全 文 ：广 西 植 物 Ｇｕｉｈａｉａ　３２（２）：２３１－２３７　　　　　　　　　　　　　　 　　 ２０１２年３月　
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－３１４２．２０１２．０２．０１７
韭葱黄条病毒、洋葱黄矮病毒和胡葱黄条病毒
六安分离物ＣＰ基因克隆及同源性分析
韦传宝１，２＊，华俊雅１，杨　宇１，隗洋洋１，史利利１
（１．皖西学院 生物与制药工程学院，安徽 六安２３７０１２；２．安徽省植物生物技术实训中心，安徽 六安２３７０１２）
摘　要：设计特异性引物ＰＣＲ扩增了六安大蒜病样中的韭葱黄条病毒（Ｌｅｅｋ　ｙｅｌｌｏｗ　ｓｔｒｉｐｅ　ｖｉｒｕｓ，ＬＹＳＶ）、洋
葱黄矮病毒（Ｏｎｉｏｎ　ｙｅｌｌｏｗ　ｄｗａｒｆ　ｖｉｒｕｓ，ＯＹＤＶ）和胡葱黄条病毒（Ｓｈａｌｌｏｔ　ｙｅｌｌｏｗ　ｓｔｒｉｐｅ　ｖｉｒｕｓ，ＳＹＳＶ）的全长
ＣＰ基因，插入到ｐＧＥＭ－Ｔ载体并测序。分别比较３种病毒ＣＰ基因种内变异性和种间亲缘关系。结果表明
ＬＹＳＶ六安分离物ＣＰ基因由８６４个碱基组成，与Ｇｅｎｂａｎｋ上已报道的６８个ＬＹＳＶ不同分离物ＣＰ基因的核
苷酸序列同源性为７６．１２％～８４．３１％；ＯＹＤＶ的ＣＰ基因由７７１个碱基组成，与Ｇｅｎｂａｎｋ上已报道的８６个
ＯＹＤＶ不同分离物同源性为８１．０６％～９０．４０％；ＳＹＳＶ的ＣＰ基因由７７４个碱基组成，与Ｇｅｎｂａｎｋ上已报道
的１１个ＳＹＳＶ不同分离物ＣＰ基因同源性为８８．６３％～９４．３２％；从分析结果来看，ＬＹＳＶ的ＣＰ基因不同分
离物之间变异性较大，ＯＹＤＶ　ＣＰ变异性不大，ＳＹＳＶ变异性很小；３种病毒都有１个以上的宿主，病毒种内不
同宿主分离物之间ＣＰ序列差异很小。进化分析显示ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶ的ＣＰ基因亲缘性较近并成簇，ＬＹＳＶ
的ＣＰ基因与ＯＹＤＶ和ＬＹＳＶ的ＣＰ基因亲缘性较远。
关键词：韭葱黄条病毒；洋葱黄矮病毒；胡葱黄条病毒；ＣＰ基因；序列分析
中图分类号：Ｓ４３６．４２１　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１０００－３１４２（２０１２）０２－０２３１－０７
① ＣＰｇｅｎｅ　ｃｌｏｎｉｎｇａｎｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｌｉｕ’ａｎ
ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｏｆ　Ｌｅｅｋ　ｙｅｌｏｗ　ｓｔｒｉｐｅ　ｖｉｒｕｓ，Ｏｎｉｏｎ　ｙｅｌｏｗ
ｄｗａｒｆ　ｖｉｒｕｓ　ａｎｄ　Ｓｈａｌｏｔ　ｙｅｌｏｗ　ｓｔｒｉｐｅ　ｖｉｒｕｓ
ＷＥＩ　Ｃｈｕａｎ－Ｂａｏ１，２＊，ＨＵＡ　Ｊｕｎ－Ｙａ１，ＹＡＮＧ　Ｙｕ１，ＷＥＩ　Ｙａｎｇ－Ｙａｎｇ１，ＳＨＩ　Ｌｉ－Ｌｉ　１
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｗｅｓｔｅｒｎ　Ａｎｈｕｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌｉｕ’ａｎ　２３７０１２，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｐｌａｎｔ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｔｒａｉｎｉｎｇ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ａｎｈｕｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｌｉｕ’ａｎ　２３７０１２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｓｉｇｎｅｄ　ｔｏ　ａｍｐｌｉｆｙ　ＣＰｇｅｎｅｓ　ｏｆ　Ｌｅｅｋ　ｙｅｌｌｏｗ　ｓｔｒｉｐｅ　ｖｉｒｕｓ（ＬＹＳＶ），Ｏｎｉｏｎ　ｙｅｌｌｏｗ
ｄｗａｒｆ　ｖｉｒｕｓ（ＯＹＤＶ）ａｎｄ　Ｓｈａｌｌｏｔ　ｙｅｌｌｏｗ　ｓｔｒｉｐｅ　ｖｉｒｕｓ（ＳＹＳＶ）Ｌｉｕ’ａｎ　ｉｓｏｌａｔｅｓ．Ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ＣＰｇｅｎｅｓ　ｗｅｒｅ　ｃｌｏｎｅｄ　ｉｎｔｏ
ｐＧＥＭ－Ｔ　ｖｅｃｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｗｅｒｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ＣＰｇｅｎｅｓ　ｏｆ　ＬＹＳＶ，ＯＹＤＶ　ａｎｄ　ＳＹＳＶ　Ｌｉｕ’ａｎ
ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｃｏｎｓｉｓｔｓ　ｏｆ　８６４，７７１ａｎｄ　７７４ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ａｃｉｄｓ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ａｌｉｇｍｅｎｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ＣＰｇｅｎｅ　ｏｆ　ＬＹＳＶ
