全 文 ：菌 、 金黄色葡萄球菌 、溶血性链球菌无明显抑
制作用 , 因此需对其抗炎机理进行深入探讨 。
本实验用调理酵母多糖激活 P M N , P h B
不仅能抑制活化 PM N 的化学发光 , 而且减
少 H : 0 : 的产生 , 并有剂量依赖性关系 。 因此
推侧 P hB 的抗炎作用可能是抑制了 PM N 活
化时氧自由基的产生 , 其作用环节仍需进一
步探讨 。
参 考 文 献
李益新 .等 . 上海免疫学杂志 , 1 9 8 5 , 5 ( l ) : 2 5
P i e k E
, e t a l
.
J L m m u M e t h
, 1 9 8 0 ( 3 )
:
16 1
aB d we y J A
, e t a l
.
J 压 oc h e m , 1 9 8 1 , 2 5 6 : 1 2 6 4 0
A l l e n R C
, e t a l
.
iB oc h e m iB o P h” R es C劝m m u n , 1 97 2 ,
4 7 : 6 7 9
W
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, e t a l
.
r厅u , , 1 9 8 7 , 3 3 ( S u pp l ) : 2 8
( 1 9 9 5
一 0 3一 0 6 收稿 )
E f f ec t of P h y
s a l i n B o n C卜e m i l u m 五n es ce n e e an d H 2 0 2 P r o d u e t i o n o f
A e t i v a t ed P
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E f fe e t o f o p s o n iez d
z y m o s a n o n 卯 l y l l l o r p h o n u e le a r l e u kco yt e ( P M N ) w e r e s t u d ie d b y e h e m il u面ne s e e n e e
( C L ) a n d h y d r o g e n 伴 r o x id e ( H ZO Z ) a s s a y s . R e s u l t s s h o w e d t h a t d if fe r e n t e o n e e n t r a t io n s o f P h y s a l in B ( P h B )
p r e s e n t e d
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e a l b y P M N
.
伸筋草注射液的制备及其对
大鼠实验性矽肺的疗效△
铁道部第二工程局职业病防治院 (成都 6 10 1 0 1) 贫立中 . 黄泽华 王惠茄
摘 要 将伸筋草提取液分别用超池法和水醉法制成注射液 ,分组对染尘大鼠腹腔注射给药 5
周 ,解剖后测定各组大鼠肺的鲜重 、 干重 、胶原含量和病理分级等指标 ,结果表明 . 用超滤法制备的
注射液预防性治疗给药对大鼠实验性矽肺有较好疗效 , 而用水醉法制备的注射液疗效不佳 。 还对
伸筋草的抗矽有效成分进行了探讨 。
关锐词 伸筋草注射液 矽肺 超滤
伸筋草为石松科植物石松 (与 c oP do 勿 m
少口户on -ct u m T h u n b . ) 和垂穗石松 P a l人i n 入a e a
c e o u a ( L
.
) A
.
F r a n e o e t V a s 。
. 等的干燥全
草 〔` ’ 2〕 。 我们在药筛工作中发现伸筋草的酸水
提取液腹腔注射对大鼠实验性矽肺有较好疗
效 ,为了能逐步应用于临床 ,采用不同的制剂
方法 ,将其制成注射液并进行了预防性治疗
给药的动物疗效实验 。
1 注射液的制备
制剂所用的伸筋草购 自本地医药公司 ,
经鉴定为垂穗石松 ,并经成都市药品检验所
检验所证 。 将药材先后用 10 倍量和 8 倍量的
0
.
1% H C I 浸泡过夜 , 倾出浸 泡液 ,过滤后浓
缩至约 20 0 % (即含生药 2 9 /m l ) ,冰箱中放置
帝
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现在铁道部第二工程局中心医院药剂科
2 8 6
·
△铁道部 “ 八五 ” 重点卫生科研课题
过夜后再次过滤或离心 , 得药液 ( I ) 。取部分
( I ) 用 N a 0 H 液调至 p H S , 静置后过滤 , 滤
液用 H CI 液调至 p H 6 , 过滤 、 分装 、 消毒 , 作
为疗效对照用的药液 S ;其余的 ( I )分别用
超滤法和水醇法制成注射液 。
1
.
