全 文 ：龟蔑散对哮喘大鼠肺组织 p一肾上腺素能受体及 cA M P 的影响
上海中医药大学中医基础理论教研室 ( 2。。 0 3 ) 2包照 日格图 寮 吴敦序 陈淑俊
吴昆鳃 童舜华 奚蓓莉
摘 要 大鼠哮喘连续激发后肺组织胞膜 卜A R 和胞浆 C A M P 水平逐 日下降 , 在第 7 日明显低于
正常对照组 (尸 < 0 . 01 ) ;激发第 7 日 , 龟蔑散明显上调 p一 A R 密度 (尸 < 0 . 0 5) 并使 c AM P 水平明显
上升 ( p < 。 . 0 5 ) 。 提示龟蔑散治疗哮喘可能与其上调 件A R ,提高 C A M P 水平作用有关 ,联合用药可
提高糖皮质激素的疗效 。
关键词 龟蔑散 哮喘大鼠 任肾上腺素能受体 (压A R ) 环磷酸腺普 c( A M )P
支气管哮喘是一种常见的呼吸道疾病 ,
件肾上腺素能受体 甲一 A R )激动剂是 目前最
有效的支气管扩张剂 ,该类药物通过兴奋 日-
A R
, 舒张支气管平滑肌 而使哮喘得 以控
制 〔`〕 。 与糖皮质激素 ( G C ) 合用 , 作用 可加
强 〔2〕 。 但是 ,长期使用 G C 出现的全身性副作
用和 件A R 激动剂长期用药出现剂量依赖性
心动过速和诱发心律 失常甚至导致某些患者
的死亡等问题却困扰着医学界 〔 3〕 。 实践表明 ,
采用 中药与 p 受体激动剂 联合用药 , 加强 p
受体激动剂的疗效 ,改善 月受体激动剂的快
速减敏 , 消除或部分消除其副作用而提高哮
喘的治愈率 。 我们在临床上长期应用补肾健
脾中药方龟茂散防治支气管哮喘的基础上 ,
通过动物实验直接观察哮喘大鼠肺组织 日-
A R 的 R T 值及 c A M P 含量的变化来探讨龟
蔑散治疗哮喘的作用机制 。
1 实验材料
1
.
1 试剂 : 卵蛋 白为 iS g m a 公司产品 ; 百 日
咳杆菌疫苗由上海市传染病研究所提供 ; 丙
酸倍氯米松 (商品名为必可酮 )为重庆葛兰素
制药有限公司产品 ; ` 2 5 1一 N a l , 无载体 , A m er -
s h a m 公 司产 品 ; ` 2 5 1一心得静 , 我 校同位素室
标记 , 比活度为 2 1 7 6 C i /m m o l ; 心得安 , 北
京制药厂产 品 ; C A M P 试剂盒为本校同位素
室提供 。
1
.
2 中药 : 龟茂散由黄蔑 、 人参 、 白术 、 甘草 、
龟板 、 鹿角片 、 巴戟和紫河车等 21 味中药组
成 。 由上海药材公司提供 , 加工制粉与鼠饲料
相混匀 ,制饼备用 。
1
.
3 动物 : 雄性 S D 大鼠 , 体重 2 0 9 左右 ,
由上海计划生育研究所提供 。
2 实验方法
2
.
1 大鼠哮喘模型制备 : 参照 吕国平等人的
方法 〔` 〕 ,略加改动 。 先将动物随机分为正常对
照组 、 模型组 、 龟蔑散组 、 必可酮组及龟 茂散
加必可酮组 ,观察 24 h 。 然后 , 除正常对照组
外 , 其余各组再分第 1 、 3 、 7 日组 , i p 卵蛋 白
1 0 m g
,灭活百 日咳杆菌疫苗 5 x l 护 个和氢
氧化铝干粉 1 0 m g 致敏 , 2 周后予超声雾化
吸入 1 %卵蛋 白激发 , 每日 08 , 0 一 09 , 0
吸入 20 m in 重复激发 。 正常对照组用生理盐
水代替抗原液进行注射和雾化吸入 。 各组在
相应预定时间处死摘取肺脏 。
2
.
