全 文 ：广西植物Guihaia27(6)：937—940 2007年11月
海南龙血树离体快速繁殖
薛鹰1，黄宝灵1，吕成群1，赵银萍2，周传明1，李莺2
(1．广西大学林学院．南宁550004；2．西安文理学院生命科学系．西安710061)
摘要：以3月龄高约25cm的海南龙血树为基本材料，以茎节纵切块为外植体，在改良MS+6-BA2．0mg／L
+NAAo．1mg／L培养基中培养1个月后萌芽率为78．6％。萌芽在Ms+6一BAl．5mg／L+NAA0．2mg／L培
养基中连续两次继代培养，2个月后芽增殖倍数为2．9。丛芽及单芽都在MS+6-BAl．0mg／L+NAA0．2
mg／L培养基中进行培养，1个月后丛芽的单芽增殖倍数为4．6，单芽增殖倍数为0，8。萌芽放入MS(改良)+
NAAO．2mg／L培养基中进行培养，生根率为100％，移栽成活率为i00％。
关键词：海南龙血树f离体培养I快速繁殖
中图分类号：Q943．1文献标识码：A 文章编号：1000一3142(2007)06—0937—04
RapidpropagationofDracaenacambodianainvitro
XUEYin91，HUANGBao-Lin91，LnCheng-Qunl，
ZHAOYin-Pin92，ZHOUChuan-Mingt，LIYin92
(1．CollieofForestry，GuangxlUniversity，Nanning530004-C}Iim；2．Departmentof
“^Science。Xi’删ArtsandS,：ienceCollege．Ⅺ’an710061tChina)
Abstract：hthisstudy．theKrewmontholdDracaenacambodianaabout25emhighwasusedaSthebasicmaterial．
Thetenderstemfragmentsweyecleavedl ngthwaysintofourpieces，eachpiecewasusedastheplandetandinduced
inthemediummodifiedMSsupplementedwith6-BA2．0rag／LandNAA0．1mg／L，theg rminationrates78％af-
teramonthculture．Theproliferationmultipleofthebudis2．9afterthegerminationwasc tinuouslyinducedtwice
inthe8ar／lemediumMSsupplementedwith6-BAl．5mg／LandNAA0．2rag／Laftertwomomhs。themediumwas
renovatedonceamonth．What’smote，the鲋ectthatthedifferentformofbudusedaSaplantletforsubculturehad
onthepmliferationmultipleoftheburgeonofDracaenacambodianawhentheywereinducedOnthesamemedium
hasalsobeenprovedinthispaper．OurresultshowedthattheproliferationmultipleoftheclusteringbudsWaS4．6
andsinglebud0．8whentheywereculturedOnthesamemediumMSsupplementedwith6-BAl．0mg／Land
NAA0．2mg／Lforamonth．Therootingratewas100“whenthegerminationwereculturedonthemodifiedmedi—
umMSsupplementedwithNAA0．2mg／L．Andthesurvivalrateofoutplantinginnurseryis100％．
