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· 南 京 农 朴 大 学 学 报 1 6卷
麦的年平均产里也就随之提高 。
(本系 8 6一 88届毕业 产 l毛李德明 、 刘林旺 , 一王四扣 、 徐长兴 . 张伏生 、 蒋风德等同学参加部分试验 一L
作 , 谨表谢惫 )
参 考 文 献
2
3
4
5
鲍 L战 . 稻麦钾素营养诊断 和钾肥施用 _ 土壤 , 19 90 , 2 2 (4) 1 .81 一 l粉
鲍士 H _ , 史瑞和 , 徐国华 . 钾索对水稻 、 小麦产虽和品质的 影响 土堆通报 , 19 90 , 2 ! (3) 二 1 15 一 1 17
徐国华 , 鲍 十 H , 史瑞和 . 土壤钾素供应状况的研究 . 南京农业大学学报 、 1991 , 14`2) : 47 一 52
G r im m e H P o t a s s i u m r e le a 父 i n r e la t io n t o c r o P P r o d l , c t io n 了n 二 P r o c I o th e o n g r I n t P o t a s h I n s t . B e r n :
197 4
,
1 3 1一 136
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. 入下a d i s o n W ics o s in
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,
1 9 8 5
,
11 77 一 1 1 9 9
(
一责任编辑 谢福祥 )
《土地纵横》 杂志创刊
经泪 与、 省新闻出版局 、 江苏省委穴传部批准 , 由亨! _ 琢省土地骨理局 、 字L苏省土地学会和
南京农业大学上地竹理 学院联合 一 i一办的 《 _ 1一地纵横》 杂志 花双月 户{) j几 1 9 3 年 1 月创 刊.
该 刊丢编 由 } ;址 J : 农业大学 一 l 一万茂教授担任 。
该 阵将在 “ 一 个中心 , 内 个基本汽 ” 丛本路线折导 卜, 遵抓 ` 百花齐放 、 百家争鸣 ”方针 ,
有传党和国家有 关 _ L地政策 . 法规 、 井就现实中的有 关上地问题进行探讨 。 主要栏 日有 : 土
地 (资源 ) f之、 价 、 上地产权 . 地产经营 飞 地产 ,厅场 、 _卜地开发 、 上地金融 、 _ L地法规 、 土地
财务 、 _ L地 现划 、 上地 史、 生态环境 、 _上地政策 ` l _地教育从房产制度等 。
南 京 农 业 大 学 学 报1 6卷
欧洲葡萄 (犷 ., i n ife r a L i n n ) 、 宿晓红葡萄 ( S u x i a o h o n g ) 、 华东葡萄 (犷 . 那 e u d o r e l i e u la t a W . T .
W a n g )和葛蕊葡萄 (犷 . 加 x o o s a T h u n b ) 。 其中欧洲葡萄代表品种玫瑰香 (M u s e a t H a m b u r g ) ,
美洲葡萄代表品种康可 ( C V . co cn or d) , 由南京农业大学提供 , 宿晓红葡萄由宿迁市引人 , 华
东葡萄 、 毛葡萄 、 桑叶葡萄 、 葵契葡萄 、 葛蕊葡萄等植株为上海市农科院提供的野生葡萄嫁
接苗 , 试材中 , 除欧洲葡萄 、 关洲葡萄和宿晓红葡萄为雌雄同株 , 其余为雌雄异株 .
同工酶试验取样 , 经过 比较试验 , 确定酷酶同工酶用新梢端部展叶 3一 4 d 的幼叶 , 过
氧化物酶测定取枝蔓中部展叶 30 一 4 Od 的成熟叶 , 花粉粒取样则于始花期 (4 一 6 月 ) , 选发育
良好的雄株花序或两性花序 。
L l 同工酶测定
过氧化物酶和酝酶同工酶采用双垂直平板聚丙烯酸胺不连续系统凝胶法测定 . 酚酶浓缩
胶浓度 3 . 13 % ; p H 6 . 5。 酝酶分离胶浓度 10 . 06 % ; p H S . 9 。 过氧化物酶浓缩胶浓度 3 . ” % ;
p H 6
.