2 给药方法 : 龟茂散在大鼠哮喘激发前 2
周开始给药 , 含药物饲料吃净 , 补 加普通饲
料 , 直至动物处死为止 , 每鼠剂量为 .2 4 9 d/ ;
必可酮在每 日激发哮喘的同时给予大鼠喷雾
资
A d d r e s s
:
B a o Z h a o r ig e t u
,
D e p a r t m e n t o f B a
s
i e T h e o r y o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i e in e
,
S l
l a n g h a i U n i v e r s i t y o f T
r a d i
-
t i o n a l C h in e
s e M e d i e in e
,
S h a n 只 h a i
包照 日格图 男 ,博士 , 研究方向为中药药理 。 现在 上海中医药大学博士后流动站从事博士后研究工作 。 先后承担和参加国家自然科学基金 、 中医药管理局和省级科研项 目多项 。 现正从事上海市教委和中医药管理局基金资助项目“ 扶正与化痰中药对哮喘大 鼠肺组织 卜肾上腺素 能受体和 糖皮质激素受体的调节作 用 ” 的研究 。
.
4 6 4
-
吸入 1 0 拼 g/d , 对照组吸入等容积 生理盐
水 。
2
.
3 肺组织 件A R R T 值测定 : 肺组织放入
加蔗糖缓冲液中 ,以细胞分散器粉碎 ,然后以
t e f l o n 匀浆 器匀 浆 , 2 7 o o o r / m i n 离 心 1 5
m in
, 取沉淀以反应缓冲液配成所需浓度的
膜蛋白悬液 。 反应试管中加入 ” 5 1一心得静 50
拜L 和膜蛋 白悬液 20 0 拜L , 平行非特异管另
加入 1 0 拜L 心得安 ,总容积为 40 0 拼L 。 以上
操作均在 。 ℃一 4 ℃中进行 。 37 ℃水浴中反
应 30 m in 后 ,收集结合部分于玻璃纤维滤膜
上 , 以放射免疫 7 计数器测量放射性 。再以公
式算出结合位点数 ( R T ) 。
R T 一 (总结合一非特异性结合 )/ 仪器效率 x
比活度 x 蛋白量 (m g ) 〔 5〕 。
2
.
4 肺组织 。 A M P 的测定 : 称取 50 m g 肺
组织放入 2 m L 醋酸缓冲液中粉碎匀浆 (冰
浴 ) , 再加入 2 m L 无水 乙醇混匀静止 5 m in ,
3 S Oo r /m i n 离心 1 5 m i n 取上清液 , 6 0 ℃蒸
发致干 ,然后以放射免疫分析法测定 。
2
.
5 蛋 白含量测定 : 用 lo w yr 微量定蛋 白
法 。
3 实验结果
3
.
1 龟茂散对哮喘大鼠肺组织 各A R R T 值
的影响 : 见表 1 。
表 1 龟蔑散对哮喘大鼠肺组织 p一 A R R T 值的影响
西药组的 R T 值均明显高于模型组 (均为 P
< 0
.
0 5 )
。
3
.
