全 文 ：植 物 学 报 一9 5 5, 3 0 。 ) : 1斗一 2 0
A c止。 刀b t a心e a 笛对 c 。
大叶杨组组间杂交花粉一柱头相互作用的
超微结构研究*
朱 形 李文铀
(中国林业科学研究院林业研究所 , 北京 )
摘 要
以大叶杨为母本 ,分别与小叶杨 、 欧洲黑杨 、 响叶杨进行人工杂交 ,并以大叶杨 x 大叶杨为
对照 ,观察其花粉与柱头相互作用的超微结构变化 。 结果表明 ,大叶杨柱头细胞在授粉前表现
生理活跃 ,含丰富的细胞器 ,壁外被含分支通道的角质层 。 接受大叶杨及欧洲黑杨花粉的柱头
细胞内部仍有丰富的细胞器 , 膜结构保存完好 。 接受小叶杨及响叶杨花粉的柱头细胞衰亡较
快 ,授粉部位沉积厚的阱眠质 ,细胞内部液泡化 ,膜结构逐渐消失 ,细胞质电子密度加大 。 欧洲
黑杨花粉行为与大叶杨花粉行为相似 ,花粉能迅速萌发 , 并以短管形式穿人柱头 , 异常行为罕
见 。 小叶杨及响叶杨花粉萌发后只有半数花粉管能以短管形式进入柱头 , 其中部分管内沉积
阱眠质 , 另半数花粉管在柱头上表现各种异常行为— 扭曲 、 爬行 、 肿胀 、 提前破裂释放内容物及先端沉积脐眠质 。 由各种花粉在大叶杨柱头上的行为和大叶杨柱头对各种授粉的反应 判
断 , 与大叶杨杂交亲和力在柱头阶段表现由强至弱依次是欧洲黑杨 、 小叶杨 、 响叶杨 。
关键词 组间杂交 ;不亲和性 ; 花粉一柱头相互作用 ;杨属
在林木杂交育种方面 , 自 70 年代以来 , 对杨属 ( oP P“ l“ s) 花粉和柱头的相互作用进
行了一些研究【,冲 ,s9 ,l4] , 取得了一定进展 。 但这些工作对花粉和柱头的相互作用过程中花
粉 、柱头细胞内的超微结构变化注意不够 。
我们在前文研究的基础上 〔1] , 选取我国特有的高山耐湿造 林 树 种 , 隶 属 大 叶 杨 组
( S
e ct
.
L e u e i d e s S p a c h ) 的大叶杨 ( p . l a五o c a ,扣 O l i v . ) 为母本 , 与青杨组 ( s e c t . T a e a -
m a hc a e e a S p a e h ) 的小叶杨 ( p . 五m o , l’i C a r r . ) 、 白杨组 ( s e e t . L e u c e D u b y ) 的响叶杨
( p
.
a d e n o户o d区 M a x im · ) 以及黑杨组 ( S e e t . A i g e i r o s D u b y ) 的欧洲黑杨 (尸 . 。 isar L
.
)
进行人工杂交 , 对其花粉和柱头的相互作用进行了透射和扫描电镜的研究 , 以探讨亲本杂
交的不亲和性问题 ,找出各杂交父本花粉在柱头阶段与大叶杨的亲和程度 , 为开发利用我
国特有的杨树资源提供资料。
材 料 和 方 法
19 83一 1 9 85 年间以大叶杨为母本 , 分别与小叶杨 、欧洲黑杨 、 响叶杨进行人工控制杂
本文于 1 , 86 年 5 月收到 , 1 9 8 7年 4 月收到修改稿。
* 中国科学院科学基金资助的课题
* P r o i e o t S u P P o r t e d b y t h o S c i e n e e F u n l o f ht e C h 、 n 。 。 e A o a d e m y o f S e l e n e e .
