; JEOL GX- 400核磁
共振仪, TMS 为内标; Shimadzu IR- 408 红外光谱
仪;色谱用硅胶, TLC, RPTLC 薄层色谱硅胶板是
M erck公司产品; Sephadex LH-20 为瑞典 Parmacia
公司生产, 所使用的试剂均为分析纯。实验样品人
工种植高山红景天为 2000年门田重利教授购于河
北,经富山医科药科大学生药研究室鉴定。
2
提取与分离
取人工种植的高山红景天地上部分 3 kg ,切碎,
甲醇回流提取 3 次, 每次甲醇量为 6 L, 每次提取 2
h,回收甲醇, 得到提取物210 g。把甲醇提取物悬浮
于水,依次用氯仿( 300 mL
2)、醋酸乙酯( 300 m L

2)和正丁醇( 300 mL
2)进行萃取, 干燥各萃取
物及水层, 得到氯仿萃取物 53 g, 醋酸乙酯萃取物
13 g, 正丁醇萃取物 75 g, 水溶物 67 g。其中, 醋酸
乙酯萃取物和正丁醇萃取物显示出显著的抑制
PEP 活性,我们对醋酸乙酯萃取物进行分离。取 12
g 醋酸乙酯萃取物在 600 g 的硅胶柱上进行柱色谱,
用 MeOH-CH Cl3( 5
95
30
70)进行洗脱, 每流份
100 mL, 共收集 98 份。经薄层色谱检识合并相同
流份, 得到 10 个组份: Fr
1 200 mg; Fr
2 3
3 g;
Fr
3 486 mg; Fr
4 2
5 g; Fr
5 290 mg; Fr
6 88 mg;
Fr
7 167 mg; Fr
8 95 mg; Fr
9 370 mg; Fr
10 100
mg。其中 Fr
2 经甲醇反复重结晶得到化合物

( 2
6 g)。取 Fr
4组份2
5 g,在 Sephadex LH-20上
进行分离, 用 H2O-MeOH ( 100
0
70
30)进行洗
脱,得到
( 28
4 mg )、
( 14
5 mg ) ; 取 Fr
4 已经
过 Sephadex LH-20分离所得的一组份 1
25 g 过硅
胶柱,用 MeOH-CH Cl3( 5
95
25
75)进行洗脱, 得
到
( 53
4 mg ) ,
( 78
4 mg )、
( 181
0 mg )。组
份 Fr
5以 CHCl3-MeOH ( 2
1)为展开剂, 经硅胶薄
层色谱分离, 得到化合物
( 67 mg )。组份 Fr
6以
MeOH-H2O( 2
3)为展开剂,经硅胶反相薄层色谱分
离,得到化合物
( 14
5 mg )。
3
鉴定
化合 物
: 无色结晶, mp 225 ~ 250
。
1H-NM R光谱数据与文献[ 6]对照,确定为没食子酸。
化合物
:无定型粉末, mp 161~ 163
。IR、
1H-NM R、13C-NMR数据与文献[ 7]报道的红景天苷
一致。
化合物
: 淡黄色粉末, [
] 25D - 41
5 ( c, 0
4,
MeOH )。 IR
KBrm ax ( cm- 1 ) : 3 390, 1 655, 1 077。
1H-NM R( CD3OD, T MS )
: 8
02 ( 2H , d, J= 9
0
Hz) , 6
89( 2H, d, J= 9
0 Hz) , 6
18( 1H, d, J= 2
0
Hz) , 5
22( 1H , d, J= 7
6 Hz) , 3
62 ( 1H , dd, J=
11
9, 5
0 Hz) , 3
40( 3H, m) , 3
12( 1H, dd, J= 7
8,
7
6 H z ) , 1
26 ( 3H , d, J= 6
1 H z)。 13C-NMR
( CD3OD, TMS)
: 177
8 ( C-4) , 160
7 ( C-4
) , 153
7
( C-9) , 151
0( C-5) , 148
8( C-7) , 146
0( C-2) , 137
3
( C-3) , 131
1 ( 2
C, C-2
, 6
) , 123
1( C-1
) , 116
3
( 2C, C-3
, 5
) , 105
7( C-10) , 100
6( C-6) , 97
2( C-
1
) , 82
4( C-2
) , 72
4( C-4
) , 71
1( C-5
) , 70
8( C-
2
) , 18
1( C-6
) , 以上数据与文献[ 8]报道的 7- O-
-
D 葡萄糖-3, 4
, 5, 8-四羟基黄酮一致。
化合物
: 淡黄色粉末, [
] 25D - 50
9 ( c, 0
4,
MeOH )。 IR
KBrm ax ( cm- 1 ) : 3 385, 1 650, 1 072。
1
H-NM R( CD3OD, TM S)
: 8
20( 2H , dd, J= 9
0,
1
7 Hz) , 6
90( 2H, dd, J= 9
0, 1
7 H z) , 6
65( 1H,
s) , 5
56 ( 1H, s) , 3
79( 1H, dd, J= 11
9 Hz) , 3
62
( 1H, dd, J= 11
9, 5
0 Hz) , 3
40 ( 3H, m ) , 3
12
(1H, dd, J= 7
8, 7
6 H z) , 3
79 ( 1H , dd, J= 11
9
Hz) , 3
62( 1H , dd, J= 11
9, 5
0 H z) , 3
40( 3H, m) ,
3
12( 1H, dd, J= 7
8, 7
6 H z, ) , 1
26( 6H , d, J=
6
1 H z, )。13C-NMR( CD3OD, TM S)
: 177
8( C-4) ,
160
7( C-4
) , 153
7 ( C-9) , 151
0 ( C-5) , 148
8 ( C-
7) , 146
0( C-2) , 137
3( C-3) , 131
1 ( 2C, C-2
, 6
) ,

