全 文 ：·资源·
川产忍冬属三种植物的核型分析
闫秋洁1，2，邹利娟1，田婷婷1，王 丽1，沈晓露1，罗明华1*
(1. 绵阳师范学院生命科学与技术学院，四川 绵阳 621000;2. 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境
教育部重点实验室，四川 成都 610064)
摘要 目的:为川产忍冬品种的开发应用提供遗传参考。方法:应用改良的染色体制片技术，对忍冬、红白忍
冬和细毡毛忍冬的茎尖细胞进行染色体制片和核型分析，并计算相关染色体参数。结果:忍冬、红白忍冬和细毡毛
忍冬的染色体数目均为 2n = 2X = 18，染色体总长分别为 30. 747、33. 231 和 36. 948 μm;核型公式分别为 2n = 2X =
18 = 2m + 7sm，2n = 2X = 18 = 8m + 8sm + 2st 和 2n = 2X = 18 = 8sm + 10m;核不对称系数为 64. 013%、64. 380%和
61. 949%;核型依次为 2B、2B和 2A型。结论:3 种忍冬遗传进化程度较高，可作为广泛栽培的种质资源。
关键词 忍冬;红白忍冬;细毡毛忍冬;染色体;核型分析
中图分类号:Ｒ282. 6 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2014)03-0384-04
收稿日期:2013-06-26
基金项目:四川省科技厅应用基础计划项目(2013JY0078)
作者简介:闫秋洁(1980-)，女，讲师，研究方向:药用植物引种栽培;Tel:13550821481，E-mail:veronica008@ 163. com。
* 通讯作者:罗明华，Tel:15883781434，E-mail:mhemei@ 126. com。
Karyotype Analysis of Three Lonicera Species Growth in Sichuan
YAN Qiu-jie1，2，ZOU Li-juan1，TIAN Ting-ting1，WANG Li1，SHEN Xiao-lu1，LUO Ming-hua1
(1. College of Life Sciences and Technology，Mianyang Normal University，Mianyang 621000，China;2. Key Laboratory of Bio-resources
and Eco-enviroment of Ministry of Education，College of Sciences，Sichuan University，Chengdu 610064，China)
Abstract Objective:To provide the genetic reference for development and application of Lonicera species growth in Sichuan. Methods:
Shoot apices cells from Lonicera japonica，Lonicera japonica var. chinensis and Lonicera similis(cultivars)were used to make the chromo-
somal preparation. Their karyotypes were analyzed and the relevant parameters of chromosomes were measured by improved chromosome
preparation technique. Ｒesults:The chromosome numbers of three Lonicera species were 2n = 2X = 18;their chromosome length was
30. 747，33. 231 and 36. 948 μm;Their karyotype formula was 2n = 2X = 18 = 2m + 7sm，2n = 2X = 18 = 8m + 8sm + 2st and 2n = 2X =
18 = 8sm + 10m;Their As. k was 64. 013%，64. 380% and 61. 949%;And their karyotypes belonged to 2B，2B and 2A type，respective-
ly. Conclusion:These three Lonicera species can be of the germplasm resources for widely cultivating since they have high degree of ge-
netic evolution.