黄金生 、 梁景森同志协助电镜工作 ,谨致谢意。
朱 彤等 : 大叶杨组组间杂交花粉 、 柱头相互作用的超微结构研究
交 , 并以大叶杨 x 大叶杨组合为对照。 其中 , 大叶杨雌 、雄枝采自湖北宜昌 ; 小叶杨雄枝采
自北京西山 ; 响叶杨雄枝采自江苏南京 ;欧洲黑杨雄枝采自新疆阿尔泰 。
各亲本均为雌 、 雄异株 。 采条后次年 1 月始水培 , 室温 15 一 18 ℃。 雄花枝分室套袋
隔离 , 收花粉后 2一斗℃ 冰箱 (干燥条件 ) 中贮存备用 ;雌花枝花芽膨大时套袋隔离 。 人工
授粉 。
人工授粉后分别于 6 、 1 0 、 2 5 、 5 0 小时取样 。 供扫描电镜观察的材料以 50 多 乙醇配
制的 F 人A 固定液或以 0 . 2m ol / l 磷酸缓冲液配制的 3外 戊二醛固定液固定 24 小时以上 。
5 0多乙醇或相应缓冲液清洗 , 系列乙醇脱水 , 乙酸异戊醋置换 , 临界点干燥 , 碳 和金 喷
镀 , P ihl ip : s 一 5 05 型扫描电镜观察照相。 供透射电镜观 察 的材 料 以 o . Zm ol / 1 二甲肿酸
钠缓冲液配制的 3外 戊二醛及 2多 饿酸双固定 , 乙醇系列脱水 , 环氧丙烷置换 。 E p on 8 12
环氧树脂渗透包埋 , 60 ℃ 过夜聚合。 超薄切片厚 5 0 一 70 0入 , 醋酸铀染色 , 柠檬酸铅复
染 。 日立 H 一 6 0 0 型 、 P hil ip s 一 4 0 0 型透射电镜观察照相 。
观 察 结 果
(一 ) 各种花粉在大叶杨柱头 上的行为
1
. 大叶杨 X 大叶杨 (对照 ) 人工授粉后 6 小时 ,即可见大叶杨花粉大量萌发 。 萌发
出的质地光滑的花粉管迅速穿人柱头组织 , 沿柱头细胞间隙生长 , 属 “ 短管型 ” 〔花粉萌发
后迅速进人柱头 , 暴露于柱头外的管很短 ) (图版 I , 3 ) 。 偶尔可见长管爬行 , 但最终仍可
进人柱头组织 。 值得注意的是在花粉粒表面可见颗粒状物 (图版 I , 3 ) , 对照薄切片 , 此颗
粒状物不象外壁雕纹 , 却与小麦原生质体由于渗透压调整而分泌的分泌物相似。 推侧与
柱头细胞渗透压的改变有关。
2
. 大叶杨 x 欧洲黑杨 欧洲黑杨花粉在人工授粉后 6 小时亦可大量萌发并迅速穿人
柱头组织 (图版 l , 4) 。 花粉管进人柱头 90 % 以上属于短管型 。 但见一例花粉管扭曲爬
进 ,不进人柱头组织 。 无论短管萌发或长管扭曲爬行的花粉粒及花粉管 , 均可见大量分泌
物。 另外 ,欧洲黑杨不但花粉粒纹饰颗粒较粗大 , 而且花粉管上有波纹 , 因而与大叶杨花
粉有明显区别 (图版 l , 4 ) 。
3
. 大叶杨 x 小叶杨 授粉后 6 小时 , 小叶杨花粉已有萌发 。 授粉后 2 5小时 , 花粉大
量萌发 。 萌发后的花粉管只有约 60 务可顺利穿入柱头组织 , 其余则表现各异 , 如花粉管
不能穿人柱头组织而在其上爬行 ;先端沉积阱抵质不能进人柱头组织 ;先端累积物质以及
花粉管先端破裂而在柱头表面释放内容物。 爬行的花粉管往往略有肿胀 (图版 I , 5 ) 。 另
外 ,小叶杨花粉及花粉管无论伺种表现 ,其分泌物均较上述组合为少 。 授粉后 50 小时 ,许
多花粉粒空瘪 。
4
. 大叶杨 X 响叶杨 授粉后 6 小时 ,即可见响叶杨萌发出来的纤细花粉管 ,直径只为
花粉粒的 1 / 5 , 而一般杨属花粉管直径为花粉粒直径的 1 / 2。 约有 60 外的花粉管可顺利
穿人柱头组织 , 另一些则需爬行一段后进人 (图版 I , 6 ) 。 还有一些花粉管在授粉后 50 小
时仍不能进人柱头组织 。 响叶杨花粉粒及花粉管与小叶杨相似 , 分泌物很少 。
(二 ) 大叶杨柱头组织对各 `组授粉的反应
1
. 大叶杨柱头形态 大叶杨柱头大 , 3 深裂 。 色黄绿 ;花往短而不显著 ` 盛花期 ,往头
i` 植 物 学 报 30 卷
发亮 ,常有粘液分泌。 光镜下 ,粘液对高碘酸一席夫 ( P A s) 反应及汞一澳酚蓝染色均呈 阳
性反应 。 电镜下可见柱头被角质层覆盖 。 授粉后 , 柱头表面晦暗 ,逐渐枯萎 。
2
. 大叶杨 x 大叶杨 (对照 ) 大叶杨未授粉柱头细胞在授粉当天表现生理活跃。 高尔
基体旺盛分泌小泡〔图版 n , 2 ) 。 内质网 , 主要是粗面内质网常盘绕成团分布 ,末端膨大隘
缩形成小泡 (图版 H , l )。 质体内部片层发育不 良。 线粒体内崎较发达 。 细胞质中含较多
