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Studies on the Peroxidase and Acid Phosphatase in Thunberg Fritillary (Fritillaria thunbergii)During the Process of Relieving Dormancy at Low Temperature

浙贝母低温解除休眠过程中过氧化物酶和酸性磷酸酶的研究



全 文 :。 药材 ·
浙贝母低温解除休眠过程中过氧
化物酶和酸性磷酸酶的研究
中国医学科学院
中国协和 医科大学药用植物研究所 (北京
10 0 0 94 )高文远 辛 李志亮 肖培根
摘 要 研究了浙贝母低温解除休眠过程中过氧化物酶和酸性磷酸酶的活性变化 。 结果表明 ,鳞
片近轴面表皮的过氧化物酶活性大大高于鳞片内部贮备组织的过氧化物酶活性 ,而和芽的酶活性
接近 。 鳞片内部贮备组织的酸性磷酶酶活性在低温解除休眠的后期快速上升 。
关键词 浙贝母 休眠 过氧化物酶 酸性磷酸酶
浙贝母 F irt il la ir a ht un be gr i M i q . 是一
种常用中草药 ,其鳞茎具有止咳 、 化痰等多种
功效 。浙 贝母是一种早春性植物 , 一年中地上
部分的生活时间只有 2一 3个月 , 初夏气温稍
高时便进入了休眠状态 。 用低温手段处理处
于休眠状态的鳞茎 ,可以大大缩短其休眠时
间 , 使其在气温适宜的秋季再生长一季 ,达到
一年两季栽培的目的 ,从而大大缩短商品浙
贝的采收时间〔 , 〕 。 研究浙贝母低温解除休眠
过程中的酶变化 , 可能深入了解浙 贝母低温
解除休眠的机理 ,完善一年两季栽培理论 。
1 材料与方法
1
.
1 实验材料 : 取自本所实验地 ,待浙 贝母
地下鳞茎进行休眠状态后 ,选取大小均 匀无
病残的鳞茎 , 放于 8 ℃一 10 ℃条件下进行低
温处理 ,定期取样 ,进行过氧化物酶和酸性磷
酸酶的活性测定 。
1
.
2 过氧化物酶的活性测定 : 按薛应龙等〔 2〕
的方法进行 。 样品的提取 :取材料 1 9 ,加入 5
m L 0
.
1 m o l / L 的 T r i s 一 H C I 缓冲液 ( p H s .
5 )
, 于研钵中加入少许石英砂后充分研磨 , 8
o o o r /m i n
,
o ℃一 4 ’ C条件下离心 1 5 m i n , 取
上清液备用 。
1
.
3 酸性磷酸酶的活性测定 : 测试管中加入
0
.
1 m L 样品提取液 ,对照管中加入 0 . 1 m L
提取缓冲液 ,然后各加入 0 . 9 m L 水 。 各试管
中加入 1 m L 醋酸缓冲液 ( p H S . 0) 和对硝基
酚磷酸钠溶液 0 . 1 m L , 充分混匀后 ,于 30 ℃
恒温水浴中保温 2 0 m i n , 时而摇动 , 1 0 m i n
后 ,各试管中加入 1 m L 0 . 5 m o l / L N a O H 以
终止反应 , 在 7 5 1一 G W 型分光光度计上 40 0
n m 下 比色 。 酶活性的大小用每克材料每分
钟水解底物的微摩尔数来表示 。样品的提取 :
取材料 1 9 , 加入 5 m L 0 . 0 5 m o l / L 的 T r i s -
H C I (含 2 m m o l / L E D T A ) p H 7 . 5 的提取缓
冲液和 少许石 英砂 , 充分研磨后 , 8 o 0 r /
im
n o ℃一 4℃条件下离心 15 im n , 取上清液
备用 。
2 结果与分析
2
.
