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两种滇产木姜子属植物中总黄酮的抗氧化活性研究



全 文 :书两种滇产木姜子属植物中总黄酮的抗氧化活性研究
王少杰1,马水仙1,张 娜1,周树娅1,尹艳清1,杨丽娟1,2*
(1.云南民族大学 民族药资源化学国家民委-教育部重点实验室,云南 昆明650500;
2.云南民族大学 云南省聚乳酸基功能材料工程实验室,云南 昆明650500)
摘 要:目的:对滇产金平木姜子和红叶木姜子进行总黄酮含量的测定,并分别研究总黄酮的抗氧化活
性。方法:用正丁醇分别浸提金平木姜子和红叶木姜子得到两种提取物,用紫外分光光度法测定各自总
黄酮的含量,同时以DPPH清除率实验来评价其抗氧化活性并分别绘制DPPH随浓度变化曲线进行比
较。结果:金平木姜子中黄酮提取物的DPPH自由基清除率最高为72.63%,IC50值为1.75mg/mL;红
叶木姜子中黄酮提取物的DPPH自由基清除率最高为86.67%,IC50值为1.48mg/mL。结论:金平木姜
子和红叶木姜子中含较丰富的总黄酮化合物,具有较强的抗氧化活性,且红叶木姜子中总黄酮的抗氧化
活性高于金平木姜子。
关键词:金平木姜子;红叶木姜子;总黄酮;DPPH;抗氧化活性
中图分类号:R284.1;R285.5   文献标识码:A   文章编号:1673-2197(2013)01-0019-03
收稿日期:2012-10-11
基金项目:国家自然科学基金项目(21162042);云南自然科学基金项目(2010CD090);云南省高校化学类核心课程教学团队
项目
作者简介:王少杰(1983-),男,云南民族大学硕士研究生,研究方向为超分子化学及药物化学。
通讯作者:杨丽娟,女,云南民族大学教授,研究方向为超分子化学及药物化学。
  金平木姜子 (Litsea chingpingensis)和红叶木姜子
(Litsea rubescens)同属于樟科 (Lauraceae)木姜子属 (Lit-
sea)植物,主要分布于云南南部地区海拔1 500~2 500m山
地[1]。木姜子属植物又名木香子,性味辛、微苦,有香气无
毒,其根皮及叶可供药用,具有祛风、散寒、理气、止痛、温
肾、健胃等功效,用于治疗肠胃炎、胃寒腹痛、水肿、风湿关
节痛及跌打损伤等[2,3];其果实的挥发油成分是重要的工业
原料,并有抑制黄曲霉菌和驱虫的功效[4]。其主要化学成
分黄酮类化合物可能与抑菌和抗病毒作用有关,因此测定
金平木姜子和红叶木姜子中总黄酮的含量可为两者抗菌、
抗氧化活性等研究和生产的药材优选提供参考依据[5-7]。抗
氧化剂不仅能够应用于食品工业,防止食品氧化、延长保质
期,而且还能够用于制作保健品及化妆品,具有延缓衰老、
抵抗癌症和防治心脑血管疾病的功效,且由于天然的抗氧
化剂更具有安全、无毒的特性,而越来越被人们所重视[8,9]。
因 此 ,开 发 天 然 的 抗 氧 化 剂 一 直 以 来 都 是 化 学 、
食品工业一项重大的课题。目前,金平木姜子和红叶木姜
子的抗氧化活性研究前人未见报道。本文报道提取两者总
黄酮的抗氧化活性,以期为两者的实际应用提供理论依据
和实践依据
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  名贵药材有:竹节人参(北山七),天麻,扣子七,紫油厚
朴等。板(桥)党(参),(石)窑(当)归,作为恩施地理标志享
誉国内;珍稀品种七叶一枝花、江边一碗水、头顶一颗珠、文
王一支笔,在恩施市境内的蕴藏量相对较大。
总之,恩施植物药材品种多,蕴藏量大,品质优良。若
能合理地开发利用,定能给恩施人民乃至全国人民的健康
带来福音。
参考文献:
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(责任编辑:宋勇刚)
—91—
书1 仪器与试剂
1.1 主要仪器
AS10200超声波清洗器 (天津奥特赛恩斯仪器有限公
司);UV2401紫外-可见分光光度计(日本岛津公司Shi-
madzu)。
1.2 试剂及材料
芦丁(北京化学试剂公司);正丁醇;无水乙醇AR;无水
甲醇AR;亚硝酸钠AR;硝酸铝AR;DPPH;氢氧化钠AR;
金平木姜子 (采于云南金平)正丁醇浸膏;红叶木姜子 (采
于云南腾冲)正丁醇浸膏。
2 方法与结果