1 超滤法 : ( I )经适当稀释 、 离心 、微孔滤
膜过滤后用 6 0 0 0 分子量的中空纤维超滤组
件进行超滤 , 新的超滤液和未滤过液分别浓
缩 , 用 N a 0 H 溶液调至 p H 6 左右 (后者过滤
后又调至 p H S一 9 ,冷藏 、离心后再用 H C I溶
液调至 p H 6 左右 ) ,过滤 、分装 、 消毒 ,为伸筋
草注射液 C 和作对照的药液 N 。
1
.
2 水醉法 : ( I )先后用 2 倍量的乙醇 、 4%
明胶液 10 0m l 、 6倍量的乙醇和 3 倍量的水进
行沉淀 。 所得药液浓缩后一部分调 p H 为 6 ,
过滤 、 分装 、 消毒 , 为伸筋草注射液 R ; 另一部
分加 1%的活性炭 , 加热煮沸 3 o m in 后过滤 、
分装 、 消毒 , 为伸筋草注射液 T 。
1
.
3 质量检查 : 所制得的几种药液均 澄明
( N 液久置后出现少量沉淀 ) 。 分别在各药液
消化前和消化后采用胶束增溶吸光光度法 〔3 〕
测定其中的铝含量值 ,和小鼠对各药液的最
大耐受量 ,结果见表 1 。
2 动物疗效实验
2
.
1 材料和方法 : W ist a r 大鼠 ,雄性 ,体重
表 1 各伸筋草液的质 t 检侧结果
品种 制备方法 浓度( % ) 颜色 小良耐受最(ml / k g )
铝含量值 ( . 9 /d )
C 超撼法 3 0 橙黄
N 超滤法 3 0 橙红
R 水醉法 2 00 浅黄
T 水醉法 4 0 0 淡黄
S 粗提液 2 0 棕红
消化前
0
.
8 3 8
0
。
37 5
0
。
0 0 9 4 5
0
。
0 0 9 7 0
消化后
1
.
3 4
1
。
0 8
0
。
1 0 7
0
。
0 1 7 7
2
。
9 8
差值
0
.
5 0
0
。
7 0
0
。
0 9 8
0
.
0 0 8 0
一300t立34内gJ`
1 8 0 9 左右 , 由中国医学科学院输血研究所提
供 。 染尘用石英粉尘由中国预防医学科学院
卫生研究所提供 , 含游离 51 0 : 在 97 %以上 ,
小于 5料m 的颗粒占 9 . 9% ,用前重新研磨并
混悬于生理盐水中 ,含量 为 4 5m g /m l , 高压
灭菌后按 1 0 0 0 u0 /m l 加入青霉素 。
将大鼠随机抽 出 6 只作为正常对照 , 其
余在乙醚麻醉下气管内注入石英粉尘混悬液
1
·
Om l挤鼠体重 1 8她 以下 o · g m l , 1 6 09 以
下 0 . 8m l ) , 以后每天注射青霉素 s o o 0 u /
只 ,共 d5 。 染尘大鼠按体重分段后随机分为 6
组 , 除 1 组腹腔注射生理盐水作为染尘对照
组外 ,其余 5 组分别注射上述伸筋草液 , 每周
3 次 ,共计 5 周 , 见表 2 。 实验期间每周 称大鼠
体重一次 , 每天观察大鼠的活动 、进食 、 皮毛 、
大小便等情况 。
表 2 分组及给药情况 ` 士 s )
组别 动物数(结束 /开始 ) 染尘前体重( g ) 解剖前体重( g ) 每次剂量( m l /只 ) 每
次剂量中所含生药量 ( g )
总给药量 ( g /次 )
:
俘口月了ōb内12 / 1 3
13 / 14
14 / 14
13 / 14
12 / 14
1 3 / 1 3
6 / 6
1 8 7土 39 2 7 4土 5 0
1 8 2士 38 2 6 8士 3 9
1 8 6士 3 6 2 7 5上 3 6
1 8 5士 3 3 2 7 3士 3 4
4
.
