全 文 ：中 国 药 科 大 学 学 报
J o u r n a l o f C h i n a P h a r m a e e u t i e a l U n iv e r s i t y 1 9 9 5
,
2 6 ( l )
: 8 ~ 1 0
东亚和北美产红豆杉属七种植物中
紫杉醇及短叶醇的含量
高山林 朱丹妮 周荣汉 K u t n e y J P `
(中国药科大学中药研究所 , 南京 2 1 0038 ; ’ 加拿大哥伦比亚大学化学系 )
摘 要 应用高效液相色谱分析了东亚产四种红豆杉和北美产三种红豆杉的紫杉醇和短叶醇
含量 。 结果表明 , 短叶红豆杉树皮中紫杉醇含量最高 ,其次为中间红豆杉树皮 ;东亚产四种红豆杉枝
叶中 , 云南红豆杉枝叶中紫杉醇含量较高 , 东北红豆杉和美丽红 豆杉次之 ;短叶醇含量则以短叶红
豆杉针叶最高 , 东北红豆杉及云南红豆杉次之 。
关键词 红豆杉 ; 紫杉醇 ; 植物资源
全世界约有 12 种红豆杉属 ( 7 ,ax 潞 L . )植
物 , 我国产五种 , 主要分布在北半球温带和亚
热 带 。 自 1 9 7 1 年 W a n i 等从 短 叶 红 豆 杉
(7’ · 加 ve ifo l功 )的树皮中分离得到抗癌活性成
分紫杉醇 (t ex of )后 〔`〕 , 美国 、 加拿大等国投入
了大量人力物力 ,对红豆杉资源 、 化学成分及
生理活性 、 人工合成 、 生物转化和细胞培养等
方面进行了广泛深入的研究 。 药理学研究表
明 , 紫杉醇具有独特的抗癌机理 , 对乳腺癌 、
子宫癌 、 白血病 、 肺癌等都具有较好的治疗效
果 , 最近经 F O A 正式批 准应用 于临床 。 据
1 9 3 年在美 国加利福 尼亚召开的国际红 豆
杉资源会议测估 , 紫杉醇正式应用于临床后 ,
每年将需 要 2 0 gk 以上 , 按现在 提取得率
0
.
0 3%计算 , 每年要收取 70 0 吨树皮来提取 ,
现有的红豆杉天然资源只够用 5一 10 年 。 因
此红豆杉资源的研究和合理利用引起 了广泛
重视 。 W i t h e r u p 曾对北美产的四种红豆杉的
针叶进行 了紫杉醇含量的测定 , 结果表明针
叶中含有 0 . 0 1% 一 0 . 01 % 紫杉醇川 ; 徐 礼
桑等应用高效液相色谱法测定了中国红豆杉
五个样品中紫杉醇 的含量为 0一 0 . 03 5 % (样
品部位不详 ) 〔3 〕 ; 罗士德等分析了云南三种红
豆杉科植物 ,三种三尖杉科植物和一种罗汉
松科植物不同部位的紫杉醇及其同系物巴卡
亭 ( b a e e a t in l ) 和赛法 罗马 宁 ( e e ph a lo m a n -
in en )的存在和含量 [’] ,但未见有我国几种红
豆杉植物的叶和枝条中紫杉醇及紫杉烷类化
合物含量的报道 。 为扩大利用部位及合理开
发我国药用植物资源 ,我 们对我国产四种红
豆杉和北美产三种主要红豆杉进行了叶或树
皮中紫杉醇及短叶醇 s1[ 含量测定 。
实验部分
1
.
1 材料和仅器
材料 : ( 1) 中国红豆杉 7 at 刀招 clt ~ ( iP lg
.
)
R he d
. 采自陕西城固 ; ( 2) 美丽红豆杉 T . ma 沙 ie
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.
) 5
.
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.
