全 文 ：中国农业科学 2010,43(6):1302-1313
Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.026

收稿日期：2009-07-23；接受日期：2010-01-11
基金项目：教育部新世纪优秀人才支持计划项目（NCET-06-0489）、上海市农委重点攻关项目[沪农科攻字（2006）第 4-3 号]
作者简介：赵宏波，副教授，博士。E-mail：zhaohbzhou@yahoo.com.cn。通信作者陈发棣，教授。Tel：025-84395231；E-mail：chenfd@njau.edu.cn



基于 AFLP 的菊属、亚菊属及其近缘属的属间关系
赵宏波 1,2，缪恒彬 1，吴国盛 1，陈发棣 1，郭维明 1
（1 南京农业大学园艺学院，南京 210095；2 浙江林学院农业与食品科学学院，浙江临安 311300）

摘要：【目的】由于研究材料、地理分布等条件的限制，菊属（Dendranthema）、亚菊属（Ajania）及其近缘
属的属间关系未得到很好解决。核糖体 ITS 区和叶绿体 trnL/trnF 间区等相关分子序列解析用于研究植物系统进
化具有较大优势，但在菊属及其近缘属等相关类群间存在信息位点低的问题，而 AFLP 标记以其高多态性的优点在
亲缘关系很近类群的系统演化研究中表现出一定的优势，因此本研究利用 AFLP 技术对菊属、亚菊属及其近缘属的
属间关系进行研究，旨在分析和探讨菊属、亚菊属及其近缘属的系统关系，同时为菊花（D. ×grandiflorum）等
材料的遗传育种提供参考。【方法】利用 9 对荧光标记引物对东亚蒿亚族菊属、亚菊属及其近缘类群共 50 个分类
单元进行 AFLP 分析，同时分别利用 SPSS 11.0 软件采用非加权平均数 UPGMA 方法和 PAUP* 4.0 b10 软件采用最
大简约法进行聚类分析。【结果】AFLP 分析共获得 1 695 个多态性条带。根据相似性系数，无论是整个蒿亚族及
其近缘类群内部，还是菊属、亚菊属内部，均表现出较高的遗传多样性，种间分化明显。【结论】无论是 UPGMA 聚
类分析结果还是构建的最大简约树，AFLP 结果均将菊属和 Arctanthemum 先聚为一亚分支，各自形成两个种群，
各自种群包含亚菊属的个别类群；亚菊属的大部分类群和太行菊属（Opisthopappus）形成另一亚分支，与菊属亚
分支互为姐妹群形成菊属-亚菊属大分支。这说明菊属和亚菊属可能是由共同的祖先类群平行演化而来，其中亚菊
属的多花亚菊（A. myriantha）、铺散亚菊（A. khartensis）等与菊属亲缘关系较近，而原产日本的矶菊（A.
pacifica）、盐菊（A. shiwogiku）等是亚菊属中较进化类型；太行菊属的系统地位可能更接近于蒿亚族；短舌菊
属（Brachanthemum）则被排除于菊属群之外。柳叶亚菊（A. salicifolia）、异叶亚菊（A. variifolia）等应从
亚菊属中分离出来，支持单列成栎叶菊属（Phaeostigma）。
关键词：菊属；亚菊属；蒿亚族；AFLP；系统演化；属间关系

Intergeneric Phylogenetic Relationship of Dendranthema (DC.) Des
Moul., Ajania Poljakov and Their Allies Based on Amplified
Fragment Length Polymorphism
ZHAO Hong-bo1,2, MIAO Heng-bin1, WU Guo-sheng1, CHEN Fa-di1, GUO Wei-ming1
(1College of Horticulture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095; 2 School of Agriculture and Food Science, Zhejiang
Forestry College, Lin’an 311300, Zhejiang)

Abstract: 【Objective】 Intergeneric phylogenetic relationship of Dendranthema (DC.) Des Moul., Ajania Poljakov and their
allies are still unresolved due to the restriction of plant materials and complicated geographic distribution. In order to resolve the
phylogeny of these groups and lay a foundation for the breeding of some important cultivated plants in this tribe such as
chrysanthemum, Amplified Fragment Length Polymorphism (AFLP) was applied in this research. 【Method】 The phylogenetic
relationships of subtribe Artemisiinae endemic to eastern Asia and its allies including 50 taxa were analyzed using amplified
fragment length polymorphism (AFLP) markers with near-infrared fluorescence-labeled primers. Phylogenetic searches were
respectively performed by Unweight Pair Group Method with Arithmetic Mean (UPGMA) using SPSS 11.0 and maximum
6 期 赵宏波等：基于 AFLP 的菊属、亚菊属及其近缘属的属间关系 1303
parsimony analysis (MP) with PAUP* 4.0b10. 【Result】 Nine primer set combinations were used in this investigation, and a total of
1936 AFLP fragments were detected, of which 1695 were polymorphic (87.6%), indicating considerable genetic variation at the
species level. High genetic differentiation not only among all the taxa but also respectively among Dendranthema or Ajania was
detected. 【Conclusion】 The Dendranthema-Ajania clade was the most important cluster of the phylogenetic tree. At the same time,
this clade was chiefly divided into two sub-clades. (1) one corresponds to Dendranthema, Arctanthemum and a few species of Ajania
that was further separated from two groups respectively including a part of Dendranthema and one or two species of Ajania, (2)
another to a majority of taxa of Ajania and Opisthopappus. These two sub-clades were sister to each other. The results indicated that
Dendranthema and Ajania maybe parallely evolved from common ancestors where A. myriantha and A. khartensis should be closer
to Dendranthema than other taxa in Ajania, and Ajania pacifica and A. shiwogiku were more advanced taxa in this genus,
Opisthopappus once belonging to subtribe Tanacetinae may be closer to subtribe Artemisiinae, however, radiate or rare discoid
Brachanthemum was excluded from this group. The present phylogeny suggests that a revision of this scheme should be necessary, in
which A. salicifolia and A. variifolia should be transferred to Phaeostigma.
Key words: Dendranthema; Ajania; Artemisiinae; AFLP; phylogeny; intergeneric relationship