8
。 过氧化物酶分离胶浓度 8 . 76 % ; p H S . 9 。 电极缓冲液为 0 . o 49 m ol / L T ir s一一 甘氨
酸 , p I J S . 3 。 电 ] 1短2 2 OV , l付I飞IJ 4 一 s h , 温度 4 ℃左石 。
过氧化物酶采用醋酸联苯胺法染色 , 酷酶采用坚牢蓝法染色 。
1 2 S F M 花粉制样与观察方法
始花期从 田间取 回花药 , 在室温 }; 白然干燥 , 记 后 , 收取花粉 , 放人干燥器中备用 ,
样品真空镀金 2 0一 30 拜m , 用 H I T A C H I一 545 0 和 P H r l l P一 505 扫描电子显微镜观察 , 工作
l匕11万 1 5 k V 一 ZOk V 。 分别选取 ZO O x , 4 0 O x , 1 2 5 O x , 2 0 0 0 x , 3 2 5O x , 4 0 0 O x 等视野
观察 花粉扫描特征 , 主要依据 A h m e d u zla h 等 ` ’ 〕 的分类方法 , 记录极轴 (P ) 、 赤轴 ( E ) 、 形
状 、 发芽沟扩展性 表而纹饰特点 、 网眼形状 孔网类型等特征 . 葡萄形态分类系统参照俞
德浚等 〔? , 方法 。
2 结果与分析
2
.
1 宿晓红与不同葡萄种同工酶借型比较
21
.飞 酌酶同工 酶 观察结果证 明 : 宿晓红 葡萄的第 1一 3 酶带 (E : 、 E Z 、 E 3 )与其它种基木
相似 , 其第 4 条酶带 (E , 0) 为一高迁移 率带 , 欧 洲葡萄 也具有这一酶带 , 两者酶谱距离为
住0 ( 农 ! ) , 栩似性最大 , 由此推测两者亲缘关 系最近 , 华东葡葡雌雄株和宿晓红葡萄酶
i普之 !) lj的差异分另」农现在 E 7 和 E g 上 , 雌株比宿晓红蔺萄多 了一条酶带 ( R : .0 3 2 6) , 两者
酶 i普距离系数为 0 2 0 , 表明华东偷萄是仅次 J几欧洲葡萄的近缘种 。
2 1 2 过氧 化物酶同工酶 由过较化物再引 .d工酶的 i普刑 吞出 , 其酶潜比酷酶酶带多 , 宿晓
红荀萄共有 7 条的带 , 其中有 5 条与欧洲葡萄相卜;i , `已们分别为 P 、 、 P Z 、 P 3 、 P S , P 。 , 而且
酶带的迁移率亦相同 , 只是在着色释度上有左异淤12) , 其酶 i普距离系数为 0 . 2 0( 表 2) , 小于
其它各种 , 农明两者具有川似的遗传基础 。 华 东能萄的 P , 、 P Z 、 P , 三条酶带与宿 晓红葡萄
一致 , 华东葡萄的 P , (R f 二 2 0 .科 4 )两带在宿晓红伪萄酶 i普中不存在 , 该种雌 、 雄株与宿晓红
葡萄的酶 i普距离系数分别为 0 . 50 和 0 . 0 0 , 亲缘关系亦较近 。
因此 , 两种 {。吐主酶的两 i踌冲离都显示出宿晓红蔺萄与欧洲偏萄亲缘关系最近 , 其次为华
东他萄 。 前带密度较大的仄域一般都在慢带区 , 但慢带区种间差异不明显 , 分析时要慎重对
待 。 快带区分离较好 , 酶带形式多变 , 因种而异 , 是区别各种葡萄的特征酶区 .
4期 黄 非等 :宿晓红葡萄与葡萄属有关种亲缘关系初探 5 l
表 1各种葡萄酷酶同工酶酶谱距离 .
T ab lei 1 D st an ca e rti o of E T Sz y口 og a rmo sf va r lo u s sP e ei e.
种 类
T yp e
A D GH K
0
0
.
2 0 0
0
.
5 0 0
.
57
0
.
2 5 0
.
4 0
0
0
.
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ABCDEFGKHLJ1
A ~ L 见图注
. 脑谱距离 = 两分类群不同酶带数 / 两分类群酶带总数
D i s t a n e e = D i fc r e n t i s o z y m e b a
n d s b e t w e e n 2 g r o u P e s / s u m o f t h e b a n d s o f th e b o t h
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图 1 葡萄酷酶同工酶酶谱
F ig
.
1 E S T z y m o g r a m s o f g r a P e s
图 2 葡萄过氧化物同工酶酶谱
F 19
.