1 过氧化物酶的活性变化 : 图 1 为芽 、 鳞
片近轴面表皮和鳞片内部贮备组织 3 个部位
在低温解除休眠过程中过氧化物酶的活性变
化 。 可以看出 ,不仅芽的酶活性有变化 ,鳞片
两个部位的酶活性也有变化 , 说明低温解除
. A dd r e s s
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高文远 男 , 19 94一 0 7 毕业于中国协和 医科大学生药学专业 , 获理学博士学位 。 中国医学科学院 、 中国协和医科大学药用植物研究所工作 , 现任 “ 国家中医药管理局 中药资源利用与保护研究中心” 生物技术组组长 , 副研究员 。 研究方向为药用植物生物化学和分子生物学 , 已在国内外学术刊物上发表论文 20 多篇 。
《中草药 》 19 97 年第 28 卷第 7 期 · 4 2 3 .
浙贝母休眠的过程不单单是芽的活动 , 也离
不开鳞片的参与 。还可以看出 ,鳞片近轴面表
皮的过氧化物酶活性远远大于鳞片内部贮备
组织 , 和芽的酶活性接近 。说明芽和鳞片近轴
面表皮的代谢相对来说比较活跃 ,而鳞片内
部贮备组织的代谢较不活跃 。 另外 , 3 个部位
酶活性的变化曲线尽管幅度不同 ,但变化规
律相似 。 说明芽和鳞片过氧化物酶的代谢有
很强的内在相关性 。 过氧化物酶是植物体内
的保护酶之一 ,能清除植物体内活性氧和其
他过氧物自由基对细胞膜的伤害〔 3〕 。 从 3 条
酶活性曲线的变化趋势可以看出 ,最终酶活
性的大小趋 于和起始时一致 ,特别是鳞片两
个部位的曲线更为明显 , 显示 了过氧化物酶
维持体内平衡的作用 。
活性曲线总的看来均呈上升的趋势 。 而在 45
一 5 d 这段时期 , 芽和鳞片近轴面表皮的酶
活性开始下降 ,鳞片内部贮备组织的酶活性
则快速上升 。 酸性磷酸酶是一类专一性较低
的水解酶类 ,参与碳水化合物等多种生物大
分子的降解 , 还与磷酸盐和磷酸醋的代谢有
关 〔。 。 鳞片内部贮备组织中贮备的淀粉粒等
物质 , 是该时期各部位代谢活动营养的唯一
来源 。 鳞片内部贮备组织在低温解除休眠后
期酸性磷酸酶活性的快速上升 , 是为了降解
自身贮备的营养物质 , 供给休 眠解除后芽快
速生长的需要 。
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低温时间 t (d )
图 1 浙贝母低温解除休眠过程
中过氛化物酶的活性变化
l
一芽 2一鳞片近轴面表皮 3一鳞片内部贮备组织
2
.
2 酸性磷酸酶的活性变化 : 图 2 显示 了浙
贝母低温解除休眠过程中芽 、 鳞片近轴面表
皮和鳞片内部贮备组织 3 个部位酸性磷酸酶
的活性变化 。 在低温作用 45 d 之前这段时
期 ,各部位之间酶活性的大小相近 ,且 3 条酶
低温时间 t ( d)
图 2 浙贝母低沮解除休眠过程中
酸性麟酸陇的活性变化
1
一芽 2一鳞片近轴面表皮 3一鳞片内部贮备组织
3 讨论
过氧化物酶和酸性磷酸酶的活性变化表
明 ,在浙贝母低温解除休眠的过程中 ,不仅芽
的代谢发生了变化 , 鳞片的代谢也发生了变
化 。这些变化积累到一定程度时 ,便导致了休
眠解除的质变 。 在低温解除休眠过程中 ,芽是
生命活动的中心 ,但也离不开鳞片的参与 。芽
和鳞片不同部位过氧化物酶和酸性磷酸酶的
曲线相似的变化趋势表明芽和鳞片之间存在
着内在代谢相关性 。
.
4 2 4
.
