全 文 ：第巧卷 第 3期
19 94
昆 明 医 学 院 学 报
D A C A EM ICJ O UR A NL OF K U NM I NG M ED ICL A C OL L E G E
V ol
.
15 No
.
3
4 19 9
滇产胡椒属植物 930 1醇提物抗血小板
活化因子作用的研究 ’
马国义 王新华 李新华 王德成 陈植和
(昆 明 医 学院药理教研 室 , 是明 65 0 03 1)
摘要 本文以血小板活化因子 (P A )F 诱导的兔血小板聚集 , 大鼠足肿胀和离体平滑肌收缩为指标观
察了 93 01 对 P A F 活性的影响 , 结果表明 : 93 01 醇提物不仅能抑制 P A F 诱导的兔血小板聚集和大鼠足肿
胀 , 而且能抑制 P A F 引起的离体大鼠和豚鼠回肠平滑肌收缩 , 提示 93 01 醇提物具有较强的抗 P A F 作用 .
关键词 胡椒属 血小板活化因子 血小板聚集 大鼠足肿胀 平滑肌收缩
中图分类号 R 973
血小板 活 化 因子 ( p l a t e l e t a e t i v a t i n g
af ct or
,
P A F ) 是由多种炎症细胞 , 血小板
和血管内皮细胞释放的一种脂类介质 〔 ’ 〕 ,
具有广泛而强烈的生物学活性 , 能促进血小
板聚集 , 增加毛细血管通透性 , 诱发支气管
哮喘和过敏性休克等 , 在炎症 、 心血管和呼
吸系统疾病的发生和发展过程中起着重要的
作用 (2, ’ 〕 . 因此 , 寻找特异的 P A F 拮抗剂
可能为以上疾病的防治提供适宜的药物 . 文
献 (4) 报道 : 胡椒属植物海风藤中分离出的
海风藤酮 ( k a d s u r e n o n e ) 是特异的 P A F
拮抗剂 , 9 301 为我省特产胡椒属植物 , 民
间用于治疗风寒湿痹 、 筋骨疼痛和哮喘 , 是
否也含有类似海风藤酮的成分未见报道 . 本
文观察 9 301 醇提物对抗 P A F 引起的血小
板聚集 , 大鼠足肿胀及离体回肠平滑肌收缩
的作用 .
1 材 料
L l 动 物
健康家兔 2一 3 k g , W i s t a r 大鼠 200一
300 9
, 豚鼠 3 50一 500 9 , 雌雄不拘 , 均由
本院动物科供给 .
L Z 药品及其配制
粉碎的 9 301 分别经二氯甲烷和乙醇回
流或冷浸 , 收集其提取液 , 浓缩得浸膏 , 取
1 9 浸膏加 s m L P E G 一4 0 0 溶解 , 再溶于
0
.
5% 甲基纤维素中制成悬液 . 进行血小板
聚集实验 时将悬 液以 1 20 r / m in 离心
10 m in
, 取清液备用 , 海风藤购自上海中药
店 , 提取及配制同 9 301 .
L 3 主要试剂及仪器
P A F 系美国 is gm a 公司产品
, 溶于含
0
.
2 5% B SA 的 T ir s一 N a e l 缓 冲溶液中 ,
p H 7
.
6
. 花 生 四烯馥 ( 。 r a e h id o n i。 。 c id ,
A A ) 美国 is grn a 公司产品 , 溶于无水乙醇
中 , 临用前用 1% 碳酸钠稀释 . 二磷酸腺昔
( a d e n o s i n e d i Ph o s Ph a t e
,
A D P ) 瑞士进 口
分装 , 溶于磷酸盐缓冲液中 . 氯化乙酞胆碱
( a e e t y lc h o il n e
,
A e h ) 上海试剂二厂生产 ,
蒸馏水配制 , 现配现用 . 组胺 ( ih s at m ine ,
H i st ) 为进 口粉剂 , 蒸馏水配制 .
B S一6 31 型血小板聚集仪 ; U一 13 5 C 型
岛津记录仪 .
* 云南省应用基础研究基金资助课题
3期 马国义 , 等。 滇产胡椒属植物 9 301 醇提物抗血小板活化因子作用的研究
2 方法与结果
2
.
