全 文 ：中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月·1663·
炮制20h的地黄比较，差异是832am-1峰逐渐变
弱且高波段移至836cm～，820cm_1峰明显增，770
855．0 800 750730
波数／Cm。
图3熟地黄不同炮制时间的二阶导数谱
Fig．3SecondderivativespectraofPreparedRa ix
Rehmanniaeproc ssedfordifferenttimes
cm_1峰减弱并高波段移至778cm～，并与819cm叫
峰、800cm_1峰一并成强度相当的一组三强峰。炖制
20h与炖制60h的样品相比，主要是778cm。峰
逐渐出现771cm_1一特征化的小肩峰。以此，可以
用地黄炖制20h来量化(数字化)熟地黄传统的经
验标准：“黑如漆，甜如饴”；以加黄酒未炖与炮制60
h分别来量化传统的经验炮制理论：“不及则功效难
求，太过则气味反失”。
3结论
傅立叶红外光谱二阶导数谱法在地黄及其不同
提取部位、炮制品的鉴定应用中具有明显的专属性
和特征性。综合以上方法学考察和实例分析，可以看
出，红外光谱二阶导数谱在中药复杂混合物体系中
应用的优势明显，凸现其专属性、特征性强的特点必
将在中药的药源开发、品质优劣、真伪鉴别及制剂工
艺流程的质量控制等发挥重要的作用。
Reference：
Eli SunSQ，ZhouQ，Qingz．7’如Two—DimensionalRelez，ant
InfraredSpectrum∥ChineseMateriaMedica(中药二维相关
红外光谱鉴定图集)[M]．Beijing：ChemicalIndustryPress，
?003．
大孔吸附树脂分离纯化菟丝子黄酮的研究
吴春，陈林林
(哈尔滨商业大学化学中心，黑龙江哈尔滨 150076)
菟丝子别名黄丝、黄藤子、豆寄生，为旋花科菟
丝子属植物菟丝子CuscutachinensisLam．的干燥
成熟种子，含有黄酮等多种生物活性物质。菟丝子黄
酮的提取方法通常采用有机溶剂萃取法，但所得粗
提物黄酮的量较低。为提高黄酮类化合物的质量分
数，本实验选择大孔吸附树脂对菟丝子黄酮进行纯
化，为吸附树脂分离纯化菟丝子中的黄酮类化合物
提供实验依据。
1仪器与材料
SHZ—A水浴恒温振荡器，上海跃进医疗器械
厂：瑞士普利塞斯XT4200C型天平；721分光光度
计，上海精密科学仪器有限公司。
菟丝子黄酮由南方小粒菟丝子提取所得[1]。
AB一8、D一101、H一103、NKA一9、S一8、X一5型大孔
吸附树脂，南开大学化工厂；芦丁，中国医药(集团)
上海化学试剂公司；其他试剂均为分析纯试剂。
2方法与结果
2．1菟丝子总黄酮的测定
2．1．1标准曲线的绘制：准确称取芦丁对照品(105
C干燥至恒重)适量于100mI。烧杯中，用30％乙醇
溶液溶解后转移至250mI。量瓶中，加30％乙醇至
刻度，配成0．3176mg／mL的对照品溶液。
准确吸取对照品溶液1．00、2．oo、4．00、6．00、
8．oo、10．00mL分别置于25mL量瓶中。用30％的
乙醇补充至12．5mL，加入1mLNaNO。(5％)摇匀，
放置5min后加入lmLAl(N03)3(10％)，6min后
再加入5mI。1mol／LNaOH溶液，混匀，用30％乙
醇稀释至刻度。10min后以试剂空白为参比，于500
收稿日期：2006—02—03
基金项目：黑龙江省自然科学基金重点项目(ZJY04—08)
作者简介：吴春(1962一)，女，天津人，教授，硕士生导师，1988年获东北师范大学化学系理学硕士学位，先后主持黑龙江省自然科学
基金等多项，发表论文40余篇，主要从事天然产物研究与开发。Tel：(0451)84852147E—mail：wuchun2005@sohu．corn
万方数据
·1664· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷笫11期2006年11月
am处测定吸光度值，利用最小二乘法绘制标准曲线，
得芦丁质量浓度(ymg／mL)对吸光度(A)的回归方
程Y一0．1153A一0．0018，r一0．9998。
2．1．2测定：取1mL提取液于25mL量瓶中，其
余步骤与标准曲线的绘制相同，测定吸光度值，通过
标准曲线方程计算总黄酮的质量浓度。
2．2静态吸附和解吸试验
2．2．1静态吸附方法：准确称取经预处理的湿树脂
1．5g，置于磨口锥形瓶中，加入30mI。菟丝子黄酮
