全 文 : Guihaia Mar. 2016ꎬ 36(3):369-372
http: / / journal.gxzw.gxib.cn
http: / / www.guihaia-journal.com
DOI: 10.11931 / guihaia.gxzw201409017
王庆玲ꎬ董涛ꎬ杜文玉ꎬ等. 模拟氮沉降对紫苏叶挥发油主要成分的影响 [J]. 广西植物ꎬ 2016ꎬ 36(3):369-372
WANG QLꎬ DONG Tꎬ DU WYꎬ et al. Effects of simulated nitrogen deposition on main components of volatile oil in Perilla frutescens [J]. Guihaiaꎬ 2016ꎬ
36(3):369-372
模拟氮沉降对紫苏叶挥发油主要成分的影响
王庆玲ꎬ 董 涛ꎬ 杜文玉ꎬ 李凯明ꎬ 吕朝磊ꎬ 张子龙∗ꎬ 王宝华
( 北京中医药大学 中药学院ꎬ 北京 100102 )
摘 要: 我国为世界三大高氮沉降区之一ꎬ氮沉降严重影响了植物生长发育ꎮ 该研究采用喷施硝酸铵
(NH4NO3)模拟氮沉降ꎬ分析了不同浓度氮沉降作用下紫苏叶中紫苏醛、D ̄柠檬烯、α ̄蒎烯等 3种挥发油成分
的变化规律ꎮ 结果表明:随喷施氮盐浓度不断提高ꎬ紫苏叶挥发油的 3种主要成分含量均有显著下降趋势ꎻ氮
盐浓度升至 0.044 molL ̄1时ꎬ紫苏醛、D ̄柠檬烯、α ̄蒎烯的含量降至最低ꎬ之后趋于稳定ꎻ氮盐浓度对 3种挥发
油成分含量的比例也有影响ꎻ不同氮盐浓度处理下ꎬ3 种挥发油成分的变异系数不同ꎬ紫苏醛的变异系数为
0.692 9ꎬD ̄柠檬烯的变异系数为 0.460 1ꎬ而 α ̄蒎烯的变异系数为 0.271 6ꎬ即紫苏醛含量变化最大ꎬα ̄蒎烯含量
最为稳定ꎮ 大气氮沉降浓度对紫苏叶挥发油主要成分含量有显著影响ꎬ随氮盐浓度不断提高ꎬ紫苏醛、D ̄柠檬
烯、α ̄蒎烯等 3种挥发油成分含量呈降低趋势ꎬ尤以紫苏醛含量的降低最为剧烈ꎮ 氮沉降增加对紫苏叶有效
成分含量有降低的作用ꎮ
关键词: 氮沉降ꎬ 紫苏ꎬ 紫苏醛ꎬ D ̄柠檬烯ꎬ α ̄蒎烯
中图分类号: Q946.889 文献标识码: A 文章编号: 1000 ̄3142(2016)03 ̄0369 ̄04
Effects of simulated nitrogen deposition on main
components of volatile oil in Perilla frutescens
WANG Qing ̄Lingꎬ DONG Taoꎬ DU Wen ̄Yuꎬ LI Kai ̄Mingꎬ
LÜ Zhao ̄Leiꎬ ZHANG Zi ̄Long∗ꎬ WANG Bao ̄Hua
(School of Chinese Pharmacyꎬ Beijing University of Chinese Medicineꎬ Beijing 100102ꎬ China )
Abstract: Our country is one of the three nitrogen settlement areas in the worldꎬ and nitrogen deposition seriously affects
the growth and development of plants. We analyzed the changing rule of the three kinds of volatile oil componentsꎬ Peril ̄
la aldehydeꎬ D ̄Limoneneꎬ α ̄Pinene in the leaves of Perilla frutescensꎬ under different concentrations of nitrogen deposi ̄