Ｌｉｕ’ａｎ　ｉｓｏｌａｔｅ　ｓｈａｒｅｄ　７６．１２％－８４．３１％ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ａｃｉｄｓ　ｉｄｅｎｔｉｔｉｅｓ　ｗｉｔｈ　６８ＬＹＳＶＣＰｇｅｎｅｓ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｏｎ　Ｇｅｎｂａｎｋ，
ＣＰｇｅｎｅ　ｏｆ　ＯＹＤＶ　Ｌｉｕ’ａｎ　ｉｓｏｌａｔｅ　ｓｈａｒｅｄ　８１．０６％－９０．４０％ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ａｃｉｄｓ　ｉｄｅｎｔｉｔｉｅｓ　ｗｉｔｈ　８６ＯＹＤＶＣＰｇｅｎｅｓ　ｒｅ－
ｐｏｒｔｅｄ　ｏｎ　Ｇｅｎｂａｎｋ　ａｎｄ　ＣＰｇｅｎｅ　ｏｆ　ＳＹＳＶ　Ｌｉｕ’ａｎ　ｉｓｏｌａｔｅ　ｓｈａｒｅｄ　８８．６３％－９４．３２％ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ａｃｉｄｓ　ｉｄｅｎｔｉｔｉｅｓ　ｗｉｔｈ　１１
① 收稿日期：２０１１－０７－０７　　修回日期：２０１１－１２－２９
基金项目：安徽省教育厅自然科学基金重点项目（ＫＪ２０１１Ａ２７２，ＫＪ２０１０Ａ３２８）［Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｎｈｕｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ　Ｅｄｕｃａ－
ｔｉｏｎ　Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ（ＫＪ２０１１Ａ２７２，ＫＪ２０１０Ａ３２８）］
作者简介：韦传宝（１９６１－），男，安徽寿县人，博士，硕士生导师，主要研究方向为植物病毒学，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｗｅｉｃｈｕａｎｂａｏ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ。
＊通讯作者（Ａｕｔｈｏｒ　ｆｏｒ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ）
ＳＹＳＶＣＰｇｅｎｅｓ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｏｎ　Ｇｅｎｂａｎｋ．Ｔｈｅｓｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅ　ｉｎ　ＬＹＳＶＣＰａｍｏｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｉｓｏ－
ｌａｔｅｓ　ｗａｓ　ｈｉｇｈ，ｗｈｉｌｓｔ　ｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅ　ｏｆ　ＯＹＤＶＣＰｗａｓ　ｍｏｄｅｒａｔｅ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｉｓｏｌａｔｅｓ．Ａｌ　ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ
ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ＬＹＳＶＣＰｇｅｎｅ　ａｍｏｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｗａｓ　ｈｉｇｈ，ＯＹＤＶＣＰｇｅｎｅ　ａｍｏｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｗａｓ　ｉｎ　ｔｈｅ
ｍｉｄｄｌｅ　ａｎｄ　ＳＹＳＶＣＰｇｅｎｅ　ａｍｏｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｗａｓ　ｌｏｗ．Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ＬＹＳＶＣＰｈａｄ　ｌｉｔｔｌｅ
ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｗｉｔｈ　ＯＹＤＶＣＰａｎｄ　ＳＹＳＶＣＰａｎｄ　ＯＹＤＶ　ｈａｄ　ｃｌｏｓｅｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｗｉｔｈ　ＳＹＳＶ　ｔｈａｎ　ＬＹＳＶ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｌｅｅｋ　ｙｅｌｌｏｗ　ｓｔｒｉｐｅ　ｖｉｒｕｓ；Ｏｎｉｏｎ　ｙｅｌｌｏｗ　ｄｗａｒｆ　ｖｉｒｕｓ；Ｓｈａｌｌｏｔ　ｙｅｌｌｏｗ　ｓｔｒｉｐｅ　ｖｉｒｕｓ；ＣＰｇｅｎｅ；ｓｅ－
ｑｕｅｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ
　　已知侵染葱属（Ａｌｌｉｕｍ）植物的病毒主要来自
马铃薯 Ｙ 病毒属 （Ｐｏｔｙｖｉｒｕｓ）（Ｔｓｕｎｅｙｏｓｈｉ等，
１９９８；Ｃｈｅｎ等，２００２）、马铃薯Ｘ病毒属（Ｐｏｔｘｖｉｒｕｓ）
（Ｋａｎｙｕｋａ等，１９９２；Ｒｙａｂｏｖ等，１９９６）、麝香石竹潜
