全 文 ：赤土袂荃试对异丙肾上腺素
诱发的小鼠缺血心肌的保护作用
新疆医学院药理教研室 (乌鲁木齐 8 3 0 0 5 4) 李玉琪 介
李志良
周承明
周 康
王晓雯
张克锦
摘 要 赤土获菩贰 (S m i) 为赤土获菩 S m ila 二 解a b r ￡2 R ox b . 中发现的有效成分 。 在异丙肾上腺素
诱发小鼠急性心肌缺血期 , 心肌 SO D , Se 一 G S H 一P x 活性均降低 , M D A 含量增加 , 血清 C PK 浓度升
高 , 心肌超微结构广泛而严重损伤 。 S m i 50 0 , 25 0 , 12 5 , 6 2 . sm g / k g 灌胃 , 呈剂量依赖性地保护急性
心肌缺血期 S〔)D , Se 一G S H 一Px 活性 , 降低 M D A 含量 , 减少 C PK 释放 , S m i 1 2 5m g / k g 灌 胃及
lom g / k g 腹腔注射明显减轻缺血心肌超微结构损伤 。 提示 S m i具有抗异丙肾上腺素介导的脂质过
氧化作用及对缺血心肌的保护作用 。
关镇词 赤土获荃 赤土获菩贰 异丙肾上腺素 心肌缺血 超微结构
赤土获菩贰 (s m ig la b r in , S m i)系从 赤土
获等中提取分离制得的单体二氢黄酮醇 鼠李
糖贰 , 本室曾发现赤土获菩醋酸乙酷提取物
有抗儿茶酚胺及抗动脉粥样硬化作用 〔, ·幻 , 据
张克锦教授药理 实验结果 , 临床将赤上获荃
试用于治疗冠心病心绞痛患者 , 心绞痛等症
状消失 , 心电图改善〔3〕 。本文采用异丙肾上腺
素 (l 5 0) 诱发小鼠急性心肌缺血模型 , 以普蔡
洛尔 (P ro) 为阳性对照 , 以血清肌酸磷酸激酶
(C P K )及心肌超微结构的变化为指标 , 观察
心肌损伤程度 , 研究 S m i对缺血心肌的保护
作用 。 以超氧化物歧化酶 (S O D ) , 硒谷肮甘肤
过 氧化物酶 (S e 一 g lu t a t h io n e p e r o x id a s e , S e -
G SH
一
P x) 活性及丙二醛 (MD A )含量 为间接
依据 , 观察 15 0 诱发 小鼠急性心肌缺血时氧
自由基 (o x y g e n fr e e r a d ie a l , O FR )的产生 ,
研究 Sm i的抗脂质过氧化作用 。
1 材料与方法
药 品与试剂 : S m i 由实验者提取分离制
得 。湖南湘潭产赤土获荃根茎 , 粉碎后用乙醇
回流提取 , 经溶剂粗分及柱层析等分离 ,得到
一白色针晶 , 经定性分析 , 元素分析 , 光谱分
析 , 鉴定为多取代基的二氢黄酮醇 鼠李糖贰 。
其在赤土获等中首次得到 , 命名为赤土获菩
贰 (S m i) 。 其分离和鉴定另文报道 。 150 上海
天丰制药厂生产 ; Pr o 北京制药厂生产 。
动物分组 : N IH 小鼠 1 8 只 ,体重 21 士 s
2 9
, 雌雄兼用 , 随机分为 8 组 。 a) 正常组 (38
只 ) : 生理盐水 (N S ) 0 . 05 m l/ g , 连续灌 胃 , 给
药 5d , 1 次 /d , 于第 4 天灌 胃 5h 后皮下注射
N S o
.
O4 m l/ g
, 连续 Zd ; b )缺 血 组 (4 0 只 ) :
N s o
.
