全 文 ：T L C
一可见分光光度法对丝瓜藤及其炮制品质最控制的应用
中国药科大学 (南京 21 0 0 0 ) 9
江 西余江制药厂-
程萦胖 介
吴朝 阳
谢 宁
摘 要 用薄层刮板一可见分光光度法检测丝瓜藤及其炒黄 、 炒炭制品中齐墩果酸的含量 。 其方法
回收率为 9. 2 5% , r 一 0 . 9 9 9 8 ( n 一 5 ) , R s D 为 1 . 05 % ,取得了较为可靠的结果 。 证明丝瓜藤原药材
及其炮制品中齐墩果酸含量无显著差别 。
关镇词 丝瓜藤 齐墩果酸 T L C 一可见分光光度法 炮制
丝 瓜 系 葫 芦 科植物 L u fj 盗 cy z认 d ir ca
( L
.
) R o e m
. , 民间用其藤 (叶 )治疗慢性气管
炎有着悠久的历史〔 , ’ , 对其化学成分的研究
已有些报道 , 主要 成分为齐墩果酸 及其糖
贰〔 2 · ’ 〕 。 据《中药大辞典 》记载 : 本品有舒筋活
血 , 杀虫之功效 , 有小毒 。 内服及外用均需 “ 烧
存性 ” 或“ 锻存性 。 ” 为研究并比较丝瓜藤及其
炒黄 、 炒炭制品中主要成分齐墩果酸差别 ,炮
制对其成分的影响 ,我们对此进行了研究 。
1 实验部分
1
.
1 仪器与试药 : 7 52 可见紫外光栅分光光
度 计 ; 超声 波 清洗 器 C X 一 2 5 0 型 ; P e r k i n -
E lm e r L a m b d
a 2 U V / v i s s p e e t r o m e t e r ;丝瓜
藤 L . 州 in d而 a ( L . ) R oe m 采 自江西余江 ,
炒黄及炒炭丝瓜藤自制 ;齐墩果酸对照品 (中
国药品生物制品检定所提供 ) ;硅胶 G (层析
用 ,青岛海洋化工厂 ) ;化学试剂均为分析纯 。
1
.
2 最大吸收波长的选择 : 称取适量齐墩果
酸对照品 , 加入 0 . 05 %三氯化铁冰醋酸溶液
5 m L
, 再缓缓 加入 5 m 1) 浓硫 酸 , 摇 匀 , 在
40 0一 60 0 n m 波长处扫描 , 图谱显示最大 吸
收波长为 4 5 0 n m 。
1
.
3 薄层色谱条件 : 展开剂 : 氯仿 一甲醇 ( 10
: 1 ) ; 硅胶 G 薄层板 : 取硅胶 G 适量 , 加入
1% C M C
一
N a 水溶液 , 混匀 . 涂布于 20 c m x
2 0 c m 玻板上 ,室温干燥后 ,于 1% ℃活化 40
m in 贮于 干燥器内备用 。
称取 50 9 待测各种原药材 ,置索氏提取
器中用 甲醇 回流 4 h , 减压 回收 甲醉 , 用 0 . 1
m o l / L N a O H 溶液调 p H ) 1 1 , 回流 3 0 m i n ,
加 0 . 1 m o l八一 H C I调 p H Z , 回流 l h ,滴加氨
水至 p H 7 用氯仿萃取 3 次 , 合并氯仿液 , 水
洗 3 次 ,取氯仿层 ,用无水 N o Z SO ; 适量进行
干燥后 , 过滤 , 加氯仿定容于 50 m L 容量瓶
中 ,备用 。
1
.
