全 文 :铁皮石斛集约化高产栽培技术研究
付开聪 1 ,冯德强 1 ,张绍云 1 ,王进红 1 ,张雪梅 1 ,史永锋 1 ,唐学明 1 ,叶 华 2 ,张 静 2 ,字应伟2⒇
( 1. 云南省思茅地区民族传统医药研究所 ,云南 思茅 665000; 2. 云南思茅高等师范专科学校 ,云南 思茅 665000)
摘 要: 目的 寻求铁皮石斛人工集约化高产栽培技术的最佳途径。 方法 利用铁皮石斛的试管苗对不同苗的大
小、栽培基质、不同季节和不同的外源生长素作用下 ,比较其成活状况和产量。 结果 在思茅地区铁皮石斛最佳栽
培季节为每年 3月中旬至 6月中旬和 9月上旬至 11月下旬 ,其排列顺序依次为 3月中旬至 6月中旬> 9月上旬至
11月下旬> 6月下旬至 10月下旬> 12月上旬至次年 3月上旬 ;施用外源生长素对促进产量效果明显 ;共生菌对提
高移栽苗成活率有一定影响 ,但对提高产量无明显作用。 结论 通过实验研究应用以上方法进行集约化栽培铁皮
石斛可年产鲜品达 6× 103~ 1. 2× 104 kg /h m2 ,下地成活率达 92. 5% ,较好地解决了铁皮石斛大田移栽成活率低及
产量不理想等问题。
关键词: 铁皮石斛 ;集约化栽培 ;外源生长素
中图分类号: R282. 21 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2003) 02 0177 03
Studies on high production technology in scale cultivation of Dendrobium off icinale
FU Kai-cong1 , FEN G De-qiang1 , ZHANG Shao-yun1 , WANG Jin-hong1 , ZHANG Xue-mei1 ,
SHI Yong-feng1 , T ANG Xue-ming1 , Y E Hua2 , ZHANG Jing2 , ZI Ying-w ei2
( 1. Yunnan Simao Institute of National and T raditional Chinese Medicine, Simao 665000, China;
2. Yunnan Simao High No rmal T raining School, Simao 665000, China )
Key words: Dendrobium of f icinale Kimura et Migo; scale cul tivation; ex ohormones
铁皮石斛 Dendrobium of f icinale Kimura et
Inig o别名:黑节草。是我国常用中药材植物 ,具有生
津、止渴、镇痛、消除水肿之功效 [1 ] ,主治热病阴虚、
目暗、胃弱、声间嘶哑等疾病 ,对声带疲劳、恢复其美
音有特殊性疗效…… [2 ]。 主要分布于云南、广西、贵
州等省区。其中 ,以云南为主产区 ,加工品“西枫斗”
曾是云南出口创汇的农特产品 ,价格高达 1 300美
元 /公斤 ,被人们誉为“价值千金的草” , 20世纪 60
年代末资源枯竭 ,出口终止。为保护物种的繁衍 ,有
效利用和开发这一珍稀名贵药材 , 20世纪 70年代
国家相关部门投入大量科研资金主要集中在快速繁
殖 ,扩大繁殖系数等方面的研究 ,有了很多成功的报
道 [3 ]。据调查 ,目前普遍存在的问题是试管苗移栽成
活率低 ,即从试管苗到大田移栽的中间环节成为制
约铁皮石斛生产发展的一大障碍 [4 ]。
本课题组自 1997年开始 ,在对黑节草集约化栽
培种植中 ,从铁皮石斛的生境到人工改造后的温、
光、水、气、外源生长素、共生菌、栽培基质以及栽培
季节等方面的问题进行研究 ,特别是各种因素对铁
皮石斛成活率与产量的影响作了深入细致的研究 ,
笔者将自己 3年多来对铁皮石斛在大田栽培所研究
取得的经验作一阐述 ,以供同行们参考。
1 材料与方法
1. 1 材料: 1997-11-31取自云南省文山州广南县马
