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Hemostatic studies of YAOLIUGONGXUE‘AN GRANULE* on metrorrhagia induced by abortifacient

药流宫血安治疗药流后子宫出血的实验研究



全 文 :导小鼠产生免疫性肝损伤[ 4~7] ,表现与人类病毒性
肝炎的病变更为相似。血清 ALT 目前仍是反映肝
受损的敏感指标。故选用以上 3个肝损伤模型, 对夏
枯草合剂的保肝效应进行考察。结果显示夏枯草合
剂对CCl4所致小鼠血清 ALT 增高有明显的降低作
用;在 D-GalN+ LPS 所致小鼠肝损伤中,夏枯草合
剂明显降低肝损伤小鼠血清 ALT 水平; 对BCG+
LPS 引起的小鼠血清 ALT 水平升高都有显著降低
作用。结果表明夏枯草合剂对 3种肝损伤均有显著
的保护作用, 为其应用于临床提供了药理学依据。
参考文献:
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药流宫血安治疗药流后子宫出血的实验研究
华晓东,韩 晶
(天津市药品检验所,天津 300070)
摘 要: 目的 观察药流宫血安对药流后子宫出血的影响。方法 测定药物对正常及药流小鼠的出、凝血时间,抗
炎、镇痛作用及对大鼠离体子宫收缩的影响。结果 药流宫血安可缩短小鼠出血时间, 减少药流后小鼠的阴道出血
量, 并使大鼠离体子宫收缩幅度增加,同时具有消炎、镇痛作用。结论 药流宫血安对药流后子宫出血有明显的治
疗作用。
关键词: 药流宫血安;药流; 米非司酮
中图分类号: R285. 5; R286. 92  文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 07 0627 04
Hemostatic studies of YAOLIUGONGXUEAN GRANULE
*
on metrorrhagia
induced by abortifacient
HUA Xiao-dong, HAN Jing
  ( T ianjin Institute for Drug Contr ol, T ianjin 300070, China)
Key words : YAOLIU GONGXU EAN; abort ion by abort ifact ient ; mifepristone
* YAOLIUGONGXUEAN GRANULE is a pr epar ation of tr aditional Chinese medicine used in the tr eatment of metr or-
rhag ia induced by abor tifact ient.
  药流宫血安由花蕊石、三七、益母草、菟丝子等
中药制成,具有化瘀止血、固肾调经等功效, 临床用
于治疗月经过多及药物流产后子宫出血过多等症。
我们研究了药流宫血安的止血、镇痛、抗炎等作用,
为该药的临床研究提供依据。
1 实验材料
1. 1 供试药物; 药流宫血安, 飞鹰公司研制的治疗
药流后子宫出血的新药,批号: 990413。云南白药,消
炎痛,己烯雌酚注射液,米非司酮,益母草浸膏, 缩宫
素注射液, 子宫肌蓄养液 ( NaCl 9 g、KCl 0. 4 g、
CaCl2 0. 06 g、葡萄糖 0. 5 g、NaHCO 3 0. 5 g , 全量
100 mL)。
1. 2 实验动物:昆明种小鼠,体重( 22±2) g, Wis-
tar 大鼠, 体重( 220±20) g ,均购自北京医学科学院
实验动物繁育场, 合格证号: 医动字第 01-3001 号
(二级动物)。
2 实验方法与结果
2. 1 药流宫血安颗粒剂止血作用的研究
·627·中草药 Chinese T radit ion al and Herbal Dr ugs 2001年第 32卷第 7期
