全 文 ：20 种清热解毒中药对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗药性的影响
杨明炜, 陆付耳, 徐丽君, 刘艳娟, 陈　茹Ξ
(华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所, 湖北 武汉　430030)
　　随着抗生素的广泛应用, 细菌对抗生素的抗药
性已成为临床上越来越棘手的、具有挑战性的严重
问题。其中具有多重耐药性的耐甲氧西林金黄色葡
萄 球 菌 (m eth icillin2resistan S tap hy lococcus au2
reaus, M R SA ) , 因其临床分离率逐年上升, 治疗困
难, 病死率高, 最为全球关注[1 ]。大量研究表明清热
解毒中药虽抗菌作用较弱或无抗菌作用, 但它们与
抗生素联用往往能增强抗生素的疗效, 提示清热解
毒中药可能对细菌抗药性有一定影响。因此本实验
观察临床上常用的 20 种清热解毒中药对M R SA 抗
药性的影响。
1　材料与方法
111　药品: 白头翁、金银花、大青叶、板蓝根、紫花地
丁、蒲公英、鱼腥草、红藤、败酱草、白花蛇舌草、半枝
莲、野菊花、蚤休、黄连、黄芩、黄柏、大黄、连翘、虎
杖、栀子共 20 种常用清热解毒中药之地道药材, 采
用水醇法工艺路线分别制成含生药 100% 静脉注
射液。
112　标准菌珠: 选择一种甲氧西林敏感金黄色葡萄
球菌 (m eth icillin2sen st ive S tap hy lococcus au reaus,
M SSA ) 标准菌株 (A TCC29213) 作为质控菌株。
113　临床菌株: 6 株M R SA 菌株均由华中科技大
学同济医学院附属同济医院检验科从临床标本中分
离得到。经鉴定 235、205 两株抗药性由质粒介导,
797、748、756、705 四株抗药性由 m ecA 基因引起。
114　方法: 采用液体试管二倍稀释法测定各中药对
6 株M R SA 的M IC, 然后取 1ö2M IC 浓度管及对照
管内细菌按 K irby2Bauer 法[2 ]测定细菌对苯唑西林
(OX)的敏感性。
2　结果
　　20 种清热解毒中药与 6 株M R SA 作用后, 紫
花地丁、半枝莲、败酱草能使其中两株 M R SA
(235、205) 由对 OX 抗药变为敏感, 但对另 4 株
M R SA 的抗药性无影响, 其余中药对 6 株M R SA
的抗药性均无影响, 见表 1。
表 1　中药对M RSA 对OX 敏感性的影响
Table 1　Effects of Ch inese herbs on sen sitiv ity
of M RSA to OX
组别 235 205 797 748 756 705
对照 - - - - - -
黄连 - - - - - -
黄柏 - - - - - -
白头翁 - - - - - -
金银花 - - - - - -
连翘 - - - - - -
栀子 - - - - - -
虎杖 - - - - - -
大黄 - - - - - -
野菊花 - - - - - -
鱼腥草 - - - - - -
红藤 - - - - - -
黄芩 - - - - - -
板蓝根 - - - - - -
大青叶 - - - - - -
蒲公英 - - - - - -
半枝连 + + - - - -
败酱草 + + - - - -
白花蛇舌草 - - - - - -
蚤休 - - - - - -
紫花地丁 + + - - - -
　　“- ”表示抗药;“+ ”表示药物敏感
　　“- ”m eans drug2resistan t; “+ ”m eans drug2sensit ive
3　讨论
　　目前, 治疗M R SA 感染的药物中, 仅万古霉素
等少数抗生素疗效肯定外,M R SA 对大部分抗生素
有不同程度的抗药性, 但近年来已有M R SA 对万
古霉素敏感性降低的报道[3 ]。因此, 探寻新的抗生素
或逆转细菌抗药性的药物成为当今国内外重要的研
究课题。清热解毒中药常用于治疗感染性疾病, 虽其
抗菌作用较弱或无抗菌作用, 但它们与抗生素联用
往往能增强抗生素的疗效, 提示清热解毒中药可能
对细菌抗药性有一定影响, 可否利用清热解毒中药
解决M R SA 抗药性问题值得进一步研究。
实验结果显示, 20 种清热解毒中药分别与 6 株
·997·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 7 期 2004 年 7 月
Ξ 收稿日期: 2003210214
基金项目: 国家自然科学基金资助课题 (39900198)
作者简介: 杨明炜 (1966—) , 男, 湖北人, 副教授, 硕士, 主要从事中药药理研究。
T el: (027) 83662577　E2m ail: mw yang0301@ho tm ail. com3 同济医院检验科
M R SA 作用后, 紫花地丁、半枝莲、败酱草能使其中
两株质粒介导的M R SA 由对 OX 抗药变为敏感,
但对另四株 m ecA 基因引起M R SA 的抗药性无影
响, 提示紫花地丁、半枝莲、败酱草逆转M R SA 抗
药性的作用可能是通过消除其抗药质粒所致, 具体
