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拉丁学名
(基源 ) 彝文药名彝文注音 (汉字音读 ) 汉文药名
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白 术
木 耳
收稿日期 : 1卯 8年 8月2 1日
水朝阳草抗癌化学成分的筛选研究 `
昆明医学院第一附属医院 (砧侧U ) l梁明达
胡美英 梁 红 贾 伟 陈昆昌 胡月英 杜开运
摘要 用体外及体内癌细胞株筛选实验证明水朝阳草确有抗癌作用 , 其药用部位是叶和花 。
有效化学成分为倍半菇内醋及黄酮 。
关健词 水朝阳草 抗癌作用 黄酮 倍半菇内醋
水朝阳草〔’〕 , 学名水朝阳旋复花 ( anI -
坛 触之记瓜入。 一 叼山对 ica C . Y . 肠 ) 。 始载于
《滇南本草 )图 , 谓用 于治乳汁不通 、 乳岩 、
乳痈红肿疼痛… … 。 云南民间用于治疗乳腺
癌 、 消化道癌 。 t3] 但尚未见有关科学实验报
告 。 本文报道用体外体内筛选的综合实验方
法 , 探讨水朝阳草的抗癌化学成分 。
1 实验材料
中国民族民间医药杂志 1卯8 年总 35 期
1
.
1 水朝阳草 秋季采自昆明西山林间湿
草地 , 洗净凉干备用 。 按 《云南省药品标
准》闭鉴定药材 。
水提取液 : 取药材 5 9 浸于 s d 蒸馏水
中 , 于试管内沸水浴半小时 , 取滤液备用 。
乙醇提取液 : 取药材 5 9 浸于 s iln 50 %
乙醇中 , 于试管内沸水浴半小时 , 挥发的乙
醇以蒸馏水补足 s d , 取滤液备用 。
2 3
次 , 共 9 次 , 第 10 日处死动物称体重 。 解
剖肿瘤称取瘤重 , 依 C一 T/ C x 10 计抑瘤
率 , 以评价药物抑瘤效果 。 据体重变化估计
药物的毒性大小 。
3 实验结果
3
.
1 水朝阳草抗癌的药用部位 将水朝阳
草植株的根 、 茎 、 叶 、 花分别用水浸提 , 均
以 10 拼岁 d ·的浓度作用于肺腺癌细胞 ( Z x
1护 / d ) , 结果见表 1 。
表 1 水朝阳革不同部位对癌细胞生长的抑制率
药用部位 癌细胞生长抑制率 P值
5
.
20 %
32
,
46 %
> 0
.
05
> 0
.
05
根茎
结晶混悬液 : 以水朝阳草的花置于 回流
提取器中 , 加入石油醚 , 水浴上加热 印 -
o ℃ , 回流提取 , 冷时有结晶析出 , 反复重
结晶 , 到得白色针状结晶。 用乙醇溶解结晶
并加以碾磨 , 再用蒸馏水稀释至所需的浓
度 , 呈混悬液备用 。
注射液 : 结晶经完全溶解后 , 制成供临
床试用的针剂 。
1
.
2 实验动物 昆明种小白鼠 , 由云南省
药品检验所提供 , 雌雄不拘 , 健康 , 体重
18 一 2 2 9。
1
,
3 人癌细胞 主要以肺腺癌细胞株作为
靶细胞 。 〔5 〕
1
.
4 动物瘤株 小鼠宫颈癌 ( 1U 4 ) 及艾氏
腹水癌 ( EAC ) 由云南省药物研究所提供 。
小鼠胰腺癌 (M咒 ) 。 ( 6〕
2 实验方法
按徐淑云 《药理实验方法学》图进行实
验 。
2
.
