全 文 ：杨属植物中酚甙类含量的 HPLC法测定
王 　强　　王 　欣 　　汪　红
(中国药科大学中药分析教研室 , 南京 210038)
摘　要　采用 HPLC 法 , 对 18 种杨属植物树皮中酚甙类成分含量进行了测定。 所建立的方法[ 采用
Shim- pack ODS 柱 ,以甲醇(A)和水-四氢呋喃(99∶1)(B)为流动相] 确实可靠 ,具良好的线性关系 ,精密度 RSD
<2%,加样回收率 salireposide为 99.2%, RSD=1.77%, davidianin 为 98.6%, RSD=3.01%, grandidentatin
为 102.1%, RSD=0.91%。本法可用于杨属植物的含量测定。 salicin 为杨属植物的共有成分 , 且含量较高 ,
种间差异明显。
关键词　杨属;酚甙;HPLC;含量测定
　　杨属(Populus L.)植物在我国古代就已作为
药用 ,其树皮 、雄花序 、叶均可药用 ,主要以白杨树
皮 、青杨 、胡桐泪等名入药 ,有祛风 、行瘀 、消炎等
功效。现代药理学证明其有抗菌 、抗炎 、抗肿瘤 、
镇痛 、抗病毒 、对心血管系统的保护及细胞毒等多
种药理活性。据俄罗斯 1996年专利报道 ,白杨树
皮醇提物的抗肿瘤活性相当于或优于长春花
碱[ 1] 。杨属植物的主要活性物质为酚甙和黄酮
类成分。今采用 HPLC 法对杨属植物的酚甙类
进行测定(见图 1),以期为杨属植物品质评价提
供依据。
1　实验部分
1.1　仪器与试药
岛津 LC-10A 高效液相色谱仪;SPD-10A 紫
外检测器;SCL-10A系统控制器;HS 系列色谱数
据工作站 Ver3.4(杭州英谱科技开发有限公司)。
salicin(水杨甙 ,北京药物所林茂教授赠), sali repo-
side、g randidentat in 、davidianin 对照品均为自提 ,
经光谱鉴定 ,定量分析对照品纯度均在 98%以
上。样品为作者采集并经分类鉴定。甲醇(色谱
纯);四氢呋喃(分析纯);重蒸馏水 。
1.2　色谱条件
色谱柱:Shim-pack ODS 150 mm ×6 mm;流
动相:甲醇(A)和水-四氢呋喃(99∶1)(B)作梯度
洗脱[ 2 , 3] ,初始 , B:72.5%(10 min)※60%(至 42
min)※55%(至 52 min)※72.5%(至 60 min);流
速:1.0 ml/min;柱温:25℃;检测波长:273 nm;灵
敏度:0.010AUFS。
2　方法与结果
2.1　线性关系
取对照品精密称定 ,用甲醇配制 salicin(Ⅰ ,
0.092 mg/ml)、salireposide(Ⅱ , 0.106 mg/ml)、
davidianin(Ⅲ ,0.042 mg/ml)、g randidentatin(Ⅳ,
0.023 mg/ml)的混合对照品溶液 ,分别进样 4 、8 、
12 、16 、20 μl ,用上述色谱条件测定(见图 1),以峰
面积对对照品量作标准曲线 ,回归方程为:
Y Ⅰ =6.845×104X +2.792×103 , r=0.9999
Y Ⅱ =1.473×105X-4.861×103 , r=0.9999
Y Ⅲ =3.143×105X-2.136×103 , r=0.9998
Y Ⅳ=2.089×105X +2.409×103 , r=0.9999
t/min
Fig 1.HPLC chromatogram of phenolglycosides
A:standard　B:sample 　1.salicin 2.salireposide 3.davidiana 4.
g randidentatin
2.2　精密度试验
精密吸取混合对照品溶液 20 μl ,重复进样 5
次(N=5),各对照品峰面积的 RSD<2%。
2.3　样品测定与回收率试验
2.3.1　样品液的制备　取样品约 1 g ,精密称定 ,
加醋酸乙酯 100 m l , 用索氏提取器提取至无色
33
中 国 药 科 大 学 学 报
Journal of China Pharmaceutical University　2000 , 31(1):33～ 34
收稿日期　1999-09-28
(约 4 h),提取液回收至干 ,用甲醇定容于 50 ml
容量瓶中 ,进样前 ,经硅胶色谱小预柱(河北省津
杨滤材厂)处理 ,除去杂质 ,进样 5 μl ,按上述色谱
条件测定 ,测得峰面积 ,计算含量。结果见表 1 。
2.3.2　加样回收率试验　精密称取已知含量的
白杨树皮 ,精密加 salireposide , davidianin , grandi-
dentatin对照品 ,按样品测定方法提取及测定 ,计
算回收率。 salireposide 的回收率为 99.2%, RSD
=1.77%;davidianin 的回收率为 98.6%, RSD
=3.01%;g randidentatin 的回收率为 102.1%,
RSD=0.91%。
Tab 1.Contents of phenolglycosides in the bark of Popu lus L.