 收稿日期: 2000-11-08作者简介:华晓东( 1971-) ,男, 1993年毕业于天津医科大学预防医学专业,医学学士,药师,现从事药理、毒理研究工作。
2. 1. 1 对小鼠出血时间的影响(断尾法) [ 1, 2] :取健
康小鼠 50只,雌雄各半,随机分为 5组,药流宫血安
给药组分别 ig 给予原料浸膏 8. 6, 17. 2, 34. 4 g 生
药/ kg , 阳性对照组给予云南白药 1 g / kg ( 20 mL/
kg) ,空白对照组给予同体积生理盐水,连续 5 d,于
末次给药后 30 m in , 以利剪在距小鼠尾尖 0. 5 cm
处横断, 血液自行流出后计时, 每隔 15 s用滤纸吸
取血滴 1 次, 直至自然停止, 计算出血时间, 结果见
表 1。
表 1 药流宫血安对小鼠出血时间的影响( x±s)
组别 剂量
( g 生药/ kg)
动物数
(只)
出血时间
( min)
空白对照   — 10    13. 33±4. 33
药流宫血安   8. 6 10 10. 76±1. 99
17. 2 10 9. 05±2. 76*
34. 4 10 7. 24±2. 16* *
云南白药 1. 0 10 7. 65±1. 42* *
  与空白对照比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
结果表明, 给药 5 d 后, 药流宫血安原料浸膏
17. 2, 34. 4 g 生药/ kg 组与对照组比较,其出血时间
均明显缩短, 并有明显的量效关系。
2. 1. 2 对正常及受孕小鼠凝血时间的影响(玻片
法) [ 2] :取健康小鼠(雌雄各半)及受孕小鼠各 50只,
随机分为 5组,每组 10只。正常小鼠分组及用药同
2. 1. 1。受孕小鼠于孕第 7天 ig 给予米非司酮 12. 5
mg / kg ( 10 mL/ kg)造成流产, 并于造型当日开始给
药,药流宫血安给药组剂量同 2. 1. 1, 连续 5 d至孕
第 11天。健康及药流后小鼠均于末次给药后 30
min,眼内眦球静脉丛取血, 自血液滴在玻片上开始
计时,每隔 30 s 用清洁大头针自血滴边缘向里轻轻
挑动一次,观察到挑起血丝为止,计算凝血时间,结
果见表 2。
表 2 药流宫血安对正常及孕流小鼠凝血时间的影响( x±s)
组别 剂量
( g 生药/ kg )
正常小鼠
( s )
孕流小鼠
( s)
空白对照 — 82. 90±39. 01 147. 12±65. 38
药流宫血安 8. 6 60. 80±13. 88 125. 04±68. 55
17. 2 67. 30± 8. 34 131. 52±87. 51
34. 4 74. 40±30. 68 109. 32±62. 88
云南白药 1. 0 48. 50±16. 28* * 62. 39±15. 43* *
  n= 10,与空白对照比较: * * P < 0. 01
结果表明,给药 5 d后,阳性对照组凝血时间与
对照组相比明显缩短( P< 0. 01) , 而药流宫血安对
健康及孕流后小鼠的凝血时间并无明显影响。
2. 2 药流宫血安对正常大鼠离体子宫平滑肌收缩
作用的影响[ 3] : 取雌性未孕大鼠,实验前 24~48 h
按 0. 2 mg / 100 g 体重 sc 己烯雌酚, 实验时将离体
子宫放入盛有 20 mL 蓄养液的浴槽中,另一端与肌
力换能器相连。恒温水浴保持温度在( 37±0. 5) ℃,
并不断向蓄养液中通气。给药前记录一段正常子宫
收缩曲线后,每次加入不同浓度药液 0. 2 mL, 记录
给药后的子宫收缩曲线, 相邻两次给药间隔时间为
10 m in, 结果见表 3。
表 3 药流宫血安对正常大鼠子宫平滑肌收缩作用的
影响( n= 9)
组别 终浓度
( g 生药/ mL 蓄养液)
收缩幅度
( m m)
正常组 -   8. 44± 5. 63
缩宫素 0. 02 U/ mL 49. 06±13. 16
药流宫血安 0. 005 41. 00±18. 06* *
0. 01 57. 50±13. 35* *
