全 文 ：力较有丝分裂原 ConA明显减弱 ,提示 HAPS和
APS均有有丝分裂原样作用。
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菟丝子黄酮对应激大鼠卵巢内分泌的影响
王建红 ,王敏璋 ,伍庆华 ,闵建新 ,陈晓凡 ,欧阳栋
(江西中医学院 ,江西 南昌　 330006)
摘　要: 目的　观察菟丝子黄酮对心理应激引起卵巢内分泌功能降低的调节作用。方法　采用声 -光 -电复合应激刺
激制造大鼠卵巢内分泌功能降低模型 ,观察菟丝子黄酮对模型大鼠血清 E2 , P水平 ,肾上腺抗坏血酸含量以及垂
体、卵巢、子宫重量的影响。 结果　菟丝子黄酮明显提高模型大鼠血清 E2 , P水平 ,增加垂体、卵巢、子宫的重量 ,但
对肾上腺抗坏血酸含量没有明显的影响。 结论　菟丝子黄酮能够明显改善卵巢内分泌功能。
关键词: 菟丝子黄酮 ;卵巢内分泌 ;心理应激
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 12 1099 03
Effects of flavonoids fromCuscuta chinens is on ovarian endocrine
in female rats exposed to psychologic stress
WANG Jian-hong , W ANG Min-zhang , WU Qing-hua,
M IN Jian-xin, CHEN Xiao-fan, OU YANG Dong
( Jiangx i Co lleg e of TCM , Nanchang 330006, China)
Abstract: Object　 To observ e the effects of the f lav onoids ex t racted f rom Cuscuta chinensis Lam.
( FC) on the ovarian endocrine functions in female ra ts expo sed to psycho logic st ress. Methods　 Sound,
ligh t and elect ricity w ere combined into a st ressful stimulus to induce dysfunction on ovarian endocrine
functions in female rats; to observe the effects o f FC on the ovarian endocrine functions in fema le rats ex-
posed to psycholo gic st ress, by determining the changes of serum E2 , P and asco rbic acid lev els in adrenal
g land, and by w eighing the pi tui taries, ova ries and uteruses. Results　 FC increased the serum E2 , P and
the w eigh t of pitui taries, ov aries and uteruses obviously , but did no t increase asco rbic acid lev els in a-
drenal g land in female rats expo sed to psycho logic st ress. Conclusion　 FC improves the ovarian endocrine
functions in fema le rats.
Key words: flavonoids of Cuscuta chinensis Lam. ( FC) ; ov arian endocrine; psychologic st ress
　　菟丝子是旋花科植物 Cuscuta chinensis Lam.
的成熟种子 ,为温补肾阳的要药 ,在中医临床上应用
广泛 ,尤其在治疗生殖内分泌失调类疾病方面 [1 ]。菟
丝子主要成分为黄酮类化合物 [2 ] ,本实验研究了菟
丝子总黄酮对心理应激大鼠卵巢内分泌的调节
作用。
1　材料
1. 1　药物: 菟丝子经本院中药鉴定教研室鉴定为
·1099·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2002年第 33卷第 12期
收稿日期: 2002-05-05基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 39960026) ;江西省卫生厅资助项目 ( 2000A21)作者简介:王建红 ( 1963-) ,女 ,江西南昌人 ,江西中医学院基础部副教授 ,现为生理教研室主任 ,硕士生导师 ,主要从事中药对人类生殖内分泌功能调控方面研究工作。 Tel: ( 0791) 6836406　 E-mai l: w ang jh 69@ hotmai l. com