2.1 总黄酮含量的测定[10-13]
2.1.1 芦丁标准曲线的制备 准确称取芦丁对照品
5mg,于50mL容量瓶中,加70%乙醇溶液,并稀释至刻度。
准确吸取上述溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6
mL分别置于5mL容量瓶中,加5%的亚硝酸钠0.4mL,摇
匀后放置6min,加10%的硝酸铝溶液0.4mL,摇匀后再放
置6min,加4%的氢氧化钠溶液4mL,再用70%乙醇定容至
刻度,摇匀,放置30min,在370nm波长处以空白做参比进
行比色测定,以吸收波长为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标
准曲线(见图1)。用最小二乘法以对照品芦丁质量浓度与
吸光度作线形回归,得其线性回归方程为 A=0.5902C-
0.2126,R=0.9991。
图1 芦丁的标准曲线
2.1.2 金平木姜子正丁醇部分总黄酮含量的测定 准
确称取金平木姜子正丁醇部分提取物10mg置于25mL容
量瓶中,用70%乙醇溶解定容到刻度,得到质量浓度为
0.4mg/mL。准确吸取上述溶液一定体积置于5mL容量瓶
中,加5%的亚硝酸钠0.4mL,摇匀后放置6min,加10%的
硝酸铝溶液0.4mL,摇匀后再放置6min,加4%的氢氧化钠
溶液4mL,再用70%乙醇定容至刻度,摇匀,放置30min,在
370nm波长处进行比色测定。根据标准曲线制备方法,测
得吸光度A,代入回归方程,计算得样品中总黄酮的含量C
=4.8×10-2 mg/mL。
2.1.3 红叶木姜子正丁醇部分总黄酮含量的测定 准
确称取红叶木姜子正丁醇部分提取物20mg置于25mL容
量瓶中,用甲醇溶解定容到刻度,得到质量浓度为0.8mg/
mL。准确吸取上述溶液一定体积置于5mL容量瓶中,加
5%的亚硝酸钠0.4mL,摇匀后放置6min,加10%的硝酸铝
溶液0.4mL,摇匀后再放置6min,加4%的氢氧化钠溶液4
mL,再用甲醇定容至刻度,摇匀,放置30min,在370nm波
长处进行比色测定。按以上方法计算得样品中总黄酮含量
C=1.2×10-2 mg/mL。
2.2 总黄酮抗氧化作用[10,14-17]
2.2.1 DPPH溶液的配制 准确称取12mgDPPH 用无
水乙醇溶解并定容于500mL容量瓶中,使DPPH浓度为6
×10-5 mol/L。
2.2.2 金平木姜子提取物溶液的配制 准确称取金平
木姜子正丁醇部分提取物10mg置于25mL容量瓶中,用
70%乙醇溶解定容到刻度,得到质量浓度为0.4mg/mL。
2.2.3 红叶木姜子提取物溶液的配制 准确称取红叶
木姜子正丁醇部分提取物20mg置于25mL容量瓶中,用甲
醇溶解定容到刻度,得到质量浓度为0.8mg/mL。
2.2.4  DPPH自由基清除率 参照文献所用方法,依以
下公式计算:
I%=A0-A

A0
×100%
Ι% 即为DPPH自由基清除率。
2.2.5 金平木姜子总黄酮清除自由基DPPH活性的测
定 准确吸取金平木姜子溶液0、0.05、0.1、0.15、0.2、
0.25、0.3、0.5、0.7、0.9、1.0mL分别置于5mL容量瓶中,
加4.0mL的DPPH,摇匀后再用70%乙醇定容至刻度,摇
匀,放置30min,可见溶液颜色呈规律性由紫色变为黄色(图
2-A),在516nm波长处以空白做参比进行比色测定。
2.2.6 红叶木姜子总黄酮清除自由基DPPH活性的测
定 以同上方法配制红叶木姜子总黄酮清除自由基DPPH
活性的待测溶液(图2-B),亦于516nm波长处以空白做参比
进行比色测定。
图2 金平木姜子和红叶木姜子抗氧化活性待测溶液
2.2.7 绘制标准曲线 将以上测定结果以浓度为横坐
标,自由基清除率为纵坐标,绘制标准曲线(图3),并依据曲
线计算出金平木姜子IC50值为1.75mg/mL,红叶木姜子
IC50值为1.48mg/mL。
3 结论
通过与芦丁进行对照实验,得出金平木姜子样品中总
黄酮含量为4.8×10-2 mg/mL,红叶木姜子样品中总黄酮含
量为1.2×10-2 mg/mL,且金平木姜子中总黄酮含量高于红
叶木姜子总黄酮含量。抗氧化活性测试方面:自由基包含
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书羟基自由基、过氧自由基和烷基自由基,提取物能够清除