0 引言
【研究意义】春黄菊族（Anthemideae）是菊科中
一个中等大小的族，共包括 12 个亚族[1]，其中蒿亚族
（Artemisiinae）是东亚最主要的亚族，80%以上的属
主要分布于此地区或有分布。不同学者对蒿亚族的系
统演化进行了一定的研究，但主要集中于蒿属
（Artemisia L.）及其近缘属即蒿属群（The Artemisia
group）的相关研究[2-10]；由于供试材料限制，对菊属
[Dendranthema (DC.) Des Moul.]、亚菊属（Ajania
Poljakov）及其近缘属如短舌菊属（Brachanthemum
DC.）、Arctanthemum (Tzvelev) Tzvelev 等的系统关系，
菊属群（the Dendranthama Group）与蒿属群的关系等
均未能阐明。此外，一些重叠分布的类群如匹菊属
（Pyrethrum Zinn.）、菊蒿属（Tanacetum L.）、女蒿
属（Hippolytia Poljakov）、Nipponanthemum Kitam.
等被认为与菊属亲缘关系很近或存在姐妹群关系，均
使得菊属、亚菊属与其近缘类群的属间界限、系统关
系等十分模糊。【前人研究进展】菊属以东亚为分布
中心，仅紫花野菊[D. zawadskii (Herbich) Tzvelev]分布
可至南欧。菊花[D. ×grandiflorum (Ramat.) Kitam.]
为世界广泛栽培的观赏植物，起源于中国[11-12]；亚菊
属分布于东亚和中亚，以中国为分布中心，向东（日
本、朝鲜和俄罗斯远东地区）、向北（蒙古、西伯利
亚）、向南（印度）、向西（喜马拉雅、中亚）逐渐
扩散；Arctanthemum 分布于远东地区和日本 [1,11]。
Tzvelev 根据 Arctanthemum 叶片呈玫瑰花形排列和近
北极的分布，将其从菊属分出[1]；Kitamura[13]、Ohashi
和 Yonekura[14]把亚菊属、Arctanthemum 归在菊属里，
并把它们处理为不同的组。Tzvelev 研究了大量菊属和
亚菊属植物，但仍未能很好地界定两属，认为菊属、
亚菊属关系很近，菊属更保守，与亚菊属等平行进
化[1]；亚菊属头状花序小、盘状，无舌状花，紧密排
列呈伞形，又区别于菊属。Мулдашев[15-16] 根据
Phaeostigma 褐色的柱头和直立的花冠裂片，将其从亚
菊属中分出单列成属。Tzvelev 认为短舌菊属与菊属亲
缘关系很近，两者具有相似的子房，无冠毛、薄壁、
黏性 [1]。Zhao 等 [17]利用核糖体 ITS 区和叶绿体
trnL/trnF 间区序列对蒿亚族系统演化特别是菊属群和
蒿属群的组成和内部关系等进行了研究，结果表明菊
属群由菊属、亚菊属、紊蒿属（Elachanthemum Ling et
Y. R. Ling）、太行菊属（Opisthopappus Shih）和
Arctanthemum 组成，但未能很好地解决菊属群内部菊
属与亚菊属的关系以及与其它近缘属的系统关系等问
题。利用核糖体 DNA 和叶绿体 DNA 的基因或基因间
区在植物系统发育研究中虽然已经得到广泛应用，然
关于 ITS 和叶绿体基因或基因间区在属下或属间信息
位点有限在其它植物中也有许多报道[18-21]；在亲缘关
系很近类群的系统演化研究中，AFLP 标记以其高多
态性的优点表现出更大的优势[22-23]。AFLP（amplified
fragment length polymorphism）即扩增片段长度多态
性，是由荷兰 Keygene 公司的科学家 Zebeau 和 Vos
等于 1993 在 PCR（polymorphism chain reaction）和
RFLP（restriction fragment length polymorphism）的基
础上发明的一项 DNA 指纹技术，其基本原理是通过
基因组DNA酶切片段的选择性扩增来检测DNA酶切
片段的多态性[24]。近年来，AFLP 在系统演化[25]、遗
传多样性[26-27]、属间和种间关系[28-29]、杂种起源[30-31]、
1304 中 国 农 业 科 学 43 卷
亲本鉴定[32]、遗传图谱构建和基因定位[33-34]等研究中
应用广泛。【本研究切入点】本研究拟利用 AFLP 对
东亚蒿亚族内部菊属、亚菊属与近缘类群的亲缘关系
进行研究和探讨，进而探讨东亚蒿亚族的系统关系，
从而为利用远缘杂交进行菊花等重要观赏植物的遗传
育种提供一定的参考。【拟解决的关键问题】建立菊
属、亚菊属及其近缘属 AFLP 反应体系，并进行多态
性和相似性分析，同时利用相关软件进行聚类分析，
以此为依据探讨菊属、亚菊属及其近缘属的属间系统
关系。
1 材料与方法
1.1 材料
供试材料为来自于东亚蒿亚族和菊蒿亚族
（Tanacetinae）、滨菊亚族（Leucantheminae）等菊属、
亚菊属及相关类群共 50 份（表 1）。
1.2 方法
1.2.1 总 DNA 提取 采用改进的 CTAB 法[35]从新鲜
叶片或硅胶干燥的叶片中提取总 DNA。
1.2.2 AFLP分析 AFLP 操作参照 Vos 等[24]的方法。
利用北京鼎国生物技术公司的 FISH-AFLP 试剂盒并
按其操作指南进行。各样品基因组 DNA 的酶切和接
头的连接在同一反应中进行。接头序列为：EcoR I 接
头1 : 5′＞CTC GTA GAC TGC GTA CC ＜3′和EcoR I
接头 2 : 5′＞AAT TGG TAC GCA GTC TAC ＜3′；Mse
I 接头 1: 5′＞GAC GAT GAG TCC TGA G＜3′和 Mse I
接头 2: 5′＞TAC TCA GGA CTC AT＜3′。EcoR I 预扩
增引物序列: 5′-GAC TGC GTA CCA ATT CA-3′，Mse
I 预扩增引物序列: 5′-GAT GAG TCC TGA GTA A
C-3′。从 64 对 EcoR I/Mse I 引物对中筛选出扩增图谱
清晰的 9 对进行选择性扩增反应（表 2）。
（1）酶切和连接。在 20 µL 反应体系中含有 DNA
模板 4 µL（50 ng·µL-1），PstI 和 MseI 接头 1 µL，
PstI（4 U·µL-1）和 MseI（4 U·µL-1）2 µL，10×
reaction buffer 2.5 µL，10 mmol·L-1ATP 2.5 µL，
T4 Ligase（3 U·µL-1）1 µL，超纯水 7 µL。将上述混
合液混匀离心数秒，37℃保温 5 h，8℃保温 4 h，4℃
过夜。
（2）预扩增反应。用预扩增引物组合进行预扩增。
反应体系为 25 µL。含酶切-连接产物 2 µL，Pst I 和
Mse I 预扩增引物 1 µL，dNTPs 0.5 µL，10×PCR buffer
2.5 µL，Taq DNA 聚合酶 0.5 µL（2 U·µL-1），超纯水
18.5 µL。预扩增反应程序为：94℃变性 30 s，56℃复
性 30 s，72℃延伸 80 s，循环 30 次。预扩增产物稀释
20 倍，-20℃保存备用。
（3）选择性扩增反应。用荧光标记的经过筛选的
8 对引物（表 2）进行正式选择性扩增。其中 MseI 引
物的 5′ 端用荧光染料进行标记。反应体系为 25 µL。
含预扩增产物稀释后的 DNA 样品 2 µL，10×PCR
buffer 2.5 µL，dNTPs 0.5 µL，PstI 引物 1 µL（5
ng·µL-1），MseI 引物 1 µL（30 ng·µL-1），Taq 酶 0.5
µL（2U·µL-1），超纯水 17.5 µL。选择性扩增 PCR 扩
增程序为：94℃ 30 s，65℃（以后每轮循环温度递减
0.7℃）30 s，72℃ 80 s，扩增 12 轮；然后 94℃ 30 min，
55℃ 30 s，72℃ 80 s，再进行 23 个循环。
（4）电泳与数据处理。取 1 µL PCR 产物加入 1 µL
内标（Gene mark 500）在 377 DNA 自动测序仪（ABI
PRISM 377 sequencer）上于 4%的变性聚丙烯酰胺凝
胶上电泳 2.4 h，利用 Run Module: GS Run 36F-2400