o 1 5 m l/ g 灌 胃给药连续 sd , 1 次 / d , 于
第 4 天灌 胃 sh 后皮下注射 Is o 2 0 m g / k g , 连
续 Zd ; 。 )Pr o 组 (2 0 只 ) : Pr o Zo m g / k g 灌胃 ,
连续 5d , 1 次 /d , 第 4 天灌胃 5h 后 , 皮下注射
Is o Zo m g / k g
, 连续 Zd ; d )S m i组 : N S 作溶剂 ,
分别 Sm i so o m g / k g (1 9 只 ) ; 2 5 om g / k g ( 1 9
只 ) ; 1 2 5m g / k g (1 8 只 ) ; 6 2 . sm g / k g (1 6 只 )
灌 胃及 x om g / k g (1 8 只 )腹腔注射 , 连续 sd ,
1 次 / d , 于第 4 夭给药 sh 后 (lo m g / k g 组给
药 Zh 后 ) , 皮下注 射 Is o Zo m g / k g , 连续 Zd ,
于第 5 天皮下注射 150 或 N S 后 2h 摘取眼球
取血制备血清 , 供测 CPK 浓度 , 并立即取出
心脏用冰冷生理盐水冲洗 , 制备心肌匀浆 。
心肌 匀浆 的制 备 : 取 全 心 , 称重 , 加 入
p H 7
.
0 叠氮化钠磷酸缓冲液 , 在冰冷条件下
. A d d r e s s
:
L I Y u q z
,
De p
a r tm e n t o f P ha r m a eo lo g y
,
X in 一in g M e d iea l C o lle g e , W u lu m u q i
现址 : 解放军第 f一 五医院 , 新疆呼 图壁
.
4 1 8
·
研磨制成 10 %匀浆 。 实验数据用 t 检验处理 。
生化指标测定 : S O D 活性用邻苯三酚 自 2 结果
氧 化法 〔‘〕; S e 一G S H 一P x 活性 用 D T N B 直 接 2 . 1 S m i 对缺血心肌 S O D 活性的影响 : 缺
法旧 ; MD A 含量用 T B A 显色法旧 ; 以上指标 血组 心 肌 S O D 活性 与正 常组 相 比降低
用 7 21 分光光度计 (上海第三分析仪器厂 )测 29 % ; S m iso m g /k g 剂量组 SO D 活性与缺
定 ; C PK 用美国产 E nc or e 10 型生化自动分 血组相 比增 加 58 % , 并高于 正 常组 (尸 <
析仪测定 ;蛋白定量用 C B B 一S D S 法〔, 〕 。 0 . 0 5 ) , S m iz so , 1 2 5 , 6 2 . sm g / k g 组分别比缺
超 微 结 构 观察 : 正常 组 , 缺血组 , S而 血组增加 24 % , 21 % ,及 17 % 。 S mi 灌胃 4 个
1 25 m g /k g 及 lo m g /k g 组各取左心室心尖部 剂量组对 SO D 的活性呈剂量依赖性 , 且呈线
1 一 zm m 3 组织 3 块 , 按 H o ffs t e in 等方法 〔日〕 , 性关系 (r = 0 . 9 6 5 6 ) 。 Sm iz om g / k g 组 比缺血
用 L a (N O 3 )3 作 示踪 剂制作电镜标本 , 在 组 增 加 20 % , Pr 。 组 比缺 血 组 增 加 24 %
JE M
一
10 0c x 型透射电镜下观察心肌细胞膜 (表 ) 。
通透性及超微结构的变化 。 2 . 2 S mi 对缺血心肌 Se 一G S H 一Px 活性的影
表 Smi 对异丙肾上膝素诱发小吸缺血心肌 SO D , Se 一G S H 一Px 活性 ,
M D A 含t 和血漪 CPK 浓度的影响
组别 剂量
(m g / k g )
以) D
(u / m g 蛋白 )
反一G SH 一P x
(u / m g 蛋 白 )
M D A
(m m o l/ m g 蛋白 )
C PK
(u / L )
对照 38
1
5 0 4 0
Pr o 2 0 2 0
S m i 5 0 0 19
S m i 2 5 0 1 9
S m i 1 2 5 1 8
S m l 6 2
.
5 1 6
S m i 10 1 8
6
.
7 6士 1 . 1 2 二
4
.
8 3士 1 . 2 6
5
.
9 9士 0 . 9 7 二
7
.
6 1士 1 . 6 6 ’ .
5
.
9 9士 0 . 94 二
5
.
8 3士 0 . 6 6 二
5
.
6 4士 1 . 1 ] ,
5
.
7 9士 0 . 58 ’ .
1
.
5 7士 0 . 2 9 二
1
.
1 2士 0 . 2 1
1
.
5 5士 0 . 2 9 . ’
1
.
7 6士 0 . 4 二
1
.
4 9士 0 . 3 5 . “
1
.
4 3士 0 . 3 2 ’ .
1
.
3 4士 0 . 2 3 . ’
1
.
3 8士 0 . 2 2 二
0
.
