全 文 ：HPLC法测定降香挥发油中橙花叔醇的含量
韩　静1, 2, 唐　星2, 巴德纯1X
( 1. 东北大学,辽宁 沈阳　110004; 2. 沈阳药科大学, 辽宁 沈阳　110016)
　　降香挥发油是从豆科常绿小乔木降香檀 Dal -
ber gia odorif er a T. Chen 的树干和根部干燥心材[ 1]
提取得到的, 它可提高血小板 cAMP 含量,具有抑
制血栓形成的作用[ 2] , 利用降香挥发油开发研究新
剂型有很高的社会和经济价值。国内外关于降香挥
发油化学成分的研究报道较少, 国外曾有自同属植
物 D. pa rvif lora Roxb.木材中得到橙花叔醇、微量
糖醛及一种可能是金合欢醇的成分。但各种研究报
道都是用气相色谱法或 GC-MS[ 3]法, 尚未见有用
HPLC法测定降香挥发油中橙花叔醇含量的报道。
本实验以降香挥发油的主要成分橙花叔醇为指标,
建立了 HPLC 测定方法, 测定了用水蒸气( steam
distillat ion, SD)及 CO2 超临界萃取( supercr it ical
CO2 fluid extract ion, SFE-CO2)两种方法提取的挥
发油中橙花叔醇的含量,为降香挥发油的综合利用
提供了客观的定量评价。
1　仪器与试药
JASCO 高效液相色谱仪 (包括 PV—2080
pump, UV—2075 Delecter) , 大连华洋科学仪器有
限公司。橙花叔醇对照品由 Sigma 公司提供,是顺
反异构混合物, 水蒸气及 CO2 超临界萃取两种方法
提取的挥发油自制,甲醇为色谱醇(山东禹王公司) ,
水为重蒸水(自制)。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件:色谱柱为北京迪马公司产 Diamonsil
C18( 200 mm×4. 6 mm, 5 Lm)色谱柱;流动相为甲醇-
水( 78∶22) ;体积流量为1. 2 mL/ min;检测波长 213
nm;进样量为 10 LL;柱温室温。色谱图见图1。
2. 2　对照品溶液的制备:精密称取橙花叔醇对照品
适量, 甲醇溶解并定容, 得质量浓度为 10. 58 mg/
mL 溶液,摇匀,作为储备液。
2. 3　供试品溶液的制备:精密称取 CO2提和水提
降香挥发油, 分别置量瓶中, 甲醇溶解并定容,得质
量浓度为 456和 522 Lg/ mL 的溶液,再经 0. 45 Lm
滤膜滤过得供试品溶液。
# 顺式橙花叔醇　* 反式橙花叔醇
# Cis-nerol idol　* T rans-nerolidol
图 1　橙花叔醇对照品(A)、SFE -CO2提降香挥发
油(B)、水提降香挥发油( C)HPLC图
Fig. 1　HPLC chromatogram of nerolidol (A) , volatile
oil of Lignum Dalbergia Odor if er ae extr acted
by SFE-CO2( B) , and vola tile oil of Lignum
Da lbergia Odorif era e extr acted by SD (C)
2. 4　线性范围:取对照品储备液按不同比例稀释,
得质 量 浓度 为 42. 32、84. 64、169. 28、338. 56、
677. 12 Lg/ mL 的溶液, 注入液相色谱仪,记录橙花
叔醇的峰面积, 以顺反式峰面积总和(A)对质量浓
度(C)作图, 其回归方程为:A= 9 032. 9 C+ 92 840,
r= 0. 999 9。橙花叔醇在 42. 32～677. 12 Lg/ mL 线
性关系良好。
2. 5　精密度试验:精密吸取 42. 32 Lg/ mL 对照品
溶液, 重复进样 5次, 每次进样 10 LL, 记录橙花叔
醇色谱峰面积, RSD= 0. 7% (n= 5)
2. 6　重现性试验:分别取两种降香油各 5份, 按供
试品制备项下方法操作, 制备样品溶液,按外标一点
法测定橙花叔醇的含量, CO2提和水提降香挥发油
体积分数分别为 25. 09%和 20. 9%, RSD值分别为
0. 83%和 1. 2% (n= 5)。
2. 7　稳定性试验:取供试品溶液分别于 0、2、4、6、8
h 注入液相色谱仪, 依法测定橙花叔醇的峰面积。
RSD值为 1. 3%和 1. 5% (n= 5)。结果表明样品溶
液在 8 h内比较稳定。
2. 8　加样回收率试验:精密称取已知含量的供试品
溶液 9份,按高中低 3种浓度加入适量对照品溶液,
·824· 中草药　Chinese T radit ional and Herbal Drugs　第 35 卷第 7 期 2004 年 7 月
X 收稿日期: 2003-10-13作者简介:韩　静( 1967—) ,女,蒙族,辽宁人,在职博士研究生,副教授,现研究方向为纳米技术及干燥技术应用。
T el: ( 024) 23843711-3511　E-mail : hj -8080@163. com
加入量分别为 292. 01、194. 67、97. 34 Lg, 混匀, 在
相同色谱条件下测定橙花叔醇的体积分数, 计算回
收率。CO2提油平均回收率为 99. 34% , RSD值为