隐病毒属（Ｃａｒｌａｖｉｒｕｓ）（Ｔｓｕｎｅｙｏｓｈｉ等，１９９８）和葱
属Ｘ病毒属（Ａｌｌｅｘｉｖｉｒｕｓ）（Ｓｕｍｉ等，１９９９），这些病
毒均为弯曲线状粒子，基因组为正义单链ＲＮＡ。
马铃薯Ｙ病毒属成员最多，对作物的危害也最
大，该属成员基因组长约１０ｋｂ，３′末端具有ｐｏｌｙ
（Ａ）尾巴，含有单一开放阅读框。基因组ＲＮＡ在宿
主内先翻译成多聚蛋白，然后自催化裂解成１０个成
熟蛋白，从Ｎ端至Ｃ端依次为Ｐ１、ＨＣ－Ｐｒｏ、Ｐ３、ＣＩ、
ＮＩａ－ＶＰｇ、ＮＩａ－Ｐｒｏ、Ｎｉｂ和ＣＰ（Ｃｏａｔ　ｐｒｏｔｅｉｎ）（Ａｄｒｉ－
ａｎ　Ｖａｌｉ等，２００７；Ｃｈｅｎ等，２００１）。韭葱黄条病毒
（Ｌｅｅｋ　ｙｅｌｌｏｗ　ｓｔｒｉｐｅ　ｖｉｒｕｓ，ＬＹＳＶ）、洋葱黄矮病毒
（Ｏｎｉｏｎ　ｙｅｌｌｏｗ　ｄｗａｒｆ　ｖｉｒｕｓ，ＯＹＤＶ）和胡葱黄条病
毒（Ｓｈａｌｌｏｔ　ｙｅｌｌｏｗ　ｓｔｒｉｐｅ　ｖｉｒｕｓ，ＳＹＳＶ）是马铃薯Ｙ
病毒属中侵染葱属作物的确定成员。这三种病毒形
态结构相似，往往呈复合感染。要检测病毒，最方
便、有效的方法是制备其抗ＣＰ 血清，通过间接
ＥＬＩＳＡ方法检测病叶中的病毒粒子。制备的某种
病毒抗ＣＰ血清最好一方面能够检测不同地区、不
同宿主分离物，另一方面与其他病毒没有交叉反应，
要预测制备的抗血清是否达到这个要求，对ＬＹＳＶ、
ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶＣＰ基因种内变异性和种间亲缘关
系分析的研究十分重要。本文用 ＲＴ－ＰＣＲ的方法
扩增了ＬＹＳＶ、ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶ六安分离物的ＣＰ
基因，分别分析了３种病毒ＣＰ 基因种内变异性和
种间亲缘关系，为推测制备的六安分离物抗血清是
否能够用于其它地区和不同宿主分离物的检测，以
及是否可能与其它病毒产生交叉反应提供依据。
１　实验部分
１．１材料
有明显花叶病症的大蒜植株采集自六安市郊
区、寿县、舒城县和霍邱县。ｐＧＥＭ－Ｔ载体和大肠
杆菌ＴＧ１菌株购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司；ＬＡ　Ｔａｑ　ＤＮＡ
聚合酶、ＡＭＶ　Ｒｅｖｅｒｓｅ　Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ、Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅａｓｅ
Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ、ＤＮＡ　Ｌｉｇａｔｉｏｎ　Ｋｉｔ　ｖｅｒ．２为ＴａＫａＲａ公司
产品；１ｋｂ　ＤＮＡ　Ｌａｄｄｅｒ为 ＭＢＩ公司产品；引物合
成以及测序由上海生工完成。
１．２植物病叶总ＲＮＡ提取与ｃＤＮＡ合成
按照ＲＮｅａｓｙ　Ｐｌａｎｔ　ｍｉｎｉ（ＱＩＡＧＥＮ）试剂盒提供
的方法提取病叶总ＲＮＡ，于－８０℃保存。因为马铃薯
Ｙ病毒属成员基因组ＲＮＡ的５′－端有Ｐｏｌｙ（Ａ）和特
征序列，设计 Ｍ４－Ｔ（５′－ＧＴＴ　ＴＴＣ　ＣＣＡ　ＧＴＣ　ＡＣＧ
ＡＣ（Ｔ）１５－３′）为起始引物。采用禽源逆转录酶体系合
成ｃＤＮＡ，反应体系２０μＬ，包括４．０μＬ　５×逆转录反
应缓冲液，１０．５μＬ模板ＲＮＡ，０．５μＬ　ＲＮａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ
（４０Ｕ／μＬ），２．０μＬ　Ｍ４－Ｔ起始引物（１００μｍｏｌ／Ｌ），
２．０μＬ　１０ｍｍｏｌ／Ｌ　ｄＮＴＰｓ，１μＬ　ＡＭＶ（５Ｕ／μＬ）。４２
℃水浴合成１．５ｈ，于－３０℃冰箱备用。
１．３　ＣＰ基因的扩增与克隆载体的构建
根据 Ｇｅｎｂａｎｋ上已报道的 ＬＹＳＶ、ＯＹＤＶ 和
ＳＹＳＶ全序列设计相应 ＣＰ克隆引物：ＬＹＳＶ－ＣＰ
（＋）：５′－ＣＣＡ　ＴＡＴ　ＧＧＣ　ＧＧＧ　ＴＧＡ　ＡＧＡ　ＧＣＴ
ＡＧＡ　ＣＴＣ　Ａ－３′；ＬＹＳＶ－ＣＰ（－）：５′－ＧＧＧ　ＡＴＣ　ＣＴＡ
ＴＧＡ　ＧＣＡ　ＣＣＡ　ＴＣＡ　ＡＧＡ　ＴＧＧ　ＴＧ－３′；ＯＹＤＶ－
ＣＰ（＋）：５′－ＣＣＡ　ＴＡＴ　ＧＧＣ　ＡＧＧ　ＧＧＡ　ＡＧＧ　ＡＧＡ
ＡＧＡ－３′；ＯＹＤＶ－ＣＰ（－）：５′－ＧＧＧ　ＡＴＣ　ＣＴＣ　ＡＣＡ
ＴＴＴ　ＴＡＡ　ＴＡＣ　ＣＧＡ　ＧＣＡ　ＡＣ－３′；ＳＹＳＶ－ＣＰ
（＋）：５′－ＣＣＡ　ＴＡＴ　ＧＧＣ　ＡＴＣ　ＡＧＡ　ＡＡＣ　ＡＧＡ
ＡＧＡ－３′；ＳＹＳＶ－ＣＰ（－）：５′－ＧＧＧ　ＡＴＣ　ＣＣＡ　ＴＡＣ
ＧＡＡ　ＧＡＣ　ＣＧＡ　ＧＣＡ　ＧＣＧ　ＴＧ－３′。
以ｃＤＮＡ为模板，采用ＬＡ　Ｔａｑ　ＤＮＡ聚合酶
ＰＣＲ分别扩增ＬＹＳＶ、ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶ全长ＣＰ基
因，反应体系参照说明书。预期扩增产物经１％琼
脂糖凝胶电泳分离，用ＱＩＡｑｕｉｃｋ　Ｇｅｌ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ试
剂盒回收，具体方法参照厂家说明。将纯化产物导
入ｐＧＥＭ－Ｔ载体，并转化ＴＧ１菌株，蓝白斑筛选后
提取阳性克隆质粒，经ＰＣＲ检测确定后测序。
２３２ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３２卷