2 龟蔑散对哮喘大鼠肺组织 c AM P 含量
的影响 : 见表 2 。
表 2 龟蔑散对哮喘大鼠肺组织
c A M P 含量的影响
组别 动物数
e AM p 含量 pm o l / s om g 肺组织临土 s )
(只 ) 第 l 日 第 s 日 第 7 日
组别 动物数
R T fm ol / m g 蛋白任士 : )
(只 ) 第 1 日 第 s 日 第 7 日
正常对照 9 1 44 . 2士 3 2 . 3 14 4 . 2士 3 2 . 3 144 . 2士 3 2 . 3
哮喘模型 9 1 51 . 4士 34 . 5 91 . 5士 56 . 1△ 4 1 . 3士 25 . 1△△
必可酮 9 16 0 . 7士 25 . 6 90 . 4士 34 . 5 6 8 . 8士 19 . 2 “
龟蔑散 9 12 3 . 6士 39 . 5 10 2 . 5士 2 2 . 4 7 3 . 2士 22 . 3 ,
必可酮+ 龟蔑散 9 14 7 . 8士 38 . 3 9 9 . 2士 35 . 3 7 1 . 4士 24 . 4 `
与正常对照 组比较 : △尸 > 。 . 05 △△ p < 。 . 01 ;
与哮喘模型组比较 : , p < 。 . 05
从表 1 可见 ,哮喘激发第 3 日 ,模型组 日-
A R 的 R T 值低于正常对照组 , 各用 药组的
R T 值与模型组比较无明显差异 。 哮喘激发
第 7 日 ,哮喘模型组的 R T 值显示继续下降 ,
与正常对照组相 比较 尸 < 0 . 01 , 有非常显著
性意义 。 另一方面 , 必可酮组 ,龟蔑散组及中
《中草药 》 1 9 98 年第 29 卷第 7 期
正常对照 9 4 . 04士 0 . 84 4 . 0 4士 0 . 84 4 . 0 4士 0 . 8 4
哮喘模型 9 5 . 60士 0 . 7 1 5 . 0 2士 。 . 92△ 2 . 70士 1 . 1△△
必可酮 9 3 . 50士 0 . 6 6 3 , 94士 1 . 1 0 4 . 02士 1 . 42 ,
龟蔑散 9 3 . 5 2士 0 . 88 3 . 3 0士 0 . 78 3 . 8 8士 1 . 2 8 ·
必可酮 + 龟蔑散 9 3 . 6 0士 0 . 68 4 . 1 0士 1 . 2 2 4 . 6 8士 1 . 6 8 二 二
与正常对照组 比较 : △尸> 。 . 05 △△尸 < 。 . 01 ;
与哮喘模型组比较 : , 尸 < 。 . 05 , · 尸 < 。 . 01
从表 2 可见 ,哮喘激发第 3 日 ,模型组肺
组织 c A M P 含量低于正常对照组 。 哮喘激发
第 7 日 , 模型组肺组织 c A M P 含量显著低于
正常对照组 ( p < 0 . 01 ) 。 与模型组比较 ,必可
酮组 ( P < 0 . 0 5 ) 、 龟蔑散组 (尸 < 0 . 05 )及中西
药组 (尸 < 0 . 01 )肺组织 c A M P 含量均显著高
于模型组肺组织 c A M P 含量 。
4 讨论
支气管哮喘是以呼吸道慢性非特异性炎
症和 阵发性通气障碍为主的疾病 ,其病理生
理变化涉及到免疫系统和神经内分泌系统多
个环节 , 其中肾上腺素能 p一 A R 功能低下是
重要一环 。
我们的实验结果显示 , 哮喘大鼠肺胞膜
压A R 的 R T 值随哮喘持续激发而逐日下降 ,
在第 3 日即低于正常对照组 , 在第 7 日进一
步下降 。 伴随着 件A R 的 R T 值下降 , 哮喘大
鼠肺组织 c A M P 水平也出现降低 ,在第 7 日
达最低水平 。 当然 , C A M P 作为“ 第二信使 ” ,
是一种非特异性的介质 , 许多因素都可使其
变化 。 但在哮喘发生过程中肺胞浆 c A M P 水
平变化则与胞膜 各A R 的密度变化关系密
切 。 实验结果亦提示了这一点 。
临床上龟蔑散用于防治支气管哮喘的发
作 已有数年 。在哮喘缓解期开始给药 ,哮喘发
作时与皮质激素和 件A R 激动剂 联合用药 ,
一
4 6 5
.
确实具有使哮喘发作次数大为减少 , 发作容
易控制和减少皮质激素及 件A R 激动剂的副
作用等特点 。 龟蔑散组方由补肾健脾两类中
药组成 ,方义 为温补 肾阳 、纳气利水 ,补益肺
脾之气 , 堵截生痰之源 。 实验中在哮喘激发第
7 日 , 龟蔑散和必可酮均使已经下降的哮喘
大 鼠肺组织 件A R R T 显著上调 , 同时显著提
高肺组织 c A M P 水平 。可见 , 龟蔑散和 G C 一
样对 件A R 具有上调作用并提高 c A M P 水
平 。资料表明 ,温肾中药可改善皮质功能和 月-
A R 功能 ;健脾固本中药调节细胞和体液免
疫 , 提 高 CA M P 水 平 , 阻 抑 过 敏 介 质 释
放 〔6一 8 〕 。 可以推论 , 龟蔑散上调 卜A R 及提高
c A M P 水平作用可能与其类皮质激素样作
用 ,改善肾上腺皮质功能和免疫调解等诸方
面的因素有关 。
参 考 文 献
1 B e 1 E H
, e t a l
.
