全 文 ：HPLC法测定矽肺宁片中岩白菜素的含量
潘　女燕①　邓茂芳②　田永华① (①杭州 杭州胡庆余堂药业有限公司 310016　②杭州 浙江医学高等专科学校 300053)
摘要　目的: 采用高效液相法测定矽肺宁片中岩白菜素的含量。 方法:以甲醇 -水 ( 20∶ 80)为流动相 ,迪马 C18柱 ( 250mm×
4. 6m m, 5μm)为固定相 ,检测波长为 275nm。结果:岩白菜素在 0. 88～ 7. 04μg范围内呈良好的线性关系 , r= 0. 9997,平均回收
率为 99. 35% ( n= 6) , RSD= 0. 93%。 结论:本法操作简便准确 ,可作为矽肺宁片中岩白菜素的质量控制方法。
关键词　矽肺宁片 ;岩白菜素 ; HPLC
Quantitative Determination of Bergeninum in Xifeining Tablets by HPLC
Panyan①　 Deng maofang② and Tian Yonghua① (① Hangzhou Hu Qing Yu Tang Pha rmacecut ical . Co . Ltd . , Hangzhou 310016
　②Depar tment of Pharmacy , Zhejiang Med ical College, Hangzhou 310053)
Abstract Objective: T o develop an HPLC method fo r the quantitativ e determination of berg eninum in Xifeining Tablets.
Method: The HPLC sy stem consisted Dimake C18 co lumn( 250mm× 4. 6mm, 5μm) , me thano l-wa ter ( 20∶ 80) a s mobile phase,
and with detection waveleng th 275 nm. Results: The linear co rr elation was good in th e r ange of 0. 88～ 7. 04μg of berg eninum,
cor relation coefficient is 0. 9997. T the average recovery w as 99. 35% ( n= 6) and the RSD w as 0. 93% . Conclusion: The method
is simple, accurate and can be used fo r qua lity cont rol o f ber geninum in Xifeining Table ts.
Key words: Xifeining Tablet; be rg eninum; HPLC
　　矽肺宁片是由连钱草、虎杖和岩白菜素制成的
中药复方制剂 ,具有活血散结、清热化痰、止咳平喘
的功效 ,一直来用于治疗矽肺引起的咳嗽、胸闷、短
气、乏力等症 [1 ]。 本文采用 HPLC法对其制剂中的
岩白菜素含量进行测定 ,结果发现此法操作简便 ,快
速 ,结果正确可靠。
一、仪器与试药试液
仪器: HP1100高效液相色谱仪 (美国惠普公
司 ) M ETT LER220电子天平 (美国梅特勒公司 )
SB2200超声波仪 (上海超声仪器厂 )
试药试液:甲醇 (色谱纯 )　无水乙醇 (分析纯 )
水 (二次重蒸馏水经 0. 45μm的微孔滤膜滤过 )
对照品: 岩白菜素对照品 (杭州胡庆余堂药业有
限公司提供 ,云南省药品检验所鉴定 ) ,以面积归一
法测得 ,含量为 100. 0% (见图 1)
样品:矽肺宁片 (杭州胡庆余堂药业有限公司生
产　批号为 030502、 030301、 021104)
二、实验方法与结果
1. 色谱条件与系统适用性试验　色谱柱: 迪马
DimakeC
18柱 ( 5μm 46mm× 250mm不锈钢 ) ;流动
相为: 甲醇 -水 ( 20∶ 80) ;流速为: 1. 0ml· min-1 ;检
测波长为: 275nm;理论板数不低于 1000。
2. 对照品溶液的制备　精密称取在 105℃干燥
至恒重的岩白菜素对照品 44mg ,置 50m l容量瓶
中 ,加无水乙醇使溶解 ,并定容至刻度 ,摇匀 ,过滤即
得 (岩白菜素含量为 0. 88mg /ml)。
3. 供试品溶液的制备　取 20片矽肺宁片 ,称
定重量 ,计算平均片重。研细 ,精密称取细粉适量 (约
0. 1g ) ,置 50m l容量瓶中 ,加无水乙醇 ,超声提取 40
分钟使溶解 ,并定容至刻度 ,摇匀 ,过滤即得。
4. 线性关系考察　精密量取上述对照品溶液
1、 2、 4、 6、 8μl,注入液相色谱仪 ,测得峰面积分别为:
180152、 444478、 870708、 1331558、 1770734。 以岩白
菜素进样量 (μg )为纵坐标 ,峰面积为横坐标 ,绘制
标准曲线。回归方程为 C= 4. 43× 10-6A+ 0. 1247(γ
= 0. 9997)。结果表明岩白菜素在 0. 88～ 7. 04μg范
围内有良好的线性关系。
5. 精密度试验　精密吸取同一供试品溶液 (批
号为 030502) ,重复进样 5次 ( 4μl) ,测得其峰面积分
别为: 885851、 877954、 868543、 869516、 862739,平均