图１　ＬＹＳＶ六安分离物与部分ＬＹＳＶ分离物ＣＰ核苷酸序列的比对
Ｆｉｇ．１　Ａｌｉｇｍｅｎｔ　ｏｆ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ＣＰｇｅｎｅｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｌｉｕ’ａｎ　ｉｓｏｌａｔｅ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｏｆ　ＬＹＳＶ
不同颜色表示该序列在不同分离物ＣＰ基因中的同源性，其中黑色、红色、蓝色和黄色分别表示同源性达１００％、７５％～１００％、５０％～７５％
和３３％～５０％。下同。Ｂｌａｃｋ，ｒｅｄ，ｂｌｕｅ　ａｎｄ　ｙｅｌｏｗ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｈｏｍｏｌｏｇｙ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ｔｈｅｓｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｒｅａｃｈ　１００％，７５％～１００％，５０％～
７５％ａｎｄ　３３％～５０％．Ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｂｅｌｏｗ．
１．４ＬＹＳＶ、ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶＣＰ基因种内变异性和种
间亲缘关系分析
　　采用ＤＮＡＭＡＮ软件分析不同分离物ＣＰ基因
种间亲缘关系。参考病毒分离物序列下载自 Ｇｅｎ－
ｂａｎｋ数据库。
３３２２期　 韦传宝等：韭葱黄条病毒、洋葱黄矮病毒和胡葱黄条病毒六安分离物ＣＰ基因克隆及同源性分析
图２　ＯＹＤＶ六安分离物与部分ＯＹＤＶ分离物ＣＰ核苷酸序列的比对
Ｆｉｇ．２　Ａｌｉｇｍｅｎｔ　ｏｆ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ＣＰｇｅｎｅｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｌｉｕ’ａｎ　ｉｓｏｌａｔｅ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｏｆ　ＯＹＤＶ
２　结果与分析
２．１ＬＹＳＶ、ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶ　ＣＰ基因
分别克隆了六安地区３个ＬＹＳＶ　ＣＰ 基因、４
个ＯＹＤＶＣＰ基因和４个ＬＹＳＶＣＰ基因。由于六
安市所属５县总面积不大，也没有自然屏障隔离，因
此同种类病毒不同分离物ＣＰ之间核苷酸序列同源
性很高。其中３个ＬＹＳＶＣＰ基因之间核苷酸序列
同源性为９７％；４个ＯＹＤＶ　ＣＰ基因之间核苷酸序
４３２ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３２卷
图３　ＳＹＳＶ六安分离物与部分ＳＹＳＶ分离物ＣＰ核苷酸序列的比对
Ｆｉｇ．３　Ａｌｉｇｍｅｎｔ　ｏｆ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ＣＰｇｅｎｅｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｌｉｕ’ａｎ　ｉｓｏｌａｔｅ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｏｆ　ＳＹＳＶ
列同源性为９６％；４个ＬＹＳＶ　ＣＰ 基因之间核苷酸
序列同源性为９８％。
２．２ＬＹＳＶ、ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶＣＰ基因的克隆及种内变
异性分析
　　 用引物对 ＬＹＳＶ－ＣＰ（＋）∕ ＬＹＳＶ－ＣＰ（－）、
ＯＹＤＶ－ＣＰ（＋）∕ ＯＹＤＶ－ＣＰ（－）和ＳＹＳＶ－ＣＰ（＋）
∕ＳＹＳＶ－ＣＰ（－）从样品病毒ＲＮＡ基因组ｃＤＮＡ中
分别扩增到预期大小的目的片段。经纯化后插入到
ｐＧＥＭ－Ｔ载体，转化ＴＧ１菌，测序并对序列进行多
重比对。分析结果表明：（１）共获得３个不同的ＬＹ－
ＳＶＣＰ基因序列（分别来自六安市郊、寿县和霍邱
县），ＣＰ基因之间核苷酸序列同源性为９７％，说明
５３２２期　 韦传宝等：韭葱黄条病毒、洋葱黄矮病毒和胡葱黄条病毒六安分离物ＣＰ基因克隆及同源性分析
图４　ＬＹＳＶ、ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶ六安分离物ＣＰ基因核苷酸序列比对
Ｆｉｇ．４　Ａｌｉｇｍｅｎｔ　ｏｆ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ＣＰｇｅｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｌｉｕ’ａｎ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｏｆ　ＬＹＳＶ，ＯＹＤＶ　ａｎｄ　ＳＹＳＶ
六安市本地分离物的变异性很小，选择六安市郊分
离物代表六安分离物。ＬＹＳＶ六安分离物ＣＰ基因
由８６４个碱基组成，共编码２８７个氨基酸，与Ｇｅｎ－
ｂａｎｋ上已报道的６８个ＬＹＳＶ不同分离物ＣＰ基因
