全 文 ：　　根据实验结果 ,确定以 60%乙醇提取人参。
2.4　精制条件的选择　选择了 3 个常用的醇沉
浓度 ,以黄芪甲苷含量为指标 , 确定醇沉浓度。方法:
取处方量 3 倍药材 ,按规定加水煎煮 , 过滤 ,滤液浓缩
至相对密度 1.06(80℃测),均分成 3 份 , 加 95%乙醇
使含醇量分别为 50%、60%、70%,搅均 , 冷藏 24h , 抽
滤 ,滤液回收乙醇至无醇味 , 浓缩至稠膏状 ,真空干燥
至恒重。精密称取干膏 2g , 以下操作同 2.2 项下方
法。结果见表 5。
表 5 醇沉实验结果
醇沉浓度(%) 干膏重量(g) 黄芪甲苷(m g)
50 25.98 14.60
60 24.24 13.27
70 22.01 12.03
　　根据实验结果 ,醇沉浓度确定为 50%。
2.5　矫味剂的选择　分别选用甜菊苷 、郎氏蛋
白糖 、蔗糖 3 种甜味剂制备样品进行比较 , 实验结果
表明 ,以 100g药粉中加入 10g 郎氏蛋白糖效果最佳。
2.6　制粒　比较了干法和湿法两种制粒方法 ,
湿法制粒色泽均匀 , 因此选用湿法制粒:药材(除人
参)按水提法提取 , 过滤 , 滤液冷藏 24h , 取上清液浓
缩至稠膏 , 加入 95%乙醇使含醇量为 50%, 搅匀 , 冷
藏 24 小时 ,抽滤 , 滤液回收乙醇至无醇味 , 继续浓缩
至稠膏 , 加入适量淀粉与挥发油包结物 、人参提取物
及蛋白糖充分混匀 、制粒 、真空干燥 ,整粒 , 包装即得。
3.讨论　本胶囊中人参作为君药又是贵重药
材 ,因此单独提取。方中黄芪主要成分黄芪甲苷性质
稳定 , 薄层层析斑点分离完全 ,矫味剂采用郎氏蛋白
糖可节约成本 ,且口感较好。
李属五种中药的蛋白质电泳指纹
图谱鉴别
山东中医药大学中药学院　卢燕　石俊英
中药质量控制是中药现代化生产和质量管理的
重要组成部分 ,中药指纹图谱是中药标准化 、规范化 、
国际化的需要。近年来 ,蛋白质指纹图谱技术发展较
快 ,国外学者已用于小麦 、大麦 、水稻等作物的鉴定 ,
1991 年国际种子检验协会将蛋白质电泳方法正式定
为标准的品种鉴定方法 ,表明了蛋白质电泳方法在种
子鉴定和纯度检测中的地位。我们将蛋白质指纹图
谱技术与中药电泳鉴别法相结合 ,探讨了中药蛋白质
电泳指纹图谱在中药质量控制中的应用。本文采用
该技术对蔷薇科李属的五种种子类中药进行了鉴别。
1.仪器与材料
1.1实验仪器 　多用电泳仪 、垂直板电泳槽 、
EDAS-290 凝胶成像紫外分析仪 、离心机 、电子天
平 、循环水真空泵 、真空干燥器 、超声波清洗器等。
1.2 实验材料　李属五种种仁的名称与来源参
见下表。
样品名称与来源
编号 样品名称 原植 物来 源
1 苦杏仁 Prunus armeniaca L.
2 山桃仁 Prunus davidiana(Carr.)Franch.
3 桃　仁 Prunus persica(L.)Batsch
4 樱桃仁 Prunus psaudo cerasus Lindl.
5 郁李仁 Prunus japonica Thunb.
