全 文 ：HPLC法测定葛根素葡萄糖注射液中葛根素的含量
李群力 ,蒋晓萌
(浙江尖峰药业有限公司 ,浙江 金华　 321000)
　　葛根素葡萄糖注射液为血管扩张药 ,临床用于
冠心病、心绞痛、心肌梗死的预防和治疗。 葛根素为
其主要有效成分 ,本实验采用 HPLC法测定其中葛
根素的含量 ,方便、准确 ,便于控制产品的质量 [1, 2 ]。
1　仪器与试药
Waters 2690型高效液相色谱仪 , 966型二极管
阵列检测器 , Mi llennium 32色谱管理系统。葛根素
对照品 (批号: 0752-9816,中国药品生物制品检定
所 ) , 3′-甲氧基葛根素 (批号: 980601,含量 98. 5% ,
中国医学科学院协和药厂 )。 葛根素葡萄糖注射液
(自制 )。
2　方法和结果
2. 1　色谱条件: ODS C18 ( 150 mm× 4. 6 mm, 5
μm) ,流动相: 甲醇-1. 5%冰醋酸-氯仿 ( 21∶ 78∶
1) ,流速: 1. 0 m L /min,柱温: 30℃ ,检测波长: 250
nm ,灵敏度: 0. 1 AU FS,进样体积: 20μL;理论塔板
数以葛根素计不低于 1 000。
2. 2　对照品溶液的制备: 取葛根素对照品适量 ,加
水溶解制成每毫升含葛根素 0. 2 mg的溶液 ;另取
3′-甲氧基葛根素对照品适量 ,加水溶解制成每毫升
含 3′-甲氧基葛根素 0. 2 mg的溶液。分别精密吸取
葛根素对照品 10 mL、 3′-甲氧基葛根素对照品 1
m L,加水至 25 mL,得对照品溶液。
2. 3　供试品溶液的制备:精密吸取样品 1. 5 m L,置
50 m L量瓶中 ,加水稀释至刻度 ,摇匀 ,即得。
2. 4　标准曲线及线性范围:分别精密吸取混合对照
品溶液 0. 25, 0. 5, 1. 0, 1. 5, 2. 0 m L于 10 m L容量
瓶中 ,加水稀释至刻度 ,分别进样 ,测定。以峰面积对
浓度绘制回归曲线 ,经回归分析 ,得回归方程:
Y= 1 928 056. 9X - 59 210. 4, r= 0. 999 5,线性范
围 0. 2～ 2. 0μg。
2. 5　稳定性试验:精密吸取葛根素葡萄糖注射液
(批号 00329-1) 1. 0 mL,置 10 mL量瓶中 ,加水稀释
至刻度。每 1 h进样 20μL,测定 ,连续观察 8 h后 ,
每隔 24 h测定 ,结果日内稳定性 RSD为 0. 46% ,日
间稳定性 RSD为 0. 52%。
2. 6　精密度试验: 精密吸取上述对照品溶液 12
μL,进样 8次测定 ,结果 RSD为 0. 22% 。精密吸取
样品 ( 000329-2) 1. 0 mL,置 10 mL量瓶中 ,平行试
验 5份 ,分别加水至刻度 ,进样 20μL,测定 ,结果
RSD为 0. 87% ,因而方法精密度良好。
2. 7　重现性试验: 精密吸取 3份样品 ( 000329-2)各
1. 0 mL,加水稀释至 10 mL,进样 20μL,依法于日
内、日间分别测定 ,结果 RSD为日内 0. 76% ,日间
0. 96%。
2. 8　干扰性试验:取 5%葡萄糖溶液 1. 0 mL,加水
稀释至 50 mL。进样测定 ,结果在葛根素、 3′-甲氧基
葛根素相应的 tR处无干扰吸收峰。
2. 9　回收率试验:按样品处方比例分别精密吸取葛
根素、 3′-甲氧基葛根素及葡萄糖适量 ,加水溶解至
10 mL,按葛根素葡萄糖注射液制备方法制备 ,进
样 ,测定 ,计算回收率。结果葛根素的平均回收率为
99. 85% , RSD为 0. 86% (n= 9)。
2. 10　样品含量测定:精密吸取样品 1. 0 mL,置 10
mL量瓶中 ,加水稀释至刻度 ,进样 20μL,测定 ,结
果见表 1。
表 1　样品中葛根素含量 (n= 3)
批　号 葛根素 (mg /mL)
000329-1 1. 196 8
000329-2 1. 192 7
000329-3 1. 191 0
3　讨论
　　本方法经比较甲醇 -水、甲醇 -水 -氯仿、甲醇 -冰
醋酸 -氯仿等不同体系和比例流动相的色谱行为 ,结
果甲醇-冰醋酸 -氯仿 ( 21∶ 78∶ 1)分离效果最佳。
本研究建立的葛根素葡萄糖注射液中葛根素含
量的测定方法可为葛根素葡萄糖注射液成品质量标
准的建立提供依据。
参考文献:
[1 ]　陶忠华 .新药葛根素的研究 [ J ]. 中国新药 , 1993: 2( 6): 1-3.
[2 ]　中国药典 . 2000年版 . 二部 .
·428· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 5期
收稿日期: 2001-11-17