全 文 ：反相高效液相色谱法测定丁公藤注射液中
东首著内醋含量
广西医学院附院 ( 南宁 5 30 0 2 7) 李 梅 .
广西药品检验所 陆敏仪
周 燕文
勇二
杨正鸿 赵 素荣
草 麟二
摘要 报 道 了 用 反 相 高 效液相色谱法测定丁公藤注射液中东直著内醋 , ( T S C O )含量的方法 。
色谱柱 : 岛 津C L C 一O D S柱 ( 5 协m ) ; 流 动 相 : 甲 醇一水一冰醋 酸 ( 38 , 62 : 0 . 1 9 ) ; 流 速 :
0
.
g m l/ m i
n ; 检测波长 : 3 10 n m ; 柱温 : 5o0 C : 内标 : 丙酮 。在 0 . 4 ~ 16 卜 g范围内线性良好 , r =
1
.
0 00 0
。 平均回收率为 9 7 . 7 1 士 0 . 。。纬 ( P = 0 . 0 5 , C V = 1 . 5 3% , n = 1 2 ) , 稳 定性 、 重现性均
较好 , 可作为丁公藤注射液的质量控制手段之一 。
关键饲 丁公藤注射液 东直著内醋 ( sc o p ol et i n ) H P L C
丁公藤注射液具有发汗 、 驱风 、 消肿 、 镇痛作用 , 临床用于治疗急 、 慢性风湿性关节炎
及类风湿性关节炎 、 坐骨神经痛 , 辅治腰肌劳损 、 腰椎炎 、 外伤性关节炎等疾病 。 其主含东
莫若内醋 、 东蓑若贰 , 两者被认为是丁公藤中抗风湿的有效成分 , 并且 , 药理实验表 明两者
均具有一定的镇痛 、 抗炎 、 祛痰 、 平喘作用 c1 一 3〕 。 已知东蓑若内醋的含量 测定方法有紫外分
光光度法〔 2〕 、 比色法 c4 〕、 薄层层析 -紫外分光法〔 5 〕、 薄 层 光密度法〔 6〕 、 荧光法 〔 7〕、 气相色
谱法〔 8 〕等 , 本文建立了用反相 H P L C法测定丁公藤注射液中东 蓑若内醋含量的方法 , 为其制
剂质量控制提供一个简便 、 快速 、 准确的测定方法 。
1 仪器与试药
仪器 : 日本岛津 L C 一 6 A高效液相色谱仪 , C R 4 一 A X数据处理机 , L C一 6 A泵 ; S P D 一 6 A
紫外检测器 , 微量注射器 : 50 时 。 长城 2 86 计算机 。
试剂均为分析纯级 ( A R ) 。
对照品 : 东 夏若内醋 ( 中国药品生物制 品检定所供 。 批号 9 1 1 1 30 )
样品 : 详见表 。
2 色谱条件
2
.
2 色谱柱 : 日本岛津 e L e 一 o D s ( 6 x 15 o m m , 5卜m ) , 保护柱: 日本 岛津 e L e 一 o D s ( 4 x
1 o m m
, 5卜m ) 。
2
.
2 流动相的选择 : 先用正交试验方差分析的计算杭程序粗选 { _卜流动相的条件 , 然后用改进
单纯形法精选出流动相的最佳条件为 : 甲醇一水一冰醋酸 ( 38 , 6 2 , 0 . 1 9) , 流 速 二 0 . g m l/ m in ,
柱温 = 50 ℃ ; 检测波长 31 0 n m ; 内标 : 丙酮 , A U F S : 。 . 02 ; 记 录 仪 衰 减 4 , 纸 速 4 m m /
m i n , 进样量 2 0协 l 。
3 对照品和供试品溶液的制备
3
.
1 对照 品贮备溶液的制备 : 精密称取东蓑若 内醋对照品 25 m g置 25 m l量瓶中 , 加甲醇稀释
至刻度 , 摇匀 , 作为东蓑若内醋对照 品贮备溶液 , 备用 。
3
.
2 对照品溶浓的制备 : 精密吸取东蓑若内酷对照 品贮备溶液 0 . 2 、 0 . 4 、 0 . 6 、 。 . 8 、 1 . 0 、
2
.
0
、
4
. 。 、 8 . o m l , 分置 10 m l量瓶中 , 各加丙酮 l . o m l , 各用甲醇稀释至刻度 , 摇 匀 , 各配
成 2 0 、 4 0 、 6 0 、 5 0 、 10 0 、 2 0 0 、 4 0 0 、 5 0 0协g / m l浓度 , 作为东莫若 I趁脂对照 品溶液 , 密闭 、
.