853
中草药
Chinese T raditional and Herbal Drugs
第 35 卷第 8 期 2004年 8月
123
1( C-1
) , 116
3 ( 2C, C-3
, 5
) , 105
7 ( C-10 ) ,
100
6( C-6) , 97
2( C-1
) , 82
4( C-2
) , 72
4( C-4
) ,
71
1( C-5
) , 70
8( C-2
) , 18
1( C-6
) , 106
2( C-1
) ,
77
9( C-3
) , 77
8( C-5
) , 75
4( C-2
) , 71
2( C-4
) ,
62
4( C-6
) , 以上数据与文献[ 9]报道的红景天黄酮
苷一致。
化合物
: 无色针状晶体, mp 173 ~ 175
,
[
] 25D - 14
9 ( c, 1
0, MeOH )。1H-NM R、13C-NM R
光谱数据与文献[ 10]报道的表儿茶素一致。
化合物
: 白色无定型粉末, [
] 25D - 13
9 ( c,
0
4, M eOH ) , 1H-NMR、13C-NM R光谱数据与文
献[ 10]报道的表儿茶素没食子酸一致。
化合物
: 白色粉末, [
] 25D - 16
1 ( c, 0
2,
M eOH ) , IR
KBrmax ( cm- 1) : 3 410, 2 220, 1 653, 1 077。
1H-NMR( CD3OD, T MS)
: 6
46 ( 1H , qdd, J= 6
9,
6
4, 1
6 Hz ) , 4
56 ( 1H, ddd, J = 13
5, 6
4, 1
3
Hz) , 4
44 ( 1H, ddd, J= 13
5, 6
9, 1
3 Hz) , 4
30
( 1H , d, J= 7
9 H z) , 3
84 ( 1H, dd, J= 12
0, 2
0
Hz) , 3
68( 1H, dd, J= 12
0, 5
0 Hz) , 3
30( 3H , m ) ,
3
18( 1H, dd, J= 8
8, 7
9 Hz) , 1
97 ( 3H , dd, J=
2
8, 1
2 Hz)。13C-NMR( CD3OD, TM S)
: 118
2( C-
1) , 112
5 ( C-2) , 145
0( C-3) , 68
4 ( C-4) , 20
2( C-
5) , 104
0( C-1
) , 74
8( C-2
) , 77
9( C-3
) , 71
4( C-
4
) , 78
0( C-5
) , 62
5( C-6
) , 以上数据与文献[ 11]报
道的红景天氰苷 A一致。
化合物
: 淡黄色油状物, [
] 25D - 16
8 ( c, 0
4,
M eOH)。1H-NM R( CD3OD, TMS)
: 5
57( 1H , m ) ,
5
10( 1H , m) , 4
36( 1H, dd, J = 11
5, 6
5 Hz) , 4
32
( 1H , dd, J= 11
5, 6
5 Hz) , 4
30 ( 1H , d, J= 7
8
Hz) , 3
96 ( 1H , t, J= 6
8 H z) , 3
85 ( 1H, dd, J=
11
7, 2
1 H z) , 3
67 ( 1H, dd, J= 11
7, 5
1 H z) ,
3
20- 3
30 ( 3H , m ) , 3
18 ( 1H, dd, J= 7
8, 7
5
Hz) , 2
24 ( 2H , t , J= 6
8 Hz) , 1
68 ( 3H , s) , 1
66
(3H , s) , 1
62( 3H, s)。13C-NM R( CD3OD, T MS)
:
66
1( C-1) , 122
9 ( C-2) , 143
0 ( C-3) , 78
0( C-4) ,
34
8( C-5) , 121
6 ( C-6) , 134
0 ( C-7) , 18
0( C-8) ,
26
0( C-9) , 12
0( C-10) , 102
8( C-1
) , 75
0( C-2
) ,
78
1( 2C, C-3
, 5
) , 71
6( C-4
) , 62
8( C-6
) , 以上数
据与文献[ 12]报道的 1- O-
- D-葡萄糖-3, 7-二甲基-4-
羟基-2, 6-辛二烯一致。
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声
明
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和
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中草药
杂志编辑部
#854# 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drugs 第 35 卷第 8 期 2004年 8月