全 文 ：14 种紫珠属植物醇提取物抑制磷酸二酯酶 4
活性初探
杨璐1，张天华2，白旭1，吴一诺2，罗海彬2，谢丽霞1，何细新1，彭光天1
(1．广州中医药大学 中药学院，广东 广州 510006;2．中山大学 药学院，广东 广州 510006)
摘要:目的 研究 14 种紫珠属植物枝叶提取物对磷酸二酯酶 4(PDE4)的抑制作用。方法 采用体积分数
95%乙醇回流提取法提取药材，以标记液体闪烁计数法检测提取物对 PDE4 的 D2 亚型靶标(PDE4D2)
的抑制活性。结果 测试体系的药物终质量浓度为 0． 2 g /L时，毛叶老鸦糊、裸花紫珠对 PDE4D2 的抑制
率分别为 86． 78%和 85． 76%，其他 12 种紫珠属植物的抑制率则均在 90%以上，其中大叶紫珠的抑制率
为 98． 63%。结论 紫珠属植物对 PDE4 靶标具有明显的体外抑制作用。
关键词:紫珠属;磷酸二酯酶 4;抑制作用
中图分类号:Ｒ285． 6 文献标志码:A doi:10． 3969 / j． issn． 1006-8783． 2015． 03． 010
文章编号:1006-8783(2015)03-0328-04
Inhibition of the crude extracts from fourteen species of Callicarpa Linn． plants towards
Phosphodiesterase-4
YANG Lu1，ZHANG Tianhua2，BAI Xu1，WU Yinuo2，LUO Haibin2，XIE Lixia1，HE Xixin1，
PENG Guangtian1
(1． School of Traditional Chinese Medicine，Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou，510006，
China;2． School of Pharmacy，Sun Yat-Sen University，Guangzhou 510006，China)
Abstract:Objective To investigate the inhibition of the fourteen Callicarpa Linn． medicinal plants towards
phosphodiesterase 4 (PDE4)in vitro． Methods Callicarpa Linn． Chinese medicines were extracted with
95% ethanol reflux and the inhibition rates against PDE4D2 were determined out by liquid scintillation
counting method． Ｒesults When the concentration of the crude extract was 0． 2 g /L，the inhibition rate of
C． giraldii var． subcanescens and C． nudiflora against PDE4D2 were 86． 78% and 85． 76%，respectively．
Those of the other 12 species were more than 90%，especially that of C． macrophylla was 98． 63% ．
Conclusion Callicarpa Linn． plants showed remarkable inhibitory activities towards PDE4 in vitro．
Key words:Callicarpa Linn．;phosphodiesterase 4 (PDE4);inhibition
收稿日期:2015-01-13
基金项目:国家自然科学基金项目(21103234，81373258);广东自然科学基金团队项目(S2011030003190);广州市科技计划项
目(2014J4100165)
作者简介:杨璐(1990—)，女，2012 级硕士研究生;通信作者:彭光天，男，博士，讲师，从事药用植物资源和分类研究，Email:
jxpeng0813@ 126． com。
网络出版时间:2015-05-26 9:22 网络出版地址:http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /44． 1413． Ｒ． 20150526． 0922． 001． html
马鞭草科紫珠属 Callicarpa Linn．植物约有 190
余种，主要分布于热带和亚热带亚洲以及大洋洲，我
国约有 46 种，主要分布于长江以南［1］。国产紫珠属
可作药用的约 30 种(含种下单位)，其中 24 种有止
血作用［2-3］。杜虹花 C． formosana、广东紫珠 C．
kwangtungensis 和大叶紫珠 C． macrophylla 为 2010
年版《中国药典》一部收载［4］。此外，紫珠 C．
bodinieri、白毛紫珠 C． candicans、白棠子树 C．
dichotoma、老鸦糊 C． giraldii和红紫珠 C． rubella 为
一些地方中药材标准收载［5-8］。
据文献报道，杜虹花、广东紫珠和大叶紫珠均有
散瘀止血、消肿止痛的作用，用于衄血、咯血、吐血、
