全 文 ：1 46 8 一 药物分析杂志C h i nJ Ph a rmA n al2 ( ) 06 , 2 6 ( 10 )
H P L C 测定复方天山荃菜颗粒中盐酸婴粟碱的含量
盛萍 ’ , 帕丽达 · 阿不力孜 2 , 刘波 ’ , 古丽 · 斯坦 , ,…蜜圣…医」2
( 1
. 新疆医科大学中医学院 ,乌鲁木齐 83( 幻另 ;2 . 新疆医科大学药学院 , 乌鲁木齐 83( 洲万 4 ;3 . 新疆药物研究所 ,乌鲁木齐 83( l XX) )
摘要 目的 :建立复方天山茧菜颗粒中盐酸婴粟碱的含量测定方法 。 方法 :采用 HP LC 法 , 色谱柱为岛津 V P 一 O D S 柱 (巧 0 ~ x
4
.
6 ~
,
5 卜m)
, 甲醇 一 缓冲溶液 (醋酸钱 0 . 35 % , 三乙胺 0 . 03 % )( 60 : 4o )为流动相 , 流速为 1 m L · im n 一 ’ , 检测波长为 240 n m
。
结果 :盐酸婴粟碱的线性范围为 0 . 13 一 0 . 64 林g · mL 一 ’ ,平均加样回收率为 98
.
1%
。 结论 :所建立的方法简便 、 可行 ,重复性好 。
关键词 :复方天 山荃菜颗粒 ;盐酸婴粟碱 ; H PL C
中图分类号 : Rg 1 7 文献标识码 : A 文章编号 : 02 5 4 一 179 3 (2 00 6 ) 1 0 一 14 86 一 02
H P L C d e t e r m i n a t i o n o f P a P a v e r i n e
i n c o m P o u n d T i a n s h a nj i n c a i
h y d r o c h l o r id e
g r a n u l e s
s H E N G P i n g l
,
P A L I D A A b u 一 112 12 , L xu B o l , G U L I 5 1 一 t a n D U N i a n 一 s h e n g
( 1
.
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e罗 o f 『 r r ad i丈i o n al Ch i n e s e M e d i e i n e , U ru m q i 8 3 0 0 54 , C h i n a ;
2
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.
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,
U ru m q i 8 3 (以 )0 , C h i n a )
A b s t r a c t O bj e c t i v e : T o e s t a b l i s h a m e th o d of r d e t e r m i n a t io n o f p a p a v e ir n e h y d or e h l o ir d e i n th e e o m p o u n d T i a n s
-
h a nj i n e a i g r a n u l e s
.
M
e t h o d s : H PL C m e t h o d w a s d e
v e l o p e d of r t h e d e t e rm i
n a t io n o f p a p a v e ir n e h yd or e h l o ir d e i n th e
e o m p o u n d T i a n s h a n ji n e a i g
r a n u l e s o n a e o l u m n o f V P 一 OD S ( 1 50 m m x 4
.
6 m m
,
5 林m ) , m e th a n o l 一 b u fe r s o l u t i o n
( a m m o n i u m a e e t a te 0
.
3 5%
,
t r ie t h y la m i n e 0
.
0 3% ) ( 6 0 : 4 0
, “ : ) a s a m o b il e p h a s e , fl o w ar te 1 m L · m i n 一 ’ a n d
d e t e e ti o n w a v e l e n g t h a t 2 4 0 n m
. 取 s u l st : T h e r a n g e o f l in e a r i t y w a s 0 . 13 一 0 . 6 4 卜g · m L 一 ’ , th e a v e r a g e r e e o v e叮
w a s 9 8
.
1%
.
C o n c lu s i o n
: T h e e s t a b l is h e d m e t h o d s 15 s i m p l e
,
fe a s i l b l e a n d
r e p r o d u e ib l e
.