Keywords：Dracaenacambodl na；invitroJ rapidpropagation
海南龙血树(Dracaenacambodiana)，又称小花
龙血树、山海带、南山不老松，是龙舌兰科龙血树属
植物，多生长于热带与亚热带地区常绿木本植物。
海南龙血树有很高的观赏及药用价值。在观赏方
面．叶姿优美，线状披针形叶，长30～50cm，簇生于
分枝顶部，树干古朴沧桑，树型奇特，叉因其极耐荫，
养护简单，因此常用作园林造景，室内盆景，深受人
们喜爱。在药用价值方面，从树中提取“血竭”，有止
血、活血、生肌、行气之功效(杨先会等，2004)。近年
来遭到人为掠夺性采伐破坏，2001年国家列入二级
珍稀濒危保护植物(吴繁花等，2005)。因此，开展海
南龙血树离体快速繁殖的研究对其保护、开发和利
用具有重要意义。关于海南龙血树组织培养的研
究，目前国外未见报道，国内仅有零星报道。其中吴
繁花等(2005)通过器官间接发生方式获得成苗并移
栽成功；黄运凤等(2005)对海南龙血树诱导增殖过
牧藕日期t2005—11-20謦回目辨：9006-05—18
作者葡介：薛鹰(1975一)，男，陕西高膛人，碰士．主要从事植物组织培养快速繁殖技术研兜
万方数据
938 广西植物 27卷
程中的最佳苗龄进行了试验研究。本文以离体器官
直接发生方式为繁殖途径，以克服器官间接发生方
式繁殖所产生的遗传变异、成苗周期长等缺点，为海
南龙血树及海南龙血树属其它植物组织培养快速繁
殖的工厂化生产提供重要依据。
1材料与方法
1．1外植体的处理
以3月龄高约25cm海南龙血树的茎段为初始
材料。材料先用加人少量洗洁精的自来水漂洗，用
软刷轻刷表面，然后用自来水冲洗30rain。在无菌
条件下将茎横切成带有两个完整茎节长约2cm茎
段。茎段用70％酒精浸泡30s、0．1％HgCl2浸泡
12min，然后用无菌水冲洗6次。用无菌滤纸吸去
茎段表面的水分。将其切取长约0．5cm的茎段，每
节纵向分成4份，接入培养基中进行培养。
1．2培养条件
以MS、MS改良(降低N、P、K三种元素含量)培
养基为基本培养基。培养基pH=5．8，蔗糖30g／L，
琼脂粉5．1∥L；在温度为23士2℃，每天光照12h，
光照强度为27twnol·盯2·f1条件下进行培养。
2结果与分析
2．1芽的诱导
将茎节的1／4纵切段放人MS(改良)+6一
BA2．0rag／L(单位下同)+NAA0．1培养基中进行
培养，1个月后，接种数191块，萌芽块数151块，外
植体萌芽总数175个，萌芽率为78．6％}其中平均
单块萌芽1．16个，单块萌芽最多达z个芽(约占
15．9％)。芽平均长约为o．5cm，芽生长缓慢。有41
块未分化或在切口处产生嫩绿色的愈伤组织，这与
前人关于海南龙血树的组织培养中芽分化诱导结果
相似(吴繁花等，2005)。
2．2芽的继代增殖培养
Z．2．1不同6一队浓度和继代次数对增殖倍数的影响
将萌芽分别接种于MS(改良)+6-BA0．5+
NAA0．2，MS(改良)+6-BAI．0+NAA0．2和MS(改
良)+6一BAI．5+NAA0．2三种培养基中进行第一次
继代培养，1个月后增殖倍数及生长情况见表I。
表I不同6-BA浓度对芽增殖倍数的影响情况
Table1 Effectofdifferent6-BAconcentrationson
proliferationmultipleofbud
NElNumberofexplanmlTNB,Totalnumberofbudsafter011emonthl
PMBlProliferationmultipleofhl】d}Ⅶ卫；Meanlengthofthebud．
从表l可看出，在基本培养基相同、NAA浓度
相同的条件下，芽的增殖倍数随6-BA浓度的升高
而升高，但芽的伸长生长却明显降低，说明8-BA对
海南龙血树芽的分化有利，但对芽的伸长生长有抑
制作用。将上述丛生芽条切成长约0．8cm茎段(含