软件自动采集电泳胶图。利用 GeneScan 3.1 软件将
30 个个体对荧光引物产生的电泳胶图转换为 0、1 矩
阵。用 NTSYS2.11 版软件中的 DICE 法计算样品间
的相似系数，并用 SPSS 11.0 分析软件采用 Jaccard
相似系数以及非加权平均数 UPGMA 方法进行聚类
分析。同时，用 PAUP* 4.0 b10 软件[36]进行分子系统
树构建，参数设定如下：简约性（parsimony）分析；
树二组重新连接（tree bisection-reconnection, TBR）、
启 发 式 搜索 （ heuristic search ） 、多 重 性 选 择
（MULPARS）、ACCTRAN 优化和 100 次随机附加
的重复，空位（gap）作为缺失状态进行分析。用自展
法（bootstrap analysis）检验系统树可靠性，自展数据
集为 1 000 次[37]。获得的结果用 TreeView[38]和 MEGA
4.0[39]进行处理。
2 结果
2.1 AFLP 条带多态性
利用 9 对 AFLP 引物对所有材料进行检测，共获
得 1 695 个多态性条带，其中菊属和亚菊属类群的多
态性条带为 1 613 个，菊属的多态性条带为 1 489 个，
亚菊属的多态性条带为 1 375 个（表 2），均表现出较
高多态性（图 1），表明无论是蒿亚族及其近缘分类
群，还是内部的菊属和亚菊属种间遗传多样性均较高，
携带有大量的遗传信息。
2.2 属间遗传相似性系数和遗传多样性
分析获得遗传相似性系数，最高的为菊属云台山
野菊（D. indicum YTS）和野路菊[D. japonense（Nakai）
6 期 赵宏波等：基于 AFLP 的菊属、亚菊属及其近缘属的属间关系 1305
表 1 试验材料
Table 1 The sampled taxa, along with voucher information and their geographical origin
代号
Code
分类群
Taxon
采集地/ 标本号
Source/ Voucher
地理分布
Distribution
内类群 Ingroup
蒿亚族 Artemisiinae Bremer & Humphries
菊属 Dendranthema (DC.) Des Moul.
菊组 Sect. Dendranthema
野菊系 Ser. Indica Tzvelev
1 野菊 D. indicum (L.) Des Moul. 江苏南京 Nanjing, Jiangsu/ Chen0004 亚洲东部 East, Asia
2 野菊 D. indicum (L.) Des Moul. 河南云台山 Yuntaishan, He’nan/ Zhao.HN06-01 中国 China
3 小红菊 D. chanetii (A. Léveillé) Shih 北京 Beijing / Chen0005 中国、朝鲜半岛 China, Korea
4 菊花脑 D. nankingense (Hand.-Mazz.) Y.R. Ling 江苏南京 Nanjing, Jiangsu/ Chen0001 中国 China
5 毛华菊 D. vestitum (Hemsley) Ling 安徽天柱山 Tianzhushan, Anhui/ Chen0006 中国 China
6 D. yezoense (T. Maekawa) Hind 日本本州北部 N. Honshu, Japan/ Chen0611 日本 Japan
7 萨摩野菊 D. ornatum (Hemsley) Kitam. 日本九州 Kyushu, Japan/ Chen0606 日本 Japan
8 大岛野路菊 D. crassum (Kitam.)Kitam. 日本九州 Kyushu, Japan/ Chen0607 日本 Japan
9 野路菊 D. japonense (Nakai) Kitam. 日本九州 Kyushu, Japan/ Chen0605 日本 Japan
10 油菊 D. okiense (Kitam.) Kitam. 日本本州西部 W. Honshu, Japan/ Chen0603 日本 Japan
11 龙脑菊 D. japonicum (Makino) Kitam. 日本本州 Honshu, Japan/ Chen0602 日本 Japan
12 菊花‘奥运火炬’D. ×grandiflorum (Ramat.) Kitam. ‘Aoyunhuoju’ 江苏南京 Nanjing, Jiangsu/ Zhao0503 栽培 Cultivated
13 菊花‘神马’D. × grandiflorum (Ramat.) Kitam. ‘Jinma’ 江苏南京 Nanjing, Jiangsu/ Zhao0505 栽培 Cultivated
山菊系 Ser. Oreastra Shih
14 小山菊 D. oreastrum (Hance) Ling 陕西太白山
Taibaishan, Shaanxi/ Zhao.TB06-04
远东地区、中国、朝鲜半岛
Far East, China, Korea
甘菊系 Ser. Lavandulifolia Shih
15 甘菊 D. lavandulifolium (Fischer ex Trautv.) Kitam. 北京 Beijing / Chen0002 中国 China
16 泡黄金菊 D. boreale (Makino) Ling ex Kitam. 日本本州 Honshu, Japan/ Chen0601 中国、朝鲜半岛、日本
China, Korea, Japan
红花系 Ser. Zawadskiana Tzvelev
17 紫花野菊 D. zawadskii (Herbich) Tzvelev 安徽黄山
Huangshan, Anhui/ Chen0007
欧亚大陆（包括俄罗斯、中国、蒙
古、朝鲜和日本等）
Eurasia (including Russia, China,
Mongolia, Korea and Japan)
18 D. weyrichii (Maxim.) Tzvelev 日本日光 Nikko, Japan/ Chen0608 远东地区、日本 Far east, Japan
拟亚菊系 Ser. Glabriuscula Shih
19 异色菊 D. dichrum Shih 河北内丘 Neiqiu, Hebei/ Chen0003 中国 China
苞叶组 Sect. Chlorochlamys Shih
20 那贺川野菊 D. yoshinaganthum (Makino ex Kitam.) Kitam. 日本四国 Shikoku, Japan/ Chen0604 日本 Japan
Arctanthemum (Tzvelev) Tzvelev
21 A. arcticum (L.) Tzvelev subsp. maekawanum (Kitam.) 日本本州北部 N. Honshu, Japan/ Chen06111 日本 Japan
亚菊属 Ajania Poljakov
褐苞组 Sect. Phaeoscyphus Shih
栎叶系 Ser. Quercifoliae Shih
22 柳叶亚菊 A. salicifolia (Mattf.) Poljakov 甘肃靖远 Jingyuan, Gansu/ Zhao.GS06-02 中国 China
异叶系 Ser. Variifoliae Tzvelev
23 异叶亚菊 A. variifolia (Chang) Tzvelev 陕西太白山 Taibaishan,Shaanxi /Zhao.TB06-02 中国 China
细裂系 Ser. Tibeticae Tzvelev
24 短裂亚菊 A. breviloba (Franchet ex Hand.-Mazz.) Ling et Shih 云南丽江 Lijiang, Yunnan/ Xie.LJ06-01 中国 China
25 铺散亚菊 A. khartensis (Dunn) Shih 四川康定折多山Kangding, Sichuan / Zhao.SC06-01 中国 China

