全 文 ：o r cell deb ris induced by comp lem en tary cascade
react ion [1 ] o r by m edia to rs th rough apop to sis[16 ].
T he strik ing enhancem en t fo r clearing Congo2red
in the b loodstream of m ice by EERD sym bo lizes its
op son ic effect on the phagoyto sis, w h ich is defi2
n itely help fu l in fa tcilita t ing rehab ilita t ion of in2
ju red t issues.
　 　 T herefo re, the an t i2inf lamm ato ry effect of
EERD w as realized, a t least in part, by inh ib it ing
lip id perox idat ion, release of m edia to rs and en2
hancing the act ivity of SOD and CA T as w ell as re2
ducing the act ivity of iNO S and po ten t ia t ing the
phagocyto sis of R ES.
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乌苏里藜芦碱对血小板聚集及凝血与出血时间的影响
李欣燕1, 韩国柱1Ξ , 张书文1, 吕　莉1, 杨静娴1, 赵伟杰2
(11 大连医科大学 药理教研室, 辽宁 大连　116027; 21 大连理工大学 制药工程系, 辽宁 大连　116024)
摘　要: 目的　研究乌苏里藜芦碱 (V nA ) 对大鼠的抗血小板作用及其对小鼠凝血时间和出血时间的影响。方法　
比浊法测定正常大鼠及血瘀模型大鼠血小板聚集百分率, 观察 V nA 抗血小板作用。毛细玻璃管法测定小鼠全血凝
血时间 (CT ) ; 比较等效抗凝剂量的 V nA 及肝素对小鼠尾出血时间 (BT ) 的影响。结果　V nA (45、30、15 Λgökg,
iv) 对AD P 诱发的大鼠血小板聚集有明显抑制作用, 且呈剂量依赖性。V nA (12. 5、25、50、100 Λgökg, ip ) 可明显
延长小鼠 CT 和BT , 等效抗凝剂量的V nA (4913 Λgökg, ip ) 所致BT 延长略低于肝素 (1125 m gökg, ip ) , 但无统
计学意义。结论　V nA 具有显著抗血小板作用, 能显著延长 CT , 对BT 的延长作用不超过肝素。
关键词: 乌苏里藜芦碱; 抗血小板作用; 凝血时间; 出血时间
中图分类号: R 286132　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 11 1269 04
·9621·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
Ξ 收稿日期: 2004202211
基金项目: 辽宁省教委科研项目 (20272271)
作者简介: 韩国柱 (1943—) , 男, 江苏省泰州市人, 现为大连医科大学教授, 从事抗血栓药理学与药动学研究。
T el: (0411) 84720229　E2m ail: hgzhx2236@ sina. com. cn3 通讯作者
Effects of V era trum n ig rum var. ussu r iense a lka lo ids on pla telet aggrega tion
and tim e of coagula tion and bleed ing
L I X in2yan1, HAN Guo2zhu1, ZHAN G Shu2w en1, LU　 ¨L i1, YAN G J ing2x ian1, ZHAO W ei2jie2
(11D epartm ent of Pharm aco logy, D alian M edical U niversity, D alian 116027, Ch ina; 2. D epartm ent of Pharm aceu tical
Engineering, D alian U niversity of T echno logy, D alian 116024, Ch ina)
Abstract: Object 　 To study the effects of V era trum n ig rum L. var. ussu riense N akai a lkalo ids
(V nA ) on p la telet aggregat ion in ra ts and coagu la t ion t im e, b leeding t im e in m ice. M ethods　T he an2
t ip la telet effect of V nA w as exam ined by determ in ing p la telet aggregat ion ra te in no rm al ra ts and b lood
stasis model ra ts by tu rb id im etric m ethod developed by Bo rn. W ho le b lood coagu la t ion t im e (CT ) in m ice
w as m easu red by cap illa ry glass tube m ethod, b leeding t im e (BT ) by hemo rrhagic t ran sect ion of mou se ta il
model. Results　V nA (45, 30, and 15 Λgökg, iv) sign if ican t ly inh ib ited AD P2induced p la telet aggregat ion
in ra ts in a do se2dependen t m anner. V nA (12. 5, 25, 50, and 100 Λgökg, ip ) m arkedly increased CT and
BT in m ice. V nA [ 49. 3 Λgökg, w h ich w as an t icoagu lan t ly equ ieffect ive to heparin (1. 25 m gökg) , ip ] p ro2
longed BT. T here w as no sta t ist ica lly sign if ican t d ifference in BT betw een V nA and heparin, a lthough BT
increase induced by V nA w as sho rter than that induced by heparin. Conclusion　V nA has sign if ican t an2
t ip la telet effect in ra ts and can p ro long CT and BT in m ice. A t equ ieffect ive do se V nA 2induced BT increase
does no t exceed that heparin induced.