2～3个茎节)，然后将这些茎段接种于MS(改良)+
6一BAl．5+NAA0．2培养基中进行第二次继代培
养，1个月后增殖倍数见表2。
表2不同继代次数对芽增殖倍数的影响情况
Table2 Effectofdifferentsubculturefrequenciesonproliferationmultipleofbud
从表2可看出，通过第二次继代培养后，芽增殖倍数
分别为起始芽数的1．0、2．3、2．9倍，明显高于第一次
继代培养；在同为MS(改良)+6-BAl．5+NAA0．2
培养基的条件下，第二次继代培养的增殖倍数是2．9，
远高于第一次继代培养的0．8。这说明连续继代培
养有利于海南龙血树芽的增殖，而适当提高6-BA的
浓度对连续继代中芽的分化更为有利。
2．z．2不同外植体种类对芽增殖倍数的影响田郎
等(1998)在金心巴西铁(Dracaenafragra scv．
Massangeana)的茎尖培养及植株再生研究中发现
在芽继代增殖时将丛芽块分割成2～4个芽一小丛
转入继代培养基中进行培养，可实现扩繁。本文初
万方数据
6期 薛鹰等：海南龙血树离体快速繁殖 939
步研究海南龙血树不同外植体种类对芽增殖倍数的
影响情况。即将增殖后的诱导芽以丛芽和单芽两种
方式，均用MS+6-BAl．0+NAA0．2、MS+6一
BAO．5+NAA0．2和MS(不含任何激素)三种培养
基进行培养，1个月后，结果见表3。
从表3看出：(1)从芽的增殖倍数与基本培养基
表3单芽和丛芽两种接种方式对芽的增殖倍数的影响情况
Table3 Effectofclusteringbudsandsinglebudusedasexplanto proliferationmultipleofbud
TNBBIITotalnumberofbudsheforeinduction【ITNBOMtTotaInumberotbudsafteronemonth，
表4单芽和丛芽两种接种方式对芽的增殖倍数的影响
Table4 Effectofclusteringbudsandsinglebudusedasexplanto proliferationmultipleofbud
EXPSIExplantsINEIINumberofexplantswithbudinducedlBP Buddingpercentage．
中激素的关系看，在相同的培养基中，丛芽诱导增殖
倍数高于单芽诱导，在MS+6一BAl．0+NAA0．z、
Ms+6一BA0．5+NAA0．2及Ms(不舍任何激素)三
种培养基中培养，丛芽诱导增殖倍数分别为4．6、
4．3和1．0，而单芽的增殖倍数分别为0．8、0．9和
0．6，在培养基中加入激素对芽的增值有明显促进作
用，而对丛芽的诱导增值作用更显著。在相同的基
本培养基中加入激素时，丛芽增殖倍数为单芽的4
～5倍。(2)从苗平均长度与基本培养基中激素关
系看，激素对单芽伸长生长影响不大，但是激素6一
BA对丛芽伸长生长的影响较大，当加人较高浓度
激素6一BA(1IO)时芽均长为3．0cm，不加激素时芽
均长为2．0am，而加入较低浓度激素(6一BA)时芽均
长为1．5cm，前者分别是后者的1．5和2．0倍。
为进一步证实丛芽和单芽两种不同的接种方式
对增殖倍数的影响，又将表3中的丛芽分成单芽和
丛芽两种方式接入相同的培养基中进行培养，1个
月后其培养结果见表4。
从表4看出：(1)从芽的增殖倍数来看，在相同
的培养基中，丛芽的增殖倍数为1．44，单芽的增殖
倍数为0．15，丛芽的增殖倍数是单芽的9．6倍，说
明在单芽增殖过程中以丛芽为接种方式明显高于以
单芽为接种方式。这是因为，单芽诱导率降低，仅为
64．1％，其余35．9％未诱导出萌芽，而是脱分化形
成愈伤组织，而丛芽诱导率为100％，仅在接种的芽
和培养基接触处形成少量愈伤组织(o．5～1．0
CrD．5)。与表3比较，在相同的培养基(MS+6一
BAl．0+NAA0．2)，无论是以丛芽接种方式还是以
单芽接种方式丛芽和单芽增殖倍数均有很大降低，
