全 文 ：第 18卷 第 4期 化　学　研　究 Vol.18　No.4
2007年 12月 CHEMICAL　RESEARCH Dec.2007
紫外分光光度法测定高山红景天根及其浸膏的有效成分
吉　欣 1 ,张利娟 1 ,李育亮 1 ,胡绍霞 2
(1.河南大学 化学化工学院 ,河南 开封 475001;　2.洛阳市宜阳县第一高级中学 ,河南 洛阳 471600)
收稿日期:2007-08-08.
作者简介:吉 欣(1948-),男,副教授 ,研究方向:传质与膜分离.
摘　要:使用紫外分光光度法测定了高山红景天根不同部位及其浸膏中主要有效成分的含量.红景天甙 、酪醇
对照品溶液和供试品溶液在 276 nm处具有最大吸收峰 , 红景天甙对照品溶液的线性回归方程为 A=0.005 29 c
+0.001 89, r=0.999 97(n=8),线性范围为 7.97 ～ 71.71 mg/L, 平均回收率为 98.08 %, RSD为 2.60 %(n=
5).测得高山红景天原药材内层部分 、外皮层部分和总体混合物部分主要有效成分(红景天甙和酪醇)的含量
(以红景天甙计)分别为 2.789 %, 2.385 %和 2.617 %, 其浸膏中主要有效成分的质量分数分别为 6.384 %,
13.80%和 6.700 %.并用 HPLC法验证了该法的准确性 , 结果表明 ,该法可用于红景天属植物原药材及其浸膏
中主要有效成分的定量分析.
关键词:紫外分光光度法;高山红景天;有效成分;红景天甙;酪醇;高效液相色谱法
中图分类号:O657.32 文献标识码:A 文章编号:1008-1011(2007)04-0055-04
DeterminationofMainEfectiveComponentsinRootofRhodiola
SachalinensisanditsExtractbyUltravioletSpectroscopy
JIXin1 , ZHANGLi-juan1 , LIYu-liang1 , HUShao-xia2
(1.ColegeofChemistryandChemicalEngineering, HenanUniversity, Kaifeng475001, Henan, China;
2.TheNo.1MiddleSchoolofYiyang, Luoyang471600, Henan, China)
Abstract:AmethodhasbeendevelopedfordeterminationofmainefectivecomponentsinRhodiolasa-
chalinensisbyusingultravioletspectroscopy.Themaximumabsorptionwavelengthofreferencesub-
stancesolutionofsalidroside, p-tyrosolandsamplesolutionwereat276 nm.Thelinearregressione-
quationwasA=0.005 29c+0.001 89 , r=0.999 97(n=8).Thelinearrangewas7.97 ～ 71.71 mg/
L, andtheaveragerecoverywas98.08%(RSD=2.60%, n=5).Theresultsshowedthatthecon-
tentsofthemainefectivecomponents(salidrosideandp-tyrosol)oftheinteriorandexterioroftheraw
material, andtheirmixturewere2.789%, 2.385%and2.617 %respectively.Thecontentsofthe
mainefectivecomponentsoftheirextractswere6.384%, 13.80% and6.700% respectively.Also
thismethodhasprovedtobehighlyaccuratebycomparingitsresultswiththoseofHPLC.Theresults
showedthatthismethodcouldbeusedtoquantitativelyanalysethecontentsofthemainefectivecom-
ponentsinRhodiolarawmaterialsandtheirextracts.