* 江西中医学院 2000级研究生
C . chinensis Lam. 的成熟种子 ,经溶剂提取 ,聚酰
胺柱分离得总黄酮提取物 ,聚酰胺薄层析表明含有
槲皮素、金丝桃苷、紫云英苷和槲皮素-3-O-β-半乳
糖 -7-O-β -葡萄糖 4个组分 ,与文献报道一致 [2 ] ;以
芦丁为对照品 ,比色法测定总黄酮含量在 40%～
45% 之间。实验中配成浓度为 10和 5 mg /mL悬混
液 (相当于生药 2和 1 g )。
1. 2　主要试剂与仪器: E2 (雌二醇 )、 P (孕酮 ) 放免
药盒由中美合资天津九鼎医学生物工程有限公司提
供 , FJ-2008Pγ放射免疫计数器 (国营 262厂生
产 ) , 722分光光度计 (上海第三分析仪器厂 ) ,
AE240电子分析天平 (瑞士 Mett ler公司 ,分度值
0. 01 mg )。
1. 3　动物及分组: SD雌性大鼠 ,体重 160～ 180 g ,
由本院实验动物中心提供。 室温 ( 20± 2) ℃ ,自然
光照 ,自由进水进食。随机分为 4组:正常对照组、
模型组、大剂量菟丝子总黄酮组、小剂量菟丝子总黄
酮组。 每组 10只。
2　方法
2. 1　造模及给药方法: SD大鼠购进适应 2 d后 ,每
天检查阴道涂片观察动情周期变化 ,选择连续有 2
个正常动情周期的大鼠用于造模实验。正常对照组
不造模。模型组 ,菟丝子大、小剂量组造模。用声-光 -
电复合应激刺激大鼠 ,首先声 -光刺激同时出现 ,
10 s以后出现电击足底 60 s,此时声 -光刺激同时存
在 ,以后声-光刺激停止 ,电击足底继续维持 5 s。每
次时间 75 s,每日 3次 , 3次间隔时间不定 ,在 1 h
内完成。应激实验环境与饲养环境分开 ,应激实验环
境光照强度恒定 ,与外界隔音。声、光、电 3种刺激参
数恒定: ①声音强度 65 dB;②光照强度 500 lx ,为
闪烁状 ,频率 1次 /s ,亮时 500 lx、灭时 300 lx (环
境光照强度 ) ;③ 36V安全电压。选择大鼠动情期开
始造模 ,造模时间 20 d,造模同时给药。 模型组、正
常对照组 , ig蒸馏水 2 mL /d。菟丝子大、小剂量组
以菟丝子黄酮悬混液 ig ,剂量分别为 10和 5 mg /
m L, 2 mL /d,共 25 d,即造模 20 d后 ,停止心理应
激刺激 ,继续给药 5 d。实验期间 ,每天定时检查阴
道涂片 ,观察动情周期的变化。选择在停止给药后的
大鼠第 1个动情期处死动物 ,取血清于 - 20℃ 冰
箱保存 ,用放射免疫分析法测 E2 , P;迅速取肾上腺
称重后 ,用 2, 4-二硝基苯肼比色法 [3 ]测抗坏血酸含
量 ;取动物垂体、卵巢、子宫称重。
2. 2　统计学方法: 各组数据均以 x± s表示 ,组间比
较用方差分析 ,所有统计资料在 SPSS软件包上完成。
3　结果
3. 1　菟丝子黄酮对心理应激大鼠动情周期的影响:
正常组大鼠动情周期规则 , 5 d为一个周期 ,模型组
动情周期紊乱 ,主要表现为动情周期延长 ,可达 7～
8 d,尤其以间情期延长为主。 而用菟丝子黄酮组动
情周期比较规则 ,尤以高剂量组明显。
3. 2　菟丝子黄酮对心理应激大鼠血清 E2 , P的影
响:见表 1。模型组大鼠 E2水平明显降低 ,与正常对
照组比较有显著差异 ( P < 0. 01) ;菟丝子高、低剂量
组 E2水平明显高于模型组 ,有显著差异 ( P <
0. 01) ;高剂量组 E2水平明显高于低剂量组 ,有显著
差异 ( P < 0. 01)。模型组大鼠 P水平明显降低有显
著差异 ( P < 0. 01) ;菟丝子高、低剂量组 P水平明
显高于模型组 ,有显著差异 ( P < 0. 01) ;高、低剂量
组 P水平无显著差异 ( P> 0. 05)。
表 1　各组血清 E2 , P的变化 (x± s)
组　别 剂量 ( g /kg) n E2 ( ng /mL) P (pg /mL)
正常　 - 9 48. 60± 4. 95 13. 47± 1. 06
模型　 - 9 25. 89± 3. 09* * 7. 39± 0. 43* *
菟丝子 0. 1 8 43. 57± 3. 28△△ 11. 83± 0. 70△△
0. 05 9 36. 64± 2. 64△△▲▲ 10. 98± 0. 58△△
　　　与正常组比较: * * P < 0. 01; 与模型组比较: △△ P < 0. 01;
与菟丝子高剂量组比较: ▲▲ P < 0. 01
3. 3　菟丝子黄酮对心理应激大鼠肾上腺抗坏血酸
含量的影响:见表 2。模型组肾上腺抗坏血酸含量明
显降低 ,与正常对照组比较有显著差异 ( P < 0. 05) ;
菟丝子高、低剂量组肾上腺抗坏血酸含量与模型组
比较无显著差异 ( P> 0. 05)。
表 2　各组肾上腺抗坏血酸含量变化 (x± s)
组　别 剂量 ( g /k g) n 抗坏血酸 (μg /100 mg组织 )
正常　 - 9 306. 45± 54. 62