1306 中 国 农 业 科 学 43 卷
续表 1 Continued Table 1
代号
Code
分类群
Taxon
采集地/ 标本号
Source/ Voucher
地理分布
Distribution
26 多花亚菊 A. myriantha (Franchet) Ling ex Shih 四川金川县 Jinchuan, Sichuan/ Zhao.SC06-09 中国 China
27 细裂亚菊 A. przewalskii Poljakov 四川马尔康 Ma’erkang, Sichuan/ Zhao.SC06-14 中国 China
28 细叶亚菊 A. tenuifolia (Jacq.) Tzvelev 四川红原 Hongyuan, Sichuan/ Zhao.SC06-13 中国 China
29 疏齿亚菊 A. remotipinna (Hand.-Mazz.) Ling ex Shih 陕西太白山 Taibaishan, Shaanxi/ Zhao.TB06-01 中国 China
30 A. shiwogiku Kitam. var. kinokuniense (Shimot. et Kitam.) Kitam. 日本筑波 Tsukuba, Japan/ Chen06121 日本 Japan
亚菊组 Sect. Ajania
31 丝裂亚菊 A. nematoloba (Hand.-Mazz.) Ling ex Shih 甘肃白银 Baiyin, Gansu/ Zhao.GS06-05 中国 China
32 新疆亚菊 A. fastigiata (Winkler) Poljakov 新疆木垒 Mulei, Xinjiang/ Zhao.XJ06-07 中亚地区、中国 Centre of Asia, China
33 灌木亚菊 A. fruticulosa (Ledeb.) Poljakov 宁夏贺兰山 Helanshan, Ningxia/ Zhao.HL06-01 中亚地区、中国、蒙古、西伯利亚
东部 Centre of Asia, China, Mongolia,
East of Siberia
34 川甘亚菊 A. potaninii (H. Kraschen.) Poljakov 四川金川 Jinchuan, Sichuan/ Zhao.SC06-06 中国 China
35 矶菊 A. pacifica (Nakai) Bremer et Humphries 江苏南京 Nanjing, Jiangsu/ Zhao0401 日本 Japan
短舌菊属 Brachanthemum DC.
36 星毛短舌菊 B. pulvinatum (Hand.-Mazz.) Shih 甘肃靖远 Jingyuan, Gansu/ Zhao.GS06-03 中国 China
芙蓉菊属 Crossostephium Less.
37 芙蓉菊 C. chinense (L.) Makino 福建厦门 Xiamen, Fujian/ Zhao.XM05-01 中国、日本、菲律宾
China, Japan, Philippines
紊蒿属 Elachanthemum Ling et Y. R. Ling
38 紊蒿 E. intricatum (Franchet) Ling et Y. R. Ling 宁夏贺兰山 Helanshan, Ningxia/ Zhao.HL06-06 中国、蒙古 China, Mongolia
栉节蒿属 Neopallasia Poljakov
39 栉节蒿 N. pectinata (Pallas) Poljakov 新疆和硕 Heshuo, Xinjiang/ Zhao.XJ06-05 中亚地区、中国、西伯利亚、蒙古
China, Centre of Asia, Siberia, Mongolia
蒿属 Artemisia L.
40 牡蒿 A. japonica Thunb. 江苏南京 Nanjing, Jiangsu/ Chen0624 东亚、南亚、东南亚 East of Asia,
south of Asia and southeast Asia
41 绢毛蒿 A. sericea G. Weber 江苏南京 Nanjing, Jiangsu/ Chen0625 中亚、中国、蒙古、西伯利亚
Centre of Asia, China, Mongolia, Siberia
菊蒿亚族 Tanacetinae Bremer & Humphries
太行菊属 Opisthopappus Shih
42 太行菊 O. taihangensis (Ling) Shih 河南云台山 Yuntaishan, He’nan/ Zhao.HN06-03 中国 China
匹菊属 Pyrethrum Zinn.
43 除虫菊 P. cinerariifolium Trevir. 云南昆明 Kunming, Yunnan/ Chen9905 栽培 Cultivated
44 川西小黄菊 P. tatsienense (Bureau et Franchet) Ling ex Shih 四川康定 Kangding, Sichuan/ Zhao.SC06-02 中国 China
45 短舌匹菊 P. parthenium (L.) Schultz-Bip. 日本千叶 Chiba, Japan/ Chen0621 栽培 Cultivated
菊蒿属 Tanacetum L.
46 菊蒿 T. vulgare L. 北京 Beijing/ Chen0618 欧洲、亚洲 Europe, Asia
女蒿属 Hippolytia Poljakov
47 贺兰山女蒿 H. alashanensis (Ling) Shih 宁夏贺兰山 Helanshan, Ningxia/ Zhao.HL06-02 中国 China
48 川滇女蒿 H. dolichophylla (Kitam.) Bremer et Humphries 云南丽江 Lijiang, Yunnan/ Xie.LJ06-02 亚洲中部 Middle of Asia
滨菊亚族 Leucantheminae Bremer & Humphries
Nipponanthemum Kitam.
49 N. nipponicum (Franchet ex Maxim.) Kitam. 日本千叶 Chiba, Japan/ Chen0617 日本 Japan
外类群 Outgroup
茼蒿亚族 Subtribe Chrysantheminae Bremer & Humphries
茼蒿属 Chrysanthemum L.
50 茼蒿 C. coronarium L. 江苏南京 Nanjing, Jiangsu/ Zhao0501 栽培 Cultivated
6 期 赵宏波等：基于 AFLP 的菊属、亚菊属及其近缘属的属间关系 1307