便血、外伤出血、跌打肿痛等的治疗［4］;裸花紫珠总
黄酮有抗感染、止血作用，水煎液能明显抑制二甲苯
广东药学院学报
Journal of Guangdong Pharmaceutical University Jun． 2015，31(3)
所致的小鼠耳郭肿胀和角叉菜胶所致的大鼠足跖肿
胀，体现良好的抗感染作用［2，9-13］。但是，目前紫珠
类药材止血、抗感染的作用机制尚不明确。磷酸二
酯酶 4(phosphodiesterase 4，PDE4)是降解细胞内第
二信 使 3，5-环 磷 酸 腺 苷 (cyclic adenosine
monophosphate，cAMP)的关键酶，参与多种细胞功能
调节，主要存在于免疫炎症细胞内，是大多数炎症细
胞 cAMP浓度的稳态调节者，是一类新型抗感染靶
标。PDE4 抑制剂可抑制细胞内 cAMP的降解，参与
多种炎症反应调节［14-16］。为揭示紫珠属植物的抗
感染作用机制和寻找新型 PDE4 抑制剂，本文选取
紫珠属 14 种植物为对象，研究其枝叶 95%(体积分
数，下同)乙醇提取物对 PDE4 的抑制作用。
1 材料与方法
1． 1 仪器与试剂
UP200S 细胞破碎仪(德国 Hielscher 公司);
6K15 型离心机(Sigma 公司);Vortexgenie 涡旋仪
(美国 SI 公司);BioPhotomer 分光光度计(德国
Eppendorf 公司);Ni-NTA 亲和色谱柱 (Qiagen，
Valencia 公 司);Tricarb2910 液 体 闪 烁 计 数 器
(PerkinElmer公司)。
水、95% (体积分数，下同)乙醇、Tris(Bio-
Ｒad)、MgCl2(天津市大茂化学试剂厂);二硫苏糖醇
(Bio-Basic Inc．);氚代环腺苷酸(GE Healthcare);
二甲基亚砜(Oceanpak Alexative Chemical);BaOH2
溶液(Sigma 公司);ZnSO4(Sigma-Aldrich);所有试
剂均为分析纯。
1． 2 药材
本文所用紫珠属植物材料的相关信息见表 1，
白毛杜虹花 Callicarpa albociliata G． T． Peng，Y． Liu
et X． Lu为本课题组发现的 1 个新种(待发表)，其
余均为野外采集或引种栽培，凭证标本由广州中医
药大学中药学院药用植物教研室彭光天博士鉴定，
存放于该校药用植物标本室(GUCM)。
1． 3 样品的提取
将上述紫珠属植物枝叶药材阴干，粉碎。取 10 g
生药，加入 10倍量的 95%乙醇，加热回流提取 1 h，滤
过，滤液旋转挥发，浓缩至浸膏状，备用。
1． 4 PDE4 活性测试
1． 4． 1 样品的配制 将上述药材提取物的浸膏，分
别用二甲基亚砜配成质量浓度 2． 0 g /L 的溶液，取
0． 1 mL分别稀释 10 倍，制成质量浓度为 0． 2 g /L的
溶液。
1． 4． 2 样品抑制 PDE4D2 的活性测试 PDE4 可分
为 PDE4A、PDE4B、PDE4C、PDE4D 4 个亚型，分别
由相互独立的 A、B、C、D 4 个基因编码。靶标蛋白
PDE4D2 是 PDE4D 中的一个类别，其表达与纯化见
文献［17-18］。将表达好的蛋白靶标用于活性测试:首
先，取 1 /100稀释的氚代 cAMP(20 000 ～30 000 cpm)
4 μL，加入缓冲液(50 mmol /L Tris pH 8． 0，10 mmol /L
MgCl2，0 ． 5 mmol /L 二硫苏糖醇)稀释至 58 μL，
表 1 14 种紫珠属植物来源
Table 1 Ｒesourse of fourteen species of Callicarpa Linn． plants
编号 中文名 拉丁名 采集地 凭证标本
1 尖尾枫 C． longissima 广州中医药大学(大学城校区)时珍山 刘宇 6
2 华紫珠 C． cathayana 广东阳山秤架南岭自然保护区 彭光天 11067
3 紫珠 C． bodinieri 浙江清凉峰引种至广州中医药大学时珍山 彭光天 14556
4 木紫珠 C． arborea 印尼东加里曼丹 彭光天 12031
5 白毛杜虹花 C． albociliata 广州中医药大学(大学城校区)时珍山 刘宇 5
6 白棠子树 C． dichotoma 福建三明市宁化县下巫村 吴健荣 149
7 裸花紫珠 C． nudiflora 广州中医药大学(大学城校区)时珍山 刘宇 2
8 全缘叶紫珠 C． integerrima 广东流溪河国家森林公园 彭光天 11041
9 枇杷叶紫珠 C． kochiana 广州中医药大学(大学城校区)药王山 刘宇 1
10 杜虹花 C． formosana 广州中医药大学(大学城校区)时珍山 刘宇 4
11 钩毛紫珠 C． peichieniana 广州市流溪河国家森林公园 彭光天 11082
12 红紫珠 C． rubella 广东信宜县天马山 彭光天 11059
13 大叶紫珠 C． macrophylla 广州中医药大学(大学城校区)时珍山 刘宇 3
14 毛叶老鸦糊 C． giraldii var． subcanescens 广东肇庆端州区七星岩 刘宇 23
923第 3 期 杨璐，等． 14 种紫珠属植物醇提取物抑制磷酸二酯酶 4 活性初探
然后加入质量浓度为 0． 2 g /L 的药物溶液 2 μL，混