Key words Lonicera japonica Thunb. ;Lonicera japonica Thunb. var. chinensis(Wats. )Bak.;Lonicera similis Hemsl.;Chromo-
some;Karyotype analysis
金银花系忍冬科植物忍冬 Lonicera japonica
Thunb. 的干燥花蕾或带初开的花，是我国传统的中
药和国家重点管理的 38 种名贵中药材之一，具有清
热解毒、疏风散热的功效〔1〕，被约 1 /3 的中医方剂所
使用。四川忍冬属植物资源非常丰富，药用的有 12
亚组 25 种 1 亚种 6 变种〔2〕，但忍冬盲目引种现象普
遍，导致种质资源混乱，药材产量与质量参差不
齐〔3〕。因此，充分利用本土种质资源，并对现有的
优势品种进行研究，来挖掘优质的种质资源，培育出
优良的忍冬品种是亟待解决的问题。为给川产忍冬
的开发应用提供遗传参考，本实验对 3 种忍冬进行
核型分析，以期为鉴别新品种提供重要依据，也为忍
冬种质资源的保护和合理利用提供理论参考。
1 材料和方法
1. 1 材料 实验选用的 3 种忍冬材料均由笔者罗
明华教授鉴定，红白忍冬取材于绵阳市北川羌缘红
忍冬种植基地，经鉴定为忍冬科植物红白忍冬 Loni-
cera japonica Thunb. var. chinensis(Wats. )Bak. 。该
品种在当地称为红花金银花，是从红白忍冬的变异
株中优选并培育多年后形成的稳定品种，其紫红色
的幼嫩花蕾已被选为茶用金银花的优良原料。忍冬
是绵阳当地种植多年的改良的野生品种，经鉴定为
忍冬科植物忍冬 Lonicera japonica Thunb. 。细毡毛
忍冬购自绵阳市万宝市场(来源于成都兴盛花木有
限责任公司的金牛区天回镇基地)，经鉴定为忍冬
科植物细毡毛忍冬 Lonicera similis Hemsl. ，是四川省
金银花的三大主流品种之一。后两种忍冬已作为药
用忍冬的主选品种。
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DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2014.03.014
1. 2 方法 在常规核型分析方法的基础上进行了
解离和压片等步骤的优化，得到了稳定且表现良好
的制片方案。然后选用忍冬的幼嫩茎尖部位，经取
样、固定、解离、染色后制片，再选取处于细胞分裂中
期的染色体数目完整、分散良好、各条染色体基本处
于同一平面的视野，在 SK200 Digital 光学显微镜
(麦克奥迪实业集团有限公司)下观察，用显微测微
尺进行测量。
在每种被测的 50 个细胞中，选取 5 个含已确定
条数的细胞来进行核型参数的测量与计算〔4〕。染
色体数目的确定及核型分析方法根据李懋学等〔5〕
的标准，染色体着丝点位置的划分依据 Levan 等〔6〕
的方法，核型对称性按 Stebbins〔7〕的标准划分，染色
体相对长度和染色体相对长度指数的计算用 Kuo
等〔8〕的方法，根据 Arano〔9〕提出的核型不对称系数
(As. k)来确定核型不对称程度，并用 Excel 软件准
确地绘制染色体核型模式图〔10〕。
图 1 3 种忍冬茎尖细胞分裂中期部分图像
A ～ D. 忍冬 E ～ H. 红白忍冬 I ～ L. 细毡毛忍冬
表 1 3 种忍冬的染色体数目及置信区间
种类 细胞个数
染色体
数目 /条
百分比
/%
95%置信
区间 /%
忍冬 1 20 2 0 ～ 11
45 18 90 78 ～ 97
1 17 2 0 ～ 11
2 16 4 0 ～ 14
1 14 2 0 ～ 11
红白忍冬 44 18 88 76 ～ 95
1 19 2 0 ～ 11
3 16 6 1 ～ 17
1 14 2 0 ～ 11
1 12 2 0 ～ 11
细毡毛忍冬 43 18 86 76 ～ 94
4 16 8 2 ～ 19
2 20 4 0 ～ 14
1 14 2 0 ～ 11
2 结果与分析
2. 1 染色体数目 染色体分散情况较好且染色清
晰(图 1)，在选取的细胞中(表 1) ，忍冬有 90%的细