1 9 30 1提取物对 P A F诱导的 兔血小板聚
集的影响
兔 6 只 , 颈动脉放血 , .3 8%拘椽酸钠抗
凝 , 血与抗凝剂之比为 9 : 1 ( v / 的 离心分
离 富血 小 板 血 浆 ( anl t e le t , ir e h Pals m a ,
P R P
,
1《X旧 r / m 川 , 10 I n ” 1) 及贫血小板血浆
( p h et le t , op o r p als m a
,
P P P
,
3 《XX〕 r / nI
,
or ~ )
, 以 P PP 调整 P RP 中的血小板数至
绷 x l护 · -L , . 按 oB m 氏比浊法 〔5〕进行血小
板聚集性测定 . 取 .0 45 m L P R P 与不同浓度的
药物或对照液于 37 ℃温育 s n ” n 后分别加人
P A F
,
A A 或 A D P ( 4 . 5 x l了 , 3 . 3 x l丫 , l
xl -os mo l
·
-L
,
) 诱导血小板聚集 , 药物对血
小板聚集的抑制率按下式计算 :
聚集抑制率 二对照聚集% 一 药物聚集%对照聚集 % x 10 0%
结果 : 930 1醇提物和二氯甲烷提取物均
可明显抑制 P A F 诱导的兔血小板聚集 , 其作
用与同等剂量的海风藤醇提物相 当 (表 1) .
为样品制备程序的安全和简便 , 我们选定乙
醇提取物为进一步研究的材料 , 发现 : 930 1
醇提物除能抑制 P A F 诱导的兔血小板聚集
外 , 还能抑制 A A 诱导的聚集 , IC 、 及 95 %
可信限分别为 l印 . 5 ( 138 . 9 , 185 . 5 ) 及 239 . 8
(职 . 1 , 28 L 6) gm · -L , ; 在较高浓度 ( 850
gm
·
-L
l
) 时对 A D p 诱导的血小板聚集也有
抑制作用 , 抑制率为 .19 3% (表 2) .
表 1 , 3 01 不同提取物对 P A F诱导的兔血小板聚集的影
响 ( n = 6 , 牙士 s)
.2 2 对 P A F引起的大鼠足肿胀的影响
大鼠 20 只 , 分为 2 组 , 禁食过夜 , 灌胃
给药 , 一组给 930 1醇提物姗mg · -kg ` , 另一
组给等容量 0 . 5% 甲基纤维素作为对照 , 灌胃
后 40 1n u l 于左 、 右后 肢足拓皮下分别注人
T比行N a d 缓冲液及 1护 m o l · -L , P A F 各 .0 1
m L
. 致炎后 巧 , 30 , 印 和 1为 m m 用毛细管放
大法 〔。 测量足体积 (容器内盛放水银 ) , 以
左右足之差为肿胀程度 , 并与致炎前比较 , 结
果显示 : P A F 致炎后 Z h 内 , 930 1醇提物均可
明显抑制足肿胀 , 抑制率分别为 45 % , 39 % ,
4 %和 32 % , 尸< .0 01 (附图) .
0 2 「
药物 终浓度
(m g L
一 , )
聚集率
(% )
抑制率
(% ) 弓 0一5
ù
O
.后勺。沙Pd口三花ó对 照
9 30 1醇提物
9 301 二抓甲烷提取物
海风藤醇提物
64
一
0 士 8 . 3
4
.
2 士 2 . 5
3
一
6 土 1 . 9
4
.
0 士 2 . 4
9 3
.
4 士 3 .8
9 4
.
3士 3 . 3
9 3
.
8士 3 .6
00
ù、曰气óùO八
表 2 9 3 0 1醉提物对 P A F , A A 和 A D P 诱导的兔
血小板聚集的影晌 ( n = 6 , 又士 s)
浓度 血小板聚集抑制率 (% )
(m g
·
L
一 ,
) p A F A A ^ D P
0 0 0 0
2 6 10
.
1土 6 . 8 . 3 . 2 士 1 . 8 1 . 7士 1 . 3
53 1 8
.
7士 1 0 . 0二 13 . 9 士 5 . 6 申 . 1 . 7士 1 . 6
10 6 3 3
.
3士 1 0 . 7 , 右 3 0 . 4 士 5 . 8 . 中 3 . 7士 1 . 5
2 1 3 53
.
9 士 10 . 2二 4 6 . 9 士 8 . 7二 7 . 5士 4 . 2
4 2 5 7 9
.