A d d
r e s s :
L i M
e i
,
T h e A f f i l i a t e d H o s P i t a l o f G u a n g x i M 七 d i c a l C o l l e g e , N a n o i n g
二桂林医学院药学系 92 届实 习生
.
2 46
.
避光 、 冷藏 、 备用 。
3
.
3供试品溶液的制备 :每批注射液各取 5支 , 分别棍匀 , 精密吸取 0 . 5m l置具 塞试管中 ,
加盐酸 Zm l 、 水 7 m l , 混匀 , 置水浴 中水解 3 h , 取 出放冷 , 移置分液漏 斗中 , 试管用水洗涤 3
衫、 , 每次 2 m l , 合并水液 , 加氯化钠 2 9使溶解 , 用氯仿分次 振 摇 提 取 4 次 ( 】5 , 10 , 1 0 ,
10 m l )
, 合并氯仿液 , 加无水硫酸钠 1 9 , 振摇 s m il , 静 置 hl 以上 , 氯仿置水浴上挥干 , 残
渣加 甲醇溶解 , 移入 10 m l量瓶中 , 精密加入 1m l丙酮 , 用甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 作为供试
!异,溶液 。
4 线性试验
取上述各东食若内醋对照品溶液分到进样 , 结果 , 丫} _。 . 4 一 1 6 、 g范圆内 , 东食若 内毕峰高
与其含量线性 良好 , 回归 方程 Y ( 卜: g ) = 7 3 . 3 7 3 8 x 士 4 4 9 一 2 6 8 。 : = 一 。 0 0 0 。
5 系统适用性
取上述东莫若内醋对照 品溶液 ( 4 0林g / m l 、 6 。车、 g / m l 、 8 0件g / m l 、 , 各进样 5次 , 计算理
论板数和分离度 , 结果 , 理论板数按东艾蓉 内醋峰 计算 , 不年洲氏 一 J几 : 9 6 。 ( 尸 = 。 . 0 5 , n = 15 ,
C V = 2 % )
, 东蓑若内醋峰与丙酮内标峰分 离 度 不得 低 于 5 . 5 气尸 = 。 . 0 5 , n : 二 1 5 , C V =
1
.
2 % )
。 色谱图见图 。
9 精密度
的氏产洲l
U
0一.6`l
氏的产寸|卜卜`仁取东蓑若内醋对照品溶液 ( 8 0协g / m l )
连续进样 6次 , 测定峰高 , 结果平均峰高 ( h
为 4 7 4 6士 1 1 0 , ( P = 0 . 0 5 , C V 二 2 旦石, n =
9 )
。
了 回收率
取丁公藤注射液 0 . 5m l , 共 6份 , 其中2
份加入 2 0 0卜g 、 2份加入 4 0 0协g东蓑若内醋 对
照 品混 匀 , 按供试品溶液制备项下从 ,’. · · …
置具塞试管中 , … … ” 起 , 依本法试验 , 按
内标法计算 。 结果平均回收率为 9 7 . 71 士
0
.
9 9%
,
( P
= 0
.
0 5 , C V = 2
.
5 3 %
, n 二
1 2 )
。
……
j {;
}{
。组脸 _招边
8 样品测定 图 丁公藤注射液色谱图
取供试 品溶液依本法测定 , 按内标法计 I 一丙酮 n 一东蓖若口; 酉旨
算 。 结果见表 。
9 讨论
9
.
1 中国药典 90 年版一部法定为丁公藤 E r y ic be ob tus ij ol 化一种入药 , 据 报 道 ,实际生产
中有把光叶丁公藤 E . : hc ;滋 dt “ 和毛叶丁公藤 E . h af an ue sn 行等一并入药的情况 , 由于产地 、
产季 、 品种 、 药用部位的不同 , 丁公藤中东蓑若内醋含量亦不同 , 各厂家的详细生产工艺及
掌握工艺技术上的差 异等 因素 , 造戍各厂家 、 各批号注射液间东蓑若内醋含量相差较大 。 这
就表明原丁公藤注射液质量标准中以原生药和总固体的量来控制制 剂 的 质量 , 尚不足以合
理地控制制剂中的有效成分含量 。
9
.