的多聚核糖体。 质膜及液泡膜凹凸不平 。 液泡大 , 内含絮状沉积物。 授粉后 25 小时 , 细
胞内部仍较活跃 , 线粒体丰富 , 出现壁旁体。 细胞质向液泡内部侵人 , 并伴有液泡化 (图
版 11 , 3 ) o
3
. 大叶杨 x 欧洲黑杨 授欧洲黑杨花粉 25 小时后 , 大叶杨柱头细胞仍表现活跃。 许
多盘卷成团的内质网沿柱头表面细胞的细胞壁分布 (图版 1 , 4 ) 。 表面细胞线粒体内晴发
达 , 高尔基体旺盛分泌小泡 (图版 1 , 5 ) ; 游离面细胞壁向外突起 , 形成皱褶 。 细胞壁外还
可见尚未分解的角质层 , 角质层中分布具众多分支的通道 (图版 H , 4 ) , 可能与其外存在
的粘液运输有关。 细胞质未见有解体征兆。
4
. 大叶杨 x 小叶杨 在授小叶杨花粉 6 小时后的柱头上 , 可在表面及深层细胞间隙
中发现花粉管。在花粉管先端细胞器丰富 : 含大量线粒体 、 一些内质网及高尔基体 (图版
H l
,
1 ) ;花粉管中部内容物少 , 管壁内沉积拼眠质 ; 花粉管近花粉粒端基本无内容物 ,管外
有一些分泌物 。 与花粉管或花粉粒接触的大叶杨柱头表面细胞游离面壁角质层消失 , 而
常被诱导沉积拼抵质。 这些细胞的内液泡膜常沉积一些电子密度大的不规则物质 ,细胞
器以内质网为多 , 线粒体较丰富 , 质体中大部分被淀粉粒占据 , 片层少 , 基质中有小脂
滴 。 被膜结构不清晰 。 细胞质电子密度加大 , 细胞器电子密度则相对降低。 细胞质初步
液泡化 。 在与花粉管相邻的深层柱头细胞中 , 未发现壁内有阱眠质沉积 , 但细胞膜结构
模糊。 细胞质电子密度高 , 而原先电子密度较高的内质网池 ,则电子密度降低。 同时细胞
质中出现液泡 , 并向中央液泡移动 , 液泡中还含有一些小囊泡 (图版 川 , 2 ) 。 授粉后 2 5 小
时 , 在不与花粉接触的柱头细胞壁外表面 , 仍完好覆盖角质层 。 一些细胞液泡膜内沉积大
电子密度的瘤状物质 ,另一些细胞质及其内细胞器则完好如初 , 但液泡中常含一些巨大的
圆形大电子密度颗粒 , 以未经铀 一铅双重染色的薄切片观察对照判断 , 这些颗粒性质嗜饿
(图版 1 , 3 ) 。 还有一些细胞液泡膜消失 。 与花粉管邻近的柱头细胞细胞质中液泡化严
重 , 但未发现自噬泡。 授粉后 50 小时 ,柱头表面细胞细胞质全面解体 ,在壁外沉积的拼抵
质外还存在柱头分泌物 (图版 vI , 2 ) 。 深层细胞的细胞质中出现大量液泡 (图版 W , l ) ,
曾观察到内质网池中部正在形成液泡的情形 (图版 1 , 4 ) 。 细胞间隙中也有一些小泡 (图
版 IV , l ) o
5
. 大叶杨 x 响叶杨 大叶杨柱头在接受响叶杨花粉后 6 小时 , 与花粉邻近的柱头细
胞壁外已沉积厚的拼抵质 , 拼抵质沉积最厚处可达其纤维素壁的 4 倍。 拼服质壁外亦可
见分泌物 。 细胞质内出现小液泡及空白区域甲、 高尔基体及线粒体较为丰富 。 除高尔基
体槽库分泌的小泡之外 ;细胞质中还存在一些不明来源 、大小不一的小泡群。 膜结构基本
完好 (图版 vI , 3 )。 与沉积拼眠质竣日胞相邻 、远离花粉壁的柱头细胞壁外所授盖的角质层
没有被水解 ,角质层皱折形成乳突状。 细胞内线粒体众多 , 内质网盘绕成团 , 细胞质中出
现液泡。 膜结构模糊不清。
朱 彤等 : 大叶杨组组间杂交花粉 、往头相互作用的超微结构研究
讨 论
(一 )组间远缘杂交中花粉及花粉管的不亲和行为
1
. 花粉的萌发 近来 , 在花粉与雌蕊相互作用的研究中 , 人们对花粉萌发前的粘附 、
水合作用愈来愈重视。 D u m a s 等 【3 , 认为粘附和水合是有 S一基因参与的雌蕊读 出系统与
雄性单位所携带的信息作用的第一个阶段 。 不亲和的种间杂交往往障碍就位于该阶段 。
G a ge t 等 〔,J 在对杨属组间杂交不亲和性研究中也得出了黑杨组花粉不能在白杨组柱头上
粘附的结果 。 但在我们的观察中 , 无论亲和与否 , 父本花粉均可萌发 , 说明其是可以被大
叶杨柱头粘附 、水合的 。 两个结果出现这种差异 , 除了可以解释为父母本在柱头阶段的亲
和程度较高之外 ,我们更倾向于归结为大量授粉而引起的花粉 “ 群体效应 ,’o
2
. 花粉管的异常行为 花粉在大叶杨柱头上萌发后 , 则表现出种的差异。 亲和花粉
与本种花粉萌发迅速 , 基本都以短管形式进人柱头 。 而不亲和的小叶杨和响叶杨花粉则