胞染色体数目为 18 条;红白忍冬有 88%的细胞含
18 条染色体;细毡毛忍冬有 86%的细胞含 18 条染
色体。3 种忍冬均有大于 85%的被测细胞含 18 条
染色体。结合核型分析标准化建议〔5，8〕，确定 3 种
忍冬的染色体数目均为 2n = 2X =18。
2. 2 核型分析 3 种忍冬相比较(表 2)，忍冬染色
体总长为 30. 747 μm，低于红白忍冬的 33. 231 μm
和细毡毛忍冬的 36. 948 μm。3 种忍冬各条染色体
长度相当，在 5. 354 ～ 2. 317 μm 之间。其中红白忍
冬的 1 号染色体最长，为 5. 354 μm;忍冬的 9 号染
色体最短，为 2. 317 μm。细毡毛忍冬的长臂平均长
度最长，为 2. 543 μm;忍冬的短臂平均长度最短，为
1. 228 μm。忍冬和红白忍冬的 1 号染色体的相对
长度比细毡毛忍冬分别高 2. 855 和 2. 405;相对长
度指数分别高 0. 257 和 0. 216。从臂比值来看，忍
冬臂比的范围最小，为 1. 535 ～ 2. 028，而红白忍冬
和细毡毛忍冬的范围较大，分别为 1. 283 ～ 3. 850 和
1. 098 ～ 2. 751。这些参数说明忍冬的染色体长度分
布较均匀。
忍冬除 3 号和 5 号染色体为中央着丝粒染色体
外，其余均为近中着丝粒染色体;红白忍冬的 6 号染
色体为近端着丝粒染色体，1、2、5 和 7 号染色体为
中央着丝粒染色体，其余均为近中着丝粒染色体;细
毡毛忍冬的 1、3、5 和 6 号染色体为近中着丝粒染色
体外，其余均为中央着丝粒染色体。结合染色体条
数，可确定忍冬的核型公式为 2n = 2X = 18 = 2m +
7sm，红白忍冬的核型公式为 2n = 2X = 18 = 8m +
8sm +2st，细毡毛忍冬的核型公式为 2n = 2X = 18 =
8sm +10m。
忍冬臂比值大于 2. 00 的染色体占 11%，红白
忍冬的占 33%，细毡毛忍冬的占 22%。按照最长染
色体和最短染色体的比值，忍冬为 2. 198，红白忍冬
和细毡毛忍冬为 2. 062 和 1. 747。因此，忍冬和红
白忍冬的核型属于 2B 型，细毡毛忍冬的核型属于
2A型。
2. 3 染色体核型图及核型模式图 忍冬的核型不
对称系数为 64. 013%，与红白忍冬的 64. 380% 接
近，二者均高于细毡毛忍冬的核型不对称系数
61. 949%。染色体核型图(图 2)及染色体核型模式
图(图 3)形象直观地反映了忍冬染色体长短臂相对
长度、着丝点位置、核型对称性等信息。
3 讨论
·583·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 卷第 3 期 2014 年 3 月
表 2 3 种忍冬的染色体参数
种类 序号 染色体长度 /μm(总长 =短臂 +长臂) 相对长度 /% 相对长度指数 臂比 类型
忍冬 1 5. 092 = 1. 762 + 3. 330 16. 561 1. 491 1. 890 sm
2 4. 127 = 1. 448 + 2. 679 13. 422 1. 208 1. 850 sm
3 3. 885 = 1. 520 + 2. 365 12. 635 1. 137 1. 559 m
4 3. 717 = 1. 328 + 2. 389 12. 089 1. 088 1. 799 sm
5 3. 306 = 1. 304 + 2. 002 10. 752 0. 968 1. 535 m
6 2. 993 = 1. 062 + 1. 931 9. 734 0. 876 1. 818 sm
7 2. 824 = 0. 966 + 1. 858 9. 185 0. 827 1. 923 sm
8 2. 486 = 0. 821 + 1. 665 8. 085 0. 728 2. 028 sm
9 2. 317 = 0. 845 + 1. 472 7. 536 0. 678 1. 742 sm
红白忍冬 1 5. 354 = 2. 179 + 3. 175 16. 111 1. 450 1. 457 m
2 4. 597 = 1. 729 + 2. 868 13. 833 1. 245 1. 659 m