tionꎬ by spraying ammonium nitrate nitrogen deposition (NH4O3) simulation. The results showed that with the continu ̄
ous improvement of salt spraying nitrogenꎬ the main components of the volatile contents of the three kinds of Perilla fru ̄
tescens oil were significantly downwardꎻ Salt concentration of nitrogen at 0.044 molL ̄1ꎬ Perilla aldehydeꎬ D ̄Limo ̄
neneꎬ the content of α ̄Pinene fell to the lowestꎬ after stabilizingꎻ Nitrogen salt concentration on the proportion of three
kinds of volatile oil contents were also affectedꎻ Under different nitrogen salt concentrations processingꎬ variation coeffi ̄
cients of three kinds of volatile oil compositions were different. Perilla aldehyde of variation coefficient was 0.692 9ꎬ D ̄
Limonene variation coefficient was 0.460 1ꎬ and α ̄Pinene variation coefficient was 0.271 6. The Perilla aldehyde content
收稿日期: 2014 ̄12 ̄03 修回日期: 2015 ̄03 ̄26
基金项目: 北京市教委大学生创新创业项目(BJGJ1333)[Supported by the Undergraduates Innovation and Pioneering Project of Beijing Municipal Ed ̄
ucation Commission(BJGJ1333)]ꎮ
作者简介: 王庆玲(1993 ̄)ꎬ女ꎬ湖南常德人ꎬ硕士ꎬ主要从事中药药剂学研究ꎬ(E ̄mail)1042818394@ qq.comꎮ
∗通讯作者: 张子龙ꎬ博士ꎬ副研究员ꎬ硕士生导师ꎬ从事中药资源与生态、中药材规范化生产与质量控制研究ꎬ(E ̄mail)zhangzilong76@ 163.comꎮ
displayed the biggest changeꎬ while the α ̄Pinene content was the most stable. In conclusion the concentrations of atmos ̄
pheric nitrogen deposition had significant effects on the main volatile oil contents in P. frutescens leaves. With the in ̄
crease of salt concentration in nitrogenꎬ The volatile oil contentsꎬ Perilla aldehydeꎬ D ̄Limoneneꎬ α ̄Pinene etc. showed
a trend of reduceꎬ especially in the lower levels of the most dramatic perillaldehyde. Increased nitrogen deposition would
