全 文 ：Vol 1 0 No
.
天然产物 研究与开发
NAT UO R R A P LE T R U D CSE AR CA HD D NEO E V P LM E NT
水朝阳草抗癌化学成分的研究
张人伟 林咏月 戚育芳
(云南省药物研究所 昆明 6 501 1 1)
蔡毓琼
(云南省药品检验所 昆明 6 50 01) 1
摘 要 从水朝阳草 翔 u如 蒯。 动二一 a a u gt ia e c .Y . wu x e L in g的花部份分离出 3种结晶 ,
其中晶 班确认为抗癌有效成分 , 经理化常数测定和光谱解析鉴定为 rE go l de ,并作了立体
结构的研究 。
关键词 水朝阳草 , E r g o l i d e , 抗癌
水朝阳草又名旋覆花 , 属菊科植物 Inu 勿 le lat nt h哪 一ag ut ic a c . Y . w u ex iL ng , 民间以根入药 ,
治咳嗽 、 支气管炎及 口腔疾病 。 《滇南本草 》记载 : 治疗乳汁不通 、 乳癌 、 乳痛 、 红肿 、 疼痛 、 暴赤火
眼 、 目疾疼痛 、 祛风明目 。 本品化学成分尚无报道 。 我们在抗癌药物筛选中发现本品花部分的
乙醇提出物对癌细胞有显著杀灭作用 , 并从中分离出 3 种结晶 , 其中晶 皿经上海医药工业研
究院筛选 , 对多种实体癌具有不同程度的抑制作用 , 又经美国国立癌症研究所进行细胞毒筛
选 , 对人体肺癌 ( uL 一 1 ) 、 口腔表皮细胞瘤 ( K )B 等 6 种癌细胞具有杀灭作用 , 另外两种结 晶效果
不显著 。
晶 班为白色针状结晶 , m p . 1 69 ` C ,元素分析和质谱测得分子式为
C
J 7 H Z: 0 。 , I R 显 示 有 五 元 环 酮 ( 1 7 3 0 e m 一 ` ) , a . 卜不 饱 和 一 Y一内 酷
( 1 76 5 e m
一 ’
)
、 和一个乙酞 ( 1 7吐o e m 一 ` 。 ` H 谱和 “ C 谱 、 D E盯谱 , 指示有
l 个乙酞基 、 2 个 甲基 、 4 个亚 甲基 、 5 个次甲基和 4 个季碳 。 从 c o s y
谱 、 P o 璐 Y 谱和选择性 I N E P T 谱解析 ( 1 . 2 , 3 ) (表 l ) , 鉴定为 E r g o l id e
( 4
.
5 )
,立体结构式 ( 班 ) 。 这种化合物以前报道的 H N M R 和偶合常数
有一些是不正确的 , 在 R o E S Y 试验中 , H 一 6 和 H 一 8 、 H一 6 和 C 一 5一 C H 3 、
H
一
8 和 C 一 5一C H : 有 N oe 增益 , H 一 7 与 H 一 8 未观察到 N oe 增益 , 因此 H -
6
、
H
一
8 和 C 一 5 上的甲基应为 卜构型 , H 一 7 为 a 一构型 。分子模拟计算 ,证
明七元环取椅式构型 ,一系列的同一去偶试验得每个偶合质子的 J 值 ,这些实验测得的偶合常
数与计算机模拟计算的偶合常数值相比较 ,指定出质子的立体位置 , 每个偶合的邻位质子的偶
合常数很接近计算机的计算值 ( 6 )( 表 2 ) 。
1 实验 部分
1
.
