全 文 ：广 西 植 物 G uih a这 1 1 (i ) :7 7一 51 . Feb . 2 9, i
香燕束顶病和花叶心腐病的快速测定技术研究
周广泉 邹琦丽 蒋冬荣 周志权 廖咏梅
( 广西植物所究所 , 桂林 5 4 10 0 6 )
摘要 种植无病蕉苗是防治香蕉束顶病和花叶心腐病的根本措施 。 筛选无病蕉苗的快 速 测定
技术 , 除可引用 2 , 3 , 5 一氯化三苯基四 ( 氮 ) 哇浸债徒 手 切片 ; 在 36 ℃条件下 , 24 小时后 : 束
顶病株叶脉切片的维管束呈现红色 , 其它组织为红褐色 ; 花叶心腐病株叶脉切片 ( 含维管束 ) 全
部呈现黑褐色 ; 而健株叶脉切片由原绿色变成红色 . 最后褪成无色。 此外 , 也可取叶片主脉 的徒
手切片 , 用 1多曙红B水溶液染色 , 健株切片呈桔红色 , 病株切片呈砖红色 . 通过镜检 : 束顶 病
株叶片切片的表皮下 , 可观察到围绕在维管束周围成堆的分布有畸形叶绿体细胞团 ; 花叶心 腐病
的畸形叶绿体细胞团 , 多分布在薄壁细胞中 , 且多散生 ; 而健株的切片没有发现这种畸形的 叶绿
体细胞团 , 两种方法同样可靠 。
关键词 香蕉束顶病 ; 香蕉花叶心腐病 ; 2 , 3 . 5一氯化三苯基四 ( 氮 ) 哇 ; 曙红 B
广西的香蕉产区 , 生产上存在的两大问题之一 , 就是遭受着两大病害 ( 束顶病和花叶心
腐病 ) 的严重威胁 ( 另一大问题是桂中一带某些地区的偶发性霜害 ) 。
束顶病 ( B u n o h y ot p id s eas e) 在我区的香蕉生产史上危害巳久 , 而花叶心腐病 ( M哪 io
v i r u s
、
I n f e c t i o u s c h l o r o s i s ) 是近年来才传入的危险性病害之一 。
束顶病的病原 , 普遍认为是病毒 [ ’ 」 , 但也有人认为是类菌原质体 ( M L O ) [ “ 〕 , 不 论
特何种见解 , 至今仍然无人见到病原体或看到有关病原 的确切报道 , 花叶心腐病虽危害的年
代较近 , 但关于病原的报道却一致认为是属黄瓜花叶病毒 ( OM V ) 的一个株系 〔” . 〕 , 至于各
国所报道的徕系不 同 , 很可能是因为各地株系的差异所导致 〔. 〕 , . 就 目前所知道有些地区的
病原其血缘与CM V 一 黄色株系有关 , 另一些地区与 OM V 一 就豆株系有密切关系 [ . 〕 , 关于传
病媒介除带病萦芽外 , 束顶病的媒介昆虫是甘蔗黑蚜或称香蕉交脉蚜 ( 尸 e : f a l。 : ia ” l’g r 。 -
朋 r o o sa , C o g ) [ ’ 3 , 而花叶心腐病的媒介昆虫是以棉蚜 ( A P h`s 口0 5 5 夕P i i G l o v )为主 , 其次
是玉米蚜 ( A . 川 a i d i s ) 、 委蚜 ( R h o P a l o s i夕 h“ 协 P r “ ” i f o l i a e ) 和荷隘管蚜 ( R . 行夕沉 -
户h“ e ) 等 , 对花叶心腐病来说一般认为甘蔗黑蚜传病的可能性不大或不重要 〔 ` ] , 也有报道
明确的指出甘蔗黑蚜不传播花叶心腐病 〔心〕 。 因此杜绝这两种危害最根本的有效途径 就是种
植无病蕉苗 。
筛选无病蕉苗 , su m m a n w ar ( 1 9 8 2 ) 就指出 : 印度和澳大利亚是 采 用 1 % 的 2 , 3,
6
一叙化三苯基 四 ( 氮 )哩 ( 2 , s , 5一 t r i ph en y l t e t r a z o l i n m o h l o r i d e ) 水溶液对蕉苗
的根 、 小吸芽 、 叶的主脉 , 中肋等组织的徒手切片 , 在 3 2一35 ℃ 条 件 下 , 浸演 1 。 5~ 2 。 0小