萌发较迟 ,存在着 G ag e t 等『,]所报道的延迟阻碍现象 ; 花粉管只有 60 务 可以短管形式进
人柱头 ,其余则在柱头上表现为爬行 、先端沉积麟抵质或其他物质以及先端破裂释放内容
物等现象。 这与李文铀等山 所得到的结果相一致。 由于大叶杨对照组合中大叶杨花粉管
很少有这些行为 , 与 st e od e r 等 `切 报道的花粉管在异种柱头上的行为基本上和在同种柱
头上一样相矛盾。 基于我们的实验结果 ,我们同意 lK , ox 等图和 w i il n g 等【切的意见 : 当
杂交障碍表现为花粉柱头作用不亲和时 ,花粉管的异常行为应视为不亲和的表现。
(二 ) 组间远缘杂交中柱头反应的不亲和表现
1
. 角质层的水解和饼眠质的积累 前人对十字花科植物自交不亲和的研究认为角质
层不能被分解是 自交不亲和的原因【10J 。 而在萝 卜属种内亲和及不亲和传粉的研究 中 , iD c -
ik n so n 等切却发现不亲和花粉也可分泌角质酶而穿人柱头乳突细胞。 杨属各组合中 , 大
叶杨柱头与小叶杨 、 响叶杨花粉粒或花粉管接触及邻近区域的角质层消失。 因此我们认
为角质层的主要作用可能在于保护柱头 , 而与花粉作用相关较少 。
柱头细胞壁被诱导沉积阱低质 , 被认为是自交不亲和的形态学指标 , 但在杂交不亲和
组合中能否成立尚未得到肯定 。 在以大叶杨为母本的不亲和组合中 , 柱头上有阱眠质沉
积。 可能与不亲和性有关。
2
. 柱头细胞质及其解体 大叶杨柱头细胞在授粉前和接受亲和花粉后具有明显的分
泌特征 : 丰富的内质网和高尔基体 、 角质层中众多的分支通道和柱头细胞游离面的壁旁
体等。 这些分泌特征在接受不亲和花粉时会因细胞解体而变得不明显 。
有关植物柱头乳突细胞在传粉前后解体退化已有过较多的报道 z[, .67 声旧“ , 各种植物
柱头细胞解体退化时间不一。 一些植物柱头细胞在授粉前即开始退化 , 如棉花 7IJ ; 而愕
梨等植物则在授粉后开始退化『” ]。 大叶杨柱头细胞退化开始于授粉后 25 小时 , 但在接受
不亲和花粉后约 6 小时即开始退化 。 对于解体退化的表现 , 主要集中于内质网池的膨大 、
弯曲 ;细胞质解体 、 出现空白区域 l3[ , ; 变得电子不透明或液泡化 1[ ]。 大叶杨柱头在退化解
体过程中也有上述表现 。 我们认为 ,这种 自体消化很可能与内质网池膨大 、弯曲形成的液
泡有关。 用细胞化学方法曾在其中测出许多水解酶的活性 〔切 , 因此当这些液泡破裂释放
内容物时 , 就会在细胞质中相继出现液泡化和形成空白区域等现象。 在自然传粉和自交
l 8 植 物 学 报 了0 卷
不亲和传粉柱头细胞反应的研究中 , H er er or 等 L6] 和 S e d gl e户 2 ,13] 认为柱头细胞的衰亡
与传粉不亲和性无关 , 而只是与花粉管的营养有关。 由于大叶杨柱头的衰亡快慢与接受
传粉的亲和性相关 , 推测柱头细胞的提前解体退化是雌蕊拒绝反应的一部分。
参 考 文 献
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D P r y o r , z 9 7 2 b : x n t e r s p e e孟f i。 h y b r id i z a t i o n o f 卯 p l a r s u s i n g r e e o g n i -
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S f l少 a e C e 称 e r i c J
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r u r e o f s t ig m a s a n d s t y l e s i n oC m m
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C亡11 S c f ., 3 8 : 斗9一 60 .
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U L T R A S T R U C T U R A L S T U D I E S O N T H E P O L L E N
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B e f o r e P o ll i n a t i o n