Key words: V era trum n ig rum L. var. ussu riense N akai a lkalo ids (V nA ) ; an t ip la telet effect; coagu la2
t ion t im e (CT ) ; b leeding t im e (BT )
　　乌苏里藜芦碱 (V era trum n ig rum L. var. us2
su riense N akai a lkalo ids, V nA ) 是自辽宁省千山采
集的乌苏里藜芦 V . n ig rum L. var. ussu riense
N akai 根中提取得到的总生物碱, 经光谱、色谱、质
谱及核磁共振谱等现代分析方法测得V nA 中含有
11 种酯型异甾体类生物碱 [1～ 3 ], 分别为: 藜芦嗪
( verazine )、芥尔文 ( jervine )、新计巴丁 ( neo2
germ budine )、刺 孢 曲 霉 碱 ( ech inu line )、veru s2
su rien、verabenzoam ine、germ idine、germ erine、152
O 2(m ethylbu tyroyl) germ ine、veru ssu rin ine 和 zy2
gaden ine。实验研究发现V nA 具有强大的降低血液
黏度和抗血栓作用[4, 5 ] , 对大鼠脑缺血2再灌注损伤
具有保护作用[6 ] , 提示 V nA 具有良好的开发应用
前景。为探讨V nA 的抗栓降黏作用机制, 本实验对
V nA 抗血小板作用及其对小鼠全血凝血时间 (CT )
和出血时间 (BT ) 的影响进行了研究。
1　材料与方法
111　药品与试剂: V nA (含总碱> 90% ) , 由大连理
工大学化学制药工程系植化研究室提供,V nA 预先
加稀盐酸适量使溶解, 并以生理盐水稀释至 100ΛgömL , 灌封灭菌避光保存, 临用前以生理盐水稀
释。注射用赖氨匹林 (LA S) : 安徽省蚌埠安宝制药
厂, 批号 950327; 二磷酸腺苷 (AD P ) , Sigm a 公司
产品; 肝素钠, 上海生化制药厂, 批号 870516。
112　仪器: T YXN —91 智能血液凝聚仪, 上海医科
大学生物物理研究所产品; LD 5—2A 型离心机, 北
京医用离心机厂制造。
113　动物: SD 大鼠, 雌雄各半, 体重 200～ 250 g;
昆明种小鼠, 雌雄各半, 体重 18～ 22 g, 均由大连医
科大学动物中心提供。
114　V nA 对正常大鼠血小板聚集的影响: 大鼠 50
只, 随机分为 5 组。20% 乌拉坦 ip (5 mL ökg) 麻
醉, V nA 高、中、低剂量组分别尾 iv V nA 45、30、15Λgökg, 阳性对照组 iv LA S 18 m gökg, 阴性对照组
iv 等量生理盐水 (N S) , 给药后 15 m in, 颈总动脉取
血, 318% 枸橼酸钠抗凝 (血与抗凝剂体积比为 9∶
1) , 150 × g 离心 10 m in, 制备富血小板血浆
(PR P) , 剩余血浆 1 100×g 离心 15 m in, 得贫血小
板血浆 (PPP)。用 PPP 调 PR P 中血小板数至 4×
1012～ 5×1012öL , 取 PR P 200 ΛL , 加血小板聚集诱
导剂AD P 适量, 使终浓度为 2 Λmo löL , 按浊度法[7 ]
测定血小板 5 m in 最大聚集率, 血小板聚集测定均
在 2 h 内完成, 计算血小板聚集抑制百分率。
血小板聚集抑制率= (阴性对照组血小板聚集率- 给药
组血小板聚集率) ö阴性对照组血小板聚集率×100%
115　V nA 对血瘀大鼠血小板聚集的影响: 大鼠 40
只, 随机分为 4 组, 正常对照组尾 iv 等量 N S, 其余
3 组按毛氏方法造成急性血瘀模型[8 ] , 即 sc 肾上腺
素 800 Λgökg, 共 2 次, 两次间隔 4 h, 其间将大鼠浸
入冰水中 5 m in。造模后 10 m in V nA 高、低剂量组
分别 iv V nA 30、15 Λgökg。模型组 iv 等量N S。药
·0721· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
后 15 m in, 颈总动脉取血, 按 114 项方法测定计算。
116　V nA 对小鼠 CT 的影响: 小鼠 60 只, 随机分
为 6 组, V nA 各剂量组分别 ip V nA 100、50、25、
1215 Λgökg, 阳性对照组 ip 肝素 1125 m gökg, 阴性
对照组 ip 等量N S。分别于药后 30、60 m in 将内径
1 mm 玻璃毛细管分别插入小鼠左右眦球后静脉丛
取血, 至毛细管血柱达 5 mm 为止, 每隔 30 s 折断
毛细管一小段, 肉眼仔细观察有无凝血丝出现, 计算
从采血到凝血丝出现的时间, 即为 CT [9 ] , 计算 CT
延长率。
CT 延长率= (CT 给药- CT 对照) öCT 对照×100%