模型　 - 9 226. 31± 71. 33*
菟丝子 0. 1 8 257. 18± 78. 97
0. 05 9 246. 43± 98. 67
　　与正常组比较: * P < 0. 05
3. 4　菟丝子黄酮对心理应激大鼠垂体、卵巢、子宫
重量的影响:见表 3。 模型组大鼠垂体重量明显降
低 ,与正常对照组比较有显著差异 ( P < 0. 01) ;菟丝
子高、低剂量组垂体重量明显高于模型组 ,有显著差
异 (P < 0. 01)。模型组大鼠卵巢重量明显降低 ,与正
常对照组比较有显著差异 ( P < 0. 05) ;高剂量组卵
巢重量高于模型组 ,有显著差异 (P < 0. 05) ;但低剂
量组卵巢重量与模型组相比无显著差异 ( P>
0. 05)。模型组大鼠子宫重量明显降低 ,与正常对照
组比较有显著差异 ( P < 0. 01) ;高剂量组子宫重量
明显高于模型组 ,有显著差异 ( P < 0. 01) ;低剂量组
·1100· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2002年第 33卷第 12期
子宫重量与模型组无显著差异 ( P> 0. 05) ;高、低剂
量组子宫重量有显著差异 ( P < 0. 05)。
表 3　各组垂体、卵巢与子宫重量 (x± s ) mg /100g体重
组　别 剂量
( g /kg )
n 垂　体　 卵　巢 子　宫
正常　 - 9 3. 12± 0. 63 36. 56± 8. 32 266. 03±52. 65
模型　 - 9 1. 35± 0. 35* * 26. 29± 2. 37* 191. 02±30. 63* *
菟丝子 0. 1 8 3. 00± 0. 70△△ 32. 95± 4. 19△ 274. 45±35. 46△△
0. 05 9 2. 94± 0. 73△△ 29. 72± 5. 24 218. 61±55. 45▲
　　　与正常组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01; 与模型组比较:
△ P < 0. 05　△△ P < 0. 01; 与菟丝子高剂量组比较: ▲ P < 0. 05
4　讨论
　　中医认为卵巢功能降低与“肾”有密切关系 ,强
调肾虚是该病的根本原因 ,治疗上多以补肾为主。现
代中西医结合基础研究表明 ,“肾”与下丘脑-垂体 -
卵巢轴、与生殖内分泌相关 ;而应激是指机体在外界
环境的不利因素或有害因素刺激下 ,机体出现神经
内分泌和免疫系统等的综合应激状态 ,长期慢性应
激可引起疾病 ,心理应激可引起生殖内分泌的改
变 [4, 5 ] ,继而引发诸多妇科内分泌疾病 ,如闭经、月经
紊乱、不孕症、经前期综合症、无排卵、卵巢早衰等。
菟丝子的生殖内分泌调节作用已经有较多研
究 ,对下丘脑 -垂体 -性腺轴功能有多方面的作用 [6 ] ;
菟丝子黄酮可明显增加幼年雄鼠睾丸及附睾重
量 [7 ] ;并发现其本身具有类雌激素样活性 [6 ] ;研究表
明 ,菟丝子黄酮对正常雌性和雄性大鼠生殖内分泌
都有作用 [8 ]。本文根据巴甫洛夫条件反射理论 ,在常
用心理应激刺激方法 [9, 10 ]上改进 ,利用声 -光 -电复合
应激刺激方法 ,其中声 -光作为复合条件信号刺激 ,
电击足底为非条件刺激 ,产生条件反射性反应 ,即心
理应激反应。随应激刺激时间延长 ,大鼠卵巢内分泌
功能降低 ,表现为动情周期紊乱或延长 ,血清 E2 , P
水平降低 ,动情期的垂体、卵巢、子宫重量变轻 ,而菟
丝子黄酮对心理应激造成的卵巢内分泌功能降低有
明显改善作用 ,如动情周期变得比较规则 ,血清 E2 ,
P水平明显升高 ,动情期的垂体、卵巢、子宫重量均
有不同程度增加 ,且呈药效与剂量的平行关系 ,即剂
量依赖性。
肾上腺抗坏血酸含量与肾上腺皮质功能活跃程
度、合成释放肾上腺皮质激素密切相关 ,是反映肾上
腺皮质功能的经典指标。 心理应激模型大鼠肾上腺
抗坏血酸含量降低 ,表明此时肾上腺功能活跃 ,肾上
腺皮质激素合成增加 ,但用菟丝子黄酮后 ,肾上腺抗
坏血酸含量没有明显变化 ,提示补肾中药菟丝子黄
酮的作用主要表现在对卵巢内分泌功能改善上 ,如
果配合疏肝中药使用 ,可能出现更加理想的调节效
果 ,其机制有待深入研究。
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　　 (上接第 1073页 )
然强 ,但是暂时还没有建立标准图谱库 ,没有对照
品 ,解谱困难 ;气相色谱-质谱有标准图谱库 ,计算机
检索方便准确 ,完成本工作是最好的方法。
2. 5　从分析结果来看 ,超临界 CO2流体萃取与汽
油提取的知母总皂苷元组分与含量具有一致性 ,提
示可用环保的超临界 CO2流体萃取法替代传统的
汽油提取法。
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·1101·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2002年第 33卷第 12期