2 1士 0 . 0 2 “ .
0
.
2 8士 0 . 0 6
0
.
2 2士 0 . 0 8 二
0
.
2 0士 0 . 0 4 二
0
.
2 1士 0 . 0 6 二
0
.
2 2士 0 . 5 0 二
0
.
2 3士 0 . 0 7 “ .
0
.
2 3士 0 . 0 3 二
3 9 5士 1 1 7 二
5 6 5 士 1 2 6
4 2 8 士 1 1 3 二
4 0 4 士 1 5 5 二
4 1 5 士 1 9 0 二
4 5 4 士 9 2 二
4 6 3 士 1 1 0 .
4 5 8 士 8 7 二
与 15 0 比较 . P< 0 . 0 5 “ 尸< 0 . 01
响 : 缺 血 组 与 正 常 组 比 较 降 低 29 % ,
Sm i50 0 m g /k g 组比缺血组增加 57 % , 并高于
正常组 (尸< 0 . 0 5 ) 。 S m i 2 5 0 , 1 2 5 m g / k g 组分
别 比缺血组 增加 3 %及 28 % , 均接近正常
组 。 S m i 6 2 . sm g / k g 组 比缺血组增加 2 0 % 。
Sm i 灌 胃 4 个剂量组对 S e 一G S H 一Px 的活性
呈 剂 量 依 赖性 , 且 线性 关 系 良好 ( : ~
0
.
9 9 14 )
,
S m i IOm g / k g 组 比缺 血 组 增 加
23 %
,
Pr
o 组 比缺血组增加 38 % , 接近正常组
(表 ) 。
2
.
3 S m i对缺血心肌 M D A 含量的影响 : 缺
血组 心 肌 组 织 MD A 含 量 比正 常 组 增 加
3 3 %
,
S m iso o
,
2 5 0
,
12 5
,
6 2
.
sm g / k g 各组 比
缺血组分别降低 29 % , 25 % , 21 %及 18 % , 接
近正常组 , S m i 灌胃 4 个剂量组对缺血心肌
组 织 M D A 的 含 量 呈 线性 关 系 (r - 一
(中草药 )1 9 9 6 年第 2 7 卷第 7 期
o
·
9 5 9 1 )
。
S m i10 m g / k g 组 比缺 血 组 降 低
18 % ; Pr
。 组 比缺血组降低 21 %接近正常组
(表 ) 。
2
.
4 S mi 对缺血心肌 C PK 释放的影响 : 缺
血组血清 C PK 浓 度 比正 常组 增 加 43 写 ,
S m iso o
,
2 5 0
,
1 2 5
,
6 2
.
5
,
lo m g / k g 各组及 Pr o
组 比 缺 血 组分 别 降低 28 写 , 27 写 , 20 % ,
1 5 %
,
1 9 %及 2 4 %接近正常组 。 S m i 灌胃 4
个剂量组对血清 CPK 的浓度呈线性关系 (r
= 一 0 . 9 2 0 9 ) (表 ) 。
2. 5 S mi 对缺血心肌超微结构的影响 :正常
组心肌细胞膜完整 , 斓颗粒沉积在细胞膜外 ,
线粒体膜完整 , 蜻排列整齐 , 基质均匀 , 肌质
网正常 , 肌丝排列整齐 , 肌原纤维明暗带清
晰 , 缺血组心肌细胞水肿 , 肌丝排列松散 , 肌
原纤维溶解 , 肌质网扩张 。细胞膜及线粒体膜
·
4 1 9
-
破裂 , 斓颗粒进入细胞内或线粒体 内 ,沉积在
线粒体的岭上 , 线粒体极度肿胀 , 空泡化 , 峙
断裂 , 减少或消失 。
Sm i 1 25 m g / k g 组心肌超微结构改变 比
缺血组显著减轻 , 细胞膜完整 , 斓颗粒未进入
细胞 内 , 肌原纤维排列 整齐 , 线粒体结构正
常 , 基质均 匀 , 个 别 线粒 体 轻微 肿 胀 , Sm i
1 0 m g /k g 组心肌超 微结构改变 比缺血组 明
显减轻 , 细胞膜完整 , 肌原纤维排列基本整
齐 , 少数线粒体轻度肿胀 , 个别肌质网扩张 。
3 讨论
S m i 1 2 5 m g / k g 灌胃显著保护 xs o 所致
缺血心肌的超微结构损伤 , 减少 C P K 释放 ,
且在 IOm g / k g 腹腔注射时即能保护缺血心
肌的超微结构 , 由于赤土获菩醋酸乙醋提取
物具有抗儿茶酚胺作用 〔‘〕 , 而 S mi 为该提取
物的主成分之一 , 故提示 Sm i保 护缺血心肌
损伤 , 可能与其对抗 150 的作用有关 。
15 0 所致 心肌细胞 损伤可能与 O FR 形
成有关〔9〕 。 本文观察到 150 引起内源性 O F R
清 除剂 S O D , Se 一G S H 一P x 活性 降低 , M D A
含量增加 , 表明 150 引起心肌损伤与 O F R 的
形 成 有 内 在 联 系 。 S m i 5 0 0 , 2几。, ] , 5 ,