的核苷酸序列同源性为７６．１２％～８４．３１％（图１），
其中与韩国大蒜分离物（ＡＢ１９４６３４）的同源性最高
（８４．３１％）；与日本青森大蒜分离物（ＡＢ１９４６２９）的
同源性最低（７６．１２％）；与越南河内韭葱分离物
（ＤＱ９２５４５３）的同源性为８１．２０％，与越南山罗韭葱
分离物（ＤＱ９２５４５２）的同源性为８０．７４％，与巴西大
蒜分离物（ＡＦ２２８４１５）的同源性为７９．７７％，与日本
冈山韭葱分离物（ＡＢ１９４６２５）的同源性为７８．０９％。
从同源性分析结果来看，ＬＹＳＶ　ＣＰ 基因总体上变
异较大，但不同宿主分离物之间差异不大。（２）共获
得４个不同的ＯＹＤＶ　ＣＰ基因序列（分别为六安市
郊、寿县、霍邱县和舒城县），ＣＰ基因之间核苷酸序
列同源性为９６％，说明六安市本地分离物的变异性
很小，选择六安市郊分离物代表六安分离物。
ＯＹＤＶ六安分离物ＣＰ基因由７７１个碱基组成，共
编码２５６个氨基酸，与Ｇｅｎｂａｎｋ上已报道的８６个
ＯＹＤＶ不同分离物ＣＰ 基因的核苷酸序列同源性
为８１．０６％～９０．４０％（图２），其中与越南山罗韭葱
分离物（ＤＱ９２５４５４）的同源性最高（９０．４０％）；与阿
根廷Ⅲ 大蒜分离物（ＧＱ４７５３７５）的同源性最低
（８１．０６％）；与浙江余杭大蒜分离物（ＡＪ５１０２２３）的
同源 性 为 ９０．２７％，与 越 南 河 内 韭 葱 分 离 物
（ＤＱ９２５４５５）的同源性为８８．４６％，与阿根廷Ⅰ藜麦
分离物（ＧＱ４７５３８１）的同源性为８６．６６％，与阿根廷
Ⅱ藜麦分离物（ＧＱ４７５３８８）的同源性为８６．６６％，与
意大 利 大 蒜 分 离 物 （ＧＱ４７５３９０）的 同 源 性 为
８４．９７％。从同源性分析结果来看，ＯＹＤＶ　ＣＰ基因
总体上变异不大，不同宿主分离物之间差异也不大。
６３２ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３２卷
（３）共获得４个不同的ＳＹＳＶＣＰ基因序列（分别为
六安市郊、寿县、霍邱县和舒城县），ＣＰ基因之间核
苷酸序列同源性为９８％，说明六安市本地分离物的
变异性很小，选择六安市郊分离物代表六安分离物。
ＳＹＳＶ六安分离物ＣＰ 基因由７７４个碱基组成，共
编码２５７个氨基酸，与Ｇｅｎｂａｎｋ上已报道的１１个
ＳＹＳＶ不同分离物ＣＰ基因的核苷酸序列同源性为
８８．６３％～９４．３２％（图３），其中与陕西洋葱分离物
（ＡＭ２６７４７９）的同源性最高（９４．３２％）；与南亚洋葱
分离物（ＡＪ２２３８２６）的同源性最低（８８．６３％）；与越
南兴 安 火 葱 分 离 物 （ＤＱ９２５４５７）的 同 源 性 为
９３．８０％，与山东章丘大葱分离物（ＡＪ８６５０７７）的同
源 性 为 ９３．５４％，与 浙 江 杭 州 大 葱 分 离 物
（ＡＪ３１１３７０）的同源性为９０．０５％，与越南北宁韭葱
分离物（ＤＱ９２５４５８）的同源性为８９．６６％。从同源
性分析结果来看，ＳＹＳＶ　ＣＰ基因总体上变异很小，
不同宿主分离物之间差异也很小。
２．３ＬＹＳＶ、ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶＣＰ基因种间亲缘关系分
析
　　３种病毒六安分离物ＣＰ 基因序列间比对表
明，ＬＹＳＶＣＰ基因３′端比ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶ多出约
８８个核苷酸。ＬＹＳＶ　ＣＰ 基因与 ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶ
ＣＰ基因的核苷酸序列同源性分别为５３．１３％和
５２．８９％；ＯＹＤＶ　ＣＰ基因与ＳＹＳＶ　ＣＰ基因的核苷
酸序列同源性为７２．９７％（图４）。
进化树分析显示国内外报道的３种病毒的最大
进化距离为０．２２５。ＬＹＳＶ与两者亲缘关系较远，
进化距离达０．１４８，ＯＹＤＶ与 ＳＹＳＶ同源性较大，
进化距离为０．２１９（图５）。
　　有些病毒对植物的危害十分严重（姚伟等，
２００７），病毒检测是预防的前提（侯义龙等，２００６）。
葱属植物是重要的经济作物，全世界都有种植，由于
一般采用无性繁殖，导致病毒在鳞茎内大量积累，严
重影响作物产量和品质。ＬＹＳＶ 主要浸染大蒜
（Ａｌｌｉｕｍ　ｓａｔｉｖｕｍ）、韭葱（Ａ．ｐｏｒｒｕｍ）等作物，导致
叶片出现不规则黄色条纹，鳞茎重量显著减小。
ＳＹＳＶ主要感染葱（Ａ．ｆｉｓｔｕｌｏｓｕｍ），产生纵向黄色
条纹等症状。ＯＹＤＶ天然寄主是洋葱（Ａ．ｃｅｐａ）、也
侵染大蒜、葱、韭菜（Ａ．ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）、韭葱等葱属作
物，也曾经在藜麦（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ　ｑｕｉｎｏａ）中分离出
ＯＹＤＶ。作物感染ＯＹＤＶ后植株矮化，叶片萎缩发
黄，向下卷垂，还会引起鳞茎退化，花和种子的数量
严重减少。从ＬＹＳＶ、ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶ　ＣＰ 基因变
图５　ＬＹＳＶ、ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶ不同
分离物ＣＰ基因同源进化分析