decrease the quality of P. frutescens.
Key words: nitrogen depositionꎬ Perilla frutescensꎬ Perilla aldehydeꎬ D ̄Limoneneꎬ α ̄Pinene
氮沉降是大气中的氮化合物(包括自然来源和
人类活动来源)通过非生物途径进入生态系统的过
程ꎮ 自工业革命以来ꎬ诸如矿物燃料的燃烧、含氮化
肥的生产使用、畜牧业等人类活动日益扩展ꎬ使得向
大气中排放含氮化合物迅速增加(张炜等ꎬ2008ꎻ孙
本华等ꎬ2006ꎻ樊后保等ꎬ2007)ꎬ导致大气氮沉降强
度剧增(张维娜等ꎬ2009)ꎮ 我国已成为世界三大高
氮沉降区之一ꎬ许多地区存在高氮现象(Galloway et
alꎬ 2003ꎻ荣海等ꎬ2011)ꎮ 氮沉降严重影响了植物
的生长发育ꎬ但以往多以森林生态系统为主要研究
对象ꎬ很少探讨药用植物对氮沉降的响应规律ꎮ 目
前我国有 40%的植物类药材供应主要依靠栽培品
种ꎬ因此探讨氮沉降对药用植物生长发育ꎬ尤其是对
其有效成分含量的影响尤为重要及紧迫ꎮ
紫苏叶为唇形科植物紫苏(Perilla frutescens)的
干燥叶(或带嫩枝)ꎬ有解表散寒ꎬ行气和胃的功效
(国家药典委员会ꎬ2015)ꎮ 紫苏叶挥发油的有效成
分主要是紫苏醛ꎬ另外还有少量的 D ̄柠檬烯和 α ̄蒎
烯ꎮ 紫苏栽培历史悠久ꎬ目前分布于全国 20 多个
省ꎬ但主要产于江苏、安徽和湖南等南方地区ꎮ 而上
述地区正是我国的主要氮沉降区域ꎬ大气氮沉降量
在 5.1~25.6 kghm ̄2a ̄1之间ꎮ 因此ꎬ本研究拟通
过喷施不同浓度氮盐模拟不同程度大气氮沉降ꎬ通
过挥发油提取、气相 ̄质谱分析(任洁等ꎬ2006)ꎬ分析
氮沉降增加对紫苏叶挥发油成分的影响ꎬ以期揭示
大气氮沉降增加背景下紫苏叶品质变化规律ꎬ对于
阐明氮沉降对药用植物的影响机制ꎬ全面了解氮沉
降生态效应具有重要意义ꎮ
1 材料与方法
1.1 材料与器材
1.1.1 实验材料 紫苏种子购自北京市芳萱苑种子
有限公司ꎬ经鉴定为唇形科紫苏属植物种子ꎮ 在北
京市园林科学研究所进行试验ꎬ 2014年 3月下旬播
种ꎬ待苗高 5~6 cm 时移至田间ꎬ常规管理ꎮ 7 月下
旬收获成熟紫苏叶ꎬ清洗干燥后备用ꎮ
1.1.2 实验器材 挥发油提取器(2 000 mL 烧瓶 型
号:BB89 ̄2000)ꎬ美国 Agilent(安捷伦)7890A ̄5975C
气质联用仪ꎮ
1.2 试验设置
设置 5种不同浓度氮盐(NH4NO3)模拟大气氮
沉降ꎬ由低至高分别为 0、0.011、0.022、0.044、0.088
molL ̄1ꎬ从 4 月开始ꎬ每月的月中和月末各进行 1
次喷洒ꎬ其中氮浓度为 0的对照组喷洒等量蒸馏水ꎮ
1.3 挥发油提取
按国家药典委员会(2010)中挥发油提取方法
提取ꎮ 采用水蒸气蒸馏法ꎬ每处理约 100 g 紫苏叶ꎬ
加入 600 mL蒸馏水ꎬ蒸馏 6 h得到浅黄色紫苏挥发
油样品ꎮ
1.4 GC ̄MS分析
色谱条件:用美国安捷伦公司 7890A ̄5975C 气
质联用仪ꎬ色谱柱是 19091S ̄433 ̄Agilent HP ̄5ms 5%
Phenyl Methyl Silox气相毛细管柱(30 m × 250 μm ×
0.25 μm)ꎬ进样口采用 Agilent分流 /不分流进样口ꎬ
进样口温度为 250 ℃ꎬ不分流ꎬ进样量 2 μLꎬ程序升
温:初始温度 95 ℃ꎬ20 ℃min ̄1到 190 ℃持续 1
minꎬ5 ℃min ̄1到 230 ℃持续 1 minꎬ25 ℃min ̄1
到 290 ℃持续 20 min (王琦等ꎬ2009ꎻ卢汝梅等ꎬ
2006)ꎮ 电离方式为 EI 源ꎬ离子源温度为 230 ~ 250
℃ꎬ四级杆 150~200 ℃ꎮ
2 结果与分析
2.1 氮沉降对挥发油主要成分含量影响
用毛细管气相色谱法对紫苏叶挥发油进行分