H u 采 自陕西城 固 ; ( 3 )
东北红豆杉 7 , . 〔、 , s尹诚 1勿 S ie b . e t z u e e 采 自黑龙
江宁安 ; ( 4) 云南红豆杉 望 . y7, n an en sn is c h en g e t
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. 采自云南 丽江 ; ( 5) 桨果红豆杉 望 . 旅仪喇口
L
. 采 自加 拿大哥伦 比亚大学 植物园 ; ( 6) 中
间红豆杉 T . 服过。 C V iH o ks i 采 自加拿大哥伦
比亚大学植物园 ; ( 7) 短叶红豆杉 T . 加 e可议如
N ut
. 采自加拿大哥伦比亚大学植物园 。
以上 ( 1) ~ ( 4) 样品采集后自然干燥 , ( 5)
收稿 日期 1 9 9 4一 0 5一 19
l 期 高山林等 : 东亚和北美产红豆杉属七种植物中紫杉醇及短叶醇的含量
一 ( 7) 样品采集后冷冻干燥 2~ 3 d 。
标准品 : 紫杉醇 ( at x ol ) 由美国癌症研究
所提供 , 短叶醇 b( r ve if of io l) 由加拿大哥伦比
亚大学植物系 T o w e sr 教授提供 。
仪器 : W a t e r s 液相色谱仪 ; w a t e r s m团 e l
4 4 0 检测器 (检测波长 2 5 4 n m ) , w a t e r s m浏 e l
5 1 0 高压泵 , W a te r s W ZS P m团 e l 7 10 1 3 自动
进样器和 W a t e r s D a t e m团 u le m团 e l 7 3 0 自动
资料记录仪 。
1
.
2 方法和结果
色谱条件 : 采用 W a te r s e , 。 5 林m 柱 ,流动
相 : 甲醇 一乙猜 一水 (2 2 : 36 : 4 2) , 流速 l m l/
m in
,检测波长 2 54 n m , 标准品分离见图 1 。
后倒入 1 0 ml 三角瓶中浸泡 24 h( 溶剂量 50
一 8 0 m l ) , 次 日超声震荡提取 30 m in , 提取液
经 w at er m an l 号滤纸过滤 ,残渣用甲醇冲洗
三次 , 合并滤液 , 30 ℃ 下减压浓缩 ,提取物用
水和二氯甲烷溶解 ,剧 烈震荡 Z m in ,静置分
层 ,取二氯甲烷层用活性炭 1一 2 9 脱色 ,滤
液于 25 C 下 减 压干燥 , 用 乙 睛 1 m l 溶解 ,
0
.
4 5 协m 微孔滤膜过滤 ,供 H p L C 测定 。
样 品测定 : 各样品制备液在上述色谱条
件下进行测定 , 经数据处理机处理 ,计算出各
样品中紫杉醇及短叶醇的含量 , 见表 l 。
T a b 1
.
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0 0 2 2
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.
1 7 5
2 讨 论
F 19 1
.
1 l l e H P L C o f s at n d a r ds
at x o l ( 1 8
.
7 5 m i n ) ; 2
.
b er v i f o l i o l ( ] 1
.
9 0 m i n )
标准 曲线 : 精称 at x of 标准品 1 m g ,溶解
在乙腊 1 m l 中配成 1 m g /ml 标准溶液 。 吸取
该标准液 0 . 3 ml , 加入乙睛 0 . 7 ml 配成 0 . 3
m g / m l 标准液 , 吸取 浓度为 1 m g / m l 标准液
0
.
1 m l 加 入 乙睛 0 . 9 m l 配成 0 . 1 m s / m l 标
准 液 , 按 此 方 法逐级 稀 释 , 依次配 成 0 . 3 ,
0
.
1
,
0
.
0 3
,
0
.
0 1
,
0
.
0 0 3 m g / m 一等浓度标准溶
液 , 进样 1 0 林l , 求得 t a x o l 浓度 ( x )与峰面积
甸 ) 的直 线 回 归 方 程 为 歹 - 一 1 . 3 9 09 +
1 3 5 7 0
.
3 6 5 3 x
, r = 0
.