泳道的标号同表 1 The code of the lanes is the same as Table 1

图 1 引物组合 E-ACG/ M-CAA 的扩增图谱
Fig. 1 AFLP profiles generated using primer pairs E-ACG/ M-CAA

表 2 9 对 AFLP 引物获得的多态性条带数
Table 2 Polymorphism bands generated by 9 pairs of AFLP primer
引物组合
Primer pairs
所有类群
All taxa
菊属+亚菊属
Dendranthema and Ajania
菊属
Dendranthema
亚菊属
Ajania
GACTGCGTACCAATTCAAC/ GATGAGTCCTGAGTAACA A 182 179 179 126
GACTGCGTACCAATTCACA/ GATGAGTCCTGAGTAACAC 196 189 174 165
GACTGCGTACCAATTCACA/ GATGAGTCCTGAGTAACTT 194 193 190 155
GACTGCGTACCAATTCACT/ GATGAGTCCTGAGTAACTC 188 172 144 154
GACTGCGTACCAATTCACT/ GATGAGTCCTGAGTAACTT 182 178 169 143
GACTGCGTACCAATTCACC/ GATGAGTCCTGAGTAACAA 195 186 186 172
GACTGCGTACCAATTCACC/ GATGAGTCCTGAGTAACAG 195 180 144 167
GACTGCGTACCAATTCACG/ GATGAGTCCTGAGTAACAA 176 173 159 142
GACTGCGTACCAATTCACG/ GATGAGTCCTGAGTAACTT 187 163 144 151
合计 Total 1695 1613 1489 1375

Kitam.]，相似性系数为 0.7730，最低的为紊蒿[E.
intricatum（Franchet）Ling et Y. R. Ling]和云台山野菊，
相似性系数为 0.2012。在研究的 50 个类群中，相似性
系数差异明显，说明各类群间分化较大，遗传多样性
高。在菊属与亚菊属类群内部遗传相似系数最高值同
所有分类单元的分析结果，最低的为异叶亚菊[A.
variifolia （ Chang ） Tzvelev] 和毛华菊 [D. vestitum
（Hemsley）Ling]，相似性系数为 0.2946；菊属内遗
传相似系数最高值也同所有分类单元分析的结果，最
低的为菊花脑[D. nankingense（Hand.-Mazz.）Y.R. Ling]
和小红菊[D. chanetii（A. Léveillé）Shih]，相似性系数
为 0.4007；亚菊属内部遗传相似性系数最高的为矶菊
[A. pacifica（Nakai）Bremer et Humphries]和盐菊变种
（A. shiwogiku var. kinokuniense），相似性系数为
1308 中 国 农 业 科 学 43 卷
0.7039，最低的为异叶亚菊和多花亚菊[A. myriantha
（Franchet）Ling ex Shih]，相似性系数仅为 0.3158。
分子数据表明菊属和亚菊属关系密切，属间界限模
糊，种间 ITS 区和 IGS 间区序列同源性较高[5]，但
根据 AFLP 的结果分析发现，在菊属、亚菊属类群
内、菊属内部和亚菊属内部，遗传相似性系数差异均
较大。
2.3 聚类分析
根据各分类群间的相似性系数，采用不加权成对
算术平均法（UPGMA）进行聚类分析（图 2）和利用
PAUP* 4.0 b10 软件构件系统树（图 3）。结果表明，
不同方法获得的系统树拓扑结构基本一致。



A 和 B 表示菊属－亚菊属大分支中的两个亚分支，a 和 b 表示 A 亚分支内的两个小分支（下同）
A and B represent two sub-clades of the Dendranthema-Ajania group; a and b represent two small subclades within sub-clade A (The same as below)

图 2 东亚蒿亚族的 UPGMA 聚类图
Fig. 2 The UPGMA phylogenetic tree of Subtribe Artemisiinae endemic to eastern Asia
6 期 赵宏波等：基于 AFLP 的菊属、亚菊属及其近缘属的属间关系 1309


分支线上的数值为 1 000 次简约法抽样的自展值。亚族图示：正方形表示蒿亚族，其中空正方形表示菊属群，黑色正方形表示蒿属群；圆形表示菊蒿
亚族；三角形表示滨菊亚族；菱形表示茼蒿亚族
Numbers above the lines are bootstrap values derived from 1 000 replicates using parsimony criteria. Subtribal affinity of taxa is indicated by the following bar
patterns: Artemisiinae (square box), the Dendranthema group (empty square box) and the Artemisia group (black box); Tanacetiinae (round box);
Leucanthemidae (triangle box); Chrysanthemidae (diamond box)

图 3 基于 AFLP 生成的 5 786 个聚类树的 50%严格一致树
Fig. 3 The 50% strict consensus tree of equally most-parsimonious 5 786 trees based on AFLP polymorphism