丛芽增殖倍数从4．6降为1．4，单芽增殖倍数从0．8
降为0．15，这可能是因为随着继代次数的增加，腋
分生组织转化为芽分生组织的能力下降。(2)从芽
的生长情况来看，两种接种方式诱导的芽均长约为
3．5cm，茎叶深绿色，生长健壮。因此，从试验可以
得出在海南龙血树继代增殖过程中，以丛芽为接种
方式对芽的增殖倍数和生长均比单芽有利。
2．3生根诱导
切取高约5．0∞单芽分别接种于不加任何激素
的MS，MS+NAAo．2和MS(改良)十N从0．2三种
培养基中进行培养，MS改良培养基的盐分浓度为
MS培养基盐分浓度的3／5左右，1个月后生根情况
见表5。从表5看出：(1)海南龙血树的组培芽在不加
任何激素的MS培养基即可诱导生根，生根率达
86．7％。(2)在NAAO．2(rag／L)相同的MS和MS
(改良)两种培养基中，MS(改良)生根率达到
100％，且每株生根3．6条，根长5～7am；而MS生
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940 广西植物 27卷
裹5不同培养基对生根诱导的影响情况
Table5 Effectofdifferentm diacompositionsonr oting
RN，RhizogenesisnumberafteronemonthtRP，rootingpercentage；SRG．Situationoftherootgrowth．
根率为93．3“，每株生根3．1条，根长4～5cm。这
说明适当降低MS培养基中大量元素(N、P、K)的
含量更加有利于根的分化与生长。这与在象脚丝兰
(Yuccaelephantipes)的组织培养及快速繁殖试验
中获得的结果一致(吴维坚等，2003)。
2．4移栽
将生根后的幼苗置于室内常温、自然光照条件下
炼苗l周，然后打开瓶盖取出幼苗，用自来水将培养
基冲洗干净，植入用2．5％KMnO,消毒过的细沙中
在室内培养，开始浇足水，之后每天浇少量水，2周后
每周浇一次水，1个月后正常生长，成活率达100％。
3讨论
吴繁花等(2005)对海南龙血树的组培主要通过
器官间接发生方式最终得到移栽成活植株，这种繁
殖途径的优点是增值倍数较高，易产生新的品种，缺
点是易产生变异，不能保持原种的遗传稳定性，另外
由于需要经过脱分化和再分化的过程，生产周期长，
且生产的苗较弱。而黄运风等(2005)通过实验最终
得出45d苗龄在合适的培养基中芽诱导增值倍数
较55～70d苗龄高。本文利用器官直接发生具有
在繁殖过程中遗传性较稳定，生产周期短，生产的苗
健壮的特点，实现了海南龙血树在组织培养过程中
的器官直接发生繁殖。证实了在海南龙血树快速繁
殖过程中不同的接种方式对芽增值倍数的影响，即
在相同的培养基中以丛芽为接种方式芽增值倍数高
于以单芽为接种方式。同时还证实了在较合适的相
同培养基中进行连续继代培养有利于芽的增值诱
导。但是本试验的继代代数较少，同时从单芽和丛
芽两种接种方式对芽的增殖倍数的影响情况来看，
再次继代似对增殖倍数和苗高生长均有很大影响，
因此对于多次继代的增殖情况仍需进一步观察。
在本试验中，激素6-BA对海南龙血树芽的增殖
和生长具有明显的影响，在0．O～1．5的浓度区间，无
论是起始诱导还是继代诱导、是以丛芽接种还是以单
芽接种，芽的增值倍数均随6-BA浓度的升高而提高。
可能是由于6-BA与受体结合后产生更多的活性物
质，如K+等(许智宏等，1997)，激活更多的生长素诱
导基因的表达。从而使更多的腋分生组织转化为芽
分生组织(斯坦菲尔德等，2002)，但是当6-BA浓度过
高时则产生某些抑制物质(可能是一些抑制酶活性的
物质，也可能是一些抑制生长素诱导基因表达的基因
得以表达)，从而使芽的增值倍数降低。单芽诱导芽
的生长与6-BA浓度的变化不明显，而丛芽诱导芽的
生长随6一BA浓度的升高而生长加快。这可能是6一
BA具有打破顶端优势而促进侧芽生长的作用。侯占
铭等(2001)在香龙血树(Dracaenafragrans)和紫铁
