全 文 ：广 西 植 物 G ui ha ia 6( i一2 ) : 1 11一1 1 5. 19朋
宛田红花油茶的染色体核型研究
卢天玲 廖汉刃
(广西农学院林学分院 )
关键词 山茶属 ; 宛田红花油茶; 核型
在张宏达先生的山茶属分类系统中 I` I, 宛田红花油茶是山茶属 (C a m e l ai L ni n) , 红山
茶组 S( “ “ .t C “ m e n ai o) 该组是国外进行染色休研究最多的一个组 , [ ” ” l , 但进行核型 分
析的不多 I “ , ` ’ ] , 国内在这方面有过研究 1 2 卜 3 1, 但宛田红花油茶的核型分析未见报道 。
材 _ _料 与 方 一法 、 ’
制片用的宛田红花油茶种子是广西壮族自治区林科所提供 , 采于该所物种园内 。 1 9名4年
1 1月采种沙藏 , 12 月初转入 25 ℃恒温箱中恒温培养 , 待幼根长至 1 一 3 厘米时取样 。
截取根尖浸入饱和的对二氯苯溶液 , 在 1,0 ℃恒温条件下 , 预处理 10一13 小时 , 然后转入
C a r n o y 液中 , 在冰箱 内 4 ~ 6 ’℃的条件下固定 2 4一 40 小时 。 取出经过周定 的 材 料 , 置 于
60 ℃ 1 N H C I 中解离 20 分钟 。 ’ 用改良石碳酸品红染色 。 在染色液中压片 , 镜检选出中期分
裂相多的玻片 , 用小型钟表台钳夹紧压平片子 , 用刀片直接揭开盖玻片 , 置于 40 一50 ℃ 恒
温箱中烘 2 ~ 5 小时 , ` 脱水后用二甲苯透明 , 中性树胶封片 。 镜检选出染色体分散 良好 , 着
丝点清晰的细胞 , 用 P M一 10 A D型O L Y M P U S显微照相系统拍照 。
本试验观察了染色体分散良好的玻片50 张 , 统计了染色体清晰无重叠的细胞40 个 , 其中
选出可清晰地识别细节的细胞 10 个 , 拍照后进行测量 。
形态指数 “ a ’ (M . I . ) = (S / L )( S + L )
染色体分类按 L e v a n 等 ( 1 96 4 ) 走” J。
结 果 与 讨 论
一 、 核型 观察了清晰的无重叠的中期分裂相的细胞 40 个 , 均表 明宛田红花油茶是二倍
体种 , 其体细胞染色体数 目Z n = 30 , 与前人报道 t 名 l结果相一致 。
该染色体参数列出表 l 。 这些数据表明宛田红花油茶的染色体具有 10 对 中部着丝点染色
体 ( nI ) , 4 对近中部着丝点染色体 ( s m ) , l 对近端部着丝点染色体 ( s )t , 按 L e v a n 等《 19 6 4 )
的命名法 I “ l , 其核型公式是 :
K (Z
n
) = 3 0 二 2 0m + s s m + Z s t
按 L e v a n法分类 , 所测各个细胞染色体类型都相同 , 这与黄少甫等人 [ 2 , 3 ]研究的同一红
山茶组的 C . s e m i s e r r a t a C h i 与 C . s e m i s e r r a t a v a r . a lb i f l o r a H u 的核型也相同 。
据表 1 的数据 , 宛田红花油茶染色体组的总长度 42 . 12 微米 , 平均长度 2 . 8 土 0 . 46 微米 ,
其长度变化范围在 1 . 86 一 3 . 36 微米之间 , ,各对染色体的相对长度分布在 7 。 98 一 4 . 42 %之间 。
西 苗 物 B卷
随体数一般为 1~ 3个 , 图 3 显示在第 8 对与第 1 对的 1 条染色体上 , 其数目在不同的细胞
件峭口 变动 , 这与黄少甫 : 3 1、 K o n d 。 〔” ! 报道的情况相似 , 这是技术问题还是这个种染色体
的特异性 , 尚待进一步讨论研究。 次缓痕均在长臂士出现 , 从图 1 _和图 2 可见 , 第 4 、 9 对
有成对次维痕出现 。 第 2 、 3 对只各有一条染色体具次缓痕 , 存在同源染色体的异质结构 ,
凄可能是杂合性 , 也可能是预处理过程中出现的 , 需进一步探讨 。
表 1
丁: b l e l
宛 田 红 花 油 茶 染 色 体 参 数
1
’
b e P o r a 汀 e t e r s O f t卜e e h r 心 m o 3 o , e s o f C a , e l l i a p o ly o d o n t a H O w牛 吸备注 . ①②其巾一条具次级痕 . ③④成对具次级痕 。
1
一 2期 卢天玲 、 廖汉刃 :宛田红花油茶的染色体核型研究 3 1 1
图 1宛田红花油茶的体细胞中期染色体 (Zn =
0 3 )
。 箭头示次绕痕
F 19
.