Keywords:ultravioletspectroscopy;rhodiolasachalinensis;mainefectivecomponents;salidroside;p-
tyrosol;highperformanceliquidchromatography
　　高山红景天(RhodiolasachalinensisA.Bor.),又名库页红景天 ,系景天科(Crasulaceae)红景天属(Rhodi-
olaL.)多年生草本植物 ,其根 、茎 、叶 、花 、种子都可入药.民间常用于清肺止咳 、止血治疗跌打损伤 、烧烫伤 、
DOI :10.14002/j.hxya.2007.04.027
56　 化　学　研　究 2007年
阳痿 、糖尿病等病症.现代药理学研究表明 ,其具有抗缺氧 、抗疲劳 、抗衰老 、抗微波辐射 、抗病毒 、抗肿瘤和
增强免疫力等显著功效[ 1] .高山红景天中含有脂肪 、蜡质 、甾醇 、鞣质 、酚性化合物 、黄酮类 、多糖 、蛋白质 、有
机酸 、生物碱等 40多种化学成分 ,其中红景天甙及其甙元酪醇是主要活性成分 ,常以其总含量的高低作为衡
量红景天属植物原药材及其制剂质量的标准 [ 2] .目前其主要有效成分含量的测定方法有重氮盐比色法 、薄
层扫描法 、气相色谱及极谱 、高效液相色谱法 [ 3]和高效毛细管电泳法 [ 4]等.高效液相色谱法具有分析准确快
速 、样品制备简单等特点 ,是目前应用较为普遍的一种方法 ,但所用仪器昂贵 ,成本较高.作者用紫外分光光
度法测定了高山红景天及其浸膏中主要有效成分红景天甙和酪醇的含量 ,为红景天属植物的开发利用提供
了一种稳定可靠 、操作简便的定量测定其主要有效成分的方法.
1　实验部分
1.1　实验材料
高山红景天 ,西藏产 ,购于中国医学科学院药用植物研究所.将高山红景天根去掉残基 ,洗净 ,日晒至
干 ,砸碎后 ,取其内层部分 、外皮层部分和二者的混合物 ,粉碎 ,于 80 ℃烘至恒重 ,置干燥器中保存备用.
1.2　试剂及仪器
试剂:红景天甙对照品(供含量测定用 ,含量 96.7 %,批号 110818-200404)、酪醇对照品(供含量测定
用 ,含量 98.2 %,批号 111676-200401),中国药品生物制品检定所.
仪器:UV-7502 PC紫外可见分光光度计 ,上海欣茂仪器有限公司;TG328B型光学读数分析天平 ,中国
第二机电设备公司;Agilent1100高效液相色谱仪 ,德国 Agilent有限公司.
1.3　检测波长的选择
1.红景天甙标准溶液;2.酪醇标准溶液;3.供试品溶液
图 1　红景天甙 、酪醇标准溶液和
供试品溶液的紫外吸收光谱图
Fig.1　TheUVabsorptionspectraofthestandard
solutionsofsalidroside, p-tyrosolandtestedsample
精密称取烘干至恒重的红景天甙对照品 20.6 mg,置于 100
mL容量瓶中 ,加蒸馏水至刻度 ,摇匀 ,即得红景天甙标准溶液 ,
浓度为 0.20 g/L.取标准溶液 3.0mL于 25 mL容量瓶中 ,蒸馏
水定容至刻度 ,摇匀.取此标准溶液在 200 ～ 400 nm波长下扫
描 ,吸收光谱如图 1所示.图 1中同时给出了红景天甙 、酪醇和
供试品溶液的吸收光谱图.
由图 1可知 ,红景天甙 、酪醇标准溶液和供试品溶液在 222
nm和 276 nm处都具有吸收峰 ,但供试品溶液在 222 nm附近存
在较多的干扰性杂质 ,对吸光度的稳定性有影响 ,因此 ,选择
276nm作为红景天甙和酪醇主要有效成分的检测波长.
1.4　样品溶液的制备 [ 5]与含量测定
称取高山红景天内层部分的干药材 20.0g,用 50%乙醇水
溶液回流提取 3次 ,每次溶剂量分别为 200、160、160 mL,时间
分别为 2、1.5、1 h.合并提取液 ,减压浓缩回收乙醇至干 ,所得残渣用 100 mL蒸馏水溶解 , 4℃放置 12 h,过
滤.滤液加蒸馏水至 250mL,并调节 pH值至 7.0 ,即得药材内层部分的样品溶液.同法处理外皮层部分和
混合部分的干药材 ,得两者的样品溶液.