Ｆｉｇ．５　Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ＣＰｇｅｎｅ　ｏｆ　ＬＹＳＶ
ＯＹＤＶ　ａｎｄ　ＳＹＳＶ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｉｓｏｌａｔｅｓ
异性分析结果来看，ＬＹＳＶ　ＣＰ 基因总体上变异较
大（７６．１２％～８４．３１％），可能六安分离物抗ＣＰ 血
清ＩｇＧ不能与 ＬＹＳＶ 中某些分离物结合；ＯＹＤＶ
ＣＰ基因总体上变异不大（８１．０６％～９０．４０％），不
同宿主分离物之间差异也不大，ＳＹＳＶ　ＣＰ 基因总
体上变异最小（８８．６３％～９４．３２％），不同宿主分离
物之间差异也最小，因此预测ＯＹＤＶ和ＳＹＳＶ六安
分离物抗ＣＰ血清基本上能够与同种不同分离物之
间进行结合，能够用于这种病毒不同地区和不同宿
主分离物的检测。
３种病毒六安分离物ＣＰ 基因间比对表明，
ＯＹＤＶＣＰ基因与ＳＹＳＶＣＰ基因的核苷酸序列同
源性为７２．９７％，与ＬＹＳＶ　ＣＰ 基因的核苷酸序列
同源性为５３．１３％，但抗 ＯＹＤＹ　ＣＰ 血清与ＳＹＳＶ
ＣＰ没有血清学交叉反应，而与ＬＹＳＶ　ＣＰ有微弱的
血清学交叉反应（鲁宇文等，２００６），这说明病毒ＣＰ
基因间的同源性与血清学关系没有必然联系，要确
定病毒之间的血清学关系仅仅靠分析ＣＰ基因的同
源性还不够，最终还要通过实验来确定。
参考文献：
Ａｄｒｉａｎ　Ｖａｌｉ，Ｊｕａｎ　Ｊｏｓｅ′Ｌｏ′ｐｅｚ－Ｍｏｙａ，Ｊｕａｎ　Ａｎｔｏｎｉｏ　Ｇａｒｃｌ′ａ．２００７．
Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｇｅｎｅ　ｄｕｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ　ｄｉｖｅｒｓｉｆｉ－
ｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐ１ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｆａｍｉｌｙ　Ｐｏｔｙｖｉｒｉｄａｅ［Ｊ］．Ｊ　Ｇｅｎ　Ｖｉｒｏｌ，
８８（１０）：１　０１６－１　０２８
Ｃｈｅｎ　Ｊ，Ｃｈｅｎ　ＪＰ，Ａｄａｍｓ　ＭＪ．２００１．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ
ｃｏｍｐｌｅｘ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｏｆ　ｖｉｒｕｓｅｓ　ｉｎ　ｇａｒｌｉｃ　ｗｉｔｈ　ｍｏｓａｉｃ　ｓｙｍｐｔｏｍｓ　ｉｎ
Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ａｒｃｈ　Ｖｉｒｏｌ，１４６（１０）：１　８４１－１　８５３
Ｃｈｅｎ　Ｊ，Ｃｈｅｎ　ＪＰ，Ａｄａｍｓ　ＭＣ．２００２．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｏｍｅ　ｃａｒ－
ｌａ－ａｎｄ　ｐｏｔｙｖｉｒｕｓｅｓ　ｆｒｏｍ　ｂｕｌｂ　ｃｒｏｐｓ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ａｒｃｈ　Ｖｉｒｏｌ，
（下转第１７２页Ｃｏｎｔｉｎｕｅ　ｏｎ　ｐａｇｅ　１７２）
７３２２期　 韦传宝等：韭葱黄条病毒、洋葱黄矮病毒和胡葱黄条病毒六安分离物ＣＰ基因克隆及同源性分析
师在论文写作过程中给予帮助，特此致谢。
参考文献：
吕柳新，陈景渌．１９９０．荔枝雌雄性器官发育的相互消长［Ｊ］．
中国果树，１：９－１２
陈杰忠，罗孝政．１９９８．荔枝花性调控研究进展［Ｊ］．中国南方
果树，２７（６）：２６－２７
陈洪民，方凯华，佘丹青．２０１０．“果保”对妃子笑荔枝果实产量
和品质的影响［Ｊ］．广东农业科学，（１）：４７－４８
陈封怀．１９８７．广东植物志［Ｍ］．广州：广东科技出版社，２４６
陶忠良，高爱平，周兆德．２００１．气象条件对荔枝产量的影响研
究综述［Ｊ］．中国南方果树，３０（４）：２９－３１
黄宏芬，吕烈武．２００９．多效唑在几种热带果树上的应用进展
［Ｊ］．现代农业科技，（６）：２５－２６
Ｂａｔｔｅｎ　ＤＪ，Ｍｃｃｏｎｃｈｉｅ　ＣＡ．１９９５．Ｆｌｏｒａｌ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｂｕｄｓ
ｏｆ　Ｌｙｃｈｅｅ（Ｌｉｔｃｈｉ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）ａｎｄ　Ｍａｎｇｏ（Ｍａｎｇｉｆｅｒａ　ｉｎｄｉｃａ）［Ｊ］．
Ｆｕｎｃｔ　Ｐｌａｎｔ　Ｂｉｏｌ，２２（５）：７８３－７９１
Ｃｈｅｎ　Ｗ（陈伟），ＬüＬＸ（吕柳新），Ｈｕａｎｇ　ＣＭ（黄春梅），ｅｔ　ａｌ．
２００１．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ‘Ｗｕｙｅ’Ｌｉｔｃｈｉ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｍｂｒｙｏ
ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｓｔａｇｅｓ（‘乌叶’荔枝胚胎发育过程特异蛋白的变