1S o ma t i em et a P ha se eho rmo o sm e s
(Zn 二 30 )。 f C a m el l ia p o ly ed cn t a H o w .
A r ro w sh e w e e sn ed a ry ecn st ri et io n
.
x266 6
图 2宛田红花油茶的染色体组 , 按图 1 细胞的
染色休长度顺序排列
F 19
.
2 C h r o m o s o m e s e o m p l e m e n t c f
C a m e l l i a p o l y o d o n t a H o w
.
T h e
e h r o m o s o m e s i n t h e e e l l s
o f F i g u
r e l
w e r e a
r r a n g e d i n o r d e r o f l e n g t h
.
x 2 6 6 6
图 3 宛田红花油茶的体细胞中期染色体。 箭头
示随体
F 19
.
3 S o m a t i e m e t a P h a s e e li r o m o s o m e s
( Z
n = 3 0 ) o f C a m
e l l i a p o l y o d
o n t a H o w
.
A r r o w s h o w s a t e l l i t e
.
x 1 5 9 0
1
2
3
2…口口。口口: 。。。。日。。。。…口{l{}{口}日}口日。日口 4
1
AU叭91
八`
a
图 4 宛田红花油茶的染色体组型模式图
F 19
.
4 I d i o g r a m o f k a r y o t y p e o f C a m e l l i a p o l y o d o n t a
二 、 从山茶属染色体的倍教系列讨论宛田红花油茶基 因的利用
数系列复杂的属 从 1 9 2 9年 M or ni a g a 等用 C 5 1 n 3 n s t S 进 行研究 ,
山茶属是一个染色体倍
确认其 染 色 体 基数
n = 1 5以后 , 1 9 3 2年 K a r a s a 、 v a 又报道多倍体山茶 2 , : = 4 5的 C . 5 1 n e 工1 5 1 5 0 到 1 9 5 0年 初开始
1 14广 西 植 物 压卷
了广泛的研究, 到现在为止 , 已探明山茶属从二倍体一八倍体中 , 各个倍体水平均有 工. 飞,
还出现了少数非整倍体 。 这种倍体水平的复杂性 , 显然 与长期的人工栽培 、 杂交育种 、 天然
授粉有密切关系 。 在报道过的 7 个六倍体种中 1 . 丁, 红山茶组的滇山茶 ( C . r e ti 。吐 at a) 与西
南红山茶 (C , p i at r di )i 都是六倍体 , 而本文研究的同一组的宛田红花油茶是二倍体 , 也未发
现有护昆倍性或非整倍性 。 可见宛田红花油茶在红山茶组中, 进化上还是属于比较原始的种 ,
其基因还未被利用 。 是良好的育种原始材料 。 如能进一步加强培育 , 可望获得优 良的庭舅观
尝树 。 另外在遗传研究上 , 宛田红花油茶也是研究山茶属核型进化上值得注意的材料 。
三 、 在翻片方法上 , 倪组滚处斑有抽特的效果 试验中发现 , 预处理的时间与温度 关系
密切。 根尖在 5 、 10 、 15 及 2 5℃ 的条件下 · 预处理豹适当时间 分别 为 1 7一 2仇 10 一 1 3 、
6 一 8 及 3 一 4 小时 。 尤其在较低温度下 , 用较长的预处理时间效果较好 。 过高温度易出现
染色体粘连 , 过低温度和时间过短 , 染色体长 , 相互缠绕 着色浅而不均匀 , 缀疫不清晰 ,
不易鉴别形态 。
周 传明参加试脸 。
参 考 文 献
〔 I 〕 张宏达, 1潞 1 : 山茶属梢物的系统研究 , 中山大学学报 ( 自然科学 ) 论丛 ( 1 ) 。
〔幻 黄少甫等, 玲 a4 : 南山茶 C a垃el lai es m si e r r a at C 衍染色体核型的分析 , 广西植物 4 亡1 卜
9 ` 12。
〔 3 〕黄少甫等 , 1 9韶 : 白花南山茶的染色体核型分析 , 亚林科技 , 83 ( l ) : 37 一盯 。
( 4 〕庄瑞林等, 1今84 : 我国油茶主要物种花粉大小变异性及染色体 数 的 初 步 观 察 , 林 业科技通讯 ,
8 4 ( 3 )
: 1 5一 1 7 .