取样品溶液 10 mL,加入 10 %醋酸铅溶液 2 mL,充分振摇后 ,加入饱和硫酸钠溶液 0.5 mL,振摇后过
滤 ,并洗涤沉淀 ,滤液用蒸馏水定容至 100 mL.量取 5.0mL于 25 mL容量瓶中 ,蒸馏水稀释定容 ,摇匀 ,测定
其吸光度 ,平行测定 5次.由线性回归方程计算出浓度 c后 ,计算主要有效成分的含量.另取样品溶液 10
mL于烧杯中 ,烘干 ,称重 ,计算总固体含量和浸膏中主要有效成分的含量.平行测定 3次 ,取平均值.
2　结果与讨论
2.1　标准曲线的绘制
分别量取红景天甙标准溶液 1, 2, 3 , 4, 5, 6, 7, 8 mL,置于 25 mL容量瓶中 ,用蒸馏水稀释至刻度 ,摇匀 ,
以蒸馏水作空白 ,在 276 nm处测吸光度.以吸光度 A为纵坐标 ,浓度 c为横坐标 ,绘制标准曲线.得红景天
甙的线性回归方程为:A=0.005 29c+0.001 89 , r=0.999 97(n=8),线性范围为 7.97 ～ 71.71 mg/L.
第 4期 吉 欣等:紫外分光光度法测定高山红景天根及其浸膏的有效成分 57　
2.2　样品溶液制备及测定结果
在对高山红景天根进行预处理时 ,过高的干燥温度会使有效成分红景天甙的含量降低 [ 6] ,最佳干燥温
度为 70 ～ 80℃[ 7] ,作者采用 80 ℃.
红景天根采用水提取 ,加热时间稍长 ,其中的水解酶会使红景天甙发生水解而使其含量降低 [ 8] ,作者采
用 50%乙醇提取.并且为了使所制备的样品溶液(pH值为 5.2)稳定 ,用 2 %的 NaOH溶液调 pH值至 7.0.
对样品溶液的预处理 ,文献 [ 9, 10]中大多都是用石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯和正丁醇等有机溶剂对溶液进行
反复萃取而得到净化.笔者曾试用此法 ,发现所得萃取液仍含有大量干扰性杂质 ,致使测定结果不稳定 ,误
差较大.本实验将醇提液浓缩蒸干后 ,先加水除去水不溶性脂肪性杂质 ,再加入醋酸铅以除去样品溶液中的
蛋白质 、多糖 、果胶色素和二元酚等杂质 ,最后加入硫酸钠以除去多余的铅离子 ,避免其与糖及甙形成铅糖 ,
使测定结果失真 ,过滤之后得到的溶液无色透明 ,并排除了其它杂质的干扰.
分别取原药材内层部分 、外层部分 、内层和外层部分的混合物三种样品溶液进行测定 ,结果如表 1所示.
由表 1看出 ,高山红景天原药材的内层和外皮层部分主要有效成分(红景天甙和酪醇)的含量不同 ,质量分
数分别为 2.789%和 2.385 %;外层部分的总固体含量(0.013 83 g/mL)显著低于内层部分的总固体含量
(0.034 95 g/mL),相应地其浸膏中主要有效成分的含量 13.80%就显著高于内层部分浸膏中的主要有效成
分的含量 6.384%.内层和外层部分混合物的原药材及其浸膏中主要有效成分的含量分别为 2.617 %和
6.700 %.