2 P e r o x i d a sc z y m o g r a m s o f g r a P e s
A— 毛葡萄 9 叭 q u i n q u a n g u la r众: B— 毛葡萄忿 叭 q u in q o a n g u la r众: C— 桑叶葡萄早 犷 刀c
ifo ila ; D一一桑叶葡萄 古 叭 瓜 ifo ila ; E一一美洲葡萄 v . aI br us ca ; F一一羹黄葡萄早 犷. a .vd itr cl 。 ;
G一一葵羹葡萄古 V . a d ; , r i e , a : H— 欧洲葡萄 认 v i n ife r a ; r— 布古晓红葡萄 s u x i a o h o n g : J—华东 葡萄 早 犷 p , e u do r , , t i 。 u la za : K一一华东 葡萄 忿 卜 p s e o do r e , ic u al , a : L一一葛蕊葡萄 早 叭
介 x u o s a ; S— 标准酶谱 S ta n d a r d 却m o g r a m
南 京 农 业 大 学 学 报 1 6卷
表 2各种葡萄过氧化物酶同工酶酶谱距离
Tabl e D 2is tn ae er at io of E PR之ym o gr am sof vr aio us s Pe e ies
种 类
Ty pe
A B
0
C DE FH G
0
.
2 0 0
0
.
7 5 0
.
3 8
0
.
0 90
.
7 8 0
.
5 6
0
.
8 09
.
7 8 0
.
5 0 0
.
1 4
0
.
67 0
.
5 6
0
.
7 5
0
.
25
0
.
63
0
.
5 0 0
.
6 0
0
.
7 1 0
.
5 0 0
.
3 7 6 6 0
0
.
67 0
.
7 1 0
.
3 6 0
.
7 8 0
.
7 8 0
.
67 0
.
5 0 0
ACE D H G F B
0
.
7 1 0
.
7 5 0
.
63 0
.
8 0 0
.
7 8 0
.
7 0 0
`
7 5 0
.
2 0 0
0
.
8 6 0
.
8 8 0
.
7 5 0
.
3 6 0 0
.
8 0 0
.
7 1 0
.
2 0 0
.
5 0 0
0
.
8 6 0
.
8 8 0
.
7 5 0
.
3 6 0 0
.
67 0
.
7 1 0
L 8 6 0 0
.
8 09
.
3 6 0
.
5 0 0
.
43 0
.
7 0 07 5 0
67 0
.
7 1 0
.
40
7 1 0
.
57 0
.
5 0
,
口
,
了ù、ú
0
甲
50 0
注 二 A ~ L 见图注 。
葡萄雌雄株显现不同的酶 i普特征 , 雄株一般比雌株多一条酶带 , 如过氧化物同工酶中 ,
毛葡萄 (尺: 0 . 5 3 5 ) , 桑 t , }葡萄 (大。 0 . 3 2 3 ) , 华东葡萄沐 : 0 . 4 9 4 ) 。 但也有例外 , 如葵莫葡萄
等 , 是否雄株酶带没有显示出来 , 还有待进一步研究 。 这些特征可以用来 一旱期鉴定雌雄株 。
欧洲葡萄与东亚种群葡萄相比 , 酶带总数偏少 , 但酶带宽度较大 , 活性高 , 宿晓红葡萄
也有相 卜d情况 。 测定的几种中闰野生仙萄中 , 与宿晓红们萄酶 i普最相似的是华东葡萄雄株 ,
除特征酶带外 , 在酷酶卜J上酶上 , 它们共有第 1() 酶带 (R 「 0 . 4 1 8) , 在过氧化物酶同工酶上共
有第 3 酶带 (R 。 0 .巧 7) 1 1丁与其它种区别 。
贺普超 〔 ’ 〕 研究指出 , 葡萄同上酶具有阶段特异性和器官特异性 。 木试验结果显示 , 随
叶龄变化 , 酶 i普会有差异 。 酷酶同上酶址仕取样叶龄为展叶 3一 5d 幼叶 , 过氧化物酶同工
酶为展 11}· 3 0一 4 Od 的成熟 21} .
晃无疾 〔礴, 等对过轼化物同工酶研究结果表明 , 玫瑰香 、 毛葡萄和山葡萄具有迁移率相
同的酶带 , 但活性不同 , 本试验 中发现酶带着色程度差异很大 , 也显示酶活性的差异 .