〔 6 〕 L 已 v a n , A . , K . F r e d g a , a n d A . A . S a n d b e r g , 1 9 6 4 : N o m e n e l a t u r e f o r e e 应 t r 。血七 r i心
p 。 $ 1t i o n o n 比 r o m o s o m e s . H e r e d i t a s , 5 2 ( 2 ) : 2 0 1一 22 0 .
〔 6 〕 K a t o , M . a n d T . S i m u r a , 19 71 : C y t o g e n e t i e a l S t u d i e s o n C a m e l l i a S p o e i e s . 1 .
T h e k a r y o t y p e a n a l y s io i n C
.
s i n e n s i s a n d C
.
w a b i 、 k e . J a p a n . 无 B r e e d . , 2 1 ( 5 ) :
2 6 5一那 8 ,
〔7 蛋 K o n d o , K . , 2 9 7 7 : C y t o l o g i e a l S t往睡i 。 : i n C u l t i v 撰 t e d S p e c i e s o f C a 功 e l l i a 、 1.
D i p l o i d S p e e i e s a ” d t h e i r H 了b r i d s . J a p a n , J , B r e e d . , 2 7 ( i ) : 2 8一 3 5 .
〔8 贻K o o d o , K . , 1 9 7 7 : C y t o l o g i e a l S t u d io s i n C o l t i, a t e d S p e e i e s o f C a nt e l l i a 、 l . H 。 -
x a p lo i d S p e e i e s a n d t h e i r H y b r id s
.
J a p a n
.
J
.
B r o e d
, ,
2 7 ( 4 )
:
3 3 5一 3 4 4.
〔 9 〕 K o n d o , K . , 1 9 7 8: C y t o l o g i e a l S t u d i e s i n C u ! t i v a t e d S p e e i e s o f C a 二 e l l i a . 1 . T e -
t r a p l o i d S p e e i e s a n d H y b r i d s b e t w e o n D i p l o i d S p e e i e s a n d H e x a p l o i d S p
。仁 i e s .
J a p a n
.
J
,
B r e e d
. ,
2 5 ( 3 )
: 1 9 7一 2 0 j .
〔1 0 ) K o o d o , K . a n d W . L . A e k e r m a n , 19 7 8 : C y t o l o g i。 扭1 S t u d i o s i n C u l t i v a t o d S解 c io s
。 f C a m e l l i a
.
F
.
A nr p h i d i p l o i d C u l t i v a r 一
,
F r a g r a n t P i n k lm p r o v e d
,
A p妙 a r e d
f r o m
`
F r a g r a n t P i n k
,
S y n t h e s i z e d b y t h e C o l e h i e i n e T r e a t爪 e n t . J a p a n . J . 升r e o d . ,
2 8 ( 4 )
:
2 9 7一 3 0 3 . ’
( 2 1贡K o 皿 d 。 , K . , 19 7 9 : C y t o l o g i e a l S t o d i。 : i n C o l t i v a t。 d s p e e i。 , 。 f C a 二 e l l i二 . V , 1。 -
t r a s p e o i f i e v a r i a t i o n o f K a
r y o t y p e o i刀 t w 。 、 p e e i c s o f S e c t
.
T h e a
.
J a p合且 , J .
卜忿期 卢天玲 、 廖汉刃 :宛田红花油茶的染色体核型研究 1 15
B re ed
.,
2 9 ( 3 )
: 2 0 5一 2 1 0 .
〔12 〕 F u k u s h im a , E . , 5 . Iw a s a . , N . E n d o a n d T . Y o s h i n a r i , 1 9 6 6 : C y t o g e n e t i e S t u d ie s
i n C a m e l l i a
.
