全 文 ：黄花棘豆毒性生物碱的分离与鉴定
宁夏分析翻试中心 银川 孟协中 胡向群 张如明 尤 艺涛
摘冥 从宁夏有毒植物黄花棘豆的地上部分总生物碱中首次分得种生物碱单体 , 经光谱分析并与
标准品或文献对照 , 证实它们同属哇诺里西咤 衍生物类 , 分 别鉴定为黄华碱 、
臭豆碱、 白羽扇豆碱和鹰爪豆碱 。
关键词 黄花棘豆 黄华碱 臭豆碱 白羽扇豆碱 鹰爪豆碱
黄花棘豆 “夕 。州 系豆科棘豆属多年 生草本有毒植物 , 主要分
布在我国西北地区 , 也生长在华北 、 西南部分省 区天然草场 。 牲 畜采食后会引世馒性中毒
并产生嗜好性 , 除导致死亡外还引起母 畜不孕 、 流产 、 胎儿畸形等病症 。 近来通过抗癌药理
筛选 , 发现该植物醇浸液有抑制肿瘤的作用〔〕。 为了寻找有毒或活性成分 , 困内学者曾对该
植物的化学成分进行过研究〔“一〕, 而对其生物碱成分的研究未见文献报道 。 我们首先将该植
物地 上部分用乙醇提取后 , 按常规 的有机溶剂纯化法得到的总生物碱成分进行了小鼠急性毒
性实验 , 测得 。。为 , 确定该部位为致毒成分后 , 就进一步进行了分离鉴定 。 目
前 , 已分离出 个哇诺里西陡类生物碱 , 根据其物理常数 、 光谱数 据并 与标 准品 或文献对
照 , 分别确定为黄华碱 , 、 臭 豆 碱 , 、 白 羽 扇 豆碱
一 , 和鹰爪豆碱 , 。 这些化合物均 为首次从该植物中分得 。 总
生物碱的得率在 左右 。
材料和仪器
黄花棘豆采 自宁夏海原县南华山草场 , 取地上部分风干后置阴凉处备用 。薄层层析用江苏
福山生化试剂厂产硅胶 板 , 展开剂为氯仿一甲醇一氨水 , 在 紫外灯下观
察荧光 , 以碘化秘钾试剂显色 。 柱层析用上海五四化学试剂厂产 目中性氧化铝 。 熔
点用国产 显微熔点测定仪 未校正 比旋光用国产 一 型 旋光仪 折光 率用国
产 一 型阿贝折光仪测定 。 紫外光谱用岛津 一 型紫外分光光度计 红外 光谱用
一 型红外分光光度计 质谱用 一 型色质谱联用仪测定 。
总生物碱的提取及 薄层层析
取干燥的黄花棘豆样品 , 粉碎后用 的乙醇充 分浸泡提取 次 , 减压 回收 乙醇 ,
得浸膏 。用 硫酸溶解 , 过滤 , 将酸液用 乙醚脱脂后 , 以浓氨水碱化 至 一 , 氯仿 提取
次 , 合并氯仿提取液 , 水洗至中性 , 用无水 干燥 , 减压回收氯仿 , 得褐 色膏状 总碱
粗品 约 左右 。 再将此粗品用无水 乙醚回流提取纯化 , 减压回收 乙醚后 , 得桔黄色油状
物 约 左右 , 溶油状物于少量苯中进行薄层层析 , 显色后 即出现 个桔黄色斑点 ,
和 个桔红色斑点 一 。 显色前在紫外灯下观察荧光时 , 前 个斑点 , 分 别显灰
绿和兰紫色荧光外 , 其余 个斑点均无荧光 , 其薄层层析色谱见图 。
生物碱单体的分离和纯化
将总生物碱浴于少量苯中 , 用中性氧化铝 活性 五一 级 进行柱层析 , 以苯和苯中逐
渐增加 甲醇 一 的溶剂洗脱 , 分段收集 , 薄层检查 , 依次得到 以生物碱单体 、
、 、 其得量 比约为 为主的 种粗品 。 各粗 品经再次柱层析后分别进 一
步纯化 碱用石 油醚重结 晶得微黄色结 晶 , 碱 用无水 乙醚热提得 淡黄色 油状液体 , 碱
, ,
《中草药 》 年第 卷第 期 , 。
角石油醚溶出得近无色玻璃状物 , 碱 用石
油醚溶出得近无色的粘祝状 油物 龙空气中
很快转暗而变成褐红色 。
鉴定
生物碱 微黄色似正八 面体的光亮晶结
石油醚 , 一 , 〔 〕名 一 ”
撼 巴 心
委 。
‘二 、, 二护
口贝阳叫口
图 总生物碱的层析圈
。 , , 。 难溶于冷石油醚 , 可溶 于 乙醚 和苯 , 易 溶于 氯仿 、 乙 醇和 水 。
盛魏 , 一 ’ , 一 一 , , 吸收峰 , ,
一毗绽酮 , 。。苯环 卜有 个邻接 在 一 。。 ” 一 ’ 飞 “ 吸 收 区有 个
以 上明显的吸收峰 , 为反式 骄联的唆诺里西 咤 的 特 征〔〕。 肠 尹 。
, , 显示 分 子 中 有 一 个 一毗咤 酮 环〔〕。 一
, , , , 。 , , , 。 ,
。 , 。 , 碎 片离子 , 1 4 7 , 1 4 c 的同时 出现 是含有a一毗吮酮环 的羽扇
豆生物碱的特征〔7 〕。 根据质谱和元素分析结果推定其分子式为C 16H 2。N Z O , 不饱和度是7 , 除
上述光谱数据 已经证实分 子内有a 一毗咙酮外 , 不饱和度尚余3 , 因此可 以推定它为四环 结构化
合物 。 基于上逮理化数值和光谱分析并经文献印证〔8一10) , 确定C 为 黄华 碱 , 再 将C 与 黄华