析ꎬ采用色谱数据处理系统ꎬ以峰面积归一化法测得
挥发油各组分相对含量(李健隽ꎬ2012ꎻ彭炳先等ꎬ
2007)ꎮ 本文重点考察紫苏叶中 3 种主要的挥发油
成分:紫苏醛ꎬD ̄柠檬烯和 α ̄蒎烯ꎮ 不同氮沉降浓
度下 3 种挥发油成分含量结果见表 1ꎬ挥发油成分
与氮沉降浓度线性关系见表 2ꎮ 挥发油成分含量对
氮沉降浓度变化的响应规律见图 1ꎮ
从图1可以看出ꎬ3种成分的相对含量都随着
073 广 西 植 物 36卷
表 1 不同浓度氮沉降作用下紫苏叶挥发油 3种主要成分 GC ̄MS分析结果
Table 1 Effects of different concentrations of nitrogen deposition on the three main
components of volatile oil in Perilla frutescens leaves
浓度
Concentration
(molL ̄1)
保留时间
Retention time
(s)
名称
Designation
分子量
Molecular weight
匹配度
Mate linear
含量
Content (%)
0 5.352 α ̄Pinene (α ̄蒎烯) 136.125 97 0.59
7.124 D ̄Limonene (D ̄柠檬烯) 136.125 94 23.07
11.645 Perilla aldehyde (紫苏醛) 150.104 94 58.18
0.011 5.385 α ̄Pinene (α ̄蒎烯) 136.125 97 0.53
7.144 D ̄Limonene (D ̄柠檬烯) 136.125 94 17.95
11.862 Perilla aldehyde (紫苏醛) 150.104 49 47.40
0.022 5.358 α ̄Pinene (α ̄蒎烯) 136.125 97 0.52
7.157 D ̄Limonene (D ̄柠檬烯) 136.125 95 13.91
11.936 Perilla aldehyde (紫苏醛) 150.104 49 36.72
0.044 6.132 α ̄Pinene (α ̄蒎烯) 136.125 92 0.33
7.049 D ̄Limonene (D ̄柠檬烯) 136.125 94 7.98
11.624 Perilla aldehyde (紫苏醛) 150.104 94 9.26
0.088 6.132 α ̄Pinene (α ̄蒎烯) 136.125 64 0.32
7.049 D ̄Limonene (D ̄柠檬烯) 136.125 94 7.98
11.624 Perilla aldehyde (紫苏醛) 150.104 94 9.15
模拟氮沉降浓度的增加而减小ꎮ 根据线性方程ꎬ紫
苏醛的下降速度最快ꎬ即氮盐浓度在 0~0.044 mol
L ̄1范围内ꎬ其浓度的变化对紫苏醛含量的影响最
大ꎬ其次为 D ̄柠檬烯ꎬ最后是 α ̄蒎烯ꎮ 由表 2 可知ꎬ
紫苏醛与氮盐浓度线性关系较强(R2 = 0. 995 4 >
0.99)ꎬ而对于 D ̄柠檬烯和 α ̄蒎烯ꎬ其线性关系相对
较弱ꎮ
表 2 3种主要挥发油成分与氮沉降浓度线性关系
Table 2 Linear relation of three main components
and nitrogen deposition concentration
物质种类
Material kind
线性方程
linear equation
R2
Correlation
coefficient
线性范围
Linear limit
(molL ̄1)
α ̄Pinene
(α ̄蒎烯)
y=-5.7922x+0.604 0.932 9 0~0.044
D ̄Limonene
(D ̄柠檬烯)
y=-336.65x+22.208 0.982 1 0~0.044