1 体外实验 以细胞生长抑制率为药物
抗癌活性的主要判定指标 。 实验时 , 取传代
后 48 小时处于对数生长期的培养细胞 , 用
Rl狱n 64 0 培养液制成细胞混悬液 , 每毫升
含细胞数 20 万个 。 取 0 . 9d 细胞混悬液于
预先置有盖玻片 ( n ~ x n ~ ) 的无菌小
瓶中 , 37 ℃恒温箱中放置 2 小时 , 待细胞贴
壁后 , 加人受试药物 0 . 1时 于小培养瓶内 ,
分设 l x x〕、 lX() 、 10 、 l 、 0 . 1矛侧 d 等浓度
组 , 每一浓度组分设 4 一 8 瓶细胞 。 轻摇小
瓶后置于 37 ℃恒温箱中培养 。 48 小时后取
出小瓶内的盖玻片 , 以 H u nk 氏液冲洗 , 酒
精固定 , HE 染色 , 镜检计数贴壁的活细胞
数 , 按 C一 T/ C x 10 计细胞生长抑制率 。
每项试验重复 2 一 4 次以上 。
2
.
2 体内实验 取稳定传代的动物瘤组织
细胞混悬液 0 . 2 d (含瘤细胞 2X() 万个 ) , 分
别注射于小鼠左腋皮下 , 随机分为实验组 、
阳性对照组 、 阴性对照组 。 实验组又分设 2
一 3 个剂量组 。 第 2 日灌 胃给药 , 每 日 1
2 4
叶 98 . 59% < 0 . 0 1
花 砚 . 16 % < 0 . 01
由表 1的实验结果显示 , 以叶及花的抗
癌作用最强 。 因云南民间仅以花治疗癌症 ,
故本文重点探讨水朝阳花的抗癌作用 。
3
,
2 水朝阳花的抗癌化学成分 实验结果
见表 2 。
衰 2 水朝阳花抗瘤化学成分对名细胞的抑制率
化学成分 药物浓度 活细胞数 抑制率%
空白对照 生理盐水 225 . 78 .0 0
油 脂 1加闪犷耐 20 .3 2 .2 42
叶绿素 10 闪犷耐 231 . 79 .0 0
三 裕 1加州好耐 203
.
26 .9 盯
黄 酮 10 }刁耐 川 . 47 .50 63
倍半菇内酉旨 10 闪岁耐 1.7 0 92 . 47
由表 2 看出 , 水朝阳花的抗癌的有效化
学成分是黄酮及倍半菇内醋 , 尤以后者的抗
癌作用最强 。
3
.
3 水朝阳花的水及石油醚提取物的抑癌
强度比较 实验结果见表 3 。
表 3 表明 , 水朝阳花的石油醚提取物对
肺腺癌细胞的生长抑制效应 , 不论高或低浓
度的情况下 , 作用均比水提取物为强 。
中国民族民间医药杂志 l卯 8年总 35 期
表 3水朝阳花的水及石油酸提取物的抗瘤作
用比较
药物名称 药物浓度
0 1“盯 l ml洲罗产 l m0 . 11上『 I m
水提取物 麟 . 6 1% 4 3.n % 0%
石油醚提取物 10 .0% 94 .5 6% 38.0 1%
5一氟脉啥吮 7 8.卯 % 5 8. 9 3% 9 1.2 0%
长春新碱 94 .50%2 9 .为 % 04 .0%
3
.
4石油醚提取物所得的结晶 , 制成水朝
阳花注射液 , 对肺腺癌细胞集落生长的抑制
作用 结果见表 o4
表 4 水朝阳花注射液对肺腺瘤细胞集落生长
的抑制作用
各次实验癌细胞
分组 药物浓度 集落形成数
1 2 3 4 5
阴性对照 生理盐水 2 17 1% 180 172 29 5
0
5一uF
(阳性对照 )
场2 9 /10 “ 乙 ml 0 0 0 0 0
0
QO
水朝阳花注谢液
(实验组 )
1事娜mI
0
.
I t
上岁耐
1《)I又合z闹
l沁 z d
0
.
1尸『耐
0 0
4 0
0 0
0 0
0 0
0 0
19 1 0
0 0
0 0
0 2
表 4 表示 , 在 5 次实验中 , 生理盐水阴
性对照组的各次实验 , 癌细胞形成集落数均
很多 , 表明生长力旺盛 ; 5一 uF 阳性对照组
仅在最低浓度时有 2 次实验有少数癌细胞集
落形成 ; 水朝阳花注射液实验组 , 也只在最
低浓度 (0 . 12之岁而 ) 时 , 在 2 次实验中有极
少数的癌细胞集落形成 , 表明癌细胞的生长
力显著被削弱 。
3
.