粗提取液，盖紧瓶塞，于室温下连续振荡12h，转速
为110r／min，充分吸附后滤过，测定滤液中剩余黄
酮的质量浓度，计算吸附率。
吸附率一[(原液质量浓度×30mI，一滤液质量浓度×
滤液体积)／原液质量浓度×30ml。]×100％
2。2，2静态解吸方法：向滤去吸附液并达到吸附平
衡的树脂中加入30mI。一定体积分数的乙醇，室温
下连续振荡，充分解吸后滤过，测定滤液中黄酮质量
浓度，计算解吸率。解吸率亍[浸提液质量浓度×浸
提液体积／(原液质量浓度×30mL一滤液质量浓
度×滤液体积)]×100％
2．2．3大孑L吸附树脂的筛选：将经过预处理的树脂
AB一8、D一101、H一103、NKA一9、S一8、X一5型分别按照
静态吸附、解吸步骤进行试验，结果见表1。可见，
NKA一9的吸附率最低，原因是黄酮具有多酚结构和
糖苷键，呈弱极性，有利于弱极性和极性树脂的吸
附，而NKA一9的极性过强，因此不利于吸附。H一
103、S一8的吸附、解吸效果好于其他几种树脂，s一8
的孔容较小，比表面积较大，因而吸附率较高，但由
于其极性稍强而不易解吸，H一103的吸附率虽次于
S一8，但解吸时只有少量滞留于树脂中，大部分能被
洗脱下来。综合考虑，应选择H一103型大孔吸附树
脂进行纯化试验。
表I 吸附树脂对菟丝子中总黄酮吸附效果的影响
TableI AdsorptioneffectsofmacroporousresintotalflavonoidsofSemenCuscutae
树脂类型 吸附率／％ 解吸率／％ 树脂类型 吸附率／％ 解吸率／％
AB一8 74．630 75．814 NKA9 71。862 78．21l
D—10l 75．446 80．484 S8 87．314 80．262
H一103 76．908 97．364 X一5 75．024 77．720
2．2．4吸附液pH值的确定：由于吸附过程中吸附
质以分子状态被吸附，因此吸附质要保持分子状态
才会达到较好的效果。黄酮类化合物为多羟基酚类，
呈弱酸性，所以试验选择酸性或弱酸性pH2．0、
3．0、4．0、5．0、6．0的缓冲溶液，利用H一103型大孑L
树脂对菟丝子黄酮进行静态吸附确定吸附液的pH
值，结果见图1。可见，当提取液酸性过强，pH值为
2．0时，虽吸附率较高，但在吸附过程中已有其他物
质生成，吸附后提取液颜色变化明显。随着pH值增
大，吸附率增大，当pH值达到4．0时为最高点，此
时，黄酮类化合物保持分子状态，满足形成氢键的条
件。继续增加pH值，吸附率有所下降，因此吸附液
的pH值应选择为4．0。
85
75
孚
篓os
餐
55
2．0 30 4．0 5 n 6．0
DH值
图1 pH值对吸附效果的影响
Fig．1EffectsofpHvalueonadsorption
2．2．5洗脱剂乙醇体积分数的确定：黄酮类化合物
易溶于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂中，但由于甲醇
和丙酮的毒性和挥发性而选择乙醇作为洗脱剂。实
验选用体积分数为10％～80％乙醇溶液对吸附饱
和的吸附液按照解吸步骤进行解吸，测定解吸率，确
定洗脱剂乙醇的体积分数。结果见图2。可见，乙醇
体积分数为60％时解吸率最高，即解吸液中的黄酮
的量最高，表明此体积分数的乙醇极性与提取液中
黄酮的极性相近，易于洗脱。
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图2体积分数对解吸效果的影响
Fig．2Effectsofalcoholc ncentrationondesorption
2．3动态吸附和解吸试验：将处理好的树脂湿法装
入树脂柱(60cm×2cm)后，加入一定量的菟丝子黄
酮粗提液，调节流速，吸附一定时间后，测定流出液
的黄酮的质量浓度，以确定吸附率。再用水洗柱，以
除去多糖类等杂质，最后加入一定体积分数的乙醇
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月·1665·
作为洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液，测定黄酮的质量 做泄漏曲线，结果见表2。可见，体只流量为0．5
浓度，以确定解吸率。 mI。／rain时泄漏点出现较晚，当体积流量大于0．5
2．3．1动态吸附流速的确定：将H一103大孔吸附mI。／rain时，泄漏点均提前。原因是体积流量过快，