0. 02 65. 33±11. 19* *
0. 04 73. 00±12. 94* *
  与正常组相比: * * P < 0. 01
实验结果表明,药流宫血安对正常大鼠离体子
宫平滑肌均有明显的收缩作用,且其收缩作用随剂
量加大而增强。
2. 3 药流宫血安对小鼠子宫的影响:选用雌性性成
熟小鼠,乙醚麻醉后取俯位,于背部脊柱两侧肋下做
纵切口,摘取两侧卵巢。术后 1周开始每日做阴道涂
片检查阴道上皮周期性变化情况,连续检查 5 d, 未
呈现动情期变化的小鼠作为手术合格动物。将去势
合格的动物随机分为 5组,每组 10 只, 给药组分别
ig 药流宫血安原料浸膏 8. 6, 17. 2, 34. 4 g 生药/ kg
( 20 mL/ kg ) ,空白对照 ig 同体积的生理盐水,阳性
对照每只小鼠 sc 己烯雌酚 0. 2 mL, 连续 5 d。自给
药之日起,每天做阴道涂片检查动情周期转换情况,
5 d后处死小鼠, 解剖检查每只动物的子宫积液和
水肿情况,称量子宫湿重后,将子宫放在 10%福尔
马林液中固定, 石蜡包埋,自子宫输卵管端向子宫体
方向于不同位置作切片。每侧子宫取 4片,每只子宫
共做 8个切片, H . E 染色后, 于显微镜下用测微尺
测量子宫上皮细胞的增生高度(每只子宫两侧共测
量 40个位点,所得平均值作为该子宫上皮细胞的平
均高度)及基质细胞层的厚度(每只子宫测量 8个位
点,所得平均值作为该子宫上皮细胞的高度)。
2. 3. 1 动情周期转换[ 4, 5] :结果见表 4。空白对照组
动物均未呈现动情周期变化, 而阳性对照组在给药
后第 3天即有从动情周期转入动情期的变化, 至第
5天所有动物均呈现或呈现过动情期变化; 药流宫
血安各剂量组小鼠在给药后的阴道涂片检查中, 均
呈现过上皮细胞增多的变化, 但未出现转入动情期
的角化上皮改变。
·628· 中草药 Chinese T radit ion al and Herbal Dr ugs 2001年第 32卷第 7期
表 4 药流宫血安对小鼠动情周期的影响
组别 剂量
(生药 g/ kg)
动物数
(只)
动情周期转换
(只)
空白对照 — 10 0
药流宫血安 8. 6 10 0
17. 2 10 0
34. 4 10 0
己烯雌酚 0. 2 m L/只 10 10
2. 3. 2 对小鼠子宫体重比的影响[ 5] : 结果见表 5。
药流宫血安各剂量组小鼠在给药 5 d后解剖,取子
宫称重,各组子宫体重比明显大于对照组, 表明药流
宫血安具有使去势小鼠子宫增重的作用, 显示一定
的类雌激素样作用。
2. 3. 3 对小鼠子宫上皮细胞高度及基质细胞层厚
度变化的影响[ 6, 7] :在己烯雌酚的作用下, 小鼠子宫
上皮细胞高度明显增大,基质细胞层厚度明显增宽;
药流宫血安各剂量组均可使子宫上皮细胞高度明显
增加,而基质细胞层厚度变化不明显( P> 0. 05)。药
流宫血安各剂量组可使子宫上皮细胞增生, 显示具
有一定的类雌激素样作用, 结果见表 6。
表 5 药流宫血安对小鼠子宫体重比的影响( x±s)
组别 剂量
( g/生药 kg)
动物数
(只)
子宫体重比
( mg/ 10 g )
空白对照 — 10 5. 49±1. 24
药流宫血安 8. 6 10 7. 23±1. 56*
17. 2 10 6. 67±0. 67*
34. 4 10 6. 96±1. 12*
己烯雌酚 0. 2 m L/只 10 40. 95±11. 30* *
  与空白对照相比: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
表 6 药流宫血安对小鼠子宫上皮细胞高度及
基质细胞层厚度的影响( x±s)
组别 剂量
( g 生药/ k g)
上皮细胞高度
( m)
粘膜层高度
( m )
空白对照 —   6. 99±0. 54   18. 70±4. 96
药流宫血安 8. 6 7. 95±1. 09* * 20. 89±5. 78
17. 2 8. 28±0. 63* * 18. 65±7. 56