5 标准曲线的制备 :精密称取齐墩果酸对
照品 6 . 21 m g ,溶于 2 m L 甲醇中 , 超声振荡
使溶解 , 带状点样于 20 c m x 20 c m 薄层板
上 , 用小量甲醇反复洗涤小瓶 , 将洗涤液点于
层析板上 ,以氯仿一甲醇 ( 10 : l) 溶液展开 ,用
碘蒸气显色 。 刮取约 1 . 5 。 m 宽色带 ,用甲醇
提取 3 次 , 每次 8 、 6 、 4 m L , 离心 , 合并上清
液 , 置 25 m L 容量瓶中 , 加 甲醇至 刻度 , 混
匀 。 分别精密吸取 0 . 5 、 1 . 0 、 l · 5 、 2 · 0 、 3 · 0 m L
上述溶液于 25 m L 三角烧瓶中 ,蒸去 甲醇至
干 , 加入 0 . 05 %三氯化铁冰醋酸溶液 5 m L ,
再缓缓 加入 s m l才 浓 H ZS O 4 , 摇匀 , 放置 40
rT il n
,在 4 5 0 n m 波长处测吸收度 , 以试剂为
空白 ,结果见表 1 。 回归方程为 A 一 0 . 9 4 43 C
一 0 . 0 2 3 1 , r 一 0 . 9 9 9 8 ( n ~ 5 ) 。
1
.
6 回收率试验 : 分别精密称取 5 m g 对照
品 , 同时作样品对照 ,提取和测定方法分别按
一 A d d r e s s
程萦弊 女
:
C h e n g Z ih u a
,
C h i
, 大学本科学士学位 ,
n a P h
a r m a e e u t ie a l U n iv e r s it y
,
N
a n
j in g讲师 。 1 9 8 3 年毕业 于江西中医学院药学系中药专业 , 分配在江西国药厂 L作 , 19 91 年至今在中国药科大学中昆药剂研究所工作 。
《中草药 》 1 9 9 7 年第 2 8 卷第 10 期
主要从事部分教学和药物制剂研究 ,包括中药 、保健品 , 缓控释制剂研究工作 。
一
5 9 7
·
表 1 标准曲线侧定擞据
对照品 C ( m g ) 0 . 1 2 4 2 0 . 2 4 8 4 0 . 3 7 2 6 0 . 4 9 68 0 . 7 45 2
吸收度 A 0 . 0 8 9 0 . 2 1 5 0 . 3 3 0 0 . 4 5 0 0· 6 7 7
1
.
4项和 1 . 5项下内容操作 。 结果回收率为
9 9
.
5 2%
,
S D 为 1 . 0 4 , R S D 为 l , 0 5% ( n =
5 )
。
1
.
7 测定方法的稳定性实验 : 称取一定量的
对照 品 , 加 0 . 05 %三氯化铁冰醋酸溶液 5
m L
, 再缓缓加入 5 m I J 浓 H ZS O ; , 摇匀 ,放置
4 0 m i n
, 每隔 O , 3 0 , 6 0 , 9 0 , 1 2 0 , 1 5 0 , 1 8 0 m i n
测定其吸收度 ,结果表明样品在 。~ Z h 内测
定结果较稳定 。
1
.
8 样品含量测定 : 精密吸取 1 . 4 项下制备
的样品溶液 10 m L ,置 25 m L 三角烧瓶中 ,
置水浴上蒸去氯仿至干 , 用 2 m l J 甲醇溶解 ,
带状点样 20 。 m x 20 c m 薄层板上 , 同时用齐
墩果酸 甲醇溶液定位 。 按 1 . 5 项下展开 、 刮
板 、洗脱 ,用 甲醇定容至 25 m L 容量瓶 ,摇匀
后 , 精密 吸 取 2 . 5 m l , , 蒸去 甲醇 至 干 , 加
0
.
05 %三氯化铁冰醋酸溶液 5 m L ,再缓缓加
入 5 m L 浓 H ZS O ; 溶液 ,摇匀 , 放置 4 0 m i n ,
在 4 50 n m 处测吸收度 。 结果见表 2 。
表 2 样品测定结果
吸收度
A
测量值 ( m g )
原药材
0
.
5 7 4
0
。
5 6 9
0
。
5 7 2
0
。
5 7 2
6
.