0
6
.
0
6 C
.
0
9 0
.
0
1 8 4士 3 6 2 0 4士 3 7
染尘对照
正常对照
1 8 6士 2 8 2 8 6士 4 7
l a l 士 3 6 3 3 2士 3 7
给药结束后 ,在硫喷妥 (0 . 0 29 /只 )麻醉
下放血 ,解剖取 出肺称重 后用 10 % 甲醛 固
定 ,选每只大鼠一 叶左肺和二叶右肺中病变
最重的部位制作 3 张病理切平 , H . E . 染色 。
制作病理切片后的余肺切成 3一 4m m 见方
的颗粒 ,烘干后置索氏提取器中用丙酮脱脂 ,
《中草药 》 1 9 9 6 年第 27 卷第 5 期
再烘干后称重并换算出全肺干重 。 用氯胺 T
法 〔` 〕测定肺中经脯氨酸的含量并换算成全肺
胶原蛋 白的含量 。 所得到的数据均进行统计
分析 。
2
.
2 结果 : 染尘后大 鼠精神 、 食欲较差 ,少数
有鼻腔出血 、 喘呜等情况 , 以后逐渐好转 , 但
·
2 8 7
.
有个别鼠死亡 。 给药期间大鼠活动 、进食 、大 各组大鼠理化检验值见表 3 。 C 以及作
小便等基本正常 ,体重逐渐增加 ,但 S 组增加 为对照的药液 S 、 N 对大鼠实验性矽肺有较
缓慢 ,解剖前体重明显低于其它各组 。 除正常 好疗效 , 与染尘对照组相 比具有极显著的差
对照组和 S 组外 ,各组都有患肺脓肿的大鼠 , 异 (尸 < 0 . 0 1 ) ,而注射液 R 、 T 的疗效不佳 。
均在进行资料统计时剔除 。
农 3 理化检脸位及其比较 ` 士 s )
组别 统计只致 全肺鲜重( g ) T / C 值 t 值 全肺干重( g ) T / C 值 t 值 全肺胶原( m g ) T / C 值 t 值
9 2
.
7 6士 0 。 7 9 0 。 5 7 4 。 3 2 . 0 . 4 8士 0 . 1 5 0 . 5 8 4 . 4 5 . 7 7士 4 6 0 . 6 2 2 . 6 2 .
2
。
8 2士 0 。 5 3
4
。
1 6士 1 。 0 3
0
。
59
0
。
8 6
5
。
10
.
1
。
2 3
0
.
4 8士 0 . 1 0 0 . 5 8 5 . 3 5 . 6 9士 15 0 . 5 6 4 . 8 6 .
0
.
7 2士 0 . 2 5 1 . 0 9 10 0士 3 6 0 . 8 0
1 l
l l
4
.
2 5士 l 。 30 0 . 8 8 1 . 0 7 0 . 80士 0 . 2 4
0
。
8 7
0
。
9 6 0
.
3 2 12 6士 4 3
1
.
9 0士 0 。 2 7 0 . 3 9 7 . 5 7 】 0 . 3 1士 0 . 0 4 0 . 3 8 8 . 5 8 . 4 2士 7 0 . 3 3 7 . 4 4 .
NCRTS
染尘对照
正常对照
1 2 4
.
8 2士 1 . 2 5 / 0 . 8 3士 0 . 1 9 / / 12 5士 3 6 / /
6 1
.
4 5士 0 . 1 9 / 0 。 2 3士 0 . 0 4 / / 31 士 6 / /
“
P < 0
.
0 1
, 单侧检验
将各组大鼠肺的病理片按 4 级标准进行
分级 ,并将正常的病理片作为 O级 ,各组的级
别分布情况 见表 4 ; 用等级序值法 〔” 求得各
给药组与染尘对照组差异的显著性检验 u
值 ,结果只有注射液 C 组和药液 S 组对大鼠
实验性矽肺有较好疗效 (尸 < 0 . 0 5 ) , 其余各
液的疗效不佳 。
农 4 肺病理片的分级愉况及其比较
组别 。 I , , vI 平均级别 u 值
C 5 5 9 7 1 1
·
78 2
·
14 .