Perilla aldehyde
(紫苏醛)
y=-1115.4x+59.356 0.995 4 0~0.044
2.2 氮沉降对 3种主要成分比例影响
根据不同氮盐浓度下 3种主要挥发性成分的相
对含量ꎬ可计算出其比例关系ꎬ结果见表 3ꎮ 可以看
出ꎬ随着氮盐浓度不断增加ꎬD ̄柠檬烯和紫苏醛相对
于 α ̄蒎烯的比例不断减小ꎬ当浓度达到 0.044 mol
L ̄1时ꎬ三者的比例关系趋于稳定ꎬ为 1 ∶ 24 ∶ 28ꎬ并
且此时各成分相对含量均为最低ꎮ
表 3 不同氮盐浓度下 3种主要挥发性成分的比例
Table 3 Different nitrogen salt concentrations of
three main components in proportion
氮盐浓度
Nitride concentration
(molL ̄1)
α ̄蒎烯 ∶ D ̄柠檬烯 ∶ 紫苏醛
α ̄Pinene ∶ D ̄Limonene ∶
Perilla aldehyde
0 1 ∶ 39 ∶ 99
0.011 1 ∶ 33 ∶ 88
0.022 1 ∶ 27 ∶ 71
0.044 1 ∶ 24 ∶ 28
0.088 1 ∶ 25 ∶ 29
2.3 不同挥发油成分对氮沉降敏感性差异
对紫苏叶挥发油中 3种主要成分相对含量变异
系数进行分析ꎬ结果发现:3 种挥发油成分的变异系
数大小为 α ̄蒎烯(0.692 9)>D ̄柠檬烯(0.460 1)>紫
苏醛(0.271 6)ꎮ 说明不同氮盐浓度条件处理下ꎬ紫
苏醛含量的变化比较大ꎬ而对 α ̄蒎烯在挥发油中的
含量比较稳定ꎮ
3 结论
传统观点认为ꎬ自然生态系统对大气氮沉降相
对不敏感ꎬ 但也有研究认为应该重新评价自然生态
1733期 王庆玲等: 模拟氮沉降对紫苏叶挥发油主要成分的影响
图 1 紫苏叶挥发油 3种主要有效成分随氮沉降浓度变化曲线 a. α ̄蒎烯ꎻ b. D ̄柠檬烯ꎻ c. 紫苏醛
Fig. 1 Linear relation of three main components of volatile oil in Perilla frutescens and nitrogen deposition concentration
a. α ̄Pineneꎻ b. D ̄Limoneneꎬ c. Perilla aldehyde.
系统中氮沉降的重要性(刘学军ꎬ 2004ꎻ 王体健等ꎬ
2008)ꎮ 本研究发现大气氮沉降浓度与紫苏叶挥发
油中主要成分含量密切相关ꎬ而且随着氮沉降浓度
升高ꎬ紫苏叶挥发油成分含量显著降低ꎬ因此ꎬ氮沉
降对于自然生态系统中药用植物有效成分的影响应
该引起足够重视ꎮ
一定量的氮沉降可以增加植物的生产力ꎬ当沉
降量超过了植物和微生物对氮的需求时ꎬ植物的生
产力反而降低(李德军等ꎬ2003ꎻNakaji et alꎬ 2002)ꎮ
调查表明ꎬ我国降水 NO3
-离子浓度(0.32×10 ̄6mol
L ̄1)和沉降量(0.20×10 ̄6 molL ̄1)与美国、日本接
近ꎬ而 NH4
+浓度则更高ꎬ其沉降量也更大ꎬ分别是美
国和日本的 4倍和 3.7倍(张颖等ꎬ2006ꎻ薛璟花等ꎬ
2005)ꎮ 因此ꎬ本研究中较高浓度氮沉降处理使紫
苏叶挥发性成分含量降低ꎬ可能是因为受到了 NH4
+
过量胁迫导致的ꎮ 在后续研究中ꎬ应该设置 NH4
+和
NO3
-的单独对照试验ꎬ进一步明确不同离子对紫苏
叶 3种成分含量及其合成过程的影响ꎮ 此外ꎬ本研
究试验未排除自然条件下的大气氮沉降效应ꎬ今后
应采用大棚种植ꎬ以隔绝大气氮沉降影响ꎮ 同时增
加实验组ꎬ设置更低的 NH4NO3浓度ꎬ从而得到紫苏
叶挥发油中主要有效成分在更低浓度氮沉降条件下
的含量变化ꎬ更加全面评估氮沉降对药用植物有效
成分含量的影响ꎮ
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