5 水朝阳花注射液对人的恶性瘤细胞及
正常细胞抑制作用的比较 见表 5 。
表 5 水朝阳花注射液对人的恶性摘细胞及正
常细胞抑制作用的比较
浓 度
名称 —10拜留耐 1矛刁耐 0 . 1尸扩耐鼻咽鳞癌 (BK ) 10 % 46 士 6% 7 土 2%宫颈鳞癌 ( He la ) 10 % 43 土 6% 10 土 3 %胃腺癌 (BG ) 10 % 57 土 7% 33 土 5 %肠腺癌 (CR ) 10 % 64 土 8% 36 土 5 %肺腺癌 (以尤 ) 10 % 56 土 7% 38 土 5 %白血病 (鞍 2 ) 10 % 87 土 10 % 7 1 土 8%
人牙眼正常细胞 10 % 3 士 1% 0%
由表 5 看出 , 水朝阳花注射液在大剂量
时 ( > 10 拼岁而 ) 不论对人的正常细胞或是
恶性瘤细胞均有极强毒性作用 , 引起生长的
完全抑制 ; 在较小剂量时 , 对各种恶性瘤细
胞仍有明显的抑制生长的作用 , 但对正常细
胞则抑制作用很小或无 , 提示水朝阳花注射
液对肿瘤细胞或正常细胞的作用有明显的选
择性 。
3
.
6 水朝阳花提取物灌胃对小鼠实体型宫
颈癌 ( U 14 ) 的疗效 见表 6 、 表 7 。
表 6 水朝阳花提取物对小夙实体型宫颈癌 《lU : ) 的疗效
分组 剂量
m留 kg/ d
鼠数
始 /末
体重 ( g )
始 /末
瘤重
( g )
抑瘤率
%
P值
050<>水朝阳花水提取物
水朝阳花石油醚提取物
水朝阳花注射液
威麦宁粉剂 ’
生理盐水 (对照 )
10 / 7
10/ 8
10/ 8
119/
10 / 9
2
.
65 / 25
.
37
23
.佣 / 25 . 0
2
.
70/ 26
.
76
23
.
27 / 24
.
17
2
.叨 / 2 5 . 75
1
.
07
0
,
86
0
.
95
1
.
38
1
.
87
42
.
78
54
.
0 1
49
.
20
26
.
20
503期闹
* 曲靖地区医院吴友仁提供 , 为阳性对照 。
中国民族民间医药杂志 1卯8 年总 35 期 2 5
衰 , 水朝阳花石油趁提取物对小夙实体型宫颐瘤 《lU’ 》 的疗效
分组 剂量
n喇 k岁d
鼠数
始 /末
体重 ( g ) 瘤重
始 /末 ( g )
抑瘤率
%
P值
水朝阳花石油醚提取物
(实验组 )
5一氟脉啥吮
(阳性对照组 )
天仙丸 资
(阳性对照组 )
生理盐水
(阴性对照组 )
从刃 x 4 10/ 8 1 9 . 24 / 20 . 0’7 0 . 80 肠 . 67 < 0 0 1
5()
x Z 10/ 10 18
.叫 / 17 . 34 0 62 74 . 17 < 0 . 0 1
《 联 ) x s 1()/ 9 19 . 8 1 / 18 . 8() 2 . 20 8 . 30 > 0 . 05
l耐 X S 10/ 10 18 . 80 / 25 . 92 2 . 40
, 购自药材公司
表 6 及表 7 表明 , 水朝阳花石油醚提取
物灌胃治疗小鼠实体型宫颈癌 ( 1U 4 ) 具有
明显疗效 , 且对小鼠无明显毒性 。
3
.