9 9 9 9 ( n = 6 )
。
样品制备 : 各样品干燥粉碎成细粉 ( 1 0
目 )后均精称 0 . 5 9 , 置于研钵 中 , 加入甲醇 -
二氯甲烷 ( 1 : 1 )混合溶剂研磨 5~ 1 0 m i n , 然
l) 七种红豆杉均含有紫杉醇和短叶醇 ,
不同种 、 不同部位差异较大 ,其中以短叶红豆
杉树皮中紫杉醇含量最高 , 其次为中间红豆
杉树皮和针叶 ; 东亚产四种红豆杉枝叶中则
以云南红豆杉紫杉醇含量最高 ,具有较高的
开发价值 。
2) 虽然短叶红豆杉树皮中紫杉醇含量最
高 ,但其 为乔木 , 生长缓慢 , 而中间红豆杉是
灌木 , 在北 美太 平洋沿岸当作绿篱 , 生长较
快 ,且可扦插繁殖 , 其树皮中紫杉醇含量也较
高 ,针叶中含量也高于其他种 , 因此该种适于
人工更新和引种驯化 。
3 ) 短叶醇是 B a la z 等 19 9 1年从短叶红豆
杉树皮和针叶中分离和鉴定出的一种新紫杉
烷类化合物 s[] ,其含量在针叶中较高 ,我国红
豆杉资源中短叶醇含量以东北红豆杉及云南
红豆杉枝叶中较高 , 但该化合物的生理活性
1 0 中 国 药 科 大 学 学 报 2 6卷
尚待进一步研究 。
参 考 文 献
W a n iM C
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T a y lor H L
,
W
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, 以 “ 1. T h e i s o la t i o n a n d
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W i rh e r u P K M
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. 贫、比创名 s PP n e ed les
e o n ta i n a m o u n t o f ta x o l e o m aP r a b l e t o t h e ba r k o f 叭找创名 加门越-
户幽 l : a n a ly s i s an d i s o la t i o n . J 四` 八浏 , 5 3 ( 5 ) : 12 49
徐礼桑 , 刘爱茹 . 红 豆杉中紫杉醇的高效液相色谱法 .
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杉醇及同系物的高效液相色谱分析 . 植物 资源与环境 ,
19 9 4
, 3 ( 2 )
:
3 1
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16 13
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f r o m E a s t A s ia a n d N o r t h A m e r iC a
G a o S h a n l i n
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Z h u D a n n i
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Z h o u R o n g h a n
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K u t n e y J P I
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乃么功 , 勿 hC aln 月油洲叹右以交戚 流腮威夕 , 肠刀J峋 21 0 38 ; ’烧阿艺州曰时 of曰冶祝该了y , 少触 U升~ 威夕 of 肠它ihs C以u筋必如 , 乙初刀仪勿
A加 t ar e t 望、川绍 L . s P P a r e m a i n n a t u r a l r e s o u r e se o f at x o l , a s t r o n g a n ti Ca n此 r Ch e m l口 1 e o n s it t ue n t .
C o n t e n t o f at x o l a n d b r e v i fo li o l in se v e n s ep e ie s of 全b二潞 d i st r i b u ted i n E冶s t A s ia a n d N or ht A m e r i ca
a r e a w e r e d e te rm i n e d b y H P L C
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T h e o b t a i n e d r es u l st i n dica t e d t ha t t h
e at x of e on 妞 n t i n t h e ba r k o f
7’Q幻绍 加户砂汀议如 w a s t h e h ig h e s t , a n d th e se co n d w as b a r k o f 7钦切 s 协 of 如 . T a x ul e o n et n t i n n e ed l e a n d
s w ig o f 全’o公绍 尹 n an en is w a s t h e hi hg e s t w i t h i n f o u r s ep e i es f r o m E滋s t A s ia a r e a
,
l b ” 绍 翻即汕勿 w as
t h e s e e o n d
,
T h e e o n te n t o f b r e v i f o l io l i n n e ed l
e o f 7’a刀绍 加嗯砂汀以必w as t h e h ihg es t in se ve n s Pec ies , a n d
7’a 幻绍挑尹沮浏 d w a s s e e o n d ar y . T h e ob at in ed r e s u lst 助 v e im Po r at n t i n f o r m a ti o n i n a lt e r n a t iv e r es o u r e e
e x P l o i at t i o n
, n e w s P e e i e i n t r od u e ti o n a n d h a b iat ti o n fo r t h e P r od u e t io n o f t a x of
.
K e y w o r ds t a x o l ; b r e v i f o l i o l ; 7b幻绍 ; n a t u r a l r es o u r e e