1士 7 . 7 . , 6 5名士 7 . 0二 1 3 .0 士 4 . 2二
8 50 9 4 3 士 3 . 2 甲 . 8 1 . 4 士 5 . 3二 19 . 3 士 5 . 2 中 中
中
P < 0
.
0 5 ;
申 甲
P < 0
.
0 1
.
O一- O时照组
卜 . 一刁贻药组
0 1 5 3 0 印 120
t / m i
n
附圈 , 30 1醉提物 (印。 m g · k g一 l) 对 P A F引起的大限
足肿胀的影晌
.2 3 9 30 1醇提物对 P A F及其它激动剂所致
大鼠和豚鼠离体回肠平滑肌收缩的影
响
将动物击昏 , 迅速开腹 , 取回肠 1一 2
昆 明 医 学 院 学 报 第 15卷
cI n
, 冲洗干净 , 置于 10 m L 台氏液中 , 通
0 2
,
3 7 ℃平衡 4 5 m i n , 负荷 0 . 5 9 , 标本与
张力换能器相连 , 描记收缩曲线 . 以 P A F
(l r m of
·
L 一 , ) 引起肠肌痉挛性收缩 ,
提取物按累积浓度法加人 , 观察对持久相收
缩的抑制效应 . 求得 9 301 醇提物拮抗 P A F
所致大鼠及豚 鼠回肠平滑肌收缩的 IC ;so
同法观察到 : 9301 醇提物对 A hc 和高 K + 引
起的大鼠回肠及 H is t 引起的豚鼠回肠的持
久相收缩也有拮抗作用 (表 3) .
裹3 930 1醉提物对 P A F及其它激动剂所致大吸和膝吸离
体回肠收缩的拮抗效应 (万士 s , n 均为 10 只 )
鼠足肿胀 , 提示该药具有较好的抗急性炎症
作用 .
本文所报道 的 9 301 醇提物抑制 P A F
所引起的血小板聚集 , 大鼠足肿胀和肠平滑
肌收缩的作用为其民间用于治疗风湿 , 哮喘
等疾病及扩大其临床用途提供了理论依据 .
至于其抗 P A F 作用是特异性的还是非特异
性 的有 待于 分离 其组 分进 行 深人 的研
究 . 9 301 醇提物的效价可与海风藤醇提物
相当 , 且前者在我省资源丰富 , 其应用前景
更为可观 .
(本研究的植化工作由昆明医学院化学教研室
詹尔益 , 李映等和张燕老师完成特此致谢 . )动物 激动剂 I C ” (m g · L一 I )
P ^ r ( 10一 m o l · L一 , )
A e h ( 0
.
5 m g
·
L
一 I
)
K
+
( Z m g
·
L
一 l
)
P A F ( 10场 m o一 L一 , )
H is t ( 1 m g
·
L一 l )
4 5
.
0土 2 . 7
2 3
.
7士 2 . 8
1 0
.
1士 1 . 2
4 3
.
7士 2 . 8
2 9
.
6士 4 . 4
3 讨 论
目前认为 , 血小板的活化聚集主要通过
三条途径 , 即 A D P 途径 , A A 代谢途径和
P A F 途径 〔 7〕 , 本 文选 用 A D P , A A 和
P A F 三种诱导剂分别代表血小板活化的三
条不同途径 .
结 果 表 明 : 9 301 醇 提 物 对 P A F,
A A
,
A D P 诱导的血小板聚集均有抑制作
用 , 其 中对 P A F 诱导 的 聚集抑制作用最
强 , 对 A A 诱导的聚集作用次之 , 对 A D P
诱导的聚集需要较高浓度才能抑制 , 说明
93 01 醇提物对 P A F 诱导的血小板聚集的抑
制具有较高的选择性 . 然而 , 9301 醇提物
除能拮抗 P A F 引起的大鼠及豚鼠回肠平滑
肌收缩外 , 也能拮抗 A hc , 高 K 十和 H ist 引
起的收缩 , 这又说明 9301 醇提物中可能同
时含有抗 P A F 的成分和松弛平滑肌的其它
成分 .
9 30 1醇提物能明显抑制 P A F 引起的大
参考文献
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H a e m a t o lo g y
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1 0 7
(一9 94刁 r一刀 收稿 )
豚鼠
3 期 马国义 , 等 . 滇产胡椒属植物 93 01 醇提物抗血小板活化因子作用的研究 25
S t U d ie S o n t h e A n it 一 P A F E f fe C t o f A IC 0 h o l
E x tr a e t o f P i p e r S p
.