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l a s i co a r P a e o n t a i n i n g l a
r g e a m o u n t s o f e n d o
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P la sm i e r e t i e u l u m
, a bu n d a n t d i e t y o s o m e s a n d w e l l一 e v e l o p e d m i t o e h o n d r i a a p p e a r p h y s i o l o g i -
。 a l l y a e t i v e
.
I rs 似 , : e r w a l l s a r e e o v e r ed by a l a y e r o f c u ti e l e 诚 t h n u m e r o u s b r a n e hi n g c h a n n e l s
t o w a r d t h e o u t e r s P a e e
.
W ll e n t h e P o l le n s o f P
.
l a了i o c a r Pa a n d P
.
, 1’g , a a r e d u s t e d , r e s p e e : i v e l y , r o t he s t ig m a o f
P
.
l a s i o c a r P a
, th e d e g e n e r a t i o n o f t h e s t i gm at i e e e l l s a r e r a t h e r s l o w
.
T h e e u t i e l e o f t h e s t i g
-
m a s u r f a e e iu s t a d i
a e e n t t o t h e a l ig h t i n g P o l l e n 15 d i s s o l v e d
,
but tha c e ll e o n t e n t s
s t i l l h a v e
la r g e a m o u n t s o f e n d o P l a s m i e r e t i e u lu m a n d th e s t r u e tu r e o f t h e m em b
r a n e s y s t e m r em a i n s d is
-
ri n e t l y
.
W h e n t h
e P o l l e n s o f P
.
: i m o 忽 t’i a n d P . a d。月 o P o d a a r e f o r e e d , r e s p e e t i v e l y , u Po n t h e s t三g m a
o f P
.
l a s i o c a r P a
, t h e s t i g m a t i e e e l l s d e g e n e r a t e r a p i d l y
.
I n a d d i t i o n t o t h e d i s r u p t io n o f ht e
e u t ie l e
,
h e a v y c a l l o s e i: d e p o s i ted o n r h e w a l l , o f th e s t呈g m a e e ll s a d io i n i n g t h e d r o p p i n g p o l曰
le n s
.
N u m e r o u s v e s i e l e
s a r e f o r m e d b y t h e r o u g h e n d o Pl a s m i e r e t i e u l u m
, a n d t h e e l e e t r o n d e n
-
5 i r y 宜5 i n e r e a s i n g . T h e s t r u e t u r e o f t h e m em b r a n e s y s t e m d is a p P e a r s g r a d u a l l萝 a n d b e e o m es
i n d i s r i n c t
.