街村多年野生生长的黑节草。
1. 2 药剂:主要用了 GA (赤霉素 )、 IBA (引哚乙
酸 )、 BA ( 6-苄基嘌呤 ) ,用清水 ( CK)作对照。
1. 3 方法
1. 3. 1 应用野生实生苗进行外殖体培养 ,培养出花
芽或叶芽。
1. 3. 2 用花芽或叶芽的芽苞进行无菌系的繁殖培养。
1. 3. 3 采用不同的基质、时间、外源生长素和共生
菌进行大田栽培对比。
1. 3. 4 将组培快繁育苗分为大、中、小 3类 ,其标准
大苗: 每丛 3~ 5株 ,有 5条以上根 , 5片以上叶 ,
0. 3~ 0. 5 cm以上粗直茎 ,高大于 3~ 5 cm; 中苗:
苗形小有根或无根 ,有明显的根、茎、叶之分 ;小苗 ;
苗较小 ,根、茎、叶未全称为小苗。
·177·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 2期 2003年 2月
⒇收稿日期: 2002-08-01作者简介:付开聪 ( 1968- ) ,哈尼族 ,云南墨江县人 , 1994年 7月毕业于云南师范大学生物系 ,获学士学位。 参加过省卫生厅课题蛇菰属植物品种鉴定和生态习性研究工作 ,现负责省课题灯盏花人工适应性栽培研究和石斛植物人工引种驯化栽培研究工作。主要研究方向为名贵药材组织培养研究和石斛属植物人工引种驯化栽培研究 ,在国家级专业刊物发表相关论文 9篇。
1. 4 条件设计:采用 85%遮光网建立遮阴大棚 ,每
次实验观察丛数为 1 000丛。
1. 5 管理: 下地后及时浇水 ,保持基质水分在
60%~ 70%之间 ,上面不盖塑料膜 ,但要保证栽培通
风透气和绝对控制水。
2 实验结果与分析
2. 1 不同基质对苗成活率与产量的影响: 苗全部选
择中苗 ,基质主要应用了不同的材料和不同的组合
方法 ,外源生长 0. 025 mg /L赤霉素。 结果见表 1。
表 1 不同基质对铁皮石斛下地成活率与产量的影响
Table 1 Ef fects of dif ferent media on survival rate and
yield in underground part of D . of f icinale
生长情况
基 质 成活率 /% 产量 /( g· m- 2 ) 茎最长 / cm 茎最粗 /cm
木块苔藓 92. 5 1 100 35. 9 1. 1
木块锯沫 75. 5 697. 5 28. 5 0. 7
木块腐质土 51. 7 458. 5 19. 3 0. 43
锯沫腐质土 27. 4 257 13. 3 0. 37
锯沫河沙 34. 5 300. 9 15. 6 0. 39
从表 1中可看出 ,在几种不同的基质选择中 ,不
论成活率、产量、粗状程度和高度 ,都是木块与苔藓
的组合是好的 ,而锯沫与腐质土中最低 ,生长良好的
依次是: 木块与苔藓 > 木块与锯沫 > 木块与腐质
土> 锯沫与河沙> 锯沫与腐质土。
2. 2 不同栽培季节对移栽后铁皮石斛成活率与生
长状况的影响:自 1999年 9月我们开始繁殖出大量
试管苗以后 ,我们就一直进行着野外大田的移栽工
作。到 2001年 12月我们以不同程度的数量和质量
共移栽面积达 180 hm2。移栽苗的抽样观察 ,其结果
见表 2。
表 2 不同季节移栽铁皮石斛成活率与生长状况比较
( 1999-12— 2001-12)
Table 2 Comparison of transplantation in diff erent
seasons on survival rate and growth condit ion
of D .of f icinale ( 1999-12— 2001-12)
生长情况 成活率
/%
产量 /
( g· m- 2)
长度
/cm
直径
/cm
月均增
长 /cm
发芽苗
率 /%
根系
发达
1999-12-
2000-03
65. 4 458. 3 20. 4 0. 5 0. 8 5. 4不发达
3月中旬至
6月中旬 91. 7 988. 5 67. 7 0. 94 1 100 发 达