　　2.实验内容与方法
2.1聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
2.1.1 样品制备　称取样品 1.0g , 加入 1ml稀释
4倍的浓缩凝胶缓冲液(pH8.9), 超声提取 30min ,
3500rpm , 离心20min , 上清液加等体积 40%蔗糖溶液
混匀 ,置冰箱内冷藏 , 备用。
2.1.2 电泳操作　凝胶制备参照文献方法进行 ,
吸取样品提取液 20μl , 缓缓注入样品槽底部 , 在负极
槽电极缓冲液中加入 1 滴溴酚蓝指示剂示踪 ,电泳在
冰箱内进行。电泳开始时控制电流 15mA , 样品进入
分离胶后 , 电流调整至
25mA。待示踪指示剂行
至距琼脂层约 1cm 时 , 停
止电泳 , 整个过程约需
3h。
2.1.3 染色　取出胶
板 , 标记前沿。 将胶板浸
于考马斯亮蓝染色液中 ,
37℃染色 1 ～ 2h , 至谱带
清晰。染色后 ,用蒸馏水洗去凝胶表面附着的染料 ,
再浸于脱色液中脱色。经常更换脱色液 ,直至谱带背
景清晰 ,结果参见图 1。
2.2 指纹图谱分析　电泳胶板用凝胶成像紫外
分析仪进行分析 ,以泳道中各谱带的光密度值 OD 为
纵坐标 、谱带位置 Pos.为横坐标 , 绘制指纹图谱 , 结
果参见图 2。
7《山东医药工业》2002年第二十一卷第 6期
　　3.结果与讨论
3.1 蛋白质指纹图谱将聚丙烯酰胺凝胶电泳结
果中各谱带的位置 、宽度及每条谱带中蛋白含量的大
小都进行了量化 ,增加了中药电泳鉴别法的准确度。
实验结果表明 ,五种样品的蛋白质电泳指纹图谱差异
明显 , 分别具有各自的特征鉴别谱带;各样品图谱中
均具有一条峰高 、峰宽值较大的主要谱带 , 仅在位置
与峰面积上稍有不同 , 应为该属植物种仁的共有谱
带。
3.2 蛋白质电泳指纹图谱属于生物指纹图谱 , 适
用于几乎所有动物 、植物类中药 , 且不受蛋白质以外
其它化学成分的限制 ,采用该技术对中药进行鉴定与
质量评价是可行的。 蛋白质指纹图谱与 RAPD、
RFLP等 DNA指纹图谱技术相比 ,具有快速准确 、操
作简便 、实验成本低 、重现性好等特点 ,非常适合大范
围推广应用。
参考文献(略)
氯氮平缓释胶囊释放度测定
山东省药品检验所　毕同香
山东医科大学药学院　张娜
氯氮平(Clozapine)是目前唯一无锥体外副作用
的广谱抗精神病药物 ,被 FDA 批准用于治疗重型或
难治性精神分裂症 , 有效率达 90%以上。目前只有
口服普通片剂。考虑到精神病患者服药困难和长期
用药的特点 ,采用亲水性高分子材料制成胃内漂浮的
缓释胶囊。本文采用紫外分光光度法建立了该缓释
胶囊的释放度检测方法。
1.仪器与试药
Aglent型紫外分光光度计(美国安捷伦公司);氯
氮平对照品(山东大学药学院 , 含量 99.5%以上);氯
氮平缓释胶囊(山东大学药学院);原料药与氯氮平片
(济南金泰制药厂);盐酸为分析纯。
2.试验方法与结果
2.1　检测波长的选择　精密称取氯氮平对照品
适量 , 用 0.1mol/ L 盐酸溶液溶解并稀释成每 1ml中
约含 5μg的溶液 ,同时按处方比例同法制备不含主药
的辅料及胶囊壳溶液进行紫外扫描。 氯氮平在
240nm 波长处有最大吸收 ,辅料及胶囊壳在此波长处
无吸收。
2.2　工作曲线　精密称取干燥至恒重的氯氮平
对照品适量 ,用 0.1mo l/ L盐酸溶液制成浓度为 2 、3、
4、5 、6 、7、8μg/ ml标准系列溶液 , 在 240nm 波长处分
别测定吸收度 ,以浓度吸收度进行线性回归 , 得回归
方程为:C=12.7441A+0.05530(r=0.9999), 氯氮平
在 2～ 8μg/ml浓度内呈良好的线性关系。
2.3　回收率试验　按处方配比分别精密称取氯
氮平和辅料适量 ,置 100ml量瓶中 , 加 0.1mol/ L 盐酸
溶液适量 ,充分振摇 , 用 0.1mol/ L 盐酸溶液稀释至刻
度 ,滤过 ,精密量取续滤液 , 用 0.1mol/ L 盐酸溶液稀
释制成每 1ml中约含氯氮平 5μg 的溶液 , 同时制备 9
份溶液 ,在 240nm 波长处分别测定吸收度;另精密称
取氯氮平对照品适量 , 加 0.1mol/ L 盐酸溶液制成每
1ml中约含 5μg的溶液 , 同法测定。计算平均回收率
为 99.96%, RSD 为 0.08%。
2.4　溶液的稳定性试验　取回收率试验项下的
同一份溶液 ,在室温下放置 24h , 分别在 6、12 、24h 取
溶液测定 ,吸收度基本不变。
2.5　转速的选择　取样品 , 照释放度测定法(中
国药典 2000 年版第二部附录 XD 第一法),采用溶出
度测定法第一法装置 , 以 0.1mol/ L 盐酸溶液 900ml
为溶剂 ,拟定 75 转/min 和 100 转/ min , 分别在 1 、4、
8、12h 取样测定。结果表明 , 不同的转速在 1 、4h 的
累积释放百分率相差不大 , 但在 12h 时 , 100 转/ min
8 《山东医药工业》2002年第二十一卷第 6期