时后观察 . 束顶病病株切片呈现砖红色 ;花叶心腐病病株切片呈现黑色 ; 而健株切片则无 色 ,
并认为这项技术不仅对潜伏期的病株有甄别作用 , 而且还可用于检疫 〔` 〕 。 根据印度的 M a -
h a t m a P h u l e 农业大学的香蕉研究站 : 1 9 80年分别在该站及 J a l g a o n D i s七r i o t 的 Y a w a l
等地对束顶病和花叶心腐病 的检测筛选结果证明是有效和成功的 。 经过筛选后 田间种植的都
是健株 , 未发现病苗 。
87 厂 酉 植 物1 卷
这项技术可以 引用 。 但根据我们的数次取样多次重复验证结果 , 与报道的稍有不同 , 根
据中肋切片的观察 , 主要差别是 :
1
. 在 36 ℃条件下 , 切片浸渍 1 . 5 ~ 2 . 0小时后 , 色泽尚在变化 中 , 还不能获取确认的结
果 , 必需经过 24 小时后 , 才能显现出可以 区分出两种病和健株的不同色泽 , 如果把温度提高
到 5 0℃ , 可 以在三个小时内 , 基本完成全 过程 , 但是束顶病的维管束也呈现褐色 , 宏现上肴
与花叶心腐病较难区分 。
2
. 健株切片的无色 , 不是浸债后没有色泽的变化 , 而是首先切片被染成红色 ( 含维管
束 ) , 1 0小时后 , 色泽逐渐变淡 , 24 小时后整个切片褪色 , 成为无色 ( 实质上是显现出原有
的切片色泽一一浅绿色 ) 。
3
. 束顶病的砖红色也是逐步发展而来的 : 首先切片的维管束被染成红色 , 而其余组织
仍为绿色 , 8 个小时后维管束逐步变成紫红色 , 而其余组织逐渐显示棕褐色 , 24 小时后 , 维
管束为紫红色 , 其它组织为红褐色 。 宏观上看整个切片呈现砖红或红褐色 。
4
。 花叶心腐病切片 , 首先被染成红棕色 , 维管束也被染成红色 , 八个小时后维管束仍
为红色 , 而其余组织呈现咖啡色 , 10 个小时后 , 维管束仍为红色 , 而其它组织呈黑红色 , 2
小时后整个切片 ( 含维管束 ) 变成黑褐色 。
5
. 【根据我们 的观察 . 用 l % 2 , 3 , 5 一氯化三苯基四 ( 氮 ) 哇的水溶液浸溃中 肋 切
片 , 除能检测出束顶病和花叶心腐病外 , 还能检测出不明病因的叶片脉间褪绿病 ( 简称褪绿
病 , 根据多种途径和生物测定检测与典型花叶心腐病的反应不完全相 同 ) 。
这种褪绿病的切片 , 经浸溃后前期反应与束顶病相似 , 首先是维管束变红 , 其余组织开
始也是绿色 , 不过反应的更 快 , 比束顶病更 快的由绿变成几棕色 ( 处理后 3个小时左右 ) , 6
至 7 个小时后明显的与束顶病不 同 , 这时束顶病切片的组织仍为绿色 , 维管束为红色 , 而褪
绿病的组织 已呈现褐色 , 维管束呈现浅褐色 , 2 4小时后整个切片均呈现浅褐色 。
这项技术相对来说 , 还是需要较长的时间 , 尤其为掌握束顶病和花叶心腐病各自的发病
率 ( 即不同病害的检侧率 ) , 更不容提高处理时的温度以缩短时间 , 同时试剂的来源也不算
太容易 , 除此 , 还需在阴暗条件下进行为宜 , 以免试剂溶液见光后变红 , 影 响视觉 , 因此 ,
我们根据束顶病株叶片的 中脉 ( 或叶柄的韧皮组织纤维鞘的发育受到抑制 , 变为无数叶绿体
细胞并充塞在韧皮部附近的基本组织里 , 而健株的这一部位完全没有叶绿体细胞分布的这一
特征 〔 ` 」 , 为此 , 我们采用 1 %曙红 B水溶液进行染色一分钟 , 95 %酒精脱色 , . 显微镜观察 ,
是否存在着这一病变 , 结果发现 : 束顶病病株的叶片 中肋切片上表皮下 , 围绕在绘管床 周
围 , 堆积着成团的叶绿体细胞 , 而且整个切片转成砖红色 , 而健株切片的同一部位 ,一却完全