O sm i o P h i l i e g l o b u l i o e c u r s i n th e e e n t r a l v a e u o l e
.
P l a s t id s a e e u m u l a t e
s t a r c h g r a
-
1 1 5
。
T h e b e h a v i o r o f P o l le n t u b e s o f P
.
n ig r a 15 s im i l a r t o th a r o f P
.
l a 、 i o c a , P a
.
T h e P o l l
e n
g r a i n s g e r m i n a t e r a p i d l y a n d th e p o l l e n ut be s p e n et
r a t e i n t o t h e s t ig m a a f t e r r l一e s h o r t一 t u b e p a t -
t e n
.
A b n o r m a l be h a v i o
r 15 r a r e
.
A l o t of m i n u t e e
x u d a t e s a P P e a r o n r h e P o l l e n w a l l s
.
A s f o r P
.
l a : i o c a ; P a X P ; i m o 刀 11 a n d P
.
l a :萝o c a r P a X P . a d。 ” o P o d a , o n lv h o lf o f t h e ut -
bes e a n p e n e t r a t e i n t o ht e s : i脚 a a f : e r s h o r t健 z z b e P a r t e n a n d 15 a s s oc i a t e d w i r h c a l l o s e d e p o s i -
t i o n o n th e w a l l s
.
T h e o t h e r h a l f a
r r e s t i n g o n th e s t i g m a s u r f a e e s h o r t l y a f t e
r
g e
r m i n a t i o n
s h o w s a b n o r m a l be h a诚 o r ; s u e h a s s w e l l i n g , e r e e p i n g , bu r s t i n g , t w i s t i n g a n d d i s t o r t io n w i t五
c a l l o s e d e P o s i t i o n o n th e t i P o f th e P o l l e n ru b e s
.
A s a r e s u l t o f o u r e x P e r i m e n t s
,
I t 15 c o n e l u d e d t h a t th e d e g e n e r a t i o n s p e e d o f th e s t i g m a -
t i e e e l l s m a y be a s i g n o f i n e om p a t ib i l i ty a n d rh e e r o s s a bi l i ty i n p r o g a m i e p h a s e m a y a r r a n g e
a s f o l l o w s : P
.
l a了i o c a r P a X P . o z’g r a , P . l a : i o c a r P a X P . 了im o 忿 if , P . l a s i o c a r P a X P · a d。 , o P o d a .
T h e f i r s t on
e 15 e o m P a t i b l e w h il e th e s e e o n d a n d t h e t ih r d a r e i n e o m p a t i bl e
.
K盯 w o r d s I n r e r s e e ri o n a l e r o s s ; I n e om P a ri b i ]i t y ; P o l le n 一 t i脚 a i n r e r a e r i o n ; P o P“加
E x Pl a n a t i o n o f P l a t e s
P l a t e l
T h e m o r p卜o l o g y o f t么e s t i g m a s u r翻 e e o f oP P以“ 5 l a 了io c a r P a a n d t五 e b e l一a v i o r o f 即 l l e 几 t u b e s o f v a r i o u`
IU
a l e p a r e n t o n r h e s t ig am
o f p
.
I a s i o c a
矛
aP a s s e e n i n s EM
.
F ig
.
1 a n d 2
.
U n p o l l i n a t记 告t ig m a s u r f a e e o f p ,
I盯泣配口 r 户a , ` h o w i n g 仁b e : r ig 功 a t i e ` 。 e r o t i o n . x 3 2 2 0 F i g . 3 . A p o l l o n o f 尸. l a s i o c ar P o g e r m i n a t e d 0 0 t h e ` t ig m a
of p
·
, a : 墓o c a r户a a s s e e n i n s EM . T h e r 。 a r e d r o p s o f e x u d a t e s 。 n 即 11e n : u r f ac e ( a r r o , ) . x 15 7 , F ig . 4 . p o l l e n
t u be ` o f p
. 摊 i g r a 拌解 t r a r e s t r a i g正I t一y i n t o 色 li e s ; ig m a o f p . za s i o“ r户口 . N o t e t h e e x u d a t e s o f t h e r o l l e n g r a i n
(碗 0 , )· x 17 2 5 F ig . , . p o一l e n。 。 r 尸. : f二 o n i i 罗 r m i n a t o d 。 n t、 e : t i g m : 。 f p . l a s f o c o r户 a , , IJ o w in g : s w o l l e n t u b e
Cr e p i n g o n t址 s : ig m a r i c : u r f云e。 w i t u 。 b ur s t笼n g : ip ; : n o t h。 : lOP k u t u玩 i : r a t h e : t从 n , w i t h 。 a l l o 、 e
·士e p o s i t e d
6 p
· 又 16 50 F ig . ` . s t r a i g h t e d , , w i , r e d 。 , , d 。 1 , 。再n g 即 zl o n t` 阮 . o f 尸. a汀。 。 o 户o J 。 o n t h e s t i g m a t i c : u r f ac e of p ·
h幼o e a r aP 、 x 82 5
学 报 3 0卷
P la re 11
i Fg
.