无论是 UPGMA 聚类图还是 PAUP* 4.0 b10 软件
构建的系统树，菊属、亚菊属和太行菊属、Arctanthemum
组成最大的一个分支，其中包含两个亚分支（A 和 B），
A 亚分支又各自包含两个相对独立的菊属、亚菊属类
1310 中 国 农 业 科 学 43 卷
群。在 UPGMA 聚类图中，在第一小分支 a 中，菊属
菊花脑、宜色菊（D. dichrum Shih）等 6 个种和亚菊
属铺散亚菊[A. khartensis（Dunn）Shih]组成一小分支，
多花亚菊位于这一小分支的基部，共同组成一类群；
在第二小分支 b 中，菊属小红菊、紫花野菊等 13 个种
和亚菊属的矶菊、盐菊变种以及 A. arcticum（L.）
Tzvelev subsp. maekawanum（Kitam.）组成一个分支，
其中两个栽培菊花品种聚为一支，与野菊、油菊[D.
okiense（Kitam.）Kitam.]、毛华菊和大岛野路菊[D.
crassum（Kitam.）Kitam.]先组成一个类群。亚菊属川
甘亚菊[A. potaninii（H. Kraschen.）Poljakov]、细裂亚
菊（A. przewalskii Poljakov）和细叶亚菊[A. tenuifolia
（Jacq.）Tzvelev]等 8 个种和太行菊[O. taihangensis
（Ling）Shih]是这一大分支即菊属-亚菊属复合体的基
部类群。短舌菊属、女蒿属、蒿属、匹菊属、芙蓉菊
属（Crossostephium Less.）、栉节蒿属（Neopallasia
Poljakov）、紊蒿属和 Nipponanthemum 等类群位于整
个聚类图的基部。
在 50%严格一致树中，亚菊属川甘亚菊、细裂亚
菊和细叶亚菊等 8 个种和太行菊组成一亚分支位于菊
属-亚菊属大分支的基部，与其它菊属、亚菊属类群组
成的亚分支互为姐妹群关系，川西小黄菊、菊蒿等被
排除于这一大分支之外；与菊属和亚菊属亲缘关系很
近的短舌菊属、菊蒿属、匹菊属、紊蒿属、女蒿属和
Nipponanthemum 等的相应类群以及亚菊属的柳叶亚
菊和异叶亚菊同样也被明确排除在菊属、亚菊属大分
支之外，而位于整个系统树的基部。
3 讨论
3.1 菊属群的组成
菊 属 、 亚菊 属 大 部分 类 群 、太 行 菊 属和
Arctanthemum 组成了系统树最大的一个分支（自展值
98%），即菊属群，不仅包含了蒿亚族中的菊属、亚
菊属和 Arctanthemum，同时还包含了菊蒿亚族的太行
菊属；因此，太行菊属的系统位置值得重新考虑，其
系统地位可能更接近于蒿亚族。短舌菊属被认为与菊
属亲缘关系很近；但根据 AFLP 系统树的结果，短舌
菊属被明确排除于菊属群分支之外；根据形态学特征，
作者认为短舌菊属可能是菊属群的较原始类型。
亚菊属的柳叶亚菊和异叶亚菊被排除在菊属-亚
菊属分支之外。Muldashev[15-16]根据褐色的柱头和直立
的花冠裂片，将柳叶亚菊和异叶亚菊等从亚菊属中分
出 单 列 成 属 Phaeostigma ； 中 国 植 物 志 则 把
Phaeostigma 归在亚菊属中[11]。构建的 AFLP 系统树支
持 Phaeostigma 作为独立的属，这也得到了 ITS 和 IGS
分子系统进化结果的支持[17]。根据 Muldashev[15]、
Bremer 和 Humphries[1]等的观点，Phaeostigma 包括柳
叶 亚 菊 、 异 叶 亚 菊 和 栎 叶 亚 菊 A. quercifolia
（W.W.Shih）Ling et Shih 等，共包括 3 个种。柳叶亚
菊属于褐苞组的栎叶系，同系还有宽叶亚菊 A.latifolia
Shih，异叶亚菊属于异叶系，同系还有分枝亚菊
A.ramosa（Chang）Shih[11]；作者认为这两个种也应归
入 Phaeostigma，使之成为一个拥有 5 个种的东亚特有
属，根据属中文名出现顺序，按照吴征镒等[12]的译法，
其中文名应为栎叶菊属。
3.2 菊属、亚菊属等的属间关系
根据 ITS 区和 trnL/trnF 间区序列解析的结果，菊
属和亚菊属（包括 Arctanthemum）共同组成的分支位
于分子系统树的最末梢，但内部相互交织，属间界限
模糊，说明属间亲缘关系很近[17]。AFLP 结果将菊属
和 Arctanthemum 先聚为一亚分支，各自形成两个种
群，各自种群包含亚菊属的个别类群；亚菊属的大部
分类群和太行菊属形成另一亚分支，与菊属亚分支互
为姐妹群形成菊属-亚菊属大分支。这说明菊属和亚菊
属可能是由共同祖先类群平行演化而来，其中多花亚
菊、铺散亚菊等与菊属起源关系较近，而原产日本的
矶菊、盐菊等是亚菊属中较进化类型，是亚菊属从亚
洲中部逐渐东扩进化形成的类群。菊属群祖先类群在
东扩过程中一方面演化形成新类群，而新类群在进化
过程中又发生染色体加倍、种间杂交等；另一方面，
在某些特殊地域逐渐进化形成新种；这可能正是造成
从形态学[40]、细胞学[41-43]和遗传学[44-46]等角度揭示亚
菊属和菊属部分种间亲缘关系比其属内种间亲缘关系
还近的原因。太行菊属与亚菊属大部分类群组成一个
亚分支位于菊属-亚菊属分支的基部，这说明太行菊属
可能是菊属群祖先类群向东扩散演化形成的一个较原
始类群。
从地理分布上来看，亚菊属主要分布于中亚、中
国西部和中部地区、蒙古、西伯利亚西部、南部等地，
少数种例如亚菊[A. pallasiana（Fischer ex Besser）
Poljakov]、矶菊和盐菊等分布延伸至中国东北和日本
等地[1,11]；而菊属主要分布于中国中部和东部、西伯
利亚东部、俄罗斯远东地区、朝鲜半岛和日本等
地[1,11]；两属在中国中部、东北部和日本等地具有一
定的交叉分布，这种地理分布格局正好与蒿亚族从西
向东逐渐扩散的进化趋势吻合，进一步验证了各属间
6 期 赵宏波等：基于 AFLP 的菊属、亚菊属及其近缘属的属间关系 1311
的相互进化关系。
3.3 女蒿属、菊蒿属、匹菊属和 Nipponanthemum 与
蒿亚族的关系
Tzvelev 认为女蒿属与菊属和亚菊属亲缘关系很
近，菊属演化形成女蒿属，而女蒿属进一步演化形成
了亚菊属[1]。但笔者的研究结果表明，女蒿属在该 3
个属中最为原始，三者的演化顺序应可能是女蒿属或
其祖先类群平行演化形成菊属和亚菊属，而栎叶菊属
和短舌菊属等可能是女蒿属向菊属亚菊属复合体演化
的中间类型。根据 AFLP 和分子证据 [17]结果，
Nipponanthemum 也可能参与了亚菊属的形成或与亚
菊属具有共同的最近祖先，但形态上的明显差异又很
难支持该结论[1, 40]；所以，Nipponanthemum 的地位还
有待进一步确立。
菊蒿属中的一些种被认为是蒿亚族的姐妹群，特
别是某些种与菊属关系较近，在分类和进化上的极大
不一致，造成本属的分类地位甚至亚族的组成需要经
受巨大的考验和修订[1]。从系统树中可以看出，菊蒿
属和匹菊属的一些东亚类群如川西小黄菊等也有可能
参予了菊属群的形成或具有共同的较近祖先。
Tzvelev[1]根据边缘舌状雌花的颜色将菊蒿属与匹菊属
分为两个属，但 Heywood、Grierson、Bremer 和
Humphries 认为舌状花的颜色并不是一个十分稳定的
性状用以界定两个属，因此将两属合并为一个属[1]。
从构建的系统树可以看出，菊蒿属与匹菊属相互交织，
聚为一支，但东亚分布的川西小黄菊位于蒿亚族内部，
说明属内组成的复杂，菊蒿属与匹菊属不应单立，然
其内部组成有待进一步修订。
4 结论
根据相似性系数，无论是整个蒿亚族及其近缘类
群内部，还是菊属、亚菊属内部，均表现出较高的遗
传多样性，种间分化明显。无论是 UPGMA 聚类分析
结果还是构建的最大简约树，AFLP 结果均将菊属和
Arctanthemum 先聚为一亚分支，各自形成两个种群，
各自种群包含亚菊属的个别类群；亚菊属的大部分类
群和太行菊属形成另一亚分支，与菊属亚分支互为姐
妹群形成菊属-亚菊属大分支即菊属群复合体。这说明
菊属和亚菊属可能是由共同祖先类群平行演化而来，
其中多花亚菊、铺散亚菊等与菊属亲缘关系较近，而
原产日本的矶菊、盐菊等是亚菊属中较进化类型；太
行菊属的系统位置可能更接近于蒿亚族；短舌菊属则
被排除于菊属群之外。柳叶亚菊、异叶亚菊等应从亚
菊属中分离出来，支持单列成栎叶菊属，使之成为包
含 5 个种的东亚特有属。女蒿属、Nipponanthemum 和
匹菊属的川西小黄菊夹于菊属群和蒿属群之间，与蒿
亚族亲缘关系很近。因此，本文得出的系统进化关系
和以往的杂交亲和性结果较为一致，与菊属处于同一
分支的太行菊属、亚菊属等类群与菊属具有较好的杂
交亲和性，可直接应用于菊花的杂交育种；而女蒿属、
栎叶菊属、Nipponanthemum 和匹菊属等类群与菊属应
具有一定的杂交亲和性，经过一定的杂交亲和性研究
后，可以有选择的应用于菊花遗传育种中，这样大大
拓展了育种材料的范围。