峰面积为: 872921,相对标准偏差 ( RSD)为 1. 04%
( n= 5) ,见表 1。
表 1　精密度试验表
试验号 1 2 3 4 5 平均值 RSD%
峰面积 885851 877954 868543 869516 862739 872921 1. 04
　　 6. 稳定性试验　取对照品溶液和供试品溶液
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中国药品标准 2005年第 6卷第 2期　 (总 86) Drug Standa rds of China 2005, v ol. 6 No. 2
(批号为 030401) ,分别每过一定时间测定一次峰面
积 (进样量为 4μl /次 ) ,结果 RSD分别为 1. 00%和
1. 13% ,结果表明:对照品和供试品至少在 8小时内
稳定。见表 2。
表 2　稳定性试验表
　　　　时间 0h 2h 4h 8h 24h 平均 RSD
样品 (% )
对照品溶液峰面积 870708 876341 865474 854720 859217 865292 1. 00
供试品溶液峰面积 967356 956721 957923 943782 941257 953408 1. 13
　　 7. 重现性试验　取同批 (批号为 030502)样品
6份 ,按供试品制备方法制备并测定 (见图 2) ,含量
分 别 为: 82. 56mg /g、 83. 70mg /g、 81. 51mg /g、
83. 13mg /g、 81. 72mg /g、 83. 84mg /g ,平均含量为
82. 74mg /g , RSD为 1. 19% ( n= 6) ,见表 3。
表 3　重现性试验表
样品 1 2 3 4 5 6 平均 RSD
含量
(mg /g )
82. 56 83. 70 81. 51 83. 13 81. 72 83. 84 82. 74 1. 19%
　　 8. 回收率　采用加样回收法 ,精密称取已知含
量的样品 (批号为 030502,含量为 82. 56mg /g )六
份 ,分别加入岩白菜素一定量 ,按实验方法测的其峰
面积 ,并计算其回收率 ,结果总的平均回收率为
99. 35% ,总的 RSD为 0. 93% 。见表 4。
　　 9. 样品测定　取样品 ,批号为: 030502、
030401、 021104,按规定方法进行提取测试 ,含量分
别为: 82. 74mg /g、 80. 15mg /g、 84. 13mg /g。
三、讨论
表 4　回收率试验表
序号 测得总量 ( mg)
加入量
( mg)
称样量
( g )
称样相当
量 ( mg)
回收率
(% )
平均回收
率 (% ) RSD(% )
总的平均回
收率 (% )
总的 RSD
(% )
1-1 18. 170 8. 0 0. 123 10. 155 1. 002
1-2 18. 800 8. 0 0. 131 10. 815 0. 998 99. 47 0. 950
1-3 16. 290 8. 0 0. 102 8. 421 0. 984
2-1 19. 280 10. 0 0. 112 9. 247 1. 003 99. 35 0. 93
2-2 19. 920 10. 0 0. 121 9. 990 0. 993 99. 23 1. 110
2-3 19. 470 10. 0 0. 117 9. 660 0. 981
图 1　对照品图谱
　　 1. 提取溶媒的比较:根据报道 [1、 2 ] ,无水乙醇和
甲醇均可作为岩白菜素的提取溶媒 ,经试验 ,批号为
030502的样品 ,两种溶媒分别测定 ,含量分别为:
82. 56( mg /g )、 82. 34( mg /g ) ,在误差范围内 ,考虑
到无水乙醇毒性较小 ,故选择无水乙醇为溶媒。
2. 提取方法和时间的比较:供试品提取分别用
用浸提 24小时 ,和超声提取 20分钟、 30分钟、 40分
钟、 50分钟、 60分钟测定 ,结果浸提 24小时所测含
量偏低 ,而超声提取 30分钟、 40分钟、 50分钟、 60
分钟所得的含量均在误差范围内 ,故选择超声提取
时间为 40分钟。
图 2　样品图谱
表 5　不同提取方法和时间的含量比较
提取方法及时间 浸提 24hr 超声提取
　 　 20’ 30’ 40’ 50’ 60’
含量 ( mg /g) 73. 21 80. 32 81. 79 82. 56 82. 64 82. 71
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Drug Standards o f China 2005, v ol. 6 No. 2 中国药品标准 2005年第 6卷第 2期　 (总 87)
　　 3. 在实验中发现进样量不宜超过 10μl,进样量
过大 ,会引起理论塔板数偏小、峰形变形 ,故测定时 ,
供试品进样量定为 5μl。
4. 原矽肺宁片中的岩白菜素含量采用薄层扫
描法 ,由于薄层斑点在日光和荧光下肉眼均不可见 ,
加上薄层展开费时 ,影响因素较多 ,对日常生产质量
控制不利。两法对照测试 ,由于原法采用 24小时浸
提 ,含量略低。
综上所述 ,本法具有简便 ,快速 ,正确 ,重现性好
的特点 ,可作为矽肺宁片有效的质量控制方法。
参考文献
[1 ]卫生部药品标准 WS-070( Z-14)-92( 2)
[ 2 ]杨怀镜 ,姚宏春 ,张全望 . HPLC法测定岩白菜素和复方岩白菜