表 1　高山红景天原药材及其不同部位浸膏中主要有效成分(红景天甙和酪醇)的含量
Table1　Contentsofmaineffectivecomponents(salidrosideandp-tyrosol)inRhodiolasachalinensisandtheirextracts
样品 次数 吸收度 浓度(mg/L)
原药材中有
效成分含量(%)
平均值
(%)
相对标
准偏差(%)
总固体含
量(g/mL)
浸膏中有效
成分含量(%)
1 0.237 44.44 2.778
2 0.238 44.63 2.789
Ⅰ 3 0.238 44.63 2.789 2.789 0.29 0.034 95 6.384
4 0.238 44.63 2.789
5 0.239 44.82 2.801
1 0.203 38.02 2.376
2 0.203 38.02 2.376
Ⅱ 3 0.204 38.21 2.388 2.385 0.41 0.013 83 13.80
4 0.204 38.21 2.388
5 0.205 38.39 2.399
1 0.222 41.61 2.601
2 0.223 41.80 2.612
Ⅲ 3 0.224 41.99 2.624 2.617 0.40 0.031 26 6.700
4 0.224 41.99 2.624
5 0.224 41.99 2.624
　　注:Ⅰ ,原药材内层部分 , Ⅱ ,原药材外层部分 , Ⅲ ,原药材内层和外层部分的混合物
2.3　稳定性重现性实验
对于同一测试液 ,每 3 h测一次吸光度 ,连续测定 24 h.结果表明 ,该溶液在 24 h内吸光度基本无变化
(≤±0.001),说明待测试溶液具有很好的稳定性.
吸取同一样品溶液 10mL,重复测定 6次 ,得样品溶液浓度的 RSD为 0.47%,相对标准偏差小 ,实验结
果重复性较好.
取主要有效成分含量为 2.094 mg/mL的样品溶液 5份 ,每份 10mL,分别加入 0.20 mg/mL的红景天甙
标准溶液 10 mL,测定结果如表 2所示.由表 2可知 , 5次测定结果的平均回收率为 98.08 %, RSD为
2.60%.
58　 化　学　研　究 2007年
表 2　加样回收率实验结果
Table2　Resultsofrecoveryrateoftheexperiment
次数 取样体积(mL)
样品中红景
天甙量(mg)
红景天甙
加入量(mg) 吸收度
测得红景天
甙总量(mg)
标准品测
得量(mg)
回收率
(%)
平均值
(%)
相对标
准偏差(%)
1 10 20.94 2.0 0.244 22.884 1.944 97.20
2 10 20.94 2.0 0.244 22.884 1.944 97.20
3 10 20.94 2.0 0.244 22.884 1.944 97.20 98.08 2.60
4 10 20.94 2.0 0.245 22.978 2.038 101.9
5 10 20.94 2.0 0.245 22.978 2.038 101.9
2.4　HPLC验证实验
为了验证紫外分光光度法测定红景天浸提液中主要有效成分的准确可靠性 ,作者对同一样品溶液同时
作了高效液相色谱法测定.相对于高效液相色谱法 ,紫外分光光度法的相对误差小于 2%.
3　结论
运用改进的紫外分光光度法测定高山红景天根不同部位及其浸膏中主要有效成分的含量.在 276 nm
处红景天甙对照品溶液具有最大吸收峰 ,线性回归方程为:A=0.005 29c+0.001 89, r=0.999 97(n=8),线
性范围为 7.97 ～ 71.71mg/L,平均回收率为 98.08 %, RSD为 2.60%(n=5).用本法测得高山红景天原药
材内层部分 、外皮层部分和总体混合物部分主要有效成分(红景天甙和酪醇)的质量分数(以红景天甙计)分
别为 2.789%, 2.385 %和 2.617 %,其浸膏中主要有效成分的质量分数分别为 6.384 %, 13.80 %和
6.700 %.并用 HPLC法验证了该法的准确性 ,在所测定范围内 , 紫外分光光度法测定数据的相对误差
<2%,表明精密度和准确度都较高.该法可用于红景天属植物原药材及其浸膏中主要有效成分的定量分
析.
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