致谢：感谢四川省甘孜藏族自治州林业局陈万才、金川
县林业局张通伟、阿坝藏族羌族自治州李为红和杨立东、陕
西师范大学杜喜春博士、陕西省眉县白根录、宁夏大学研究
生王晶、贺兰山自然保护区胡天华、甘肃省兰州市阎军才、
甘肃省榆中县高建荣以及南京农业大学杨再强博士、任广
兵、王艳芳等同学在材料收集过程中给予的帮助和支持。

References
[1] Bremer K, Humphries C. The generic monograph of the
Asteraceae-Anthemideae. Bulletin of the Natural History Museum.
Botany Series, London, 1993, 23: 71-177.
[2] Kornkven A, Watson L, Estes J. Phylogenetic analysis of Artemisia
section Tridentatae (Asteraceae) based on sequences from the internal
transcribed spacers (ITS) of nuclear ribosomal DNA. American
Journal of Botany, 1998, 85: 1787-1795.
[3] Kornkven A, Watson L, Estes J. A molecular phylogeny of Artemisia
sect. Tridentatae (Asteraceae) based on chloroplast DNA restriction
site variation. Systematic Botany, 1999, 24: 69-84.
[4] Torrell M, Garcia-Jacas N, Susanna A, Vallès J. Infrageneric
phylogeny of the genus Artemisia L. (Asteraceae, Anthemideae) based
on nucleotide sequences of nuclear ribosomal DNA internal
transcribed spacers (ITS). Taxon, 1999, 48: 721-736.
[5] Watson L, Bates P, Evans T, Unwin M, Estes J. Molecular phylogeny
of subtribe Artemisiinae (Asteraceae), including Artemisia and its
allied and segregate genera. BMC Evolutionary Biology, 2002, 2:
17-28.
[6] D’Andrea S, Caramiello R, Ghignone S, Siniscalco C. Systematic
studies on some species of the genus Artemisia: biomolecular analysis.
Plant Biosystems, 2003, 137: 121-130.
[7] Vallès J, Torrell M, Garnatje T, Garcia-Jacas N, Vilatersana R,
Susanna A. The genus Artemisia and its allies: phylogeny of the
1312 中 国 农 业 科 学 43 卷
subtribe Artemisiinae (Asteraceae, Anthemideae) based on nucleotide
sequences of nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacers
(ITS). Plant Biology, 2003, 5: 274-284.
[8] Sanz M, Vilatersana R, Hidalgo O, Garcia-Jacas N, Susanna A,
Schneeweiss G M, Vallès J. Molecular phylogeny and evolution of
floral characters of Artemisia and allies (Anthemideae, Asteraceae):
evidence from nrDNA ETS and ITS sequences. Taxon, 2008, 57: 1-13.
[9] Tkach N V, Hoffmann M H, Röser M, Korobkov A A, von Hagen K
B. Parallel evolutionary patterns in multiple lineages of arctic
Artemisia L. (Asteraceae). Evolution, 2008, 62: 184-198.
[10] Tkach N V, Hoffmann M H, Röser M, Korobkov A A, von Hagen K
B. Temporal patterns of evolution in the Arctic explored in Artemisia
L. (Asteraceae) lineages of different age. Plant Ecology & Diversity,
2008, 1: 161-169.
[11] 石 铸, 傅国勋. 中国植物志第 76 卷第一分册. 北京: 科学出版
社, 1983.
Shih C, Fu G X. Flora Republicae Popularis Sinicae, 76(1). Beijing:
Science Press, 1983. (in Chinese)
[12] 吴征镒, 路安民, 汤彦承, 陈之端, 李德铢. 中国被子植物科属综
论. 北京: 科学出版社, 2003
Wu Z Y, Lu A M, Tang Y C, Chen Z D, Li D Z. The Families and
Genera of Angiosperms in China—A Comprehensive Analysis. Beijing:
Science Press, 2003. (in Chinese)
[13] Kitamura S. Dendranthema et Nipponanthemum. Acta Phytotaxonomica
et Geobotanica, 1978, 29: 165-170.
[14] Ohashi H, Yonekura K. New combinations in Chrysanthemum
(Compositae-Anthemideae) of Asia with a list of Japanese species.
Journal of Japanese Botany, 2004, 79: 186-195.
[15] Мулдашев A A. Новый вид Phaeostigma (Asteraceae) из Востокой
Азии. Ботанический журнал, 1981, 66(4): 584-588. (in Russian)
[16] Мулдашев A A. Критическoe oбозрeниe o Ajania (Asteraceae-
Anthemideae). Ботанический журнал, 1983, 68(2): 207-214. (in
Russian)
[17] Zhao H B, Chen F D, Chen S M, Wu G S, Guo W M. Molecular
phylogeny of Chrysanthemum, Ajania and its allies (Anthemideae,
Asteraceae) as inferred from nuclear ribosomal ITS and chloroplast
trnL-F IGS sequences. Plant Systematics and Evolution, 2009, online
(DOI: 10. 1007/s00606-009-0242-0)
[18] Blattner F R, Weising K, Banfer G, Maschwitz U, Fiala B. Molecular
analysis of phylogenetic relationships among myrmecophytic
Macaranga species (Euphorbiaceae). Molecular Phylogenetics and
Evolution, 2001, 19: 331-344.
[19] Chenuil A, McKey D B. Molecular phylogenetic study of a
myrmecophyte symbiosis: did Leonardoxalant associations diversify
via cospeciation? Molecular Phylogenetics and Evolution, 1996, 6:
270-286.
[20] Zhang L B, Comes H P, Kadereit J W. Phylogeny and quaternary
history of the European montane/ alpine endemic Soldanella
(Primulaceae) based on ITS and AFLP variation. American Journal of
Botany, 2001, 88: 2331-2345.
[21] Despres L, Gielly L, Redoutet B, Taberlet P. Using AFLP to resolve
phylogenetic relationships in a morphologically diversified plant
species complex when nuclear and chloroplast sequences fail to reveal
variability. Molecular Phylogenetics and Evolution, 2003, 27:
185-196.
[22] Hodkinson T R, Renvoize S A, Ni-Chonghaile G, Stapleton C M A,
Chase M W. A comparison of ITS nuclear rDNA sequence data and
AFLP markers for phylogenetic studies in Phyllostachys
(Bambusoideae, Poaceae). Journal of Plant Research, 2000, 113:
259-269.
[23] Koopman W J M, Zevenbergen M J, van den Berg R G. Species
relationships in Lactuca S. L. (Lactuceae, Asteraceae) inferred from