117　等效抗凝剂量 V nA 及肝素对正常小鼠 BT
的影响: 仿 Kaiser 方法求得 V nA 与肝素的等效抗
凝剂量[10 ] , 即根据V nA ip 后 30 m in 全血 CT 实验
结果, 将 CT 延长率与 V nA 的对数剂量作线性回
归, 得直线回归方程, 然后将肝素 (1125 m gökg) 药
后 30 m in CT 延长率代入方程, 求得 V nA 的等效
抗凝剂量[10 ]。取小鼠 30 只, 随机分为 3 组, 分别 ip
肝素 1125 m gökg、等效抗凝剂量的 V nA 和等量
N S。药后 30 m in, 将小鼠置于固定器中, 使其尾部垂
直, 于尾尖处剪断鼠尾, 每隔 30 s 用滤纸轻吸尾尖
血液, 直至吸不出血液, 记录断尾至出血停止时间,
即为BT [11 ]。
118　统计学处理: 数据以 x ±s 表示, 组间采用 t
检验。
2　结果
211　V nA 对正常大鼠血小板聚集的影响: 见表 1。
与N S 对照组比较, 高、中、低剂量V nA 均可显著降
低AD P 诱导的血小板聚集, 且呈剂量依赖性。阳性
对照药LA S 也显示较强的血小板聚集抑制作用。
表 1　VnA 对 AD P 诱发的正常大鼠
血小板聚集的影响 (n= 10)
Table 1　Effect of VnA on AD P- induced platelet
aggregation in normal rats (n= 10)
组　别 剂量ö(Λg·kg- 1) 血小板聚集率ö% 血小板聚集抑制率ö%
N S - 　　52178± 8152 -
V nA 15 30158±101123 42106
30 22181± 71223 3 56178
45 20183± 61473 3 60153
LA S 18 000 28146± 81543 46108
　　与N S 组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs N S group
212　V nA 对血瘀模型大鼠血小板聚集的影响: 见
表 2。与N S 对照组比较, 血瘀模型组的血小板聚集
率显著升高, 当血瘀模型大鼠 iv V nA (30、15 Λgö
kg) 后血小板聚集率显著下降 (P < 0101)。
表 2　VnA 对 AD P 诱发的血瘀大鼠
血小板聚集的影响 (n= 10)
Table 2　Effect of VnA on AD P- induced platelet
aggregation in blood stasis rats (n= 10)
组　别 剂量ö(Λg·kg- 1) 血小板聚集率ö% 血小板聚集抑制率ö%
正常对照 - 　　45123± 3151 -
模型 - 69172±131443 -
V nA 15 40125± 6182# # 42126
30 28111± 5127# # 59168
　　与正常对照组比较: 3 P < 0105; 　与模型组比较: # # P < 0101
　　3 P < 0105 vs no rm al con tro l group; 　 # # P < 0101 vs model
group
213　V nA 对小鼠 CT 的影响: 由表 3 可知, 与 N S
对照组相比,V nA 各剂量均可明显延长小鼠CT , 并
具剂量依赖性。肝素亦可明显延长 CT。V nA 给药
后 30 m in CT 延长率 (y ) 与V nA 对数剂量 (x ) 呈
良好的线性关系, 其回归方程为: y = - 70. 118+
106. 07 x (r= 0. 997)。
表 3　VnA 对小鼠 CT 的影响 (n= 10)
Table 3　Effect of VnA on CT in m ice (n= 10)
组　别
剂　量ö(Λg·kg- 1) 药后 30 m inCTöm in CT 延长率ö% 药后 60 m inCTöm in CT 延长率ö%
N S - 　 1159±0131 - 1163±0141 -
V nA 1215 2133±01613 4616 1193±11093 1816
25　 2179±01963 3 7516 2170±01943 3 6918
50　 3141±11023 3 11411 2192±01673 3 7915
100　 3182±11023 3 14012 3129±01683 3 10615
肝素 1 250　 3133±01633 3 10914 2150±01323 3 5711
　　与N S 组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs N S group
214　等效抗凝剂量 V nA 及肝素对小鼠 BT 的影
响: 见表 4。由 213 结果得出与肝素 1125 m gökg 等
效的V nA 抗凝剂量为 4913 Λgökg。V nA (4913 Λgö
kg) 及肝素 (1125 m gökg) 使小鼠 BT 分别延长
5211% 和 7115% , 与 N S 对照组比较差异均显著
(P < 0105)。说明上述两种药物均可延长小鼠BT。