素片的含量 ( J) .中国药事 , 2003; 17( 3): 171
HPLC法测定林可霉素利多卡因凝胶的含量
涂晓真　吴建设　付丽娟 (武汉市药品检验所　武汉　 430012)
摘要　目的: 用高效液相色谱法同时测定盐酸林可霉素利多卡因凝胶中林可霉素和利多卡因的含量。 方法: 流动相为
0. 05mol /L硼砂溶液 (用 85%磷酸溶液调节 pH值至 5. 7) -甲醇 -乙腈 ( 75∶ 15∶ 10) ;色谱柱为 C18柱 ;紫外检测波长为 214nm;
流速 1ml /min;柱温 30℃。结果: 林可霉素在 8. 2～ 513μg /m l范围内线性关系良好 , r= 0. 9999,平均回收率为 100. 9% ( n= 6) ,
RSD为 1. 03% ;利多卡因在 7. 8～ 487μg /m l范围内线性关系良好 , r= 0. 9994,平均回收率为 98. 8% ( n= 6) , RSD为 1. 51%。
结论: 该方法灵敏度高 ,线性范围广 ,具有高的专属性 ,快速简便 ,重现性好。
关键词　高效液相色谱 ;盐酸林可霉素 ;利多卡因 ;含量测定
Determination of the assy of Licomycin and Lidocaine Gel by RP-HPLC
Tu Xiao zhen Wu Jianshe Fu Li juan(W uhan Insti tute for Drug Con trol ,W uhan 430012)
Abstract Objective: To dete rmine the assy o f Lincomycin and Lidocaine in Lincomycin Hydrochlo ride and Lidocaine Gel.Meth-
ods: The mobile phase consists of 0. 05mol· L- 1 Bo rax ( adjusted to pH5. 7 with phosphoric acid) -methanol-acetonitrile( 75∶ 15
∶ 10) . A C18 colum n was used. The UV detection w aveleng th was at 214 nm. , a flow ra te w as 1ml· min- 1 , a nd the co lumn
tempera ture w as 30℃ . Results: The Linea rity w as good for Licomycin within the r ange o f 8. 2～ 513μg· ml- 1 , r= 0. 9999, the
mean recover y w as 100. 9% ( n= 6) , RSD= 1. 03% ; The linearity w as good for Lidocaine within th e range o f 7. 8～ 487μg·
ml- 1 , r= 0. 9998, the mean recover y was 98. 8% ( n= 6) , RSD= 1. 51% . Conclusion: The me thod is rapid, convenient and repro-
ducible.
Key words　 RP-HPLC; Licomycin; Lidocaine; dete rmination
　　林可霉素利多卡因凝胶 (绿药膏 )是由盐酸林可
霉素、盐酸利多卡因与其它适宜的基质制成。临床上
多用于外科烧伤及蚊虫叮咬引起的各种感染。 该制
剂为复方制剂 ,收载在各省的地方标准中 ,原标准盐
酸林可霉素的含量测定均采用抗生素微生物检定
法 ,而盐酸利多卡因只以鉴别加以控制。本文参照中
国药典 2000年版 [ 1]盐酸林可霉素注射液的色谱条
件 ,用 HPLC法可同时测定盐酸林可霉素和盐酸利
多卡因的含量 ,结果准确 ,方法简便 ,重现性好。
一、仪器和试药
日本岛津 LC-10A高效液相色谱系统 , Anastar
色谱工作站。
盐酸林可霉素 (含量 85. 4% )和利多卡因对照
品 (中国药品生物制品检定所 ) ;林可霉素利多卡因
凝胶 (市售 ,规格: 10g: 林可霉素 0. 05g与盐酸利多
卡因 0. 04g ) ;甲醇、乙腈为色谱纯 ,硼砂、磷酸为分
析纯 ,水为重蒸馏水 ,其他试剂均为分析纯。
二、方法与结果
1. 色谱条件
色谱柱: Hypersil BDS C18 ( 4. 6× 200mm , 5μm)
和 Spheriso rb C18 ( 4. 6× 200mm , 5μm );流动相:
0. 05mol /L硼砂溶液 (用 85%磷酸溶液调节 pH值
至 5. 7) -甲醇 -乙腈 ( 75∶ 15∶ 10) ;检测波长为
214nm;流速 1ml /min;柱温: 30℃。
2. 线性试验
精密称取盐酸林可霉素对照品 120. 22mg与利
多卡因对照品 97. 3mg ,置同一 50ml量瓶中 ,加
0. 05mol /L硼砂溶液溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,精密
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中国药品标准 2005年第 6卷第 2期　 (总 88) Drug Standa rds of China 2005, v ol. 6 No. 2