全 文 ：蝼蛄的化学成分分析
魏道智 1 ,郭 澄 1* ,刘皋林 1 ,张 纯 1 ,郑汉臣 2
( 1. 第二军医大学长征医院 药学部 ,上海 200003; 2. 第二军医大学药学院 ,上海 200433)
蝼蛄是昆虫药物 ,药用历史悠久 ,但对于其化学
成分了解甚少 ,本文采用主流药材东方蝼蛄 Gryl-
lotapa orientalis Brmeister为试验材料 ,分析了其干
体内的总氮量、蛋白质、游离氨基酸、组成氨基酸含
量 ,为蝼蛄的质量评价和资源开发提供实验依据。
1 材料和方法
1. 1 试验材料:东方蝼蛄 G.orientalis Brmeister干
体 ,购自上海药材公司 ,由魏道智博士鉴定。
1. 2 总氮量和蛋白质含量的测定:采用微量凯氏定
氮法 [1 ] ,测定东方蝼蛄的总氮量 ,再折算出其蛋白质
含量。
1. 3 脂肪的测定:采用索氏提取减重法测定 [ 2]。
1. 4 氨基酸分析 [3 ]
1. 4. 1 游离氨基酸的测定: ①样品处理: 称取样品
32. 2 mg ,溶于 10 m L, 0. 02 mo l /L HCl中 ,超声波
混匀 2 min,然后 15 000 r /min离心 10 min,取上清
液待分析。②分析条件: 样品分析采用日立 835-50
型氨基酸自动分析仪 ,分析柱为 2619型阳离子交换
脂柱 2. 6× 150 mm,柱温 55℃ ,水浴温度 100℃ ,
脱氨柱 4× 50 mm,日立 2650树脂 ,层析柱 0. 26
cm,缓冲液泵压力 4. 13～ 4. 079 M Pa,流动相为 pH
3. 1～ 4. 3, 0. 2 mo l /L柠檬酸梯度缓冲液 ,流速
0. 225 mL /min,检测用茚三酮显色 ,流速 0. 3
m L /min,茚三酮压力为 1. 47～ 3. 44 M Pa,柱压为
7. 840～ 12. 74 M Pa, N2压力 27. 44 k Pa ,双波长比
色计 ( 570, 44 nm ) ,分析周期 70 min,进样量为 0. 05
m L,氨基酸标准品进样量 0. 25 mol /L。分析方法的
重复性变异系数≤ 2. 5% ,各种氨基酸的回收率平均
为 95%。
1. 4. 2 组成氨基酸的测定: 称取适量样品 ,用 6
mol /L HCl 110℃条件下水解 18 h,离心 ,其余步骤
同游离氨基酸的测定。
2 结果分析
2. 1 总氮量和蛋白质含量: 测定结果表明 ,东方蝼
蛄的总氮含量为 10. 01% ,蛋白质含量为 62. 56%。
2. 2 脂肪含量:东方蝼蛄体内的脂肪为 17. 95%。
2. 3 氨基酸含量:氨基酸含量结果见表 1。蝼蛄体
内的组成氨基酸以鸟氨酸含量最低 ,谷氨酸含量最
高 ;游离氨基酸以胱氨酸含量最低 ,以丙氨酸含量最
高 ;在组成氨基酸中必需氨基酸占 31. 68% ,半必需
氨基酸占 13. 51% ,药用氨基酸占 52. 49% ;在游离
氨基酸中必需氨基酸占 11. 76% ,半必需氨基酸占
12. 64% ,药用氨基酸占 55. 56% ;由此可见中药蝼
蛄具有较高的药用和营养价值。
表 1 东方蝼蛄体内组成和游离氨基酸的含量
Table 1 Content of composed and free amino
acid in body of G . orientalis
氨基酸 组成氨基酸含量
/%
氨基酸 游离氨基酸含量
/%
鸟氨酸 0. 27 胱氨酸 0. 03
胱氨酸 0. 30 甲硫氨酸 ac 0. 03
牛磺酸 0. 44 酪氨酸 c 0. 03
甲硫氨酸 ac 1. 01 天冬氨酸 c 0. 04
丝氨酸 1. 64 鸟氨酸 0. 05
组氨酸 b 1. 67 组氨酸 b 0. 05
苯丙氨酸 ac 1. 74 丝氨酸 0. 06
苏氨酸 b 1. 97 苏氨酸 b 0. 08
异亮氨酸 a 2. 58 苯丙氨酸 ac 0. 08
酪氨酸 c 2. 72 赖氨酸 ac 0. 09
赖氨酸 ac 2. 73 缬氨酸 a 0. 13
精氨酸 bc 3. 11 亮氨酸 ac 0. 14
甘氨酸 3. 12 脯氨酸 0. 17
缬氨酸 a 3. 50 精氨酸 bc 0. 20
天冬氨酸 c 4. 17 牛磺酸 0. 22
亮氨酸 ac 4. 27 甘氨酸 0. 22
丙氨酸 5. 57 谷氨酸 c 0. 36
谷氨酸 c 6. 48 丙氨酸 0. 55
a-人体必需氨基酸 b-人体半必需氨基酸 c-药用氨基酸
a-es sential amino acid for h uman body b-semiessential
amino acid for human body c-m edicinal amino acid
致谢: 氨基酸含量的测定由上海生物化学研究
所陈德明教授代测。
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·690· 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 8期 2003年 8月
收稿日期: 2002-10-28作者简介:魏道智 ( 1960- ) ,副教授 ,理学博士 ,现为第二军医大学药学博士后。
* 通讯作者
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1997.