1
.
U。和 l li a n te ds ti g m` ti e e c l ls o f尹 . la , i o c a 护P a a s s e o n in T EM . N成 e t卜e ac t i v e l丫 r o u g h : n d o lP a s . 云c
r o r宜e u l u二 ( E R ) l a功。 11a o n ` a r rh e o o etr 0 11(W )
.
M
.
nz i t oc 五o n d r i a , v . va 。的 l e . x 2 7 , 0 0 F玉9 . 2 . A。 。 。 l a r g e d
v
i e w o f a” u n po l l i n a t ed s t ig m a t i e e e l l o f P
.
l一 , i o c a r P叹 a : s e e n i n T E M
.
: 五o w i n g t从 a e d帕 山 e t y o s o m 。 (功 n e a r
t he e
e
l l w a 】1 (W ) , v . v a e u o l e . x Z , 5 0 0 F i g . 3 . A p o r t i o n o f s t i g m a t i e e e l l o f P . Ia , i口 c 口 r Pa , 2 5 h o u r s a f t e r
p o l l i n a t o d b了 比 e P o l l e n s o f .P l a s I’Oc a r P a , a : s e e n in T E M , sh o w i n g l a r g e a m o u n t , o f m i roc h o n d ir a (M ) a n d
e n d o p l a s m i e r e t i` u lu m ( E R )
.
N o t e t h e oc
c u r e n e e o f t h o P a r a m u r al bo d y 阔 B ) a n d t h o f o r m 今 t i o n o f v a e u o l e`
( v )
.
x l l 0 0 0 F ig
.
4
.
A p o r t io n o f s t i脚 a t i e 。 。 Il o f p . l a : i o c a r户a . z , h o u r s a f t e r p o l l i n a t e a 衍 t h e p o l l e n s o f p ·
. 宕宫 , a, “ s e o n i n T E M , s ho w i n g t h e s t i g m a t i c w o l l (W ) 15 e o v e r e d b萝 a Ia y e r o f e u t i e l e ( C u ) w it h n u m e r o 场 s
卜, a o e h i雌 c h a n n e l s t owa r d t h o o u t e r s p a e e . 艺n d o Pl a s m i e r e t i e u l u m ( E R ) , m i t oc ho n d r i a ( M ) a n d p玩 s t id s ( p ) a r e
Pr e ` e . t . x l , . 0 0 F i g . 5 . A po r t i o n o f , t i g咖 t i c e e l l o f P . l a s苗o c a r Pa a s s忱 n in T E M , 2 5五o u r s a f t e r OP l l i n a t e d
b , 即 l l e n s o f p . n ig r a , sh 。。 , n g t le a b u dn 丹 n e o o f m i t oc h o n d r i a (M ) , l a r g e a m o u n t . o f d i c t” ,om e : ( D ) , 。 nd o p l a s -
m i e r e t i e u l u m ( ER ) l a m e l l a e a n d w e l l d ve e l o p e d n u e l e u s (N )
.
V
.
v a e u ol e
.
x 9 0 0 0
P l a t e 111
F ig
.
1
.
p o l l e n t u 阮 (PT ) o f p
.