34. 4 9. 33±0. 84* * 20. 24±5. 86
己烯雌酚 0. 2 mL /只 15. 93±1. 98* * 50. 78±14. 68*
  与空白对照组相比: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
2. 4 对米非司酮致小鼠流产后子宫出血情况的影
响[ 4, 8, 9] :取健康小鼠,雌雄按2∶1比例合笼交配,次
日晨雌鼠作阴栓检查,以查到阴栓为受孕第 1天。将
查到阴栓的受孕小鼠随机分为 5 组, 每组 10只,于
受孕第 7天造型, ig 米非司酮 12. 5 mg / kg , 体积为
10 mL/ kg , 同时每鼠于阴道内置入定量海绵
( 0. 032~0. 035 g ) , 造型当日给药, 给药组分别 ig
药流宫血安原料浸膏 8. 6, 17. 2, 34. 4 g 生药 / kg
( 10 mL/ kg) ,空白对照给予同体积的生理盐水, 阳
性对照给予益母草浸膏 6 g / kg, 连续 5 d。每日更换
海绵,观察记录每鼠子宫出血情况,并将取出的海绵
装入玻璃小瓶密闭冷藏,连续收集至受孕第 11天。
受孕第 12 天眼眶取静脉血 20 L, 加入 4 mL 5%
NaOH 溶液中,并以 5%NaOH 溶液为空白对照, 用
HIT ACHIU-1100型紫外分光光度计于 545 nm 波
长下,测定静脉血吸光度( A ) , 取血后将小鼠处死,
取出子宫放入 10%福尔马林液中固定, H. E 染色,
进行组织学检查。将第鼠连续收集的海绵加入适量
的 5%NaOH 溶液浸提 24 h 后, 测定子宫出血 A
值,按下式计算自造型日起 5 d 内的子宫出血总量。
子宫出血量( mL) = 静脉血量×子宫出血 A×V2静脉血 A×V 1
式中: V1 为稀释静脉血所用 5%NaOH 量( mL )
V2 为浸提子宫血所用 5%NaOH 量( mL )
实验结果见表 7。病理组织学检查,对照组流产
子宫的宫腔扩大,内、系膜动静脉扩张, 肌层较薄。而
与对照组相比, 给药组流产子宫宫腔缩小, 内膜区
动、静脉收缩,肌层致密、增厚,腺体增生。结果表明,
药流宫血安具有减少药流后小鼠子宫出血量并促进
流产子宫复原的作用。
表 7 药流宫血安对药流后小鼠子宫出血量的影响( x±s)
组别 剂量
( g 生药/ kg )
动物数
(只)
出血量
( mL)
空别对照   - 10  0. 015 9±0. 001 0
药流宫血安   8. 6 10 0. 011 3±0. 005 1*
17. 2 10 0. 013 4±0. 003 2*
34. 4 10 0. 010 3±0. 003 4* *
益母草浸膏 6. 0 10 0. 013 7±0. 002 5*
  与空白对照组相比: * P < 0. 05 * * P< 0. 01
2. 5 药流宫血安的抗炎作用
2. 5. 1 药流宫血安对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑
制作用[ 2] :取健康小鼠 50只,雌雄各半,随机分为 5
组,每组 10只, 给药组分别 ig 药流宫血安原料浸膏
8. 6, 17. 2, 34. 4 g 生药/ kg ( 20 mL/ kg) , 阳性对照
组给予消炎痛 10 mg / kg, 空白对照给予同体积的生
理盐水,连续 5 d, 于末次给药后 45 min, 于一侧耳
壳正、反两面均匀涂抹二甲苯 0. 05 mL, 40 min 后
处死动物,沿耳廓基线剪下两耳,于同一部位用直径
7 mm 的打孔器冲下耳片, 称重,以两耳片重量差为
肿胀指标,各给药组的肿胀抑制率见表 8。
2. 5. 2 对大鼠异物埋置致子宫炎症的影响 [ 2, 3] : 将
Wistar 大鼠( 190~210 g )用乙醚麻醉, 于下腹正中
做一 2 cm 切口, 暴露子宫,沿左侧子宫角上 1 cm 处
作一横切口, 将一塑料管(管径 2 mm ,长 0. 5 cm, 重