N 4 8 9 1 2 3 2
.
0 6 1
.
3 8
1 3 0 2
.
2 5 0
.
8 1
4 3 1 4 1 2 0 2
.
0 3 1
.
7 1
5 3 1 6 9 0 8 8 2
.
2 1
.
染尘对照
正常对照
2
.
4 2 /
.
P < 0
.
0 5
为了探讨注射液中的铝含量与疗效的关
系 ,我们将各注射液消化前测得铝含量值作
为无机铝的含量值 , 消化后测得的铝含量值
作为总铝的含量值 , 以二者的差值作为有机
铝的含量值 ,分别对各组动物一次注射量的
药液中每种铝的含量值 ( X )( 染尘对照组所
用生理盐水的铝含量以零计算 )与全肺鲜重 、
全肺干重 、 全肺胶原含量的均值 ( Y )进行 直
线相关和 回归分析 , 求得公式 Y 一 A 十 B X 中
截距 A 、 回归系数 B 以及相关系数 r 和显著
性检验 t 的值 , 结果见表 5 。 染尘大鼠理化检
验值的均值与一次注射量的药液中“ 三种铝 ”
的含量值均密切相关 , 因此 , 用铝的含量值特
别是 “ 有机铝 ” 的含量值作为伸筋草注射液有
效成分含量的控制指标是可行的 ,而注射液
中所含的生药量并不能代表有效成分的含
量 。
裹 5 铝的含 t 值与理化检验值的直线相关与回归分析结果
无机铝 总铝 有机铝
检验值
A B r t A B r tA B
r tr l
4
.
0 7 2 一 0 . 6 7 7 一 0 . 8 5 8 2 3 . 3 4 . 4 . 1 7 2 一 0 . 44 0 一 0 . 8 9 5 7 4 。 0 3 . 4 。 2 9 6 一 l . 1 7 G一 0 . 9 2 7 5 4 . 9 6 二
0
.
7 20 一 0 . 1 2 7 一 0 . 8 62 6 3 . 4 1 . 0 . 7 3 9 一 0 . 08 3 一 0 . 9 0 3 1 4 . 2 1 班 . 0 . 7 6 3 一 0 . 2 2 1一 0 . 9 3 9 0 5 . 4 6 二
10 8
.
3 一 1 9 . 8 2 一 0 . 8 5 1 3 3 . 2 5 1 1 1 . 5 一 1 3 . 0 4 一 0 . 9 0 0 0 4 . 13 二 1 1 5 . 7 一 35 . 3 3 es 0 . 9 4 8 9 6 . 0 1 二
,
P < 。 . 05 , 二 p < 。 . 01 ,单侧检验
.
2 8 8
·
3讨论
尘肺特别是矽肺是危害广大接尘工人身
体健康最严重的职业病 ,但至今尚无一种理
想的治疗药物 。 伸筋草含有多种生物碱 ,三菇
醇类 、 街体成分 、 葱醒成分等 〔, ,卜川 ,在临床 _ L
主要用于治疗风寒湿痹 、关节酸痛 、 屈 伸不
利 、 跌打损伤和带状疙疹 、 肝炎 、 黄疽等病
症〔` , ’ 2 , , 另外还有抗菌 、 解热 、 升压 〔, ’ 、镇痛 〔` 3〕
等药理作用 , 但将其制成注射液并用于治疗
矽肺在国内 、 外文献中均未见报道 。 伸筋草抗
矽的有效成分 , 目前尚不清楚 。 从以往的药筛
中得知 ,其所含的生物碱没有抗矽作用 ,在本
次实验中 , 用调 p H 至碱性后过滤的方法除去
生物碱的药液仍有较好的疗效也说明了这一
点 。 本次实验证明了伸筋草药液 中的铝含量
值特别是“ 有机铝 ” 的含量值与其抗矽作用密
切相关 , 我们也把伸筋草注射液中的铝 含量
值作为制剂质量 的一项控制指标 , 但伸筋草
的抗矽有效成分是否就是铝化合物 , 尚得进
一步研究证实 。
超滤法是近年来发展较快的一种膜分离
技术 ,它能有效地滤除溶液中的各种微粒 、 胶
体 、 细菌 、 热原和大分子溶质 ,保 留小分子有
效成分 , 因此在 中草药制 剂特别是注射液的
制备中得到了越来越多的应用 〔 ,` 〕 。 在本次实
验中 ,用超滤法制备的伸筋草注射液 C 不但
较好地除去了药液中的杂质 , 而且保留了较
多的有效成分 ,对实验性矽肺的疗效较好 ; 而
采用水醇法制备的注射液 R 、 T 虽然较好地
除去了杂质 , 但作为有效成分控制指标的铝
含量很低 ,对实验性矽肺的疗效不理想 。 从实
验数据 中也可以看出 , 药液 I 超滤后 损失的
有效成分较多 , 使制得的注射液的疗效受到
了一定的影响 。 所以我们还对超滤的工艺条
件进行了探索 ,对超滤的方式进行了创新 ,有
关资料拟另文报道 。
致谢 : 先后参加 了部分实验工作的还有