DPPH自由基表明其具有降低以上三种自由基浓度及打断
脂质过氧化的作用[18]。抗氧化剂清除DPPH 自由基的清
除率越高,IC50值越低,说明该抗氧化剂的抗氧化能力越强。
本文分别测得红叶木姜子和金平木姜子的DPPH自由基清
除率及IC50值,数据表明,红叶木姜子和金平木姜子均具有
较强的抗氧化活性,且红叶木姜子的抗氧化能力较金平木
姜子强。
图3 正丁醇部分提取物清除DPPH自由基能力
综上所述,红叶木姜子和金平木姜子价格低廉,总黄酮
含量较高,其抗氧化活性研究具有较大的实际意义和应用
前景。
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(责任编辑:姜付平)
Study on the Antioxidant Activities of Total Flavonoids from Two Plants of Litsea in Yunnan
Wang Shaojie1,Ma Shuixian1,Zhang Na1,Zhou Shuya1,Yin Yanqing1,Yang Lijuan1,2
(1.Key Laboratory of Ethnic Medicine Resource Chemistry,State Ethnic Affairs Commission & Ministry
of Education,Yunnan University of Nationalities,Kunming 650500,China;
2.The Engineering Laboratory of Polylactic Acid-Based Functional Materials of Yunnan,
Yunnan University of Nationalities,Kunming 650500,China)
Abstract:Objective:To determine the total flavonoids in Litsea chingpingensis and Litsea rubescens from Yunnan and investigate
their antioxidant activities of DPPH.Methods:The flavonoids were extracted from the two plants of Litsea with n-butanol.Their
contents were determined by UV-Vis spectrophotometry and the antioxidant activities were evaluated by the removal rate for DPPH.
For further investigation,the standard curve could be drawn by using these data.Results:The DPPH removal rate of flavonoids in Lit-
sea chingpingensis was 72.63%and its IC50value was 1.75mg/mL.While the DPPH removal rate of flavonoids in Litsea rubescens was 86.
67%and its IC50value was 1.48mg/mL.Conclusion:The Litsea chingpingensis and Litsea rubescens were riched in flavonoids which had
good antioxidant activities,and the antioxidant activity of Litsea rubescens is superior to that of Litsea chingpingensis.
Key Words:Litsea Chingpingensis;Litsea Rubescens;Total Flavonoids;DPPH;Antioxidant Activities
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