树脂湿法装柱后，加入pH4的菟丝子黄酮提取液， 吸附液还没有与树脂充分吸附就已随吸附液流出，
以每流出5mI。吸附液测定总黄酮的质量浓度。以 而体积流量过慢耗时，又会造成经济上的浪费，因此
流出液体积为横坐标，流出液总黄酮的量为纵坐标 本实验选择吸附液的体积流量为0．5mL／min。
衰2吸附液体积流量吸附效果的影响
Table2 Effectsofflowrateabsorbingsolutiononadsorption
体积流量／(nil·min-，—iii——了了i_——两ii——i冀兰字望笔导熹詈塑学鼍睾兰二竺笔i枭_—1了if——石ii面
2．3．2最佳吸附时间的确定：样品上柱后在柱中的
静置时间与样品和柱材料的吸附作用有关。将pH4
的提取液以0．5mI，／min加入到树脂柱中，按照不
同的静置时间，测定流出液的总黄酮的质量浓度，结
果见图3。可见，静置时间为10～50rain时吸附曲
线缓慢上升，静置时间在50～60rain时吸附率增大
的幅度较大，而后即趋势平缓，因此静置时间60
rain为吸附最佳点。
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祷
莲
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图3 吸附时间及吸附效果的影响
Fig．3Effectsofabsorbingt meonadsorption
2．3．3最佳上柱量的确定：30g湿树脂装柱后，分
别取与树脂比例为2、4、6、8、10、12(mI．／g)的吸附
液进行动态吸附，测定流出液的黄酮的质量浓度，确
定二者的最佳配比，结果见图4。可见，随着上柱液
的增加，吸附率下降。在二者比例为2～8时，下降趋
势缓慢；继续增大比例，吸附率下降幅度增大，此时
已超过了树脂的饱和吸附量，已有部分黄酮成分损
失。而上柱量过少，将使纯化周期过长，因此从经济
因素考虑，吸附液量与树脂的最佳比例为8：1
(mL／g)。
2．3．4洗脱剂用量的确定：精确吸取与树脂比例为
8的提取液，按0．5mI。／min的流速上柱，静置60
rain后，先用水洗脱，再用与树脂量比为5、6、7、8、
9、10、11(mI。／g)的60％乙醇解吸，测定流出液总黄
酮的质量浓度，计算解吸率，确定洗脱剂的最佳用
量，结果见图5。可见，随着洗脱剂用量增大，解吸率
提高，但当洗脱剂量大于8时解吸率的增大幅度已
不明显，从节省溶剂的角度考虑，选择洗脱剂乙醇的
量与树脂比例为8：1(mI。／g)。
∞
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嫠70
60
2 4 6 S 10 12
吸|；f_I液堪与树脂比例／(mL·g-i)
圈4吸附液量与树脂比对吸附效果的影响
Fig．4Effectsofratiobetweenabsorbing
solutionandresino adsorption
图5洗脱液■对解吸效果的影响
Fig．5Effectsofeluantamoutondesorption
2．3．5解吸时间的确定：在吸附饱和的树脂柱中加
入8倍于树脂量的60％乙醇，测定静置不同时间的
洗脱液黄酮的质量浓度，确定解吸时间，结果见图
6。可见，解吸40rain后黄酮的累计量已无明显变
化，说明此时已基本解吸完全，故确定解吸时间为
40min。
2．4工艺验证：取30gH一103型大孑L树脂，按质量
体积比为l：8的比例精密吸取pH3～4的提取液，
万方数据
·1666· 中草稿 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月
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图6解吸时间对解吸效果的影响
Fig．6Effectsofelutingtimesondesorption
以吸附流速为0．5mI。／rein上样，吸附60rain后，
先用水洗脱，再用体积质量比为树脂量8倍的60％
乙醇解吸40rain，收集洗脱液，干燥，即为总黄酮，
质量分数为88％，洗脱率91％。
3 结论
H一103型大孔树脂对菟丝子黄酮具有较强的吸
附能力，经该树脂吸附，乙醇洗脱，可将粗提物黄酮
的含量提高到88％，洗脱率高于90％，具有工艺简
单，耗费有机溶剂少，成本低等特点，验证结果表明，
利用H一103型大孔树脂富集菟丝子黄酮，方法操作
简便，可行，为菟丝子黄酮类物质的分离和鉴定提供