1 实验仪器和材料
熔点用显微熔点仪测定 , 未校正 ;紫外光谱用岛津 u v 一 2 50 型仪测定 ,红外光谱用 s P 一 15
收稿 日期 : 19 9 6 年 7 月 8 日
DOI : 10. 16333 /j . 1001 -6880. 1998. 01. 007
天然产物研究与开发 V ol .10 N o
型仪测定 , 质谱用 M A T 一 皿型仪测定 , ` H 和 `’ C , D E P T , H E T c o R , c o s y 和 R o E s Y (1 . 3 ) , 以 c D -
C 1
3 为溶剂 ,用 G N 一 5 0 0型仪和 B u k e r A M 一 4 0 0 型仪 , ’ H 用 S O OM H Z , ` 3 e 用 一2 5 . S M H z ,标准程序 ;
A T P 和选择 NI E P T 谱 ( 2 ) ,用 NI C o L 3E 60 型仪 , 在 90 . 4M H z 测定 ; 计算机模拟计算采用 P c -
M o D E L 程序 ( 6 ) 。
T a bl e 1 S u m m a r y o f t h e M a jo r R e s u l t s o f C os y
,
R O ES Y a n d eS l
e e t i v e I N E P T S P e c t r a o f E r g o l id e
P r o t o fl C O S Y
( P
r o t o n )
R O E S Y
( p r o t o n )
S e l e e t i v e I N E P T
( ae r b o n )
Z a
,
2日, ( 1 0 )
1
,
2日, 3 a , 3日
1
.
Z a
,
3 a
,
3日
Z a
,
2日, 3日
7
6
,
8
,
( 1 3
a
)
,
( 1 3 b )
7
,
g a
,
9日
8
,
9日
( 5 )
,
6
.
( 1 0 ) 1 5
( 3 )
( l )
,
( 3 )
,
1 0
l
,
5
np
q乃O曰.闷口
元,9门nna于ft`伏2伪列乙以
,9ó勺é
8
,
g a
,
1 0
1
,
9日, ( 1 4 )
( 7 )
( 7 )
1 O
,
8
,
1 3 b
,
1 5
6
,
1 3 b
9日, 1 5
9日, 1 4
g a
,
1 0
,
1 4
9日, 1 4
7
,
1 3 b
6
,
7
,
8
9 以 , 9日, 1 0
,
( 5 )
,
( 7 )
,
1 1
, e o e h 3
( 6 )
,
( 8 )
,
9 ( 1 1 )
,
13
6
,
1 0
7 ( 8 )
,
( 1 0 )
7
,
( 8 ) ( 1 0 )
( 1 )
,
5 ( 9 )
,
( 1 4 )
7
,
( 1 1 )
,
1 2
7
,
1 2
1
,
9
,
( 1 0 )
2a邵36789邻1013abJl4
1 5 6
.
8 1
,
( 5 )
,
6
关 L o n g 一 r a n g e e o u Pl i n g s o f P r o t o n s a n d t w o 一 b o n d e o u Pl i n g s b e t w e e n I H a n d 1 3 C a r e s h o w n i n P a r e n t h e s e s
T a b l e 2 C a l e u l a t e d a n d O bse r v e d
V i e i n a l C o u P l i n g C o n s at n t s o f E r g o l i d e
P r o t o n J o bs
.
J C a l e
6
,
7 8
.
0 9
.
2
1东210.3招,8a9邻,a9,P78,10OJ
实验材料 : 19 91 年 6 月采集于云南大理地区 , 由作者之一
戚育芳鉴定 。
.1 2 提取分离
水朝阳草的花 I Okg ,用 95 % 乙醇热回流提取 3 次 ,提取液
减压回收至流浸膏状 ,用氯仿处理 5 次 ,氯仿提出物经硅胶柱
层析 , 石油 ,醚 一醋酸乙酷梯度洗脱 , 分别得到 3种结晶 ,基中晶
l 得 1 0 . 0 9 (收率 0 . 1% ) 。
.1 3 结构鉴定
晶 皿 ( E r g o li d e ) 白色针状结 晶 , m p . 1 7 0 `U , 「a 〕D + 1 3 3 。 1 , 1 0 1 0 . 0 J I
.
3
( e l
.
2 6
,
e H
Z
e l
Z
)分析 : 分子式 C 17 H 22 O S , 计算值 : C , 6 6 . 7 5 : H , 7 . 2 4 ,实验值 : C , 6 7 . 0 7 , 6 6 . 7 5 ; H
7
.
3 7
.
7
.