.2 2 宿晓红与不同葡萄种花粉形态结构的比较
电镜扫描显示 , 欧洲伯萄与宿晓红葡萄极轴都是 28 . 0 # m , 另外 , 发芽沟两端扩张性和
表而网眼形状具有相同特征 , 有明显 的 1.任源性 。 (图 3一 1 , 2) , 显示 了宿晓红与欧洲葡萄亲
缘关系较近 。 宿晓红询萄与华东葡萄化粉农而纹饰共同点主要农现在纹饰特征 (图 3一 3 , 5) ,
据此批测宿晓红仙萄与华 东葡萄也有较密切的亲缘关系 。
电镜观察的几种葡萄花粉一般为长球形或超长球形 , 都是三沟类刑 。 花粉表而有两种主
要类刑 : 一是穴状为主结构 , 如桑 “ l一葡萄 ( 1冬! 3一 4) ; 二是网脊状为主结构 , 如宿晓红葡萄“钊
4期 黄 非等 :宿晓红葡萄与葡萄属有关种亲缘关系初探
3一3)
. 一般花粉壁表面 , 近赤道而网脊状较为明显 , 靠近极端则穴状特征突出 .
图 3 了污晓红与几种俪萄的电镜扫描照片
F 19
.
3 P h o t o e s o f S u x ia o h o n g a n d cs v e r a l v iz o b y cs a n n in g e le e t r o n m ie r o s e o p e
其中 , 最长的花粉是桑叶葡萄 , 最短 的花粉是葛蕊葡萄 , 两者相差不足 20 % , P / E 最
大的是桑叶葡萄 , 为 .2 05 , 最小 的是要莫葡萄 , 为 1 . 51 , 而不是 网脉葡萄 。 这与 ·贺普
超 川 报道网脉葡萄花粉为球形不一致 。
王炳章认为 〔5〕 , P / E > 2 则抗逆性强 。 本试验中 , 只有 宿晓红 、 华东葡萄和桑 叶葡萄
具有该特征 , 他认为花粉粒表而孔洼多少与产量呈正相关 , 可以用此观点解释宿晓红葡萄产
量较低现象 . 另外 , 因为花粉外壁网眼由大到小的变化可能是进化趋势 ` 6 , , 欧洲葡萄中的
玫瑰香网眼明显小于宿晓红葡萄 , 后者更为原始 。
从 图 3一 3 , 5 ,叮以看出 , 宿晓红柑萄花粉表而纹饰具有华东葡萄的网脊状为主的特征 , 表
现为宽网大孔 , 网眼较稀 , 孔眼较大 , 网脊较明显 , 这些相似之处显示出宿晓红葡萄与华东
南 京 农 业 大 学 学 报 1 6卷
葡萄具有一定的同源性 .
3小 结
通过研究 , 作者初步认为 : 宿晓红葡萄与欧洲葡萄的亲缘关系最近 , 并与华东葡萄具有
较近的亲缘关系 , 经过长期栽培驯化 已成为一个适应当地生态条件的优良酿造品种 , 它的
某些性状特征 , 具有较高的育种价值 , 为一宝贵的地方品种和种质资源 .
参 考 文 献
A hm e d u ll a h M
.
P o lle n m o r p h o l o g y o f v iz行 e u lt i v a r s u s i n g sc a n n in g e l c tr o n m ic or sc o yP a n d t h e 幻g n in ·
c a n ce o f p o lle n e la s s iif e a t io n i n g r a讲 i m p r o v e m e n t p r o g r a m m e . A m p e l o g r a p h y , 1989 , 54 ~ 56
俞德浚 . 中国果树分类学 . 北京 : 农业出版社 , 1979 , 172 ~ 193
贺普超 . 我国葡萄属野生种花粉电子显微扫描的研究 . 中国果树 , 19 82 , (2) : 43 一 4 5
晃无疾 、 牛淑贞 . 我国葡萄野生种质的同工酶研究初报 . 中国果树 , 19 81 , (4) : 43 ~ 45
工炳章. 葡萄花粉微结构与生物特性的相关性 . 葡萄酿酒与栽培 , 19 8 7 , (1 ) : l一 2
叶葫民 . 柑桔花粉形态的研究 . 中国农业科学 , 19 82 , (5) : 30
(责任编辑 谢福祥 周超纲 )