K ey w o r ds
: e o m p o u n d
『
Fi a n s h a nj i n e a i 『a n u l e s ; p a p a v e ir n e h y d r o e h l o ir d e : H P LC
复方天 山荃菜颗粒由天 山董菜 、 睡莲花 、 蜀葵
子 、 婴粟壳和甘草 5 味药材经提取 、 除杂 、 制粒等工
艺制成的制剂 ,处方 由新疆药物研究所特聘维医药
专家提供 ,按照维吾尔医理论 ,临床应用本处方治疗
各种类型感冒效果显著 。 婴粟壳是处方的主要药物
之一 ,其主要有效成分为盐酸婴粟碱 、 吗啡 、 可待因
等生物碱类化合物 , 其中盐酸婴粟碱含量最高 ,也是
起药理作用 的主要活性成分之一 「’ : 。 有关盐酸 婴
粟碱的测定已有文献报道 { 2 , , ) , 本文参考文献「2 」并
经反复试验 ,用 H P[ J C 测定复方天 山董菜颗粒中盐
酸婴粟碱的含量 ,获得了满意的结果 。
1 仪器与试药
岛津 V P 一 O D S 高效液相色谱仪 ; W at e sr 24 87 双
波长检测器 ;N 一 2戊。 双通道色谱工作站 ; w at e o s巧
高效液相泵 ; UV 一 2 5 01 紫外分光光度计 ( 日本 ) 。 复
方天山荃菜颗粒 (规格 : 每袋 5 . 5 9 ) 、 阴性样 品颗粒
(缺婴粟壳 ) , 由新疆药物研究所提供 ;盐酸婴粟碱 : 购
于中国药品生物制品检定所 ,批号 121 4 一 9印2 ;甲醇
为色谱纯 ,醋酸钱 、三乙胺为分析纯 。
2 方法与结果
2
.
1 色谱条件 色谱柱 : 岛津 V P 一 O D S 柱 ( 巧 O ~
X .4 6
~
,
5 林m ) ;流动相 : 甲醇 一 缓冲溶液 (醋酸钱
0
.
3 5%
,三乙胺 0 . 0 3% ) (印 : 叨 ) ;流速 : 1 m L · m i n 一 ’ ;
检测波长 : 2 40 n m ;柱温 : 35 ℃ ;每次进样 or 林L 。
2
.
2 线性关系的考察 精密称取盐酸婴粟碱对照
品 8 . 0 0 m g ,置 50 m L 量瓶中 ,加甲醇适量溶解并稀
释至刻度 ,摇匀 , 再精密吸取其 1 m L 置 50 m L 量瓶
中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,制得 3 . 2 此 · m L 一 ’ 对
照品溶液 。 精密 吸取上述对 照品 溶液 0 . 4 , 0 . 8 ,
1
.
2
,
1
.
6
,
2 m L 分别置 10 m L 量瓶中 , 加甲醇至 刻
度 ,摇匀 ,精密吸取 10 林 L 注人高效 液相 色谱仪 , 以
对照品浓度为横坐标 ,峰面积为纵坐标绘制标准曲
线 ,得 回归方程 :
A = 9
.
7 5 3 x 10
4
C + 8
.
2 6 5 x 10
3 r = 0
.
9 9 9 6
盐酸婴粟碱在 0 . 13 一 0 . 64 林g · m L 一 ’ 范围内线性关
系良好 。
第一作者 T e l : ( 09 9 1 ) 8 3 8 1 11 2 ; E 一 m a i l : xj s p h呷@ 1 63
DOI : 10. 16155 /j . 0254 -1793. 2006. 10. 018
药物分析杂志 C h in J P harn A n al 2 )0( 6
,
26 ( 10 ) 一 1 48 7 一
2
.
3 供试品溶液及 阴性样品溶液的制备 精密称
取样品颗粒 1 . 0 9 ,研细 ,置 50 m L 量瓶中 , 加甲醇
至刻度 ,超声提取 30 m in , 分别放置至室温 ,微孔滤
膜 (0 . 45 卜m )过滤 ,制得供试品溶液 ;取缺婴粟壳的
阴性样品颗粒 2 . 0 9 ,按供试品溶液制备方法操作 ,
制得阴性样 品溶液 。
2
.
4 干扰性试验 精密吸取 0 . 64 协g · m L 一 ’ 对照
品溶液 、供试品溶液 、 阴性样品溶液各 10 协L 进样 ,
结果表明复方天山荃菜颗粒中盐酸婴粟碱有效成分
分离较好 ,制剂中的其他成分对测定无干扰 ,见图 1 。
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图 l 对照品 ( A ) 、样品 ( )B 及缺婴粟壳阴性样品的 H P L C 色谱图
F ig 1 H p L C
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n o e s u b s ran e e ( A )
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v e s a m P I w i t h
o u t P
e r l c a r l ! i u m l) a P a v e ir s
1
. 盐酸婴粟碱 ( p a p a v e 石n e h u d r( ,。 h l o r ide , 1 l . 4 m , n )
2
.
5 精密度试验 精密吸取 0 . 51 协g · m L 一 `对照
品溶液 , 连 续进样 5 次 , 测 得峰 面积 的平均值为
5 5 2 6 2
.
4
,
R SD = 1
.
8%
。
2
.