化）［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｈｏｒｔ　Ｓｉｎ（园艺学报），２８（６）：５０４－５０８
Ｄｅｎｇ　ＣＪ（邓朝军），Ｙｉ　ＧＪ（易干军），Ｚｅｎｇ　ＪＷ（曾继吾），ｅｔ　ａｌ．
２００６．Ｃｙｔｏｌｏｇｉｃ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｏｍａｔｉｃ　ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｉｎ　ｌｉｔｃｈｉ
（荔枝体胚发生过程中的细胞学观察）［Ｊ］．Ｊ　Ｆｒｕｉｔ　Ｓｃｉ（果树
学报），２３（５）：７６０－７６２
Ｍｅｎｚｅｌ　ＣＭ，Ｓｉｍｐｓｏｎ　ＤＲ．１９９５．Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ　ａｂｏｖｅ　２０ｄｅｇｒｅｅｓ　Ｃ
ｒｅｄｕｃｅ　ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ　ｉｎ　ｌｙｃｈｅｅ（Ｌｉｔｃｈｉ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）［Ｊ］．Ｊ　Ｈｏｒｔ　Ｓｃｉ，７０
（６）：９８１－９８７
Ｘｉａｏ　ＨＳ（肖华山），ＬüＬＸ（吕柳新），Ｃｈｅｎ　ＺＴ（陈志彤）．２００３．
Ｄｙｎａｍｉｃ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｉｎ　Ｌｉｔｃｈｉ（Ｌｉｔｃｈｉ
ＣｈｉｎｅｎｓｉｓＳｏｎｎ．）ｐｉｓｔｉｌ　ａｎｄ　ｓｔａｍｅｎ　ｄｕｒｉｎｇ　ｆｌｏｗｅｒ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（荔
枝花发育过程中雌雄蕊内源激素的动态变化）［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ
Ａｐｐｌ　Ｅｎｖｉｒｏｎ　Ｂｉｏｌ（应用与环境生物学报），９（１）：１１－１５
Ｘｉａｏ　ＨＳ（肖华山），Ｌｕ　ＬＸ（吕柳新），Ｃｈｅｎ　ＺＴ（陈志彤）．２００６．
Ｄｙｎａｍｉｃ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ｐｏｌｙａｍｉｎｅ，ｎｕｃｌｅｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｄｕｒｉｎｇ
ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｌｉｔｃｈｉ（Ｌｉｔｃｈｉ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＳｏｎｎ．）ｆｌｏｒａｌ　ｂｕｄ（荔
枝花芽分化过程中多胺，核酸和蛋白质的动态）［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ
Ａｐｐｌ　Ｅｎｖｉｒｏｎ　Ｂｉｏｌ（应用与环境生物学报），１２（５）：６４０－６４２
Ｚｈａｎｇ　ＹＳ（张以顺），Ｘｉａｎｇ　Ｘ（向旭），Ｈｕａｎｇ　ＳＺ（黄上志），ｅｔ　ａｌ．
２００３．Ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｕｒ－
ｉｎｇ　ｅｍｂｒｙｏ　ａｂｏｒｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｌｉｔｃｈｉ（荔枝胚败育过程中内源激素与
蛋白质含量的变化）［Ｊ］．Ｊ　Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌ　Ｍｏｌ　Ｂｉｏｌ（植物生理
与分子生物学学报），２９（３）：２３３－２３８
Ｚｈｕ　ＧＷ（朱广文），Ｚｈｏｕ　Ｔ（周天），Ｙａｏ　Ｓ（姚石）．２０１０．Ａｄｖａｎｃｅｓ
ｉｎ　ｔｈｅ　ｕｓｅ　ｏｆ　ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ　ｏｎ　Ｌｉｔｃｈｉ（植物调
节剂在荔枝上的应用）［Ｊ］．Ａｇｒｉ　Ｓｃｉ　Ｔｅｃｈ（农业科学与技术：
英文版），１１（６）：
櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢櫢
６５－７０
（上接第２３７页Ｃｏｎｔｉｎｕｅ　ｆｒｏｍ　ｐａｇｅ　２３７）
　１４７（２）：４１９－４２８
Ｈｏｕ　ＹＬ（侯义龙），Ｙｕ　ＹＪ（于亚军），Ｚｈａｎｇ　ＬＪ（张立娟），ｅｔ　ａｌ．
２００６．Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＰＤＶ　ｉｎ　Ｘｉｅｍａ　Ａｐｒｉｃｏｔ　ｂｙ　ＲＴ－ＰＣＲ（逆
转录－聚合酶链式反应技术检测“歇马杏”李矮缩病毒）［Ｊ］．
Ｇｕｉｈａｉａ（广西植物），２６（６）：６２６－６２７
Ｋａｎｙｕｋａ　ＫＶ，Ｖｉｓｈｎｉｃｈｅｎｋｏ　ＶＫ，Ｌｅｖａｙ　ＫＥ，ｅｔ　ａｌ．１９９２．Ｎｕｃｌｅｏ－
ｔｉｄｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｓｈａｌｏｔ　ｖｉｒｕｓ　Ｘ　ＲＮＡ　ｒｅｖｅａｌｓ　ａ　５′－ｐｒｏｘｉｍａｌ　ｃｉｓ－
ｔｒｏｎ　ｃｌｏｓｅｌｙ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ｐｏｔｅｘｖｉｒｕｓｅｓ　ａｎｄ　ａ　ｕｎｉｑｕｅ　ａｒ－
ｒａｎｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　３′－ｐｒｏｘｉｍａｌ　ｃｉｓｔｒｏｎｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｇｅｎ　Ｖｉｒｏｌ，７３（１０）：
２　５５３－２　５６０
Ｌｕ　ＹＷ（鲁宇文），Ｓｈｅｎ　ＪＬ（沈嘉乐），Ｗｅｉ　ＣＢ（韦传宝），ｅｔ　ａｌ．
２００６．Ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＯＹＤＶ　ａｎｄ　ＬＹＳＶＣＰｇｅｎｅ　ａｎｄ
ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｓｅｒｕｍｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅｉｒ　ＣＰ（洋葱黄矮病毒和
韭葱黄条病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备）［Ｊ］．
Ｂｕｌｌ　Ｓｃｉ　Ｔｅｃｈ（科技通报），２２（５）：６３８－６４１
Ｒｙａｂｏｖ　ＥＶ，Ｇｅｎｅｒｏｚｏｖ　ＥＶ，Ｖｅｔｔｅｎ　ＨＪ，ｅｔ　ａｌ．１９９６．Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ
ｔｈｅ　３′－ｒｅｇｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｉｔｅ　ｂｏｒｎｅ　ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ　ｖｉｒｕｓ　ｇｅｎｏｍｅ　ｔｅｓｔｉｆｉｅｓ
ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｓｈａｌｏｔ　ｖｉｒｕｓ　Ｘ　ｇｒｏｕｐ［Ｊ］．Ｍｏｌ　Ｂｉｏｌ，３０：１０３－
１１０（Ｒｕｓｓｉａ）
Ｓｕｍｉ　Ｓ，Ｍａｔｓｕｍｉ　Ｔ，Ｔｓｕｎｅｙｏｓｈｉ　Ｔ．１９９９．Ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｓｅ－
ｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｇａｒｌｉｃ　ｖｉｒｕｓｅｓ　Ａ　ａｎｄ　Ｃ　ｍｅｍｂｅｒｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｅｗｌｙ　ｒａｔｉｆｉｅｄ
ｇｅｎｕｓ　Ａｌｌｅｘｉｖｉｒｕｓ［Ｊ］．Ａｒｃｈ　Ｖｉｒｏｌ，１４４（９）：１　８１９－１　８２６
Ｔｓｕｎｅｙｏｓｈｉ　Ｔ，Ｍａｔｓｕｍｉ　Ｔ，Ｄｅｎｇ　ＴＣ，ｅｔ　ａｌ．１９９８．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｏｆ　Ａｌｌｉｕｍ　ｃａｒｌａｖｉｒｕｓｅｓ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｗｏｒｌｄ
ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｖｉｒａｌ　ｃｏａｔ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ［Ｊ］．Ａｒｃｈ　Ｖｉｒｏｌ，１４３
（６）：１　０９３－１　１０７
Ｔｓｕｎｅｙｏｓｈｉ　Ｔ，Ｍａｔｓｕｍｉ　Ｔ，Ｎａｔｓｕａｋｉ　ＫＴ，ｅｔ　ａｌ．１９９８．Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ
ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｖｉｒｕｓ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｓ　ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ
ｐｏｔｙｖｉｒｕｓ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　Ａｌｌｉｕｍｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ａｒｃｈ　Ｖｉｒｏｌ，１４３（１）：９７－
１１３
Ｙａｏ　Ｗ（姚伟），Ｄｕａｎ　ＺＺ（段真珍），Ｃｈｅｎ　ＹＱ（陈义强），ｅｔ　ａｌ．
２００７．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｒａｔｅ　ａｎｄ
ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｏｘｙｇｅｎ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ　ｓｕｇａｒｃａｎｅ　ｗｉｔｈ　ＳＣＭＶ－
ＣＰｇｅｎｅ（病毒侵染对转ＳＣＭＶ－ＣＰ基因甘蔗光合速率和活性
氧代谢的影响）［Ｊ］．Ｇｕｉｈａｉａ（广西植物），２７（１）：９５－９９
２７１ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３２卷