S ample Origin Gathering t ime
Conten t(%)(n=3)
Salicin Sali reposide Grandidentatin Davidianin
P.alba var.pyramida lis
P.alba
P.tomen tosa
P.davidiana
P.hopeiensi s
P.adenopoda
P.ussuruensis
P.koreana
P.cathayana
P.simoni i
P.pseudo-simonii
P.×xiaozhuanica
P.lasiosarpa
P.n igra var.italica
P.n igra var.thevstina
P.canadensis
P.×beij ingensis
P.× xiaohei
Liaoning Shenyang
Jiangsu Nanjing
Beijing
Liaoning Chaoyang
Neimeng Baotou
Jiangsu Ju rong
Liaoning Shenyang
Liaoning Shenyang
Liaoning Xinming
Liaoning Xinming
Liaoning Xinming
Liaoning Xinming
Hubei Hefeng
Liaoning Shenyang
Neimeng Baotou
Liaoning Shenyang
Liaoning Shenyang
Liaoning Shenyang
94.7
96.4
94.7
94.7
94.7
94.7
94.7
94.7
94.7
94.7
94.7
94.7
95.4
94.7
94.7
94.7
94.7
94.7
1.25
2.63
0.57
1.87
1.89
1.24
1.42
0.68
0.70
2.16
1.01
0.74
0.52
0.64
0.49
0.69
1.03
0.72
0.76
0.80
0.54
0.69
0.53
0.16
0.40
0.93
0.22
-
0.05
-
-
0.05
-
-
0.05
0.09
0.18
0.35
0.17
0.43
0.31
0.12-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
0.15
0.28
0.17
0.47
0.07
0.12
0.04
0.09
-
-
0.02
0.01
-
-
-
-
-
-“-” :this constituent can′t be examined
3　讨　论
1)在选取样品制备方法时 ,我们首先比较了
以甲醇和醋酸乙酯为溶剂提取 ,结果发现两者均
能提取完全 ,但甲醇提取液分析时发现干扰成分
较多 ,故选用醋酸乙酯为溶剂提取。以醋酸乙酯
为溶剂 ,对热回流提取法 ,超声波提取法 、索氏提
取法进行了比较 ,结果发现索氏法提取完全 ,方法
简便易行 。
2)由于被测成分极性差异较大 ,分析时间较
长 ,采用梯度洗脱条件下进行分析 ,流动相梯度变
化呈现三个平台 。结果发现该梯度洗脱方法稳
定 ,重现性好。在流动相比例变动时 ,基线虽有漂
移 ,但只要被测成分在基线稳定后出峰 ,就不影响
测定 。
参 考 文 献
1　具有抗肿瘤活性的白杨提取物.国外医药·植物药分册.
1998 , 13(2):90
2　Baiocchi C , Marengo E , Saini G , et al.Reversed-phase high-per-
f ormance liquid chromatography and chemomet rics , a combined
invest igation tool for complex phytochemical p roblems.J Chro-
matog , 1993 , 644:259
3　Baiocchi C , Marengo E , Roggero MA , et al.A ch romatographic
and chemometric study of the bark phenolic compounds of tw o
poplar clones w ith di fferent resistance to discosporium populeum.
Chromatographia , 1994 , 39(7/ 8):481
Determination of Phenolglycosides fromBark of Populus L.by HPLC
WANG Qiang , WANG Xin , WANG Hong
Department of Chinese Materia Medica Analysis , China Pharmaceutical University , Nanjing 210038
Abstract　Quantitat ive analyses of phenolgly cosides of bark in 18 species Populus L.were carried out by
HPLC , and the established HPLC method[ using Shim-pack ODS column and MeOH(A), H2O-THF(99∶
1)(B)as elution solvents] proved to be a good method in determination of Populus L .
Key words　Populus;HPLC;Phenolgly cosides;Quantitative analysis
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