11 mg, 酒精消毒) 放置于子宫内,并与子宫切口缝合
·629·中草药 Chinese T radit ion al and Herbal Dr ugs 2001年第 32卷第 7期
表 8 药流宫血安对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的
影响( n= 10)
组别 剂量
( g 生药 / kg)
肿胀度
( m g)
肿胀抑制率
%
空白对照 -  14. 20±3. 77 -
药流宫血安 8. 6 10. 50±2. 51* 26. 06
17. 2 8. 90±2. 33* * 37. 32
34. 4 8. 80±3. 46* * 38. 03
消炎痛 10. 0 4. 50±2. 84* * 68. 31
  与空白对照组相比: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
固定以防脱落。取手术成功大鼠 50只, 随机分为 5
组, 每组 10只,术后 2 h 开始 ig 给药,分组及剂量同
2. 5. 1, 连续 5 d,阳性对照连续给药 3 d,于末次给药
后 1 h 乙醚麻醉处死动物, 取出两侧子宫称重, 以两
侧子宫重量差为肿胀度值, 计算各给药组的肿胀抑制
率, 见表9。药流宫血安17. 2 g 生药 / kg 以上剂量对
异物埋置致大鼠子宫炎症有明显的抑制作用。
表 9 药流宫血安对异物埋置致大鼠子宫炎症
的影响( n= 10)
组别 剂量
( g 生药/ k g)
肿胀度
(m g)
肿胀抑制率
%
空白对照 - 0. 055±0. 018 -
药流宫血安 8. 6 0. 042±0. 026 23. 18
17. 2 0. 033±0. 017* 40. 33
34. 4 0. 028±0. 008* * 48. 36
消炎痛 10. 0 0. 033±0. 022* * 40. 51
  与空白对照组相比: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
2. 6 药流宫血安的镇痛作用: 对 ip 醋酸致小鼠扭
体反应的影响[ 2]。取健康小鼠 50只, 雌雄各半, 分组
及给药剂量同2. 5. 1,连续 5 d,阳性对照连续给药3
d, 于末次给药后 60 m in, ip 0. 6%醋酸溶液 0. 4
mL, 注射 5 min 后开始计时,观察15 min 内各组动
物产生扭体反应的次数,结果见表 10。
表 10 药流宫血安对小鼠疼痛作用的影响( x±s)
分组 剂量
( g 生药/k g)
动物数
(只)
扭体次数
(次)
空白对照 - 10   35. 7±4. 99
药流宫血安 8. 6 10 30. 0±5. 42*
17. 2 10 28. 6±6. 50*
34. 4 10 25. 0±6. 65* *
消炎痛 10. 0 10 13. 3±9. 07* *
  与空白对照组相比: * P < 0. 05 * * P< 0. 01
3 讨论
药流宫血安 ig 给药,可明显缩短小鼠出血时间
并减少药物流产后小鼠子宫出血量, 其作用主要通
过收缩子宫平滑肌, 同时表现轻微类雌激素样作用,
使子宫内膜区动、静脉收缩,肌层致密、增厚, 从而减
少子宫出血,该药还具有镇痛作用及抗炎作用,可明
显抑制大鼠异物埋置所致子宫炎症。以上结果为该
药用于临床治疗月经过多及药物流产后子宫出血过
多等症提供了可靠的依据。
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1 资料与方法
·630· 中草药 Chinese T radit ion al and Herbal Dr ugs 2001年第 32卷第 7期
 收稿日期: 2000-12-08作者简介:赵艳秋( 1965-) ,女,籍贯郑州,毕业于中山医科大学医学系,获医学学士学位,副主任医师,研究方向为实体瘤的化疗,特别是肺癌的治疗,擅长中西医结合治疗恶性肿瘤。