AFLP fingerprints. American Journal of Botany, 2001, 88:
1881-1887.
[24] Vos P, Hogers R, Bleeker M, Reijans M, van de Lee T, Hornes M,
Frijters A, Pot J, Peleman J, Kuiper M, Zabeau M. AFLP: a new
technique for DNA fingerprinting. Nucleic Acids Research, 1995, 23:
4407-4414.
[25] Kardolus J P, van Eck Herman J, van den Berg R G. The potential of
AFLP in biosystematics: A first application in Solanum taxonomy
(Solanaaceae). Plant Systematics and Evolution, 1998, 210: 87-103.
[26] Han J, Zhang W, Cao H, Chen S, Wang Y. Genetic diversity and
biogeography of the traditional Chinese medicine, Gardenia
jasminoides, based on AFLP markers. Biochemical Systematics and
Ecology, 2007, 35: 138-145.
[27] Zhou M, Zhao K, Chen L. Genetic diversity of Calycanthaceae
accessions estimated using AFLP markers. Scientia Horticulturae,
2007, 112: 331-338.
[28] Loh J P, Kiew R, Hay A, Kee A, Gan L H, Gan Y Y. Intergeneric and
interspecific relationships in Araceae tribe Caladieae and development
of molecular markers using amplified fragment length polymorphism
(AFLP). Annals of Botany, 2000, 85: 371-378.
[29] 周春玲, 戴思兰. 菊属部分植物的 AFLP 分析. 北京林业大学学报,
2002, 24: 71-75.
Zhou C L, Dai S L. AFLP analysis of some Dendranthema spp.
Journal of Beijing Forestry University, 2002, 24: 71-75. (in Chinese)
6 期 赵宏波等：基于 AFLP 的菊属、亚菊属及其近缘属的属间关系 1313
[30] Guo Y P, Saukel J, Mittermayr R, Ehrendorfer F. AFLP analyses
demonstrate genetic divergence, hybridization, and multiple
polyploidization in the evolution of Achillea (Asteraceae-
Anthemideae). New Phytologist, 2005, 166: 273-290.
[31] Guo Y P, Vogl C, van Loo M, Ehrendorfer F. Hybrid origin and
differentiation of two tetraploid Achillea species in East Asia:
molecular, morphological and ecogeographical evidence. Molecular
Ecology, 2006, 15: 133-144.
[32] Lee J H, Han T H. Identification of parental species of the
Alstroemeria cv. ‘Jubilee’ using AFLP marker technique. Scientia
Horticulturae, 2006, 111: 63-67.
[33] Cnops G, den Boer B, Gerats A, Montagu M, van Lijsebettens M, van
den Boer B, van Montagu M, van Li. Chromosome landing at the
Arabidopsis TORNADO1 locus using an AFLP-based strategy.
Molecular Genetics and Genomics, 1996, 253: 32-41.
[34] Hill M, Witsenboer H, Zabeau M, Vos P, Kesseli R, Michelmore R.
PCR-based fingerprinting using AFLPs as a tool for studying genetic
relationships in Lactuca spp. Theoretical and Applied Genetics, 1996,
93: 1202-1210.
[35] Lassner M W, Peterson P, Yoder J I. Simultaneous amplification of
multiple DNA fragments by polymerase chain reaction in the analysis
of transgenic plants and their progeny. Plant Molecular Biology
Reporter, 1989, 7: 116-128.
[36] Swofford D L. PAUP*: Phylogenetic analysis using parsimony (* and
other methods), version 4. 0b10. Sunderland, Massachusetts, Sinauer
Associates, 2003.
[37] Maddison D R. The discovery and importance of multiple islands of
most-parsimonious trees. Systematic Zoology, 1991, 40: 315-328.
[38] Page R D M. TREEVIEW: An application to display phylogenetic
trees on personal computers. Computer Applications in the
Biosciences, 1996, 12: 357-358.
[39] Tamura K, Dudley J, Nei M, Kumar S. MEGA4: Molecular
Evolutionary Genetics Analysis (MEGA) software version 4. 0.
Molecular Biology and Evolution, 2007, 24: 1596-1599.
[40] Iwatsuki K, Takasi Y, David E B, Hideaki O. Angiospermae
Dicotyledoneae Sympetalae// Flora of Japan. Ⅲ. Tokyo: Kodansha
Ltd, 1995: 79-97.
[41] Nakata M, Tanaka R, Taniguchi K, Shimotomai N. Species of wild
Chrysanthemum in Japan: cytological and cytogenetical view on its
entity. Acta Phytotaxica et Geobotanica, 1987, 38: 241-259.
[42] Kondo K, Tanaka R, Ge S, Hong D, Nakata M. Cytogenetic studies on
wild Chrysanthemum sensu tato in China. Ⅳ Karyomorphological
characteristics of three species of Ajania. Journal of Japanese Botany,
1992, 67: 324-329.
[43] Kondo K, Tanaka R, Hong D, Hizume M, Yang Q, Nakata M.
Cytogenetic studies on wild Chrysanthemum sensu tato in China. V.
chromosome study of three species of Ajania, Cancrinia
maximowiczii and Dendranthema lavandulifolium in the
Chrysantheminae, the Anthemideae, the Compositae in Chinese
highlands. Journal of Japanese Botany, 1995, 70: 85-94.
[44] Abd El-Twab M H, Kondo K, Hong D Y. Isolation of a particular
chromosome of Ajania remotipinna in a chromosome complement of
an artificial F1 hybrid of Dendranthema lavandulifolia × Ajania
remotipinna by use of genomic in situ hybridization. Chromosome
Science, 1999, 3: 21-28.
[45] Kondo K, Abd El-Twab M H. Analysis of inter- and intrs-generic
relationships sensu stricto among the members of Chrysanthemum
sensu lato by using fluorescent in situ hybridization. Chromosome
Science, 2002, 6: 87-100.
[46] 赵宏波, 陈发棣, 房伟民, 郭维明, 谢 伟. 利用亚菊属矶菊获得
栽培菊花新种质. 中国农业科学, 2008, 41(7): 2077-2084.
Zhao H B, Chen F D, Fang W M, Guo W M, Xie W. Creating novel
germplasms of chrysanthemum by employing the Ajania pacifica.
Scientia Agricultura Sinica, 2008, 41(7): 2077-2084. (in Chinese)

（责任编辑 曲来娥）