N a it v e t o Y u n n a n
M a G u o y i W a n g X i n h u a L i X in h u a W a n g D e e h e n g C h e n Z h ih e
(D印 a r mt e n t of hP a mr a c o .lO那夕, uK n m ign M e id e a l oC lgle e , uK n m ign 6500 3 1)
P l a t e le t a e t iv a t in g af e t o r ( P A F ) 15 a P o t e n t il P id m e d i a t o r r e l a t in g t o a n a Ph y l a x i s a n d
协n a m m a t i o n . I n th i s Pa P e r , th e e fe e t s o f t h e a l e o h o l e x t r a e t o f a C h in e s e h e r b a l P l a n t , P iep r
S P
.
9 30 1 n a t i
v e t o Y u n n a n o n P A F a c t i v i t i e s w e r e r e P o r t e d
.
T h e e x t r ac t o f P IP e
r
S P
.
9 30 1 m a r k e d ly in hi b i t e d r a b bi t P la t e l e t a g g r e ga t i o n in due d b y队F a n d a acr h id o n i e a ic d ( A A ) in v i t r o ( I e s o : x6o . s a n d 239 . 5 m g · L 一 `er s p e c y t iv e ly ) ,
a n d p ^ F一in duce d
r a t 址 n d p a w e d e m a in v iv o ( 600 m g · k g一 ,p . o ) . M e a n w ih l e , i t w a s o 卜
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th e e x t r a e t s u P P r e s s e d th e s u s t a in e d e o n t r a e t io n o f b o th i s o l a t e d r a t a n d g u in e a Pig
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n o t o n ly in d u e d b y p A F
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b u t a l s o by a e e t y l e h o l i n e (A e h )
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T h e s e r e s u l t s in d i e a t e th a t t h e e x t r a e t o f P IP e r s P
.
h a s a P o t e n t a n t i一 P A F a e t i o n .
K e y w o dsr P IP
e r S P
.
P l a t e l e t a e t i v a t i n g fa e t o r P l a t e l e t a g g r e g a t io n R a t
h in d P a w e d e m a S m o o th一m u s e le e o n t r a e t i o n
动脉灌注抗癌新药旋复花注射液治疗肝 、 肺癌的临床研究 (摘要 )
研究生 胡继红 导 师 庞瑞麟
(昆明 医学院 第一附属医 院放升科 , 昆明 6 500 3 2)
通过对 3 只正常家犬的动物实验及原发性肝 、
肺癌各 10 例的 工期临床研究 , 分别对旋复花注射
液动脉灌注的剂量 、 毒副反应 、 使用方法 、 给药途
径及初步的疗效进行分析 . 结果表明 : ( l) 经狗肝
动脉灌注不同剂型的旋复花注射液 , 可立即引起血
压下降 , 但间轻胺或麻黄碱可以对抗 ; 在人体对血
压影响则不明显 , ( 2) 支气管动脉灌注的毒副反应
与药物浓度呈正比 , 其浓度在 20 % 以下 , 仅表现
胸痛、 咳嗽等轻微症状 , 但浓度在 20 % 以上 , 则
出现难以控制的胸痛 、 咳嗽等严重呼吸道刺激症
状 . ( 3) 肝动脉直接灌注 , 药物浓度应控制在
关键词 旋复花注射液 动脉灌注 原发性肝癌
中图分类号 R 7 3 5 . 70 5 R 7 34 . 2 0 5
10 % 以下 , 大于 10 % 可引起肝细胞损伤 , G PT 明
显升高 , 2一 3周后可恢复 ; 而间接肠系膜上动脉
或脾动脉灌注 , 对肝细胞无明显损伤 . (4) 治疗
剂量以 2 m g · k g一 , 为宜 , 一般不引起重要器官如
心 、 脑 、 肝 、 肾 、 胃肠及骨翻的毒副作用 . ( 5)
对疗效进行了初步分析 , 10 例肺癌中 2 例部份缓
解 (P R ) , 其余为稳定 ( s) ; 肝癌一次性灌注疗效
不明显 .
本研究完成了国家新药 I 期临床研究的各项指
标及要求 , 并对肝 、 肺癌的疗效进行了初步分析 ,
为 n 期临床研究提供了客观依据 .
支气管肺癌 I 期临床研究