,矛二。。 八 i n t h e i n t e , e e l l u l a r s s p a沈 o f t五e : t ig m a t i e 。 e zl 。 f p . l a , i o c a , aP . 5
, e e n 玩 T E M , 6 h o u r s a f t o r P o l l inat i o n
, 。h o咐 n g t h e e a l l o s e d t u b e w a l l ( aC ) , a n d t h o e y t o p l a s m 15 r i e h i红 m i -
t“ h on d r i a (M ) a n d 山解 s t i v e v e : i c l es . T址 : t i g m a t i e e e l l a d ia c e n t t o t h e p o l l e n t u b e 10 d e g e n e r a t i , e a n d p r o -
而` 。 a l o t o f d三g e s t i , 似 i e l e : ( D玛 . 义 7 5 0 0 F ig . 2 . S t i g m a t i。 。。 115 o f P . l a , i o c。 , P。 , 6 五o u r s a f t e r p o l l i n a t o d b了
OlP l
e n s o f p
.
s im o n i i a : s e o n i n T E M
, s ho w i n g t l , e d e g e n e r a t i o g e y t o p l a s m a n d t h e d ig e s t i v e 代 s i e l e s ( D码 . N o t己
t h e p l a s t id ( p ) a e e u m u l a t e s t a r e h
.
V
. 性 c uo l e . x 1 20 0 0 F i g · 3 . St ig m a t i e ` e l l o f p . l a ; i o c a r P a , f a r f r o m r he s i t 。
of
a l ig l
l t i n g pol l e n s o f p
.
, `。 o 。 注` , a s . e en in T E M , 2 5 h o u r s 盆f t e r p o l l i n a t i o n , s卜o w i n g t h e e 、、 t i o l e ( C u ) 15 n o t
d i s s o l v o a n d t h e a p p e a r en c e o f t阮 , m i p h i l i e g l o b u l i i n t h e e o n t r a l v a c u o l e . T u从 r` 。 l a r bo di e s ( . ) 、 c ur r ed i n
t h o a d jo i n i n g e e l l
.
x 3 7 , 0 F ig
. 刁. S t ig ln a t i c e le l o f p . l a , i o e a r P a : 5 s e e n i n T E M , 2 , h o u r s a f t e r , l l i n a t e d b y
场 e p o l l。 : o f .P , 1. 口耐泣, s h o w in g t b . , 一 e uo l e f o r m ed b , t h e e n d o P l a s m i e r e t i e u l u m ( E R ) a n d 面 t oc h o n d : i a (M ) i n
t h e e y t o Pl a s口 . T五e u P尹 r e e l l i , d e g e n e r a tde w h i l e t卜e d i c t萝 o 3 o m e 15 a t i l l a c r i代 . x 4 2 0 00
P l at e IV
F ig
.
1
.
A p o r t i此 o f
o 丁 p . , j , o威 , : h o w i n g r卜e
ist 日. . d e c e l l o f p . l a : ioc a , 。 a s s e e n i n T E M , , 0 ho u r s a ft e r 卯 l l i n a t e d
仁“ l e s e e l、 e e o f t五e d i g e s t i讹 va c . o】e s
` y t o Pl a s rn
o f s t ig am
, i t h v i s互b l e n u e l e u s ( N ) , e n d o p l a sm i e r e t i e u l腼 (E R )
( D v)
a n d
a n d t h e c e n t r a l , a e uo l
e (V )
b y t he Po l l e n :
t l
飞e r
! e g e n e
r a t e d
m i t` h o n d r i a (M ) .
. 。叮 f“ e ` e l l o f
.
asnI
` h o iw 。 ` t阮 d心r a 亡 r a 七i o n
F ig
.
3
.
P o r t i o n o f sd ` 几比
P
.
1绍` i o c a r oP
o f e yt o P】。 a . ,
s u r f舀e e e e l l
a s 托 e n i n T E M , 5 0 ho ur o a f t e r OP l l in a td b y t h e
d e即月 i t i o n o f ca l l o : e ou t卜e o u t er ” 】1 a n d :五e
义 7 5 0 0
po l l e n s
讲11i e l亡
o f P
.
Ia ` i o c ` r Pa a , 6 如 u r s a f t . r P o l l i ll a t e d
P ig
.
2
.
P o r t i o。
o f P
. ` i爪。 ,衬 -
(“ r o w) . x 6 0 00
b了 t h e OP l l e n s
讨 P一而 , o oP 寸` , s五。 份 in g t h e h o v i l , d e即: i to d c a l l o s e 4
.
enP
t l】U七吕
, a c u o l。 ( D V ) in t阮 `妙叩加 . . .
, 2肠
翻 . . 已 . 山坛时胡 . d `。 lP et . 恤 . 司
T E M
t h i c k
. u d
a s t h e
如 110份
即 a l l a n d
ca ,i d se
a b u n d a n e e o f
(
.
) a二 P r e s o n r
d ig e s t i v e
主。 t h e
` y t o P la s瓜 x