62
·
sm g / k g 灌 胃各组 呈剂量依赖性 地保护
缺血心肌 S O D , S e 一G S H 一P x 活性 , 减少从 D A
生成 , 已知某些黄酮类化合物 对 O FR 具有
直接清除作用 〔’。〕 , 提示 S mi 通过对 150 介导
形成的 O FR 的直接清 除 , 而表现其抗脂质
过氧化作用是其保护缺血心肌损伤的机制之
本文 Pr o 对 150 诱发的缺血心肌生化指
标的影响与 S m i相似 。 这可能与其对抗 150
的作用有关 。 有关 O FR 的生化指标及心肌
超微结构 , 血清 C P K 浓度变化基本一致 , 提
示 S m i可能通过双重机制即直接对抗 150 的
作用以及通过对 150 介导形成的 O FR 的直
接清除 , 阻止脂质过氧化反应 , 从而保护缺血
心肌损伤 。
参 考 文 献
l 张克锦 , 等 . 中草药 , 19 9 1 , 2 2 (1 0 ) : 4 6 0
2 张克锦 , 等 . 中草药 , 19 9 1 , 2 2 (9 ) : 咯1 1
3 杨庆仙 , 等 . 中国新药杂志 , 1 9 92 , 1 (3 ) : 56
4 Z o u G I
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B io eh e m i B io p h y s
, 1 9 8 6 , 4 : 7 1
5 X ia Y M
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J H y g R
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,
1 6 (4 )
: 29
6 陈顺 志 , 等 . 临床检验杂志 , 1 9 84 , 2 (4 ) : 8
7 Y e Q I
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J C lin l
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b T
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, 1 98 6
, 4 (3 )
: 1 2 0
8 H o ff
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A m J Pa th o l
, 19 7 5 , 7 9 : 20 7
9 Sin g
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l P K
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C a n J Ph y
s io l Ph a
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,
1 9 8 2
, 60 :
1 3 9 0
1 0 H u
s a in S R
, e t a l
.
Phy t o eh
e
m i
s t r y , 1 9 8 7 , 2 6 : 2 4 8 9
(1 9 9 5
一
1 0
一
2 8 收稿)
中药超声雾化吸入法治疗喘症的临床研究
唐山市中医院 (0 6 3 0 0 0 ) 丈,1 忠 董金仁
喘症在我 国北方为常见病 , 多发病 , 中老年人群
中的发病率更高 。 临床上均用西药止咳平喘 , 但远期
疗效均不理想 , 祖国医药学主张 : “急则治其标 , 缓则
治其本 ”的标本兼治原则 。 据此 , 我院在著名老中医 ,
王国三多年治疗经验的基础上 , 自制了实喘灵 吸入
剂 , 虚喘灵 吸入剂 , 用超 声雾化吸入法给药 , 进行了
10 0 例患者临床观察 , 取得 了显著效果 。
1 实喘灵吸人剂
·
4 2 0
·
1
.
1 方药组成 : 麻黄 , 金银花 , 杏仁等 。
2
.
2 制备工艺 :取金银花置蒸馏器中 , 加水适量温
浸 1h , 加热收取馏出液约 s o o m l备用 。 再将金银花
连 同母液 以及其它药 加水适量煎煮提取两 次 , 第一
煎沸后煎煮 60 m in , 第二煎沸后煎煮 50 m in , 压榨去
渣 , 合并药液 , 过滤浓缩 至 相对密度为 1 . 1一 1 . 巧
(波美 , 热测 ) , 放至室温 , 加等量 乙醇充分搅拌 , 使含
醇量为 45 %一 5 0 % , 加盖放置 2 4h , 滤取 乙醇药液 ,