机制尚待进一步研究。其余 17 味中药对 6 株M R 2
SA 的抗药性均无影响。
References:
[ 1 ]　Sousea M A , Sanches I S, Ferro M L , et a l. In tercon tinen tal
sp read of a m ultidrug2resistan t m eth icillin resistan t staphylo2
coccus aureus clone [J ]1 J C lin M icrobiol, 1998, 36 ( 9 ) :
2590225961
[ 2 ]　L i Y L 1 C lin ica l M icrobiology and L abora tory (临床微生物
学 及 检 验 ) [M ]1 Beijing: Peop le’s M edical Pub lish ing
House, 19951
[ 3 ]　Sanyal D , W illiam s A J, Johnson A P, et a l. T he em ergence
of vancom ycin resistance in renal dialysis [J ]1 J H osp Inf ect,
1993, 24 (3) : 16721731
黄芩苷局部皮肤给药对小鼠血管通透性
及豚鼠离体回肠收缩的影响
杨新建, 王　雷Ξ
(天津长征医院, 天津　300021)
　　黄芩为唇形科植物黄芩 S cu tella ria ba ica lensis
Geo rgi 的干燥根, 主要成分为黄酮类化合物, 黄芩
对甲基2甲氧基2苯乙胺和甲醛的聚合物所致敏的大
鼠腹腔肥大细胞释放组胺及促使抗原与免疫球蛋白
( IgE) 的反应均有抑制作用。黄芩苷局部皮肤给药
对小鼠血管通透性作用的研究, 国内外均未见报道。
本实验探讨黄芩苷局部皮肤给药对磷酸组胺引起的
小鼠皮肤毛细血管通透性增高及豚鼠离体回肠收缩
的影响。
1　材料
111　药品: 黄芩苷 (土黄色粉末, 由天津市长征医
院提供, 含黄芩苷 95121% ) , 实验时用基质配成
3615% (最大浓度) 的药膏。基质, 天津市长征医院
提供。磷酸组胺 (H is) , 中国科学院上海生物化学试
剂研究所提供, 批号 9508144。盐酸苯海拉明注射
液, 天津市氨基酸公司生产, 批号 991019。
112　仪器: UV —260 紫外分光光度计 (日本岛津公
司生产)、10B—1 型离体器官恒温浴槽(浙江镇海电讯
厂)、LW 20—1 型力位移换能器 (上海医用电子仪器
厂)、XW T—台式自动平衡记录仪(上海大华仪表厂)。
113　动物: 昆明种小鼠, 一级, 体重 18～ 22 g, 雌、
雄各半, 由天津市医学动物开发中心提供, 合格证
号: 医动字第 006 号, 动物按性别分笼饲养。豚鼠, 雌
雄不拘, 体重 (466±2416) g, 由市场购买。动物饲
养环境与设施符合一级标准, 合格证书号: 012。
2　方法
211　对小鼠皮肤毛细血管通透性的影响: 将小鼠随
机分为 4 组, 每组 10 只, 雌雄各半。小鼠在给药前 1
d, 用 10% 硫化钠将小鼠背部脱毛 (215 cm ×3
cm )。实验当天分别于脱毛处涂上基质 (对照组)、
10%、15%、30% 的黄芩苷乳膏 011 gö20 g 体重
(相当于 0150、0175、115 gökg) , 每天 1 次, 连续 7
d。末次给药后 1 h 每只小鼠在给药处 sc 磷酸组胺
生理盐水溶液 1 Λgö0. 1 mL , 注射后立即由尾静脉
iv 0. 25% 伊文思蓝溶液 4 mL ökg, 15 m in 后脱臼
处死。取皮肤测蓝染面积, 计算公式为: [ (长径+ 短
径) ö4 ]2。再用角膜环钻取下蓝染部分的皮肤, 剪碎
后浸泡于丙酮2生理盐水 (7∶3) 溶液 2 mL 中, 48 h
后离心, 取上清液, 用 UV 260 紫外分光光度计在波
长 610 nm 处, 以丙酮2生理盐水溶液空白校零, 测
定所取样本的吸光度 (A ) 值。
212　对磷酸组胺引起的豚鼠离体回肠收缩的影响
21211　回肠标本的制备: 将健康豚鼠击昏后, 立即
打开腹腔, 取出回肠 6 cm 段, 将标本置于 Bo tt ing
溶液 中 [ 组 成 ( göL ) : N aC l 8. 00、KC l 0. 20、
N aH 2PO 4 0. 15、CaC l2 0. 05、N aHCO 3 1. 00、M gC l2
0. 04、Gluco se 1. 00 ], 将肠内容物冲洗干净, 并去除
周围结缔组织, 两端部分结扎, 下端固定在通氧气钩
上, 上端与 LW 20—1 型力位移换能器和 XW T—台
式自动平衡记录仪相连, 悬挂于含有 20 mL Bo tt ing
溶液的恒温 (37±0. 5) ℃ 浴槽中, pH 7. 4, 通入
95% O 2和 5% CO 2混合气体, 调标本负荷 1 g, 平衡
·008· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 7 期 2004 年 7 月
Ξ 收稿日期: 2003210229
作者简介: 杨新建, 女, 副主任药师, 主要从事中药分析及中药制剂新剂型的研究。T el: (020) 27356365