6月中旬至
9月上旬 73. 5 754. 9 44. 8 0. 57 0. 66 40 不发达
9月中旬至
11月下旬 88. 3 911. 5 57. 8 1. 14 0. 4 250 最发达
从上表可以看出: 铁皮石斛最佳栽培季节在思
茅地区为每年 3月中旬至 6月中旬和 9月中旬至
11月上旬 ,生长最差的是每年 12月至次年 3月中
旬。 其排列顺序依次为每年 3月中旬至 6月中旬>
9月上旬至 11月下旬> 6月下旬至 9月中旬> 每年
12月至次年 3月中旬。 本结论我们不仅 2000年做
了 1年的实验 ,且经 2001年 1年的反复观察 ,实验
栽培的结果基本一致。 这一结论甚至与我单位在
1990年至 1992年小实验的结果基本相吻合。 说明
铁皮石斛的集约化栽培具有很强的季节性。
2. 3 试管苗大小对铁皮石斛成活率与产量的影响:
本试验选择了生长最好的两个阶段 ,进行了实验栽
培 18个月后结果见表 3。
表 3 试管苗的大小对成活率和产量的影响
Table 3 Ef fects of test-tube plantlet s sizes on survival
rate and yield of D . of f icinale
苗型 生长情况成活率 /% 均年产量 /( g· m- 2 ) 生长最长 /cm 生长最粗 /cm
大苗 98. 7 1 563 67. 7 1. 5
中苗 93. 5 1 104 38. 5 0. 6
小苗 89. 4 413 13. 4 0. 37
从上表可以看出 ,试管苗的大小与成活率在最
佳生长季节移栽关系不是特别大 ,而产量与长粗关
系极为明显。原因我们认为:是苗小与体内积存的有
机物和能量都较少有关。 适应外界的能力和抵抗力
都很差 ,所以生长较为缓慢。
2. 4 外源生长素对铁皮石斛生长的影响:本试验用
了 BA和 GA两种做试验观察 ,对铁皮石斛的产量
及其生理生化的影响 ,用 CK作对比 ,结果见表 4。
表 4 外源生长素对铁石斛生长的影响
Table 4 Ef fect of extra-auxin on growth of D . of f icinale
外源生长素
生长情况
产量
/ ( g· m- 2)
茎杆生
长状况
叶生长
状况
发芽率
/%
GA /( 0. 025
mg· L- 1) 1 249
黄绿色肥
而壮
细小且长
而尖 56. 4
BA /( mg· L- 1 ) 938 青绿色 细长 宽大钝圆 97. 7
CK 864 呈红色或 墨绿色 椭圆形 45. 6
从上表可以看出: 使用外源生长素 , 0. 025 mg /
LGA和 1 mg /LBA对促进不同时期的生长有良好
调节作用。如冬末春初需要大量促进催芽时以喷施
1 mg /LBA为主 ,能较好地催芽。 进入生长季节时 ,
需要促进产量可以喷施 0. 025 mg /L赤霉素为主 ,
这样对提高铁皮石斛的品质和商品得率都具有良好
·178· 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 2期 2003年 2月
作用。
2. 5 对共生菌的初步探讨:共生菌是目前植物栽培
学的一个研究热点。笔者曾跟有关单位联合 ,提供菌
种进行实验 ,效果不太明显。 2000年 3月 ,我们自培
菌种又重复 3次实验 ,结果是对铁皮石斛刚从试管
苗出瓶时 ,下地对提高成活率有一定作用。但对后期
提高产量似乎无更大效果。 据分析我们认为对于刚
出瓶的苗 ,植株根部共生菌种类和数量都较少 ,能够
接受人为提供的部分共生菌 ,而植株成活后一旦根
部共生菌增殖饱和 ,再继续给予共生菌 ,植株也就不
再吸引。 所以 ,后期对促进产量并无明显效果。
References:
[ 1 ] Yang X Z, Sh ao H, Zh ou C , et al . Application of biotech-
nology in s tudies of medicinal plants Dendrobium Sw [ J].
