全 文 ：植物生理学通讯 尸如瓜 丹卿诚恻 。洲 ,川饥反川应渊活 1 9 9 3 , 2 9 ( l ) : 4 5~ 49
中粒种咖啡花药培养成完整植株
潘学峰 (琼南香草兰公司 , 海南万宁 57 `53 “ ,
lP a n t le t R e驴 n e r a t ion fr om A n the r o f c o f f ae or b u s t a
P AN x膝 F e n s (伽祝夕刃面 F画边七 co . 2公忍. 产勿翻四 W面厄叼 57 15 33)
1 植物名称 中粒种咖啡伍响俪 代 ` 绍自 ) 。
2 材料类别 花药 。
3 培养条件 基本培养基为 M S , ( l) 诱导愈伤组织
培养基附加 KT o . s m g / L (单位下同 ) 、 2 , 4一D o . s 、
N A A I
、 蔗糖 5% 、 琼脂 0 . 5% , PH 5 . 8 。 (2 )诱导胚状
体培养基附加 BA Z 、盯 0 . 5 、 N从 0 . 2 、 cH 5 0 0 、 蔗糖
3 %
、 琼脂 0 . 6% , p H S , 8 。 (3 )胚状体分化成苗培养基
为 3 / 4 M s 附加BA O . 5 、 N A A O . 8 、 G A O . 1 、 活性炭
0
.
1%
、 蔗糖 2 . 5% 、琼脂 0 . 7% , p H 5 . 8 。 培养温度 25
一 3 0℃ , 在诱导愈伤组织阶段采用暗培养 , 其他均每
天连续光照 1 0一 1 2 h ,光照强度为 1 0 0 0 坟 。
4 生长与分化情况 咖啡花蕾 (单核靠边期 )经消毒
后 , 于无菌条件下剥取花药 ,接于培养基 ( 1) 上 ,培养
2 0~ 3 0 d
, 诱导形成结构较为致密的愈伤组织 , 呈乳
白色 , 然后移至培养基 (2 )上 , 7 d 后愈伤组织逐渐变
绿 ,并开始增殖 , 1个月后愈伤组织变褐 ,再转管 。 2一
3 个月后长出白色的胚性愈伤组织 ,随后发育成白色
健壮的喇叭形胚状体 。 将其转移到培养基 (3 )上培养
1一 2 个月 , 胚状体继续发育成子叶形的胚状体 。 15 ~
30 d 后 ,部份胚状体又可增殖产生新的胚状体 ,部份
胚状体能进一步发育分化出根 ,进而形成完整植株 。
试管苗移植于砂 : 表土 = 3 : 1 ( V /V) 的基质中 ,淋足
定根水 ,用塑料薄膜套袋保湿 。 10 d 后 ,打开保湿罩 ,
逐渐降低空气湿度和增强光照 ,即可成活生长 。
s 愈义与进展 中粒种咖啡花药培养形成愈伤组织
并诱导成完整植株 , 国内外尚未见有成功的报道 。 中
粒种咖啡是多年生的异花授粉作物 ,其荃因型高度杂
合 , 用常规方法很难获得纯系 ,且育种年限长 。 花药
培养技术可能有助于这一间题的解决 。
收稿 19 9 2一 0 3一 1 0
玫瑰香叶的试管繁殖
江 明 (云南省香料研究开发中心 , 昆明 6 5 005 1 )
段金玉 (中国科学院昆明植物研究所 , 昆明 6 502 0 4 )
rP
0 P a即 t io n o f P 仑l a r g o 牡玄tL 饥 or s e u 饥 玄” 碗 t or
J I A N G M in g ( r 幽姗 n 阳“ 叙蒯 翻劝姗 s & 而甲网黔 及烧口动 已翻扮已 , 天面” `勺 6 5 0 0 5 1 )
D I J A N J in
一
Y u (尤助加匆 而囚宛. 地 oj 及勿叼 , 座加如矛如 及戚” ,天咖加匆 6 5 0 2 0 4 )
1 植物名称 玫瑰香叶仍叻 , 卿如饥
~
)
。
2 材料类别 带芽的茎段 。
3 培养条件 基本培养基为 M S 。 (l )诱导芽增殖培
养基为 M S + 6一 BA 0 . 2一 1 . o gm / L (单位下同 )+
N A A 0
.
0 2一 1 . 0 ; ( 2 )诱导生根培养基为 1 / 2 M s +
I B A 0
.
1
。 均采用固体培养 , PH 5 . 8 。 培养温度 25 士
l ℃ 。 每天光照 1 2 h ,光照强度 200 0 坟 。
4 生长与分化情况 带芽的茎段接种一周后可见芽
收稿 19 9 2一 0导 08
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1993. 01. 015
萌动 , 巧 d 后分化出 动~ 8 个丛生状芽 , 在丛芽基
部有愈伤组织发育 。 愈伤组织 的多少 ( 毗 /株 )
与 6一队 和 N八A 的浓度及配比有关 。 愈伤组织过多
则影响丛芽的分化及生长 。 为了观察 6一BA 和 N A A
的浓度变化及配比对芽增殖和生长的影响 , 本试验采
用了正交试验设计 。 试验结果经方差分析后得知 :
影响芽条增殖的主要因素是 6一 BA 。 浓度以 0 . Zlng / L
为优 。 高于 0 . 2 m g / L 时 ,愈伤组织增加 ,芽增殖倍数
下降 。 其次是 N从 , 浓度 以 0 . 1 鸭压 为优 ,高于或
低于这个浓度均不利芽的增殖和生长 。 即 M s +
6
一
BA 0
.