2 9
。
u v 入 M e o H n m : 2 0 7 ( 10 9 。 : 3 . 9 3 ) , IR ( K B r ) e m 一 ` : 8 2 0 , 9 8 0 , 1 1 6 0 , 12 3 0 , 12 4 0 , 一7 3 0
】n a X
1 7 4 0
,
17 6 5
,
2 9 6 0
,
I EM S ( m /
z
)
: 3 6 0 ( M + )
,
2 6 4
,
2 4 6
,
2 18
,
2 0 3
,
18 9
,
1 7 3
,
16 1
,
14 9
,
l ] 9
,
9 7
,
5 5
。 ’ H
N M R (C D C 1
3
)
, 己p p m : 2 . 1 1 ( d d t , J = 1 0 . 0 , 5 . 5 和 1 . OH z , I H . H 一 l ) , 2 . 16 ( m , I H , H 一 2。 ) , 1 . 42 ( m ,
I H
,
H
一
2日) , 2 . 1 1 ( d t , I H , J = 1 5 , 5 , 7 . OH z , H 一 3 a ) , 2 . 3 8 ( d d , J = 1 5 . 5 , 7 . 7 H z , H一 3日) , 5 . 4 7 ( d , J 一
8
.
OH z
,
I H
,
H
一
6 )
,
3
.
0 2 ( d d d
,
J 一 10 . 5 , 1 1 . 1 , 2 . S H z , I H , H 一 8 ) , 4 . 4 7 ( d d d , J一 10 . 5 , 1 1 . 1 , 2 . S H z
I H
,
H
一
8 ) 1
.
5 1 ( b q
,
J = 1 ZH z
,
I H
,
H 一 g a ) , 2 . 5 0 ( d d d , J 一 13 . 0 , 4 . 0 , 3 . OH z , I H , H 一 9日) , 1 . 8 5 ( m ,
I H
,
H
一
1 0 )
,
5
.
8 3 ( d
,
J = 3
.
3 H z )和 6 . 1 6 (d , J一 3 . 3 H z ) , ( e a e h I H , H一 3 ) , 1 . 1 0 ( d , J = 6 . O H Z , 3 H , H -
1 4 )
,
1
.
0 6 ( s
,
3 H
,
H
一
1 5 )
,
2
.
0 8 (S
,
3 H
,
O A C ) ;
’ 3C N M R ( C D C 13 ) = 6p p m : 4 7
.
3 6 ( C
一
1 )
,
2 4
.
9 9 ( C
一
2 )
,
3 8
.
3 8 ( C
一
3 )
,
2 1 8
.
4 2 (C
一
4 )
,
5 6
,
5 6 ( C
一
5 )
,
7 5
.
2 8 ( C
一
6 )
,
5 2
.
6 3 ( C
一
7 )
,
7 6
.
7 6 ( C
一
8 )
,
4 4
.
8 5 ( C
一
9 )
,
V o l
.
10 N o
.
1张人伟等 :水朝阳草抗癌化学成分的研究
30
.
5 4 ( C
一 10 )
,
13 7
.
89 ( C
一
1 1 )
,
16 9
.
5 1 ( C
一
1 2 )
,
12 2
.
4 1 ( C
一
13 )
,
2 0
.
4 8 ( C
一
1 4 )
,
1 8
.
9 3 ( C
一
1 5 )
,
16 9
.
6 0和 2 1 . 6 0 ( O e o e H 3 ) 。
致谢 瑞士 Br uk er 公司 rD . eH in : R ue qg er 美国伊里洛斯州大学药学院林隆泽教授代测各种 N M R 谱和
计算机漠拟计算 ,元素分析由云南省化工研究院代测 ,其它光谱由我所分析室代测。 由上海医药工业研究院和
美国国立癌症研究所进行抗癌筛选 。
参 考 文 献
B o t h n e r B Y e t a l
.