(Cordylimefruticosa)的组织培养与快速繁殖中认为
芽的增殖是由于6-BA抑制顶端优势，同时促进腋芽
原基的萌发的结果。
丛芽接种时，可能是丛芽中单芽吸收的6BA较
少，另外丛芽诱导时顶端优势弱，产生的IAA较少，
从而使细胞分裂素(6一BA)和生长素(NAA、LtA)的浓
度及浓度比例处于有利于芽分化的最佳组合。
本试验还发现随着继代次数的增加，芽的增值
倍数下降，这可能是随着继代次数的增加，细胞内产
生某些变异，进而抑制芽分化。
本文作者认为，在龙血树离体快速繁殖过程中，
除了对芽分化的分子机理进行研究外，在组织培养
方面还应对外植体、培养基的种类、激素的种类浓
度、培养条件如光照(刘桂珍等，1997)等做进一步的
研究，进而为海南龙血树及龙血树属其它植物的快
速繁殖提供重要的理论和实验依据。
该论文在写作过程中得到广西太学林学院2003
级生态学专业硕士研究生唐林峰、刘磊的热。帮助，
特此致谢!
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海南龙血树离体快速繁殖
作者： 薛鹰， 黄宝灵， 吕成群， 赵银萍， 周传明， 李莺， XUE Ying， HUANG Bao-Ling，
Lü Cheng-Qun， ZHAO Yin-Ping， ZHOU Chuan-Ming， LI Ying
作者单位： 薛鹰,黄宝灵,吕成群,周传明,XUE Ying,HUANG Bao-Ling,Lü Cheng-Qun,ZHOU Chuan-
Ming(广西大学,林学院,南宁,530004)， 赵银萍,李莺,ZHAO Yin-Ping,LI Ying(西安文理学
院,生命科学系,西安,710061)
刊名： 广西植物
英文刊名： GUIHAIA
年，卷(期)： 2007,27(6)
被引用次数： 5次

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7. 杨本鹏.张树珍.蔡文伟.宋启示.王兴红.王东.杨学.顾丽红.冯翠莲.王俊刚.罗遵喜.Yang Benpeng.Zhang
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Luo Zunxi 海南龙血树组织培养过程中血竭形成的诱导[期刊论文]-热带作物学报2009,30(2)
8. 习平根.戚佩坤.姜子德 香龙血树真菌病害的鉴定[期刊论文]-华南农业大学学报(自然科学版)2002,23(2)
9. 晏雨鸿.郭辉军.崔景云.YAN Yu-Hong.GUO Hui-Jun.CUI Jing-Yun 云南龙血树属(龙舌兰科)一新种--深脉龙血
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10. 吴繁花.朱文丽.莫饶.符常明.WU Fan-Hua.ZHU Wen-Li.MO Rao.FU Chang-Ming 海南龙血树的组织培养[期刊论
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引证文献(4条)
1.靳静晨,卜媚,罗雪枫,陈雄进,谭家壮 海南龙血树组织培养与快速繁殖技术研究[期刊论文]-广西农业科学
2010(08)
2.陈志伟,汪小飞,伊贤贵,王贤荣 微毛樱离体快繁初步研究[期刊论文]-福建林学院学报 2011(04)
3.郑道君,谢良商,王盈,张治礼,张文 中国血竭基源植物的研究与利用[期刊论文]-中国野生植物资源 2009(06)
4.张敏 巴戟天优良材料筛选与组培快繁技术[学位论文]硕士 2010


引用本文格式：薛鹰.黄宝灵.吕成群.赵银萍.周传明.李莺.XUE Ying.HUANG Bao-Ling.Lü Cheng-Qun.ZHAO Yin-
Ping.ZHOU Chuan-Ming.LI Ying 海南龙血树离体快速繁殖[期刊论文]-广西植物 2007(6)