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on cul tivation of m edical Dendrobii [ J ]. China J Ch in Mater
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otech nology about m edical Dendrobi i [ J] . Ch in Wi ld Plant
Resour (中国野生植物资源 ) , 2001 ( 1): 1-4.
HPLC法测定不同产地山药中尿囊素的含量
白 雁 ,朱凤云 ,王 东 ,陈志红 ,袁子民 ,余振喜⒇
(河南中医学院 分析测试中心 ,河南 郑州 450008)
摘 要: 目的 测定不同产地间山药中尿囊素的含量。 方法 采用 HPLC法 ,色谱柱: Shimadzu ODS ( 150 mm×
6. 0 mm ); 流动相:甲醇 -水 ( 10∶ 90) ; 流速: 0. 5 mL /min; 柱温: 35℃ ;灵敏度: 0. 005 AUFS; 检测波长: 224 nm;
纸速: 2. 0 cm /min。结果 各产地山药中尿囊素含量差异较大。结论 该法快速 、简便、重现性好 ,为不同产地间山
药中尿囊素的含量比较提供了依据。
关键词: HPLC;山药 ;尿囊素
中图分类号: R282. 6 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2003) 02 0179 02
Determination of allantoin inRhizoma Dioscoreae collected from different regions by HPLC
BAI Yan, ZHU Feng-yun, WANG Dong, CHEN Zhi-hong , YU AN Zi-min, YU Zhen-xi
( Analysis Testing Center o f Henan Colleg e o f TCM , Zheng zhou 450008, China)
Key words: HPLC; Rhizoma Discoreae; allantoin
山药为薯蓣科植物薯蓣 Dioscorea opposita
Thunb. 的干燥根茎。 具有补脾养胃、生津益肺、补
肾涩精的功能 ,主治脾虚食少、久泻不止、肺虚喘咳、
肾虚遗精、带下、尿频、虚热消渴等症 [1 ]。 主产于河
南 ,在山西、河北、山东和云南等省也有栽培山药 [2 ]。
山药含有薯蓣皂苷元和尿囊素等成分 ,尿囊素能修
复上皮组织 ,促进皮肤溃疡和伤口愈合 ,具有生肌作
用 ,可用于胃及十二指肠溃疡 ,是山药有效成分之
一 [3 ]。目前文献报道多对山药中尿囊素采用 HPLC
法和薄层扫描法进行含量测定 [ 4, 5 ] ,但对不同产地山
药中尿囊素的含量测定尚未见报道 ,为此 ,本文采用
HPLC法测定了不同产地山药中尿囊素的含量 ,从
而为山药的质量研究提供了依据。
1 仪器、试药和样品
岛津 LC-10AD高效液相色谱仪 ,岛津 SPD-
10A紫外检测器 ,柱温箱 CTO-10A, 岛津 C-R7A
数据处理器 ,微量进样器 (宁波市镇海玻璃仪器
厂 ) ,超声波清洗机 ;甲醇为色谱纯 (天津四友 ) ,水
为重蒸水 ,尿囊素对照品为 Sigma公司产品 ;山药
采自于各产地 ,经鉴定教研室陈随清博士鉴定。
2 实验部分
2. 1 色谱条件: 色谱柱: Shimadzu O DS( 150 mm×
6. 0 mm );流动相:甲醇-水 ( 10∶ 90) ;流速: 0. 5 mL /
min;柱温: 35℃ ;灵敏度: 0. 005AU FS;检测波长:
224 nm;纸速: 2 cm /min。
2. 2 对照品溶液的制备及线性化范围试验: 取尿囊
素 ,精密称定 ,置 10 mL容量瓶中 ,加重蒸水至刻
度 ,摇匀得对照品溶液 ( 0. 164 mg /mL)。精密吸取
·179·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 2期 2003年 2月
⒇收稿日期: 2002-05-31基金项目:河南省自然科学基金资助项目 ( 004025000)