7 水朝阳花提取物经腹腔注射对小鼠艾
氏腹水癌的疗效 见表 8及表 9o
表 8 水朝阳花提取物对小限艾氏腹水摘 ( 220 万 / 只 ! 的疗效
存活天数
分组 剂量
m『 k『 d
鼠数
始 /末
体重 ( g )
始 /末 自死 P值处死
平均存 生命延
活天数 长率%
水朝阳花结晶混悬液
生理盐水
40 x l 0
0
.
S lnI x 10
24
.印月 3 . 86 2 例 25 . 93 6例 lm
解 . 21 / 25 . % 10 ~ 20
9 1
.
25 508
.
3 < 0
.
0 1
巧 . 0
8690/
, 腹腔接种瘤细胞数 : 每只鼠 22() 万
衰 , 水朝阳花提取物对小鼠艾氏腹水瘤 (创刃万 /只 ) 的疗效
分组 剂量
m岁 k岁 d
鼠数
始 /末
体重 ( g )
始 /末
存活天数
自死 处死
平均存 生命延
活天数 长率% P值
水朝阳花结晶混悬液 40 x l0 24 . 14/ 2 、 63 2例 20 . 24 6例 102 82 .0 5价 . 4 < .0 01
生理盐水 .0 8耐 x lo 24 . 23 / 24 . 16 9 ~ 16 13 . 5
` 腹腔接种瘤细胞数 : 每只鼠 2印 万
表 8、 表 9均显示水朝阳花提取物对小
鼠艾氏腹水癌具有明显的疗效 。
3
.
8 水朝阳花注射液肌肉注射对小鼠胰腺
癌的疗效 见表 10
2 6 中国民族民间医药杂志 l卯 8年总 35 期
表 1 0水朝阳花注射液肌肉注射对小吸映腺摘的疗效
分组 剂量
m留 k岁 d
鼠数
始 /末
体重 ( g)
始 /末
瘤重
( g)
抑瘤率
%
P值
水朝阳花注射液
(溶剂为丙二醇 ) 0 3
X1 02 1
.
6 1 /1 3
.
2 32
.
8 7 2 0
.
5> 0
.
0 5
) ( 4x 1 2 01
.
52 /1 3
.
8 2 2
.
6 2 33
.
0< 0
.
0 5
9 0 / ló 19 /
) ( 5
x 1 02 1
.
51 /8 2
.
9 8 2
.
2 50 3
.
2< 0
.
0 5
对照
(丙二醇 ) 0
.
2 n I lx 1 02
.田 /0 3 .1 3 3 .6 1
由表 1 0看出 , 水朝阳花注射液肌肉注
射对小鼠胰腺癌 (M代 ) 实体瘤亦有一定的
治疗效果 , 且无明显毒性反应 。
4 讨论
旋复花属植物 , 据 《中国植物志》 记
载 , 在全世界约有 10 种 , 我国有 20 余种 ,
云南省有 9 种 , 水朝阳草是其中的一种 。
水朝阳草学名水朝阳旋复花 (加由 he -
l她川h l招 aq刚 ica C . Y . 肠 ex “ gn ) , 为菊科
多年生草本植物 , 产于云南省海拔 12X() -
3仪旧m 的水沟边 、 湿草地 、 向阳湿润地 , 又
称滇旋复花 , 别名水朝阳花 、 金佛草 、 水葵
花等 。
水朝 阳草作 为药物始载于 《滇南本
草》 , 图并载有治乳岩 、 乳痈的处方 。 乳岩即
为现代医学的乳腺癌 。 《滇南本草》 务本卷
一上第 35 页又谓 “ 水朝阳草 , 味甘 、 辛 、
无毒 。 生水内… …花朝阳… …采取煮硫磺成
汞 , 研粉 , 红色为丸 , 不论百病 , 服此硫磺
丸神效 … … ” 19 74 年水朝阳旋复花被收载
于 《云南省药品标准 》。闭 19 5 年以 “ 水朝
阳草” 为名收载于 《云南省志卷十七 医药
志》 , 〔’ 〕并谓 “ 消痰 、 止咳 、 祛风明目 、 清热
软坚 … … 用于乳痈红肿疼痛 、 乳岩 … … ”
《云南抗癌中草药》st] 谓民间用 以治疗食道
癌 、 胃癌 、 结肠癌 、 维隔肿瘤 、 乳腺癌 、 牙
眼癌 、 脑部肿瘤 。 但迄今尚未见到有关水朝