没有发现叶绿体细胞 , 并且整个切片 呈现桔红色 , 在花叶心腐病病叶 中脉的切片上 ) 也观察
$lJ 类似的反应和病变 , 整个切片的颜 色亦呈砖红 色 , 但其畸形叶绿体的分布 , 却与束顶病不
同 , 花叶心腐病病株切片 中的畸型叶绿体 , 多分散的分布在薄壁细胞中 。
由此可知 : 采用 1 %曙红 B水溶液染色 , 95 %酒精脱色后的砖红色反应 , 只标志着病株
的反应 , 显微镜观察畸形叶绿体的分布部位 , 才是确诊和区分束顶病抑或花叶心腐病的可靠
依据 。
为验证其可靠性 , 我们除了进行大量的重复外 ( 取健康组培苗 90 株次 , 束顶病株先后 3仓
株次 , 花叶心腐病先后两次 7 株次— 受田间发病率制约 ) , 还与生物测定结果验证 , 所得
1期 周广泉等 :香蕉束顶病和花叶心腐病的快速测定技术研究
一结果均符合上述规律 , 除此 , 还特意选取尚未表现症状的叶片进行测试 , 所得结果 , 仍表现
出病株的特征 , 另外 , 我们还对玉林市威廉氏品种 ( W i l ia m日 h y b ir d ) 组培苗试脸地的香
蕉成株叶片表现脉间褪绿而又不呈现典型花叶心腐病症状的植株 , 通过上法检测 , 并与生物
测定结果印证 , 证明不是典型花叶心腐病 。 上述结果完全与采用 2 , 3 , 6 一氯化三苯基 四
( 氮 ) 哩的测试结果一致 。 因此 , 这一测试手段 , 在整个试验中证明是可靠的 , 并且是简易
可行的 , 可以在生产中推广试用 。
在探讨曙红 B 染色鉴定蕉苗是否带病的同时 , 还探讨了使用 0 . 1%番红和 0 . 5 %甲基绿等
染色剂筛选健株的可行性 。
试验结果 : 采用 O。 1%番红染色 , 95 %酒精脱色的切片 , 所得结果与 1 %曙 红 B 染色结
果相似 , 木纤维 、 韧皮纤维和木质细胞等均被染成红色 , 镜检时健株切片的各个组织都清晰
可见 , 没有看到黑褐色团块 , 而病株 (束顶病和花叶心腐病 )则在不同部位分布有黑褐色物质
所堆积的团块 , 与曙红 B染色不同的是病 、 健株之间 , 没发现色泽上的明显区别 , 这对快速
掏汰病株 , 不是有利的条件 。 至于用 。。 5% 甲基绿染色 6 分钟左右 , 系列浓度的酒精脱 色 后
( 3 0%
,
5 0%
,
7 0%
,
85 %
,
9 0%
,
9 5%和 1 0 0% , 9 5%酒精一次性脱色也可 , 但效果稍差 ) ,
经染色后的切片 , 目测可看出健株切片呈蓝绿色 , 束顶病呈现绿色 , 而花叶心腐病常呈现墨
绿色 , 这是一个十分理想的色泽反应 , 既可快速区分病株和健株 , 又可鉴别不同的病害 , 但
经多次验证其可靠性时 , 健株的蓝绿色和束顶病的绿色反应稳定可靠 , 而花叶心腐病的墨绿
色反应常不稳定 , 尤其可虑的是常倾向健株的蓝绿色 , 因此 , 在未掌握不稳定的原因之前 ,
只能缤弃不用 , 因为健株与花叶心腐病的混淆是十分危险的 。
讨 论
在病区种植无病蕉苗时 , 再感染对生产上的威胁 , 是需要解决的一个重要问题 。 香蕉花
叶心腐病的国内外资料 , 都说明症状不尽相 同 , 危害程度也有差异 , 因此 , 高乔婉等就指出
Y ot
一
D h a u 七h y 等认为各地的病原 ( O M V ) 不可能都相同 ( 美国南部蕉株上的病原就与印度
的不 同或不完全相 同 , 与广东的也不同 ) , 甚至可能还不一定都是黄瓜花叶病毒 ( OM V )[ . 〕 ,
所以当前我区个别地区零星发现的叶片脉间褪绿病株 , 是值得深入研究的另一个问题 , 尤其
是它的感染性 、 危害性及传播途径更需重视 。 根据我们的初步测定 : 不仅对 2 , 3 , 5一氯化
三苯基四 ( 氮 ) 哇浸演切片后所呈现的色泽不同 ( 典型花叶心腐病为黑褐色 , 而脉间褪绿病