碱标准品 比薄层层析R f渔一致 , 测混合熔点不下降 , 二者的红外光潜、质谱完全相符 , 故证明
生物碱c 即黄华碱 ( 异名野决明碱 ) 。
生物碱D : 淡黄色油状液体 , 水合盐酸盐结 晶m p 234 , 一 2 3 6 ℃ , 〔的 扩一 1以 “ ( c , 0 . 5 0 6 ,
E
t
o H
)
。 难溶于石油醚 , 可溶于 乙醚和苯 , 易溶于仿氯 、 乙醇 和水 。 I R 、魏鳞 cm 一 , :
2 0 2 3
,
2 8 5 0
(
一e H Z一 )
,
2 8 0 0
(
、h )
,
1 6 5 5
,
1 5 4 7
(
a 一耽咤酮 ) , 7 0 5 ( 苯 环 上 有3个邻接
H ) ; 在2500一27 00em 一 ‘ B o h l m a n n 吸l玫区无峰或仅有不明显的肩 , 为顺式 骄联 的座诺里
西咤〔5〕。 u V 几益罗, n m ( 1 0 9 : ) : 2 5 3 ( 3 . 3 8 ) , 3 0 9 ( 3 . 3 4 ) , 表明分, 子中含有一个a一毗
呢酮环〔6〕。 E l 一M S m / z ( % ) : 2 4 4 ( M + , 2 6 ) , 一6 0 ( 8 ) , 1 4 7 ( G ) , 1 婆6 ( 22 ) , 1 3 6
(
1 0
)
, 。8 ( 10 。 ) , 。7 ( xg ) , 9 6 ( 1 3 ) , 碎片离子m /2 r6 o , , 、7 , 2 4 6 的同 时出现是含
有a 一毗吮酮环的羽扇豆生物碱的特征〔7〕。 根据 质谱 和 元 素 分 析 结 果 推 定 分 子 式 亦为
C l。H Z 。N : 0 , 不饱和度7 , 应仍为分子 中含有a一毗咤酮环的四环结构化合物 。经与文献报道的
黄华碱的差向异构体—臭豆碱对照基本吻合〔8一1幻 , 将碱D 与臭豆碱标准 品共 薄层层析R f值一致 , 二者红外光谱 、 质谱完全相 同 , 因此确定生物碱D 为臭豆碱 ( 即安那吉碱 ) 。
生物碱E : 近无色玻璃状物 , 水合盐酸盐m p 127 一 :28 ℃ , 〔的舒一 80 。 ( 。 , 0 . 70 ,
E t 0 H
)
。 可溶于石油醚 , 易溶于 乙醚 、 苯 、 氯仿、 乙醇和水 。 ‘R v魏乒 cm 一 , : 2 93 。 , 2 0 5 5
(
一C H 一 )
,
2 8 0 0
,
2 7 6 0
(
B
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a n n 吸 收 峰 , 反式喳诺里西吮 ) 〔5〕, 1 6 4 0 ( 内酞 胺 淡
基 ) 。 E l 一M S m / z ( % ) : 2 4 8 ( M + , 5 6 ) , 2 1 。 ( 1 0 ) , 1 5 0 ( 4 2 ) , 一4 9 ( 5 4 ) , 1 3 6
(
1 0 0
)
,
1 1 0
(
3 4
)
, 。8 ( 3 4 ) , 。7 ( 3 0 ) , 显示分, 子中氮原子与碳基构成酞胺的无叶豆碱
类化合物的特征裂解〔1“〕。 质谱和元素分析结果推定分子式 为C , 5 H 2 4 N 2 0 , 不饱和度是5。 从
上述各仲数据可 以推出该碱为分 子中含有内酞胺淡基的具 四环结构的化合物 , 与已知的由2
个唆诺 里西陡环 骄联而成的含氧化合物 白羽扇豆碱的资料和 比较〔3一1“〕, 基本相符 。 将 生物
碱E 推定为 白羽扇豆碱 ( 即羽扇豆烷宁 ) 。
生物碱F : 近无色粘性油状物 , 二苦味酸盐 ( C 15H :。N Z · Z C o H 3 0 7 N 。 ) 为 淡 黄 色针状
结晶 , m p 2 0 1 ~ Z o 3 oC ( 分解 , 甲醇中一次结 晶屁, ) 。 〔a〕扩+ 17.80 (e , 4 , 2 0 , E t o H ) ,
沙1.5278。 可溶于石油醚 、 苯 、 乙醚 , 易溶于氯仿 、 乙醇 , 略溶于水 。 I R 、魏蟒 。m 一 ‘:
2 9 3 0 , 2 5 6 0
(
一C H :一 )
,
2 7 9 5
,
2 7 2 0
(
B
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a n n 吸收峰 , 反式唆诺 里西 咤 ) 〔5 〕。 E l 一M s
m / z ( % )
: 2 3 4 ( M
+ ,
2 5
)
,
1 0 3
(
2 4
)
,
1 3 7
(
。1 ) , 一3 6 ( 3。) , l x o ( 2 3 ) , 9 8 ( 1 0 0 ) ,