了基础。
Reference：
[1]ChenI。I。，WuC，]iangYQ．StudiesOilextracting
procedureoftotalflavonoidsfromSemenCuscutaeEJ3．，，
HarbinUinvCommer(哈尔滨商业大学学报)，2004，20(6)：
644—647．
大孔吸附树脂纯化秦艽中龙胆苦苷
蔺建新“2，李茂星扯，张汝学2，贾正平2，高德玉1，许永全1
(1．武威市凉州医院，甘肃武威733000；2．兰州军区总医院药材科，甘肃兰州730050)
秦艽是龙胆科龙胆属草本植物秦艽Gentiana
macrophyllaPa l．、麻花秦艽G．straminea
Maxim．、粗茎秦艽G．crassicaulisDuthieexBurk．
或小秦艽G．dahuricaF sch．的干燥根，主产甘肃、
青海等地，为重要传统中药，具有祛风湿、止痹痛、清
湿热的功效。秦艽中的化学成分，早期研究认为主要
含生物碱类成分，但近年的化学分析结果表明，秦艽
中含有大量龙胆苦苷(gentiopicroside)等裂环烯醚
萜苷，为其苦味成分[1]。大孔吸附树脂是近年来发展
起来的一类有机高聚物吸附剂，其具有较好的吸附
性能，吸附作用同表面吸附、表面电性或形成氢键等
有关。本实验以秦艽中的主要成分龙胆苦苷和总固
物为指标，考察了HPD—100大孔吸附树脂富集纯化
秦艽中龙胆苦苷的工艺。
l仪器与材料
I。C一6A高效液相色谱仪(日本岛津)，SPD一
6A紫外检测器(日本岛津)，ANASTAS色谱工作
站(天津)；HPD一100型大孔吸附树脂(河北沧州宝
恩化工有限公司)；龙胆苦苷对照品(中国药品生物
制品检定所，批号：110770—200308)；甲醇为色谱纯，
水为重蒸馏水，乙醇为药用级。秦艽购自兰州市黄河
中药市场，经兰州医学院赵汝能教授鉴定为秦艽G．
m crophyllaPa ．的干燥根。
2方法和结果
2．1 龙胆苦苷的测定[2]：取秦艽提取液及上柱后
各部分的于燥物适量，用乙醇超声溶解并定容至25
mI。，作为供试品溶液。再取龙胆苦苷对照品适量，精
密称定，加乙醇使成0．5mg／mI。溶液，作为对照品
溶液。采用高效液相色谱法进行测定。色谱柱：C。。
(150mm×4．6mm，5m)；流动相：甲醇一水(3：
7)；检测波长：270nm；柱温：25C；体积流量：1
mL／min；进样量：20扯I．。
2．2大孑L树脂的处理：取HPD—100型大孔吸附树
脂适量，丙酮加热回流洗脱，洗脱至洗脱液蒸干后无
残留物。以乙醇湿法装柱，继续用乙醇冲柱，不时检
查流出液，至与水混合不呈白色浑浊为止。然后以大
量的蒸馏水洗去乙醇，备用。
2．3工艺参数考察
2．3．1秦艽药材的提取：取秦艽药材50g，粉碎成粗
粉，用8～10倍量70％乙醇加热回流提取2次，每次
1．5h 提取液滤过，合并滤液，低温减压回收乙醇用蒸
馏水定容至1000mI。，备用(含生药0．05g／mL)。
收稿日期：2006—03—13
作者简介：蔺建新(1978)，男，甘肃武威人，药师主要研究方向为中药新药研究与开发。Tel：(0935)2232946
*通讯作者李茂星Tel：(0931)8975884
万方数据
大孔吸附树脂分离纯化菟丝子黄酮的研究
作者： 吴春， 陈林林
作者单位： 哈尔滨商业大学,化学中心,黑龙江,哈尔滨,150076
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(11)
被引用次数： 3次

参考文献(1条)
1.Chen L L;Wu C;Jiang Y Q Studies on extracting procedure of total flavonoids from Semen Cuscutae[期
刊论文]-哈尔滨商业大学学报(自然科学版) 2004(06)

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2.王桃云.扶教龙.秦粉菊.钱玮.邱业先.陈鹏 大孔吸附树脂分离纯化大豆荚壳异黄酮的研究[期刊论文]-中国粮油
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3.刘俊苹.睢玉祥.闫桂琴 聚酰胺分离纯化翅果油树叶黄酮工艺研究[期刊论文]-西北农业学报 2012(1)


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