鳞片近轴面表皮的酶活性与鳞片内部组
织酶活性不一致的现象 ,在其它生理指标的
检测以及浙贝母生长发育的其它时期也曾表
现出来 ` 5 , 6 〕 。 说明鳞片的近轴面表皮对整个鳞
茎来说非常重要 ,它在芽和鳞片的相互关系
中起着重要作用 。
参 考 文 献
李志亮 ,等 . 中草药 , 1 9 5 5 , 1 6 ( 1 ) : 1 7
薛应龙 , 等主编 . 植物生理学实验手册 . 上海 : 上海科学
技术出版社 , 1 9 8 .5 1 38
E l s t n e r E F
, e t a l
.
P l a n t p h y s i o l
,
19 8 2
,
3 3
:
7 3
1) a r l e e n A
, e t a l
.
C a n J B
o t , 19 8 9
,
6 7
;
1 1 03
高文远 ,等 . 中国中药杂志 , 1 9 9 5 , 2 0 ( 12 ) : 7 1 9
高文远 ,等 . 植物学报 , 1 9 9 5 , 3 7 ( 1 1 ) : 8 8 5
( 1 9 9 6

0 4

1 5 收稿 )
S t u d i e s o n t h e P e r o x i d as e a n d A e i d P h o s P h a t a s e i n T h u n b e r g F r i t i l l a r y
( F 而瓦Jla 而 a t h u n b e gr i ) D u r i n g t h e P r o e e s s o f R e l i e v i n g D o r m a n e y a t L o w T e m eP r a t u r e
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d u r i n g t h e p r o e e s s o f r e l ie v i n g d o r m a n e y a t l o w t e m p e r a t u r e
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R e s u lt s s h o w e d t一l a t t h e p e r o x id a s e a e t iv i t y o f
a d a x ia l e p i d e r m w e r e m u e h h i g h e r t h a n th a t o f t h e in n e r s t o r e t is s u e in th e s e a le
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T h e a e id p h o s p h a t a s e a e t iv i t y o f t h e i n n e r s t o r e t is s u e i n s e a l e i n e r e a s e d q u ie k ly a t t h e la t e s t a g e o f r e
-
l ie v i n g d o r m a n e y
.
乌药混淆品— 红茵香根的生药鉴定
陕西省汉中市药品检验所 ( 7 2 3 0 0 0)
汉中师范学院生物系
彭 强 寮
赵 桦
摘 要 对乌药的混淆品红茵香根 1 il ic “ m lan ,’e ol at “ m 进行了生药性状 、 显微和理化鉴定研究 ,
并与乌药做比较 ,为鉴别两者提供依据 。
关健词 红茵香根 乌药 性状 显微 理化鉴别
乌药为常用 中药 , 来源于樟科植物乌药
L i n d e ar a g g er g a t a ( S im s ) K o s t e r m
. 的干 燥
块根 , 药材商品通常为根的横切片 ,性温味
辛 , 能顺气止痛 、 温肾散寒 ,用于胸腹胀痛 、 气
逆喘急 、膀胧虚冷 、遗尿尿频及病气 、 痛经等
症 。 发现药材市场上有将红茵香根的横切片
混充乌药销售 。 红茵香根系木兰科植物狭叶
红茵香 lI l i c i u m l a n c e o la t u m A . C . S m i t h . 的
干燥根 ,横切片与乌药相似 ,但性温味苦 ,有
大毒 ,具祛风通络 、 散癖止痛功能 , 主治跌打
损伤 、 风湿痹痛 、 痈疽肿毒等症 〔江苏新医学
院 . 中药大辞典 (上册 ) . 上海 人 民出版社 ,
1 97 .7 1 0 1 6〕而与乌药不同 。 作者对红茵香根
进行生药鉴定 , 并与乌药比较 , 为鉴别提供依
据 。
1 药材性状
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彭 强 男 ,毕业于西北大学药用生物学专业 ,副主任药师 。 曾取得 3 项有关中药科研成果奖 , 并参加编写 了《秦巴药物志 》 , 主研生药鉴定 ,发表学术论文 20 余篇 。赵 桦 男 , 1 9 8 4 年于四川大学生物系植物学专业研究生毕业 ,理学硕士 ,副教授 。 主要从事植物形 态学 、分类学研究 。发表研究论文 20 余篇 。
《中草药》 1 9 9 7 年第 28 卷第 7 期 · 4 2 5 .