中国民族民间医药杂志 1卯8年总 35 期
阳旋复花抗癌作用的科学实验报告 。
作者在云南省卫生厅及省科委的支持及
资助下 , 在云南省首次建立了人癌细胞株及
胰腺癌动物瘤株 , 可 以稳定传代大量繁殖供
给了许多单位使用 , 作者用此工具从云南及
全国的中草药中 , 筛选出几种有价值的抗癌
中草药 , 水朝阳草乃其中之一 。
国外用人癌细胞作为靶子进行体外抗癌
实验已有数十年历史 , 方法 日新月异 , 均希
望建立确实可靠的抗癌药筛选系统 。 本文的
实验研究是用体外实验的初筛而后体内实验
复筛 , 再用体外实验追踪有效化学成分及探
讨作用机理的综合筛选系统 。 体外实验是以
癌细胞的盖玻片培养法为基础 , 在显微镜下
观察细胞的贴壁铺展集落生长情况及细胞形
态结构变化 (胞膜 、 胞浆 、 核膜 、 核仁 、 核
染色质 、 核分裂 ) , 作为判断药物作用后癌
细胞是否被杀死及其生长能力是否受损的综
合客观指标 , 并制成标本长期保存观察 。 经
过大量的对国内国外生产的抗癌药的反复观
察 , 证明上述筛选系统有很高的稳定性及可
重复性 , 因此方法学是客观可靠的 。
在水朝阳草的抗癌作用一系列实验研究
中 , 我们认识到水朝阳花的提取物对多种人
癌细胞 (包括鳞癌 、 腺癌 、 白血癌细胞 ) 均
有杀伤及抑制生长的作用 。 不论是水 、 醇 、
石油醚提取物均有抗癌活性 , 但以石油醚提
2 7
取而得的结晶 (倍半菇内醋 )及其制剂的抗
癌活性最高 。 水提取物的抗癌活性虽较低 ,
但也说明民间传统煎剂 口服治癌是可行的 ,
且方便实惠 。
用动物癌株进行的体内抗癌实验中 , 证
实水朝阳草的各种提取物对宫颈癌 (鳞癌 ) 、
乳腺癌一艾氏腹水癌 、 胰腺癌均显示抑瘤作
用 , 以结晶混悬液对乳腺癌疗效最佳 。 灌胃
给药或是腹腔注射 、 肌肉注射均有抑瘤作
用 , 对实体瘤亦有疗效 , 而且实验动物的体
重未下降 , 说明无明显的毒性反应 , 对癌有
较高的选择性 。 当今的抗癌药 , 有效而无毒
者尚属少见 。
经过以上的活性追踪试验 , 确认了水朝
阳草有抗癌作用 , 其抗癌药用部位是叶及
花 , 其有效化学成分是黄酮及倍半菇内醋 ,
特别是倍半菇内醋可以认为是水朝阳草的有
代表性的抗癌化学成分 , 呈白色针状结晶 ,
分子式为 1C 7珑仇 , 分子量为 306 , 化学结
构式已确定 , 经查证 , 为一个新的抗癌内醋
化合物 。 此化合物的发现 , 已取得国 内专
利 , 并在国际学术会议上 , 得到国际认知 ,
有较好的发展前景 。
有关的药物化学 、 制剂学 、 毒理学 、 药
理学 、 临床治疗学正在进行系统研究 , 有待
今后报告 。
研究过程中得到云南省药物界老专家张
震 、 乐开礼 、 张子昭 、 曾育麟 、 魏均娴等的
咨询协助 , 特此致谢 。
参考文献
1 云南省志七十卷医药志 . 云南人民出版社 . 1卯 5 , 即 3
2 兰茂 . 滇南本草 ·第 l 卷 . 197 7 , 3 79
3 胡月英 . 云南抗癌中草药 . 19 82 , 226
4 云南省药品标准 . 1叨 4 , 2 87
5 梁明达等 . 中华肿瘤杂志 . 198 5 , 2 : 81
6 胡美英等 . 中华肿瘤杂志 . 19 86 , 1 : 1
7 徐淑云等 . 药理实验方法学 . 19 82 , 1 巧 一 fl 20
关 : 本课厄为卫生部及省卫生厅 、 省科委资助项目。
(收稿日期 : 1卯 8 年 8 月 24 日 )
蒙药材阿给的本草考证
内戴古蒙医学院蒙药系 (0刀叹闷1 ) 布日额
内象古哲盟科左中旗中心医院 张金泉
摘 要 对蒙医用阿给进行了基源考证 , 确定正品为菊科植物冷篙 月茂川自她 .成涵卫刊 d . 。