T h o r a x
, 1 9 9 1 ; 4 6
: 9
2 M a k J C W
, e t a l
.
A m R e v R e s p i r D i s
,
1 9 9 2 ; 1 4 5
:
A 8 3 4
3 F a h y J V
, e t a l
.
C li n C h e s t M e d
,
1 9 9 5 ; 1 6 ( 4 )
:
7 1 5
4 吕国平 , 等 . 中华结核和 呼吸杂志 , 19 95 ; 18 : 3 7
5 易宁育 , 等 . 中药药理与临床 . 1 9 2 ; 8( 5 ) : 40
6 胡国让 , 等 . 中西医结合杂志 , 1 9 87 ; 7 ( 2) : 71
7 赵树进 , 等 . 中国中药杂志 , 19 91 ; 16 (6 ) : 3 70
s 许得盛 , 等 . 中国中西医结合杂志 , 19 9 3 ; 13 ( 5 ) : 3 1 1
( 1 9 9 7
一
1 2
一
0 8 收稿 )
E f f e e t o f G u i q i s a n ( G Q S ) o n p
一 A d r e n e r g i c R e e e P t o r s a n d C y e l i e A M P L e v e l o f
L u n g T i s s u e s o f A s t h m a t i e R a t
B a o Z h a o r ig e t u
,
W
u D u n x u
,
C h e n S h u j
u n , e t a l ( D e p a r t m e n t o f B a s ie T h e o r y
,
S h
a n g h a i U n 宜命e r s i t y o f
’
r r a d i t i o n a l C h i
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M
e
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e l n e , S h
a n g h
a i 2 0 0 0 3 2 )
A b s t r a e t G
u iq is a n ( G Q S )
, a r e e i p e w i t h k id n e y
一 n o u r
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s
h in g
a n d s p le e n
一
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,
h a s b e e n
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n t o p r e v e n t a s t h m a t ie a t t a e k , e f f e e t i v e l y i n e l i n i e s
.
G Q S w
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d m i n is t e r e d r o r a t a w e e k b e f o r e t h e e x
-
p e r im o n t a n d e o n s e e u t i v e l y d u r in g t h e e x p e r im e n t ( 2
.
4 9 / d
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-
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a r io n e f f e e t o f b e e lo m e t h a s o n e d i P r o p i o n a t e ( B D P ) w h e n G Q S a n d B l) P w e r e a d n l i n is t e r e d s im u l t a n e o u s ly
.
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一 n o u r i s h i n g a n d s p le e n
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in v i g o r a t in g h e r b s A s t h m a t ie r a t 日一 a d r e n e r g : e r e e e p t o r
e
A M P
《中草药 》杂志 1 , 9 7 年第 28 卷增刊 (总第 2 97 期 )征订启事
经国家科委 (国科发信字 〔 l {玲 7〕 281 号文 )批准 , 我们编辑出版了 《中草药 》杂志 1 9 9 7 年第 28 卷增刊 ( 总
第 29 7期 ) 。 本增刊共收入论文 92 篇 ,其中紫杉醇研究方面的论文 12 篇 . 包括紫杉醇的化学成分 、提取工艺 、
组织培养方面科研论文 , 并特邀 国内从事紫杉醇研究的知名专家和中青年学科带头人撰写综述文章 , 充分反
映了我国从事紫杉醇研究方面的新成果 ,新进展和新动态 。 另外 ,还有反映国 内中药植化 、药理 、 分析 、 制药 、
药材 、 临床等方面的新理论 , 新方法 ,新成就的科研论文和有关综述性文章 80 余篇 。
增刊为 16 开本 , 14 页 (约 3 0 万字左右 ) , 天津市报刊增刊特许准印证 ( 97 ,第 。 6 1号 , 定价 40 元 , 另加包
装费 、 邮局附加费 5 元 。 凡 订阅者请向我部索取订单 : 3 0 0 1 9 3 天津市鞍山西道 3 0 8 号《中草药 》杂志编辑部 。
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4 6 6
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