马佑华 、 毛振芳 、 唐晓华等 。
参 考 文 献
1 中国医学科学院植物资源开发研究所 , 等 . 中药志 . 第
四册 . 北京 : 人民卫生出版社 , 1 9 8 . 4 17
2 成克敏 , 等 . 上海医科大学学报 , 19 91 , 1 8( 5) : 3 87
3 李慈琴 , 等 . 劳动卫生与环境医学 , 19 82 , 5 (5 ) : 5
4 中国医学科学院药物研究所 . 中草药有效成分的研究 .
第二分册 . 北京 : 人民卫生出版社 , 19 7 2 . 1 65
5 孙瑞元 . 定量药理学 . 北京 : 人 民卫生出版社 , 19 87 . 84
6 C A 4 2
:
4 59 4 e
7 A y e r W A
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2 2
:
2 2 0 1
8 C A 7 5
; 1 4 3通 9 2 f
9 C A 7 3
: 2 2 1只g n i
10 蔡 雄 , 等 . 中草药 , 1 9 8 7 , 28 ( 12 ) : 2
1 蔡 雄 , 等 . 上海 医科大学学报 , 19 91 , 18 ( 5) : 3 83
1 2 杜明汉 . 中原 医刊 , 1 9 8 9 , 1 6 ( l ) : 2 0
1 3 张百舜 , 等 . 中草药 , 1 9 8 8 , 2 9 ( l ) : 2 4
1 4 贺立中 . 中国药学杂忑 , 一9 9 5 , 3 0 ( 1 2 ) : 7 1 1
( 1 9 9 5
一
0 2
一
14 收稿 )
S h e n j i n e a o In j e e t l o n P r e P a r a t i o n a n d
C u r a t i v e E f f e e t i n E x伴 r im e n t a l s川 e o s i s o f R a t s
H e L i z h o n g
,
H u a n g Z e h u a
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S h e n jin
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e e t e d i n + r a
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p e r i t o n e a l ly in g r o u p s o f r a t s e o n t a m in a t e d w it h q u a r t z
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e r ot a s s e s s t h e i r P r o P h y la e t ie e f e e t s
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t h a t S h e n j icn
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e e t i o
n p r e p a r e d w i t h u l t r a f i lt r a t io n w a s e f fe e t iv e fo r t h e p r o p h y l a e t ie t r e a t m e n t o f e x p e r i
-
m e n t a l s il ie o s is o f r a t s
,
w h ile t h a t P r e P a r e d w i t卜 w a t e r 一 a l e o h o l m e t h o d w a s d e v o id o f s u e h e f f e e t . T h e a n t i s il i-
e o s i s a e t ive p
r i n e ip l
e o f S h e n ji
n e a o w
a s e x p lo r e d a n d d i s e u s s e d
.
( 中草药 》 1 9 9 6 年第 2 7 卷第 5 期 · 2 8 9 -