为正确使用该药材提供了科学依据 。
关链词 蒙医 阿给 基源考证
阿给 ( igA ) 为蒙医常用药 , 具有止血 、
消肿之功效 , 临床上主治各种出血 、 关节肿
胀 、 肾热 、 月经不调 、 疮痛等 , 也是蒙医上
常用的 “ 人造圣水组成之一 ” 。 〔’ 〕本文对其进
行了基源考证 , 确定正 吕为菊科植物冷篙
A
~
沁 ifr igd a iw ld
. , 为正确使用该药材
提供了科学依据 。
1 据文献考
《金光注释集》图认为 : “ 阿给有黑 、 白
二种或灰 、 紫二种 。 白 (或灰 ) 阿给为木
本 。 叶具裂 , 味微 , 灰白色 … … 。 具有止
血 、 消关节肿之功效 。 ” 《无误蒙药鉴 )[ 3〕认
为 : “ 阿给有灰 、 白 、 灰棕三种 。 灰阿给为
佳品 , 茎纤细 ; 颜色似艾篙 , 小叶具裂 , 花
中国民族民间医药杂志 l卯 8 年总 35 期
A BS A T RC TS OF OG [ ] R刃 NL A A T RI CL ES
An 廿一 。班址 er E伪翻 o fl i Il L u a h e U别川血 u S A邵 I a柱 C a
枷咭 从鳍 一 由 t el a仆 ei Frst H佣p i曰 Att a eh e dto K五m n in g M汕以 伽 11卿
A侧刃图比 C T: h Ts i a Pp er r epo rts t h en at i一 cn a cr et a ci vty o fIn ul al h ein at hus 理笋t ai a c
.仆 e e巧沈 -
t i v e eh e而。目 c。叮p 招 it ion r t a h e el a cto n en a dk et o n io e cm卯 n u d.
(r i Oi g耐 rt i al e con 到唱吧 32 )
A加沉如 I aI R曰 a er C hon Mo 理笋l in a Ma五 ein eAl g
Bui R一 e以 al
玩p t . Mo 叫势l in a h P
n a c
o lo y g In e
r Mo叫势l i aol cl eg eo f M威 i cn e
A砚刃卫 A C T:仆 e e ert i 6司 p耐 u ets o fi g as w a di e fn e ds a ch叮sn at h e而 p ln at A到短n `店记 .脚妙血
叨汉记 dur in gt h et c目旧l a
~
hon ts io心n n at h des ci en i讯 cs a bs iot fs uin gt h e dr u g ~p ro vi de dv h e e
.
(r i Oi g耐 art i cl eon p a罗 82 )
H e确 d心回 S泊勿 o f Ui g U凶m Dr u g
月 i似n gu Hi刀认n g Y an u F
兀n Jin ag Ins t it ut e f OMt a er i a Me di a e
A理引旧 L A C T:仆运 rt ai cl e de叮s 袱t ha hro bo fi g el ast u衡 o fi Uu gr in am曰 i ei耐 m t a er i已 兀以刁皿k -
o u
, 田记州 snt out 让以 t iaB d( )u kou 15 e o川ur 汉妇 m de ic 耐 m a t e ir al of 兀歇d川 k o u .
(侃 ig耐 art icl e on aP 邵 29 )
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4 中国民族民间医药杂志 1卯 8年总书 期