为浅褐或褐色 ) , 用 1 写曙红 B染色后 , 镜下检查 : 薄壁细胞 中所堆积的畸形叶绿体明显的
少于典型花叶心腐病 , 且更为分散 。
根据生物测定 : 在供试的几个指示植物上的症状表现 , 不尽相同 , 特别是在烟草上的症
状 , 差异较为明显 : 典型花叶心腐病在心叶烟和黄苗榆上的症状是明脉 一一 ) 花叶 , 而脉间褪
绿病 在 心 叶 烟和黄苗榆上的症状 : 叶缘有时下卷 , 重要的是显现深浅绿相 嵌 的 斑 驳 。 因
此 , 不论是症状 , 还是病原 , 褪绿病和花叶心腐病不是完全相同的 , 另外 , 把脉间褪绿病的
病原接种到其它指示植物上获得成功的事实 ( 尽管成功率不是很高— 常规的汁液摩 擦并加几滴 p H 7 。 2的磷酸缓冲液和病叶卷成简状直接摩擦指示植物叶片等两种方法 ) 可看出 : 褪绿
病具有传染性是必需肯定的事实 , 而且在调查中发现 , 褪绿病的发病率以及它的危害性 , 都
可能远远超过典型的花叶心腐病 ( 根据玉林 、 梧州的调查 : 典型花叶心腐病在蕉 田 中较难找
广 西 植 物 1 1卷
到 , 而褪绿病在种苗不常病的情况下 , 种植 8 ~ 4 个月后 , 在不同的蕉田 中 , 可以发现 10 ~
20 %的病株 , 个别蕉田可达 40 ~ 50 % 以上 ) , 因此 , 它的危害性是不容低估的 。 至于褪绿病
的病原来源问题 , 我们认为不应当排 除由蕉由附近其它植物上 ( 还可能是常见的病几毒 ) 的病
毒传染而来 。 故对推广这些易感品种更要慎重 。
香蕉是一个宿根多年生植物 , 因此对于病毒病害来说 , 它就有继代发生和累积病原的 作
用 , 所 以在采用常规防治措施的同时 ( 如及时的挖除病株 等 ) , 可考虑利用香蕉束顶病寄主
范围窄 ( 仅限于危害蕉属植物 ) 和花叶心腐病潜育期长 ( 一般是 2 ~ 3 个月 , 最长可达 10 ~
18 个月 )的特点 〔` ’ , 尤其是至今还未发现媒介昆虫 ( 蚜虫 ) 可把此病直接的从一株病燕上传
到另一株香蕉上 〔. 〕的无法理解的现象 , 这些特点都说明淘汰病苗以及在蕉田附近不种植 花
叶心斓病的其它寄主 , 诸如 : 黄瓜 、 丝瓜 、 苦瓜 、 西葫芦 、 节 瓜 、 南 瓜 、 烟 草 、 辣 椒 、 茄
子 、 番茄 、 虹豆 、 菜豆 、 黄豆 、 蚕豆 、 玉米 、 番木瓜 、 小白菜等 , 并及时锄 掉 蔓陀 罗 、 酸
浆 、 千 日红 、 商陆 、 览色葬 、 矮牵牛等杂草的重要性和必要性 。 因此 , 在此基础上 , 再把香
蕉的多年生栽培改为一年生或两年生植物 , 在筛选无病蕉苗的基础上 , 提早种植组培育成的
大苗 , 当年采收 , 既可躲避某些种植区偶发性的霜害威胁 , 又可减轻或避免上述两种病害再
感染所造成的损失 。
参 考 文 献
〔 1 ) 北京农业大学编 , 农业植物病理学 . ( 植保专业用 ) 。 农业出版社 , p . 397 .
〔 2 〕江苏农学院植保系编 , 植物病害诊断 . 农业出版社 . p . 2 59 .
〔 3 〕 高乔婉等 , 19 83 : 引致香蕉花叶病的黄瓜花叶病毒株 系 。 华 南农 学 院 学 报 , V ol . 4 N o , 4
P
.
4 3一 4 8 .
(4 〕范怀忠 . 关于 20 0。年科技规划中植物保护科技发展和应用预测论证报告。 p . 50 一 51 .
〔 5 〕 A . 5 . S u m ma n wa r a n d T
.
5
.
M a r吐 h e . 195 2 : D i a g no s t i e t e e hn i q u e f o r t h仑 d et e e -
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