1
.
C h r o m o s o m e s u r v e y i n s o m e C a m e l l i a s p e e i e s
.
J a p a n
.
J
.
H o r t
. ,
3 5
: 4 13一 4 2 1 .
〔1 3〕 D e 一V e s e o v i , M . A . a n d 0 . S z i k l a i , 1 9 7 5 : C o m p a r a t i v e K a r y o t y p e A n a l y s i s o f
D o u g l a s 一 F i r
.
S i l v a e G e n e t i e a
.
2 峨 ( 2一 3 ) : 6 5一 7 2 .
KARYO T Y P E A NA LY S IS
P O LY OD ON T A
OF C AM E LL IA
H OW
L u T i a n 一 l i n g a n d L i a o H a n 一 r e n
( F o r e s t r y D i, i s i o n o f G u a u g x i A g r i e u l t u
r a l C o l le g e )
A b s t r a e t T h e C h i n e s e e n d e m i e C a m e l l i a P o ly o d o n t a H o w
,
d i s t r i b u t e d i n
G u a n g x i o f S e u t h C h i n a 15 a n e e o n o m i e t r e e
.
A k a r y o t y p i e a l a n a ly s i s o f t h
e
s P e e i e s w a s r e P o r t e d f o r t h e f i r s t t im e
.
A k a r y o t y P e s t u d y w a s m a d e o f e h r o m o s o m e s i n r o o t一 t iP m e r i s t e m a t i e
e e l l s o f C a m e l l i a p o ly o d o n t a
.
T h e s o m a t i e e h r o m o s o m e n u m b e r 15 Z n = 3 0
-
T h
e h o m o l o g o u s e h r o m o s o m e P a i r s w e r e i d e n t i f t e d u s i n g t h e a r m r a t i o
, e e n -
t r o m e r e i n d e x
, r e l a t i v e l e n g t h a n d t h e m o r p h o l o g i e a l i n d e x
.
T h e s e v a l u e s
h a v e a l s o p r o v i d e t h e b a s i e i n f o r m a t i o n f o r d e t e r m i n i n g t h a t C a m e l l i a p o ly
·
o d o n t a h a s t e n p a i r s m e t a e e n t r i e (m
一 t y p 。 )
,
f o u r p a i r s s u bm e t a e e o t r i e (
s m -
t y p e )
a n d o n e p a i r s u b t e l o e e n t r i e (
s t一 t y p e ) e h r o m o s o m o s
.
T h e 4 t h a n d o t五
p a i r s a n d o n e o f t h e Z t h a n d 3 t h p a i r s w e r e f o u n d t o h a v e s o e o n d a r 了 e o n s t -
r i。 t i o n ( F i g
.
1 a n d F i g
.
2)
.
T h e s t h p a i r a n d o n e o f t h e l t h p a i r s w e r e s a t -
c h r o m o s o m e s (F i g
.
3) A
e e o r d i n g t o t h e e l a s s i f i e a t i o n s y s t e m s g i v e n b y L e v a n
e t a l
.
,
t h e k a r y o t y p e f o r m u l a o f t h e s p e e i e s a r e K (Z
n
) = 3 0 = Z om + s s m + Z
s t
.
T h i s k i n d 15 t h e s a m e a s C
.
s e m i s e r r a t a C h i a 皿 d C
.
s e m i s e r r a t a 、 a r
.
a l b i
-
f l
o r a H u o f t h e s a m e S o e t
.
C a m e l l i a s t u d i e d b y H u a n g S h
a o 一 f u e t a l
.
( 1. 8 3
,
1 0 5 4 )
,
J u d g i n g f
r o m t h
e
k
a r y o t了p e , C a m e l l i a p o l了o d o n t a 15 o r i g i n a l 亡a r l王。 r
i n e o m p a r i s o n w i t h o t h e r s p e e i e s o f t h e S
e e t
.
C a 爪 e l l i a .
T h i s p a p e r w a s t o a d v a n c e a n im p r o v e m e n t m e t h o d o f m a k i
n g s q u a s h
p r e p a r a t i o n s f r o m r o o t t ip s f o r e h
r o m o s o m e m o r p h o l o g了 s t u d i e s i n C a m e l l i乙
P o ly o d o n t a
.
K e y w o r d s C a m e l l i a p o ly o d o n t a ; K a r y o t y p e