S t r u e t u r e d e r e r m in a t i o n o f a t e t r a s a e e h a r i de t r a n s i r e n t n u e l e a r o v e r h a u s e r e f f e e t t h e r o at t in g
.
aJ m
( 加爪 OS 。 , 1 9 8 4 , 10 6 : 8 1 1
B a x A , S t r u e t u r e d e t e r m i n a t i o n a n d s Pe e t r a l a s s i n g m e n t b y Pu l s e d P o l a r i z a t i o n t r a n s f e r v i a l o n g
一 r a n g e P r o t o n
一
C a r
-
b o n 一 1 3 C o u pl i n g s
.
J M a 夕龙 : e阳 n l , 1 9 8 4 , 5 7 : 3 1 4
G r le s i n g h e r G e t a l
.
F e g u e n e y e f f e e t s a n d t h e i r e l im in a t i o m i n N M R r o t a t in g
一
f r a m e C r o s s r e la x a t i o n s pe e t r o s e o P y
.
J
M a g 、 刀`沼 。双 . 1 9 8 7 , 7 5 : 2 6 1
O v e r z d u r d y e v A e t a l
.
T h e s t r u e t u r e o f E r g o l i d e
.
K h ,阴 乃: , 习。 尸己。 n , 19 8 6 , 5 : 5 6 8 .
R u s t a ; y a n A et 。 2
.
eS
e o 一g u a l a n o一i d e a n d o t h e r s e s g u i t e r p e n e l a e t o n e f r o m p o s t i a b o m b y e i n a . ltP lot
《消凌刃儿 :就 ,夕 , 19 8 9 , 28 :
3 1 2 7
B u r k e r t U et a Z
一 “
M
o l e e u l a r M e e h a n i e s
“ .
A m e r ica n C h e m l ca l S o u i e t y W
a s h i n t o n D e
,
1 9 8 2
,
C h a P t e r 2
.
S T U D I E S O N T H E A N T I C A N C E R C O N S T I T U E N T S O F
I N U L A H E L I A N T l U S一 A Q U A T IC A C . Y . W U E X L IN G
Z h a n g R
e n w
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i
,
L i n Y o n g y u
e ,
Q i y u f a n g
( Y
u n n a n 乞n s t it社亡5 Of m a扮 i a M ed i ca , K u n m i n g 6 5 0 1 1 1 )
C a i Y
u q i o n g
( Y
u n n a n I n s ti z u et o f 价趾夕 OC n t尹 0 1 , K u n m in g 6 5 0 0 1 1 )
A b s t
r a e t T h e E r g o l id
e w a s i s o l a t e d f r o m t h e f l o w e r o f 八 u la h el i a n t h u s 一 a g u a t i e a C . Y . W u e x L i n g . l ts
s t r u e t u r e w a s id
e n t if ie d a s E r g o l id e b y Ph y s ie
一 e h e m ie a l e o n s t a n t s
, s P e e t r a l a n a ly s is a n d t h
e e o m P a r s io n
o f t h
e t h e s e e o u P li n g e o n s t a n d s w i t h t h
o s e e a l e u la t e d f r o m e o m P u t e r m do
e l i n g l e d t o t h
e a s s i n g m e n t o f
th e P r o t o n s t e r o to Pi e a l l y
.
C o m P o u n d w a s s h o w n t o b e w i th e x t r e m e l y P o n t e n t e y t o to x i e i t y a g a i n s t c u l
-
t u r e d e a n C e r C e l l
.
K e y w o r d s I
n u如 h e l胡 n th左 s 一 a g u a t i e a , E r g o l id e , a n t i e a n e e r
~ 二处 ,夕乙心 卜之 叹力e 几父一护 J 处心吧刁吧 J 之心尺 碑之尺声 、 欠 .~ 少之一一欠产之 ( 心哎产 、 欠产 J 心~ . ~欠一 J 交产 J ( 刁吧心吧 ~ 夕吧一乡吧刁吧.刁心刁之一一 目 夕之 ~ 夕吧劝交护 J 之产 J 吧 产J 吧 r J 屯名吧产 , 乙欢迎订阅 1 9 98 年《中国酿造 》杂志
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邮政编码 : 2 0 0 0 5 0
碧 厉 , 若刃刃刃反刃 7匆