3 0
炒黄制品
0 5 74
0
.
5 77
0 58 0
0
.
5 77
6
.
3 5
炒炭制品
0
。
5 6 3
0 5 6 8
0
。
5 6 9
0
.
5 6 7
5
.
2 5
墩果酸量无显著差异 ,说明炮制对齐墩果酸
含量影响不大 。 每克药材约含 6 m g 以上齐
墩果酸 。
2 讨论
2
.
1 据 《中药大辞典 》记载 ,本品性味“ 苦 ,微
寒 ,小毒 ” 。 临床使用均需烧存性研末内服或
锻存性研末调敷外用 。 为了对传统用药方式
提供现代理论依据 ,我们研究了原药材 、炒黄
及炒炭制品中齐墩果酸含量 ,结果表明无 明
显差异 。 当然要确定炮制对其它成分的影响 ,
还需进一步工作 。
2
.
2 我们采用制备薄层 , 选用 20 c m x 20
c m 薄层板 ,用带状点样 ,可加大薄层载样量 。
本文试验成败的关键是薄层色谱的分离 ,如
果薄层色谱分离的不好 ,将会增加刮板的难
度和误差 , 因此 , 筛选了十几种展开剂 ,最后
确定用氯仿一甲醇 ( 10 : 1) 为展开剂 ,取得较
好的分离效果 。
2
.
3 我们在样品提取中加酸和碱 , 目的是为
了使贰类水解 ,提高齐墩果酸量 。
2
.
4 试验所有加热操作均在水浴上进行 。显
色时 , 加入浓 H ZS O ; 要缓慢 , 以防气泡的产
生 ,并轻轻摇匀 , 保证测试结果的正确性 。
今 考 文 献
1 竹本常松 ,等 . 桑学推志 , 10 4 ( 3 ) , 2 4 6
2 南京药物研究所气管炎药物研究组 . 中草药 , 19 80 , n
( 2 ) ; 5 5
( 1 9 9 6
一
1 1
一
2 2 收稿 )
原药材 、炒黄制品和炒炭制品三者含齐
A P P l i c a t i o n o f T L C
一 V i s i b l e S P e e t r o m e t r y M e t h o d i n Q u a l i t y C o n t r o l o f
S t e m o f S u a k w a V e g e t a b l e s P o n g e ( L 从fJ 伍 cyl i n d ir c a ) a n d i t s P r o c e s s e d P r o d u c t
C h
e n g Z ih u a
,
W
u
Z h a o y a n g
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A T L C
一 v is ib le s p e e t r o m e t r y m e t h o d f o r t h e d e t e r m in a t io n o f o le a n o li e a e id in s t e m o f L “ `fj 盗卿l i n d ir c a
( L
.
) R o e m a n d i t s p r o e e s s e d p r o d u e t ( s t i r b a k e d t o b r o w n o r e h a r r e d ) w a s r e p o r t e d
.
T h
e m e t h o d w a s e a r r ie d
o u t o n t h in la y e r p la t e s o f s i lie a g e l G w i t h e h lo r o f o r m m e t h y l
一 a l e o h o l ( 10 , 1 ) a s t h e d e v e l o p e r
, a n
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v i s i b l
e
a b s o r b a n e e o f t h e e lu a t e w a s d e t e r m in e d a t 4 5 0 n m
.
T h e m e t h o d s h o w e d g o o d lin e a r i t y ( r 一 0 . 9 9 9 8 , n = 5 ) a v -
e r a g e r e e o v e r y w
a s 9 9
.
5 2%
, a n d R S D w a s 1
.
0 5 %
.
R e s u l t s s h o w e d t h a t t h e O l e a n o li e a e id e o n t e n t i n t h e s t e m
o f L “ 夕Zi o d ir c a a n d i t s p r o e e s s e d p r o d u e t w a s n o t d is t i n e t l y d if fe r e n t f r o m e a e h o t h e r .
.
5 9 8
.