2 实测表明 , 除个别厂家产品中检不出东蓑若内醋 以 外 , 各厂家的丁公催注射液中 , 东
莫若内醋含量波动在 8 0 一 2 0 3。终g / m l之间 , 由此 , 初步给出丁二 沁 注 、 j一砍中东蕊若内酷 含
《 中草 药 》 1” 4年第 25 卷第 5阴 · 2 4 7 ·
表 丁公藤注射液中的东黄若内脂含纽测定结果
编号 厂家 批 号 含量 (卜 g /ml ) C V %
44
八U CJ
:
八“,上
4444
广西 钦州 制药厂
同上
同」
同_ }二
同」二
同上
同上
同上
l司上
同上
江苏武进制 药厂
同上
江苏盯胎制药厂
9 1 0 4 1 9
9 1 0 4 2 0
9 1 0 4 2 1
9 10 4 2 3
9 10 42 4
9 10 4 2 6
9 10 9 2 7
9 10 0 0 2
9 1 1 0 0 4
9 1 1 0 0 5
9 1 0 6 13
9 1 0 6 1 4
9 1 0 5 1 4
10 5 0
97 0
1 13 0
8 0 0
1 1 2 0
1 0 2 0
1 3 3 0
1 1 1 0
1 3 2 0
1 22 0
2 0 30
1 5 8 0
0
。
0
3
。
2
3 。 5
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:::
:::
,五,曰an`“只Uōbt才O口n”11,曰,d
, .五火二`1
量 限度不得低于 9 0 0协g / m l ( P = 0 . 0 1 , n = 12 , C V = 2 6 . 3 5 % ) 为宜 。
9
.
3 本次测定中 , 发现有的厂家的产品在本实验条 件 下 , 未能检出东蓬若内酷的存在 , 提
示该厂家所用的原药材可能有误 , 或生产工艺技术掌握不当所致 。 这表明 , 将东蓑若 内醋作
为丁公藤注射液 中的质量控制指标是必要的 、 合理的 。
9
.
4 每次重新开机测定 , 均需用东蓖若内醋对照 占}l 溶液 ( 8 0件g /m l) 重新测定校正因子 ,
以保证测定的准确性 。
9
.
5 本实验采旧改进单纯形法计算机动态调优 , 能快速 、 准确地 找 刘最佳的流动相条件 ,
减少人工寻找流动相最佳条件的盲 {_ l性 。
参 考 文 献
中国人民解放军一五一五 部队医院 , 等 . 中华医
学杂志 , 1 9 7 5 , 5 5 ( 9 ) : 6 3 0
叶惠 珍 , 等 . 中草药 , 1 9 8 1 , 1 2 ( 5 ) : 5
中国医学科学院药物 研究所药用植物研究室 . 流
物学报 , 19 77 , 19 ( 4 ) : 2万9
郑宏业 . 药检工作通迅 , 1 9 7 9 , 9 ( 6 ) : 2 9 2
M o r o z o v a E V
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M e t o d y S o u r e m
B i o k h i m
, 1 9 7 5
, 1 0 5 : 7
陈瑞华 , 等 . 中 日天然药物学术讨论会论 文集 .
北京 : 1 9 8 4 20
M o r z o r a E V
, e t a l
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P r i k l B i o k h i m M i
-
k r o b i
o l
, 1 9 7 4 , 10 ( 3 )
: ` 7 7
W i
n k l e r B C
, e t a l
.
J
。
C h r o m a t o g
,
1 9 6 8
,
3 5
: 57 0
( 1 9 9 3
一 0 2一 Z x收稿 )
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参 考 文 献
1 程培元 , 等 . 药 学学报 , 1 9 8 4 , 1 9 ( s ) : 5 9 3 1 9 5 1 , 、 o ) : 7 5 3
2 工先荣 , 等 . 植物 学报 , 1 9 8 d , 2 6 ( 4 ) : 落2 5 6 H a n d o n g S , e t a l . P h y t o e h e m i s t r y , 2 9 0 1 ,
3 王先荣 , 等 . 植物学报 , 1 9 8 5 , 2 7 ( 3 ) : 2 8 5 3 0 ( 2 ) : 6 0 3
4 王先荣 , 等 . 植物学报 , 1 9 8 6 , 2 8 ( 4 ) : 4 ` 5 ( } 9 9 3一 0 3 一 0 3 ; {交稿 )
石 H a n d o n g S , e t a l 。 C h e m i s r r y L e t t e r s ,
安徽省高校科技 函授部中医 函授大专班面向全国招生
本部经安徽省教委批准面向全国 招 生 。 选 用 教授全面辅导和教学 。 凡具有高中语文程度者均可
《 全国高等中医院校函授教材 》 , 开设十二门中医 报名 , 附邮 3 元至合肥市望江西路 6一 0 8信箱中 医
课程 , 与高等教育中医白考学试紧相配合 , 由专家 函大 , 邮编 2 3 0 0 2 2 , 简章备索。
.
2 4 8
-