Z lgn / L十N A A 0
.
l mg / L 最适合于芽的增殖
和生长 。 采用此培养基 ,可使芽的平均增殖率稳定在
5 以上 ,繁殖周期为 25 ~ 30 d 。
将上述丛芽分割后转入生根培养基 , 10 d 后可全
部发根 ,形成完整的小植株 。 经炼苗后取出 ,洗去培
养基 , 移栽到红土中过渡 20 d 后 , 即可移栽至大田
中 。 成活率约为 90 %左右 。
5 意义与进展 玫瑰香叶的离体培养快速繁殖和采
用生物统计学方法优选配方 ,在国内外均未见报道 。
玫瑰香叶是近年从国外引种的一种香料植物 , 系多年
生草本 ,扦插策殖率低 。 由于玫瑰香叶的精油在国际
市场上较香叶天竺葵 ( p . 少. 液血溜 )更受欢迎 ,所以玫
瑰香叶组培快繁的成功 , 为生产提供了一条在短期内
繁殖出大量种苗和加速推广种植的途径 。
鹿角蔗的组织培养
黄韶玲 张洁莲 (广州教育学院 ,广州 5 1。03 。 )
T加姆u e C ul 奴甘e of P la t y c e r 诬“ , 从 f林 cr a t“ 饥
H U A N G S h a -O L in尽, z H人 N G J ie ~ L ia n (及笋州舰川 oj 压成恻 , 伍川乎触止 。渔拳 oj 及加印饭祝 , 山口咖初 51 0 30 )
i 植物名称 鹿角戴 (几印粉吻`崎砂以如刃) 。
2 培养材料 抱子 、幼抱子体 。
3 培养亲件 ( l) 抱子繁殖营养液 : 0 . 05 % ~ 0 . 1%
完全营养液 ; (2 )诱导 G G B 培养基 : M s 十 6一BA 0 . 05
+ I BA 0
.
0 5或 M S + 6 - B A 0 . 0 1+ m A 0 . 2 ; ( 3 )诱导丛
芽及继代培养基 二M S + L AA O. 25 ; ( 4) 生根培养基 :
1/ 2 M S
。 上述培养基均加琼脂 0 . 7 % ,食用白糖 3% 。
pH S
.
8
,培养温度 2 0℃一 5 0 ℃ , 光照强度 1 0 0 0 玩 ,每
天 8一 1 0 h 。
4 生长及分化情况
4
.
1 幼抱子体的繁殖 取瓦片或红转 , 经高压消毒
后 , 放入医用长方形白瓷盆 , 倒入 0 . 1%完全营养液
浸至砖瓦高度的 34/ 一 4 / 5 左右 , 保持砖瓦充分湿润 ,
然后在湿润的砖瓦面上均匀地撒上鹿角获的抱子 。
在白瓷盆外罩以塑料薄膜做成的罩子 , 以保证小环境
的相对湿度在 90 %以上 , 随时注意补充营养液 ,但切
莫使营养液面超过砖瓦面 , 以免撒在上面的鹿角蔗抱
子浮起散走 。 置于 25 ℃左右温度室内 ,约经 3 个月左
右 , 砖瓦面上泡子萌发形成丝状体 ,长出鹿角蔗原叶
体及幼抱子体 。
4
.
2 诱导 G B 把上述幼抱子体作为外植体 ,在无
菌条件下接种在 MS + 6 一BA 0
.
05 + BIA
0
.
05 或 Ms +
·
4 6
·
6
一队 0 . 01 + I B A 0 . 2 的培养基中 。 4周后产生一些绿
色球状小体 ,表面还有金黄色的绒毛 。 这些小球的结
构与愈伤组织不同 ,与兰花的原球茎相似 ,据国外报
道称之为 C G B 。 我们发现 ,处于低激素浓度的绿色原
球茎长势旺盛 ,绒毛较少 ,激素浓度较高则原球茎生
长较差 ,且金黄色绒毛布满小球体之上 。 若无激素 ,
则没有 G G B 形成 。 这种称为 G G B 原球茎可以继代培
养获得大量的原球茎 , 又可再诱导 G G B 长出丛生苗 ,
为鹿角藏快速繁殖开辟了新的途径 。
4
.
3 诱导丛生苗 把 G G琪凄种在M S + l冉A O. 2 5 的
培养基中 , 置于 1 0 0 0坟光照强度下 ,每天照光 8~
10 h
,
3一 4 周后 G G B 上抽出丛生芽 ,长势旺盛 , 基部
根状茎明显 ,有小量的根生长 。 丛生芽叶片狭长 ,偶
见 3 cm 长的叶片显出微分叉状 , 叶片上分布着一些
柔毛 , 根上也长满金色绒毛 。 丛生苗布满试管或培养
瓶内的培养基表面 。 部分继代培养丛生芽 ,部分则转
至生根培养基中培养 。
4
.
4 生根培养 把丛生苗转入 12/ M S 培养基中 ,
叶片在 3~ 4 周内迅速长大抽高 , 平均每株有 4一 5 片
叶 , 叶尖凹陷 , 出现明显的分叉现象 , 显示出鹿角旅真
收稿 1 9 9 2一 05一 16