全 文 ：人参属组织培养物总皂甙含量测定
李积华　 (南京中医药大学附属医院 ,南京　 210029)
摘　要　本文采用薄层层析 -比色法测定了人参组织培养细胞株、西洋参、白三七、钮子七组织培养物中人参 总
皂甙的含量 ,测定结果表明: 西洋参细胞培养物中含量最高 ,而人参 AC-O细胞株系含量很低 ,加样回收率为 95.
8% , RSD为 2. 59%。
　　关键词　人参属组织培养物　人参总皂甙　人参皂甙 Rb1　薄层层析 -比色法　含量测定
　　中图号　 R284. 2
　　近年来人参属植物野生资源匮乏 [1 ] ,利用植物
组织和细胞培养可以改良品质 ,并能产生与栽培植
物有着相同化学成分和药理活性的物质 ,本实验采
用薄层层析 -比色法测定人参属组织培养物的人参
皂甙 Rb 1的含量 ,为人参属植物质量提供指标。
1　仪器与材料
722光栅分光光度计 (上海第三分析仪器厂 ) ;
800型离心沉淀机 (上海手术器械厂 ) ;硅胶 G(青岛
海洋化工厂 ) ;人参二醇标准品 (中国药品生物制品
检定所产品 ) ;人参细胞株、西洋参细胞株、白三七、
钮子七 ,由南京林业大学组织培养研究室提供 ,由王
本祥教授鉴定。所用试剂均为分析纯。
2　实验与结果
2. 1　样品制备
人参属植物组织培养物经冷冻干燥后备用。精
密称取冷冻干燥后的样品 1 g置索氏提取器中 ,加
乙醚 60 ml, 48℃水浴加热 2 h,脱脂后再加甲醇 60
m l 90℃水浴加热 ,连续提取 6 h,提取液回收甲醇至
干 ,残渣用少量甲醇溶入 10 ml容量瓶中定容。
2. 2　人参二醇标准曲线制备
精密称取人参二醇标准品 2. 98 mg置于 1 ml
容量瓶中 ,加入甲醇稀释至刻度 ,精密吸取 5、 10、
15、 20、 25μl置试管中 ,热风吹干 ,再加入 5%香草
醛 -冰醋酸 0. 2 m l,高氯酸 0. 8 ml,水浴 60℃ , 15
min后取出 ,加入冰醋酸 5 m l, 722光栅分光光度计
560 nm比色 ,得回归方程为 C= 112. 0A- 0. 7718, r
= 0. 9999, C为人参二醇含量 , A为吸收度。
2. 3　加样回收率试验
精密称取人参粉末 1 g ,加入人参皂甙 Rb1 ( 4.
33 mg /ml ) 2 ml,按样品制备及样品测定项下操作 ,
测定回收率 ,结果见表 1。
表 1　加样回收率试验 ( mg )
编号 样品含量 对照品加入量 测得量
回收率
(% )
RSD
(% )
1 13. 50 8. 660 21. 01 94. 81
2 16. 20 8. 660 24. 31 97. 78 2. 59
3 14. 11 8. 660 21. 60 94. 86
2. 4　稳定性试验
取样品液适量按测定条件项下操作 ,结果在 8
h内稳定。
2. 5　样品含量测定
取甲醇提取液 20μl点在薄层板上 ,并点标准
品 Rb1定位 ,展开系统为氯仿∶甲醇∶水 ( 70∶ 55∶
10) ,展距 8 cm ,碘蒸气熏 ,显色后刮取斑点处硅胶 ,
加入 0. 2 m l 5%香草醛-冰醋酸溶液 ,加入 0. 8 ml高
氯酸 , 60℃水浴加热显色 15 min,加入 5 ml冰醋酸 ,
( 1500 r /min)离心 10 min, 722光栅分光光度计 560
nm比色 ,测定吸收度 ,结果见表 2。
　表 2　人参属组织培养物中人参皂甙 Rb1的含量 (n= 3)
培养物名称 含量 (% ) RSD(% )
白三七 0. 11 1. 01
人参 AC-O 0. 04 1. 00
钮子七 0. 45 0. 97
西洋参 6. 15 1. 24
3　讨论
西洋参细胞培养物 Rb1含量最高 ,人参 AC-O
细胞株系含量很低 ,白三七、钮子七细胞培养物的
Rb 1含量也较低。
参考文献
1　刘云章 ,王荣生 .我国人参育种的当务之急 .特产研
究 , 1991. ( 4)∶ 22
(收稿日期: 1997- 04- 28)
—94— 南 京中 医药大 学学 报 1 9 9 8年 3月第 1 4卷 第 2期JOURN AL OF N AN JIN GUN IVERSI TY OF TCM Vol. 14 No. 2Mar. 1998DOI : 10. 14148 /j . i ssn. 1672 -0482. 1998. 02. 017