等效抗凝剂量 V nA 所致 BT 延长略短于肝素, 但
无统计学意义。
表 4　等效抗凝剂量 VnA 及肝素对
小鼠 BT 的影响 (n= 10)
Table 4　Effect of VnA and hepar in at equieffective
an ticoagulan t doses on BT in m ice (n= 10)
组　别 剂量ö(Λg·kg- 1) BT öm in BT 延长率ö%
N S 　　- 　　2113±0169 -
V nA 　 4913 3115±01943 3 5211
肝素 1 250 3155±11213 3 7115
　　与N S 组比较: 3 3 P < 0101
　　3 3 P < 0101 vs N S group
3　讨论
·1721·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
　　本研究利用正常和血瘀模型大鼠研究了V nA
对血小板聚集性的影响, 结果表明 V nA 可明显抑
制血小板聚集, 其抑制血小板聚集的生化机制有待
进一步研究。实验中还发现,V nA 能剂量依赖性延
长 CT , 说明 V nA 对凝血系统可能有作用, 通常认
为 CT 延长的特异性不高, 究竟 V nA 影响凝血过
程的外源性还是内源性通路, 亦或共同通路, 则有待
通过测定凝血酶原时间 (PT )、活化的部分凝血活
酶时间 (A PT T ) 及凝血酶时间 (T T ) 进一步加以
阐明。
本研究首次发现V nA 有抗血小板、抗凝作用,
这为 V nA 的抗栓作用给予了一定的解释。等效抗
凝剂量的 V nA 所致出血不良反应不高于肝素, 进
一步说明 V nA 作为强效抗栓药进行研发是可行
的。本研究结果表明, 乌苏里藜芦中主要成分V nA
抗栓作用与其抗血小板作用有关。
致谢: 上海第一医科大学生物物理学教研室梁
子钧教授对本研究给予的热情帮助与支持。
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桂竹糖芥黄酮总苷的抗心律失常作用及其急性毒性研究
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(哈尔滨商业大学药学院, 黑龙江 哈尔滨　150076)
摘　要: 目的　研究桂竹糖芥黄酮总苷的抗心律失常作用及其急性毒性。方法　通过对家兔心电图的测定研究桂
竹糖芥黄酮总苷的抗心律失常作用, 应用改良寇氏法研究其急性毒性。结果　桂竹糖芥黄酮总苷能纠正阿霉素引
起的快速心律失常, 纠正异搏定引起的缓慢心律失常。急性毒性实验显示其 LD 50为 31117 m gökg, 95% 可信限为
28919～ 33915 m gökg。结论　桂竹糖芥黄酮总苷可纠正多种原因引起的心律失常, 且毒性小。
关键词: 桂竹糖芥黄酮总苷; 心律失常; 心电图; 半数致死量
中图分类号: R 28612　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 11 1272 03
Effect of f lavono id from E rys im um cheiran thoides on arrhythm ia and acute tox ic ity
ZHAN G X iao2dan, L IU L in, J IA Shao2hua
(Schoo l of Pharmong, H arb in U niversity of Comm erce, H arb in 150076, Ch ina)
Abstract: Object　To study the an t i2arrhythm ia effect and acu te tox icity of f lavono id from E ry sim um
cheiran thoid es L. M ethods　To study the an t i2arrhythm ia of the flavono id by determ inat ion of the ECG of
rabb its. To study the acu te tox icity effect of the flavono id by Karber’s m ethod. Results　T he resu lts
show ed that the flavono id cou ld rem edy to tachycard ia cau sed by A driam ycin and it cou ld rem edy to b rady2
card ia cau sed by V erapam il. A cu te tox icity show ed that LD 50 of flavono id is 311. 7 m gökg, 95% C I is
·2721· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
Ξ 收稿日期: 2004203207
作者简介: 张晓丹 (1958—) , 女, 教授, 哈尔滨商业大学药学院。