1. 54% (n= 9) ;水提油平均回收率为 99. 69% , RSD
值为 1. 42% (n= 9)。
2. 9　含量测定:分别精密量取供试品溶液及对照品
溶液各 10 LL,按上述色谱法进样,按外标一点法以
峰面积计算含量。结果见表 1。
表 1　降香挥发油中橙花叔醇的含量 ( n= 3)
Table 1　Nerolidol in vola tile oil of Lignum
Da lbergia Odor if er ae ( n= 3)
降香挥发油 橙花叔醇/ % RSD/ %
CO2 提油 25. 15 0. 70
水提油 21. 19 0. 81
3　讨论
3. 1　检测波长的确定:取橙花叔醇适量, 用甲醇溶
解并定容, 然后作紫外扫描, 得最大吸收波长为
212. 8 nm,取 213 nm为检测波长。
3. 2　流动相的选择:本试验采用C18色谱柱,对甲醇-
水、甲醇-乙腈-水、乙腈-水等多种流动相按不同比例
进行考察, 结果发现甲醇-水( 78∶22)溶液为流动相
时,峰形对称,分离度高,被测组份保留时间适中。
3. 4　购自 Sigma 公司的橙花叔醇对照品液是顺式
和反式的混合溶液,高效液相色谱图出峰时间分别
是 15. 683、17. 367 min。降香挥发油中只有 17. 367
min的峰。文献报道有红外光谱和核磁共振光谱可
确定挥发油中含反式橙花叔醇,推测 17. 367 min 的
峰为反式橙花叔醇, 15. 683 min 的峰为顺式橙花叔
醇。此外,顺式橙花叔醇由于存在空间位阻, 在色谱
柱上保留时间短于反式橙花叔醇, 与上述推测相符。
3. 5　本实验表明降香挥发油中橙花叔醇含量较高,
在 SFE-CO2提取的挥发油中含 25. 15% ,在水提挥
发油中含 21. 19%。
Refer ences:
[1]　Zheng H Z, Dong Z, She J . Modern Study of Tr adi tional Chi-
nese Medicine (中药现代化研究与应用) [ M] . Beijing:
Xueyu an Pres s, 1998 .
[2]　Zhu L, Guo J X, Leng H W, et al. Th e influcence of volat ile
oil of Jiang-xiang to the thrombus formation and the activity of
thr ombayte cAMP and plasma fibrin olysin [ J] . Chin Tr adi t
P at Med (中成药) , 1992, 14( 4) : 30.
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in jection Salvia Mil tiorrhiza Composita by GC [ J] . Strai t
P harm J (海峡药学) , 2002, 14( 4) : 47-48.
RP-HPLC测定虎杖中白藜芦醇苷的含量
衣洪福,陈万生, 张汉明X
(第二军医大学药学院,上海　200433)
　　虎杖系蓼科蓼属植物虎杖 P olygonum cuspida -
tum Sieb. et Zucc. 的根茎和根,采挖时间在春秋两
季。虎杖异名(《尔雅》) ,入药始见于《雷公炮制论》,
传统上用于瘀诸症,可活血散瘀,祛风通络, 清热利
湿,解毒。根据《中华本草》记载:虎杖“主治妇女闭
经,产后恶露不下, 症瘕积聚,跌扑损伤, 风湿痹痛,
湿热黄疸,淋浊带下,疮疡肿毒, 毒蛇咬伤, 火烫伤”。
虎杖根和根茎含游离蒽醌及蒽醌苷,还含有 类化
合物;白藜芦醇( resverat rol )即 3, 4′, 5-三羟基
( 3, 4′, 5-t rihydr oxysyilbene) ,虎杖苷( polydat in)即
白藜芦醇 3-O-B-D-葡萄糖苷( resverat rol -3-O-B-D -
glucoside) [ 1]等。白藜芦醇苷具有抗菌,镇咳,防止动
脉内皮损伤性血栓形成,改善休克微循环, 提高大鼠
存活率,减轻缺血再灌注、自由基、内毒素等造成的
组织器官损伤, 降血脂抗脂质过氧化及抗肿瘤等方
面的活性, 对治疗血栓性疾病及改善休克微循环等
疾病有很好的前景[ 2]。
虎杖药材生长分布广泛。据调查,目前市场上的
药材主要来源于江西、江苏、安徽、广东、浙江、贵州
等地区;当地药农均采用传统初加工方法是将采挖
新鲜药材切断后用沙磨水洗除掉的泥沙和须根, 再
经晾晒后出售。笔者对不同产地和加工方法的药材
进行白藜芦醇苷的含量测定, 以期为保证虎仗药材
的质量提供科学依据。
1　材料
高效液相色谱仪 (美国 Water s 公司) : Wa-
ters515 泵; 2487 检测器; Rherdyne7725 进样阀;
DL—3600超声震荡器; Sartarius 十万分之一天平。
·825·中草药　Chinese T radit ional and Herbal Drugs　第 35 卷第 7 期 2004 年 7 月
X 收稿日期: 2003-11-08
* 通讯作者　Tel: ( 021) 65513056　E-mail: hmzhang@smmu. ed u. cn