9 7
( 62 )
, 显示无叶豆碱类裂解特征〔‘。〕。 质谱和元素分析结果确 定分 子 式 为C , 。H Z o N : ,
不饱和度是4 , 为 四环结构化合物 , 与已知的天然化合物鹰爪豆碱的文献 值 相 符〔8一12〕, 将
碱F 与鹰爪豆碱标准品共薄层层析R ;值相 同 , 二者红外光谱 、 质谱完全一致 , 因 而 确证生物
碱F 为鹰爪豆碱 ( 即无叶豆碱 ) 。
从薄层层析检测中可以看出 , 斑点A 和B 与已鉴定的4种生物 碱(斑点C ~ F )性 质有些不
同 , 柱层析也未能完全分离纯化 , 有待进一步寻找适合条件分离纯化后 再作鉴定 。
玫谢: 本中心各仪 器组代测各种光谱 , 实验 样品 由宁夏海源县 畜枚局草原站 协助 采集 。
参 考 文 献
10
JI2345
116
7 12
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张守信 , 等 . 中国兽医 科技 , 2 9 9 1 , 2 1 ( 2 ) : 3 2
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1 4 4 9
(
1 9 9 2 一 1 0 一0 5 收稿
1993一 0 7 一 1 7修 回 )
、一r‘ .‘ 目目 ‘.‘ .. . ~ ~ ~ ~ 目, 甲扣一一.一.一~一一一一~-一一一 一一一~一—一一一一一一一一(上接第60 页)多 14 个质量单位 , 即一个C H Z, 故矶为二十五烷酸a 一单甘油醋 。其 ‘“C N M R ( C S D S N , D E P T ) :1 7 3 . 5 9 ( C , , C ) , 7 0 . 8 7 ( C : ‘ , C H ) , 6 6 . 6 3 ( C : , , C H Z ) , 6 4 . 2 4 ( C 3 ‘ , C H Z ) , 3 4 . 4 2( C Z , C H Z ) , 3 2 . 1 5 ( C 2 3 , C H Z ) , 2 5 . 3 0 ( C 3 , C H : ) , 2 2 . 9 3 ( C o 4 , C H : ) , 1 4 . 3 2
(
C
: 5 ,
C H
。
) 1 3 0
.
0 0 至29 .4 1 ( C 4至e 22, 重迭 , 共19个C H :) , 进一步确定化合物 V 为二
十五烷酸a一单泪一油醋 , 是一个新化合物 。
化合物粗 : 无色粒状结晶 , m p 8 7 . 5 ℃ 。 I R 、 ‘H 及 ‘“C N M R 光谱 与 化合物矶极相似 ,
只是 ‘H 及‘3 C N M R 分另11于 1.32至 2.Z sp p m 处多2个H 及30.00至29 .4 1p p m 处多一个C (C H 。)
峰 , 故砚为班之同系物 , 多一个C H :, 并且其M s m /z: 471 ( M + + 1 ) , 3 0 6 , 5 3 6 , 3 0 8 ,
2 8 0
一 2 5 召 , 2 2 4 , 1 9 6 , 1 6 8 , 1 3 4 , 9 8 , 7 4 , 5 7 , 表明租比班多 14个质量单位 , 故姐确定为二十
六烷酸a一单甘油醋 , 系 一首次从植物中分得。
参 考 文 献
1 中科院云南热带植物研究所 .西双版纳植物名录
昆明 : 云南 民族出版社 , 19 别 。 1 76
江苏新医学院 。 中药大辞典._L册 . 上海 : 上
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p l l 6 1 1 3
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1 9 9 2
一 1 1一 1 0 ‘次稿 )
《中草药 》1 9 9 4年第2导卷第2期 . 6 3 .
汀G !N A L A R T 叮C L E S
Studies On the C hem ical C Om ponents Of
D aguoyoum ateng ( M ueuna m acrocarPa )
H u W angyun , L u o S h i d e , a n d C a i J i a n x u n
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( O r i g i n
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