3 3. 882 = 1. 400 + 2. 482 11. 682 1. 051 1. 773 sm
4 3. 622 = 1. 204 + 2. 418 10. 990 0. 981 2. 008 sm
5 3. 611 = 1. 404 + 2. 207 10. 866 0. 978 1. 572 m
6 3. 375 = 0. 696 + 2. 679 10. 156 0. 914 3. 850 st
7 3. 228 = 1. 414 + 1. 814 9. 714 0. 874 1. 283 m
8 2. 965 = 1. 054 + 1. 911 8. 896 0. 803 1. 813 sm
9 2. 597 = 0. 757 + 1. 840 7. 815 0. 703 2. 431 sm
细毡毛忍冬 1 5. 064 = 1. 566 + 3. 498 13. 706 1. 234 2. 234 sm
2 4. 698 = 2. 232 + 2. 466 12. 715 1. 144 1. 105 m
3 4. 498 = 1. 199 + 3. 299 12. 174 1. 096 2. 751 sm
4 4. 264 = 2. 032 + 2. 232 11. 541 1. 039 1. 098 m
5 4. 065 = 1. 499 + 2. 566 11. 002 0. 990 1. 712 sm
6 4. 065 = 1. 433 + 2. 632 11. 002 0. 990 1. 837 sm
7 3. 998 = 1. 499 + 2. 499 10. 821 0. 974 1. 667 m
8 3. 398 = 1. 266 + 2. 132 9. 197 0. 828 1. 684 m
9 2. 898 = 1. 333 + 1. 565 7. 843 0. 706 1. 174 m
图 2 3 种忍冬的染色体核型图
A. 忍冬 B. 红白忍冬 C. 细毡毛忍冬
忍冬、红白忍冬和细毡毛忍冬均为二倍体植物，
染色体条数为 2n = 2X = 18，染色体基数为 9。这与
相近品种的其他忍冬属植物的染色体数目一
致〔11-14〕，也与其他研究中所用野生金银花染色体数
目一致〔5〕，表明本实验所用的忍冬在系统演化过程
中没有出现染色体数目的丢失或增加，染色体数目
较为恒定。
按 Stebbins的标准划分〔7〕，核型可以分为 12 种
类型(1A ～ 4A、1B ～ 4B、1C ～ 4C)，其中 1A 型最对
称，4C型最不对称。野生忍冬的核型类型有多种认
定，辽宁的 2 种野生忍冬，核型不对称系数分别为
66. 65%和 63. 28%，属于 2A 型，在《中国主要经济
植物基因组染色体图谱》中也有 2A 型野生忍冬的
记录〔11，12〕;来自河北的一种野生忍冬属于 3A
型〔13〕;湖北的野生忍冬也为 2B型，其核型不对称系
数为 63. 78%〔14〕。一般认为，核型进化的基本趋势
是由对称向不对称发展的，系统演化上处于比较古
老或原始的植物，大多具有较对称的核型，而不对称
的核型则常见于衍生的、特化的以及比较进化的植
物类群中。核型不对称系数越接近 50%，核型的对
称程度越高，进化程度越原始〔15〕。本实验 3 种忍冬
的核型属于中等不对称性。表明忍冬经历了不断的
进化后，核型对称性不明显;忍冬和红白忍冬的进化
程度略高于细毡毛忍冬，说明此种细毡毛忍冬核型
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图 3 3 种忍冬的染色体核型模式图
A. 忍冬 B. 红白忍冬 C. 细毡毛忍冬
对称性较明显，在系统演化上有较强的原始性，进化
程度低。而忍冬和红白忍冬经历了人为选择和多年
培育，其进化程度较高。因此，这 3 种忍冬均可作为
广范栽培的种植资源。
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32-34．
《中药材》杂志为中国最具国际影响力学术期刊。
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