6 稳定性试验 日内 : 同一批 号样品 ( 0 2 1 2 02 )
的供试品溶液 ,每间隔 l h 进样 l 次 , 共 5 次 ,测得
峰面积的平均值为 2 7 234 . 4 , R SD 为 1 . 2 % 。 日间 :
将同一批号样品 ( 0 2 12 02 )制备成供试品溶液 , 每天
进样 1 次 ,共 s d ,测得峰面积的平均值为 28 42 4 . 2 ,
RSD 为 1 . 6% 。
2
.
7 重复性试验 同一批号样品 ( 0 21 20 2 ) 5 份 ,按
,’2 . 3” 项制备供试品溶液 ,分别精密吸取 10 林L 进样 ,
按外标法计算复方天山荃菜颗粒中盐酸婴粟碱的含
量 ,平均含量为 10 . 8 林g · g 一 ’ , RS D 为 2 . 1% ( n = 5 ) 。
2
.
8 回收率试验 取同一批号 ( 0 2 12 0 2) 已 知含量
的样品 0 . 5 9 ,精密称定 , 共 9 份 ,均分 3 组 , 每组分
别加人盐酸婴粟碱 3 . 2 卜g · m L 一 ’ 对照 品溶液 1 . 3 ,
1
·
7
,
.2 1 m L
,按 “ 2 . 3 ” 项下方法操作 , 进样测定 , 结
果低 、 中 、 高 3 个加 人 量 的平 均 回 收率分 别 为
9 7
.
6%
,
9 8
.
4%
,
9 8
.
1% ; R SD 分别为 2 . 4% , 2 . 4 % ,
0
.
8 %
。
9 份样品的平均 回收率为 98 . 1% 。
2
.
9 样品测定 3 批样品 (批号 0 2 12 0 2 , 0 2 12 0 3 ,
02 120 4) 每批各取 2 份 , 按供试品溶液制备法处理 ,
分别进样 10 协L ,照中国药典 ( 2 0 0 年版一部附录 VI
D )外标法测定 , 以峰面积计算含量 , 结果 3 批样品
平均 含量 ( n = 2 ) 分别 为 64 . 7 , 65 . 1 , 60 . 4 协g ·
袋 一 ’ ;相对偏差分别为 土 0 . 6% , 士 0 . 2% , 士 0 . 9 % 。
从结果可看出 , 3 批样品中盐酸婴粟碱的含量变化
较大 ,鉴于婴粟壳来源分散 , 商品特殊 ,含量下 限可
放宽 ,而上限应有明确规定 ,故规定每袋盐酸婴粟碱
含量不得高于 70 林g 。
3 讨论
3
.
1 在婴粟壳总生物碱中盐酸婴粟碱含量最高 ,也
是主要的活性成分之一 。 从测定 的 3 批样品的情况
来看 ,盐酸婴粟碱含量存在差异 , 为控制复方天山荃
菜颗粒的质量 ,有必要对制剂中的盐酸婴粟碱含量
进行监测 。
3
.
2 取盐酸婴粟碱对照品 , 加甲醇溶解并配制成 1
m L 含 0 . 16 m g 的溶液 ,在 UV 一 2 5 01 紫外分光光度
计上 ,于 20 一 4 0 n m 波长范 围内扫描 。 盐酸婴粟
碱在 240 n m 波长处有最大吸收 , 检测结果理想 , 故
选择 2 4 0 n m 为检测波长 。
3
.
3 供试品溶液制备中曾对超声提取时间进行了考
察 ,结果 30 m in 与 40 m in 的峰面积积分值误差在 5%
之内 , 50 m in 与 40 m in 的峰面积积分值几乎没有改
变 ,表明盐酸婴粟碱在 30 m in 已提取完全 。 本试验
比较了甲醇 一水 ( 5:0 5 0 ) 、 乙睛 一 水 ( 55 : 45 )和甲醇 -
缓冲溶液 (醋酸钱 0 . 35 % ,三乙胺 0 . 03 % ) ( 60 : O4 )的
分离效果 ,结果后者为佳 ,故选用后者为流动相 。
3
.
4 用本法测定 复方 天山荃菜颗粒中盐酸婴粟碱
的含量 ,有效成分分离较好 , 制剂 中的其他成分对测
定基本不形成干扰 。 该法简便 、有效 ,可作为该制剂
含量测定的检测方法 。
参考文献
1 z H E N G H u 一 z h an (郑虎占 ) , DO N G Z e 一 h o n g (董泽宏 ) , S H E J i n g
(佘靖 ) . M o d e rn S t u dy o f ` r a d i t i o n al C h l n e s e M e d i e i n e ( 中药现代研
究与应用 ) . B e ij i n g (北 京 ) : X u e y u an p r e s s ( 学苑 出版社 ) ,
19 9 8
.
4 6 2 3
2 P i
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(本文于 2 0 0 5 年 5 月 30 日收到 )