从水飞蓟宾快速合成 2, 3-脱氢水飞蓟宾
王 沛 1 ,孙铁民 2
( 1. 长春中医学院 制药工艺教研室 ,吉林 长春 130021; 2. 沈阳药科大学 药物化学教研室 ,辽宁 沈阳 110016)
2, 3-脱氢水飞蓟宾是水飞蓟素中的有效成分之
一 ,具有抗氧化活性 ,但报道较少 ,日本学者报道了
从水飞蓟素分离出该物质 [1 ] ,在 1974年 Halbach报
道其半合成方法 [2 ] ,为水飞蓟宾在碱性条件下 ,用过
氧化氢氧化而得 2, 3-脱氢水飞蓟宾 ,但收率只有
12. 6%。孙铁民报道了以吡啶作溶剂 [3 ] ,用空气氧化
制备 2, 3-脱氢水飞蓟宾的方法 ,本实验以水飞蓟宾
为原料 ,选用以三乙胺替代吡啶合成 2, 3-脱氢水飞
蓟滨 ,合成反应见图 1。该法具有收率高达 40% ,溶
剂回收方便、副产物少的特点。
图 1 2, 3-脱氧水飞蓟宾的合成
Fig. 1 Synthesis of 2, 3-dehydrosilybin
1 实验部分
取三乙胺 200 mL,水飞蓟宾 8 g ,加热回流 20
h,回收三乙胺 ,套用。 残物用乙酸乙酯 3× 100 mL
提取 ,将提取液放置一夜 ,用硅胶 30 g过滤 ,回收乙
酸乙酯 ,加氯仿析出结晶粉末 ,用甲醇重结晶 ,得微
黄色结晶 3. 2 g。 mp 272℃～ 276℃ , IRνKBrmax cm- 1:
3 400( O H) , 1 658( C= O) , 1 600, 1 500 ( C= C)。
UV λMeOHmax nm- 1: 253, 264(肩峰 ) , 304 (肩峰 ) 368。
( AlCl3 ) 264, 304, 353, 428。 M S: 480, 462, 302, 300,
180, 162, 153, 137;
1
HNMR( 300 MHz, DM SO-d6 )δ:
12. 43( 1H, s, 5-OH ) , 10. 84 ( 1H, s, 7-OH) , 9. 60
( 1H, s, 3-OH) , 9. 20( 1H, s, 4″-OH) , 7. 77( 1H, d,
J= 2 Hz, H-2′) , 7. 75( 1H, d, J= 9. 22 Hz, H-6′) ,
7. 13( 1H, d, J= 9 Hz, H-5′) , 7. 05-6. 80( 3H, m, H-
2″, 5″, 6″) , 6. 46( 1H, d, J= 2 Hz, H-8) , 6. 20( 1H, d,
J= 2 Hz, H-6) , 4. 95( 1H, d, J= 8 Hz, H-C) , 4. 29
( 1H, m , H-b) , 3. 79( 3H, s, H-OCH3 ) , 3. 34( 2H, m ,
H-α) ; 13CNMR ( 75 M Hz, DM SO-d6 )δ: 55. 57 ( C-
O CH3 ) , 59. 96( C-r) , 75. 78( C-α) , 78. 34( C-β ) , 93. 5
( C-8) , 98. 1 ( C-6 ) , 102. 9 ( C-10 ) , 111. 6 ( C-2″) ,
115. 2( C-2′) , 116. 1( C-5′) , 116. 7( C-5″) , 120. 5( C-
2) , 121. 2( C-6′) , 123. 6( C-6″) , 127. 0( C-1″) , 136. 2
( C-1′) , 143. 3 ( C-3′) , 144. 9 ( C-4′) , 145. 6 ( C-3) ,
146. 9 ( C-4″) , 147. 6 ( 5-3″) , 156. 1( C-9) , 160. 6( C-
5) , 163. 4( C-7) , 175. 9( C-4)。合成品的 1HNM R,
13
CNM R与天然产物 2, 3-脱氢水飞蓟宾的 1HNM R,
13
CNM R相同。
2 讨论
水飞蓟宾在三乙胺存在下经空气氧化可以分子
脱氢 ,由于其碱性大于吡啶 ,故收率略高于吡啶。 结
合文献报道 ,进一步证实二氢黄酮醇在有机碱存在
下经空气氧化可以分子脱氢生成黄酮醇衍生物。
References:
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·691·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 8期 2003年 8月
收稿日期: 2002-08-12