匀，再加入已用缓冲液稀释的确定浓度的蛋白质溶
液 40 μL，在 25 ℃下静置反应 15 min，最后依次加
入 0． 2 mol /L ZnSO4 200 μL和 0． 2 mol /L Ba(OH)2
溶液 200 μL，终止 cAMP和 PDE4D2 的酶促反应，振
荡混合，14 000 r /min离心 5 min，取上清液 430 μL，
加入闪烁液 2． 5 mL，振荡混合后用液体闪烁计数仪
测定。按以下公式计算抑制率:
抑制率 =(1 －
1 － CPM样品加定量靶蛋白
1 － CPM空白样品加定量靶蛋白
)× 100%，
式中:CPM为每分钟计数率。
2 结果与分析
各个样品对 PDE4D2 的抑制活性见表 2。结果
显示，14 种紫珠均对 PDE4D2 表现一定的抑制作
用。测试体系的药物终质量浓度为 0． 2 g /L 时，所
有测试样品的抑制率均在 80%以上，除毛叶老鸦
糊、裸花紫珠外，其他 12 种紫珠样品的抑制率均大
于 90%，其中大叶紫珠抑制率为 98． 63%。若将测
试药物终质量浓度换算成对应的生药质量浓度，尖
尾枫生药质量浓度为 1． 2 g /L 时，抑制率达 90．
30%;毛叶老鸦糊活性最低，生药质量浓度为 39． 9
g /L时，抑制率仅为 86． 78%。
表 2 14 种紫珠属植物茎叶粗提物对 PDE4D2 的抑制率
Table 2 Inhibitory rates of crude extracts from fourteen
Callicarpa plants towards PDE4D2
药材
编号
测试体系的药物
终质量浓度 /(g·L －1)
生药质量浓度 /
(g·L －1)
抑制率 /
%
1 0． 2 1． 20 90． 30
2 0． 2 2． 58 91． 46
3 0． 2 2． 66 90． 54
4 0． 2 3． 20 95． 69
5 0． 2 3． 33 95． 31
6 0． 2 3． 63 90． 55
7 0． 2 3． 69 85． 76
8 0． 2 4． 13 93． 77
9 0． 2 5． 24 94． 13
10 0． 2 5． 33 93． 94
11 0． 2 6． 46 95． 70
12 0． 2 6． 98 95． 11
13 0． 2 8． 40 98． 63
14 0． 2 39． 9 86． 78
3 讨论
PDE4 靶标是一类抗感染新型靶标，其抑制剂
广泛用于多种炎症相关疾病，如哮喘、肠道炎症、关
节炎等的治疗中。紫珠属药用植物多数具有止血、
消肿作用。大叶紫珠和裸花紫珠体现良好的抗感染
作用［2，9-13］。本文结果表明，14 种紫珠属植物含有
抑制 PDE4 活性组分，均有不同程度抑制 PDE4D2
靶标的作用，提示紫珠药用植物的抗感染作用可能
与 PDE4 有关，也为进一步研究它们的抗感染机制
和从这些有潜力的组分中寻找新型 PDE4 抑制剂提
供了依据。
PDE4 靶标与老年痴呆的治疗相关［20］，据文献
［21］报道，紫珠属植物白棠子树具有抗老年痴呆作
用，而本文结果显示白棠子树能够抑制 PDE4 靶标，
这为进一步研究白棠子树抗老年痴呆的作用机制提
供了一定的依据。
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(责任编辑:陈翔
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)
美国 FDA批准 Avelox用于治疗鼠疫
美国 FDA于 2015 年 5 月 8 日批准 Avelox(moxifloxacin，莫西沙星)用于治疗鼠疫，包括肺鼠疫和败血性鼠疫。
Avelox同时也获准用于成人预防鼠疫。
鼠疫是一种极其罕见但致命的细菌感染，分为淋巴结鼠疫、肺鼠疫和败血性鼠疫 3 种。全球每年仅发生
1 000 ～ 2 000 个鼠疫病例。
鼠疫的致病菌是鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)。人感染鼠疫的途径主要有带菌跳蚤叮咬、接触感染的人和
动物、实验室接触等。鼠疫耶尔森菌还可能被用作生物恐怖袭击的武器。
FDA批准 Avelox时采用了“动物疗效规则”(Animal Efficacy Ｒule)，因为鼠疫太罕见，基本上无法进行人体疗
效试验，因此只需足够的动物试验证明其疗效就可以了。
Avelox的动物疗效试验是在 20 只在试验室被人为感染鼠疫的非洲绿猴身上进行的。20 只非洲绿猴被随机
分成两组，动物感染鼠疫并出现发热症状 4 h后分别服用 Avelox和安慰剂各 10 d，结果服用 Avelox的 10 只动物全
部存活，而服用安慰剂的 10 只动物全部死亡。
Avelox常见的不良反应包括恶心、腹泻、头痛和眩晕等。同时 Avelox 的说明书含有加黑框的警告性文字，提
醒服药患者可能会增加患肌腱炎和发生肌腱断裂的风险，另外重症肌无力患者服药可能会使肌无力症状恶化。
其他不良反应有过敏反应、肝损伤、血常规异常、神经系统症状、心率异常等。但由于鼠疫的极度危险性，与其治
疗效用相比，所有这些不良反应都是其次的。
Avelox属喹诺酮类抗菌药，由拜耳公司(Bayer HealthCare Pharmaceuticals)生产。
(来源:美国 FDA政府公告，2015-05-08 夏训明 编译)
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