全 文 ：齐鲁医学杂志 2010年 12月第 25卷第 6期　Med J Qilu , December 2010 , Vol.25 , N o.6
doi:10.3969/ j.issn.1008-0341.2010.06.027
[ 收稿日期] 2010-06-16;　[ 修订日期] 2010-07-28
[ 作者简介] 王晓俭(1962-), 女 , 实验师。 E-mail:w x jbbb@
163.com。
[ 通讯作者] 葛亮(1980-),男 ,硕士 ,实验师。
反相高效液相色谱法测定香青兰中阿魏酸的含量
王晓俭1 ,葛亮2
(1　青岛大学医学院人体形态学实验室 ,山东 青岛　266071;　2　新疆名医名方与特色方剂学重点实验室)
[ 摘要] 　目的　建立测定香青兰中阿魏酸含量的方法。方法　色谱柱为 Kromasil C18(4.6 mm×150.0 mm ,
5 μm),流动相为乙腈-50 g/ L 甲酸(31∶69),检测波长 280 nm ,流量 1.0 mL ·min -1 ,柱温 30 ℃。结果　所测香青
兰中阿魏酸的含量线性关系良好 , 线性范围为 0.04 ～ 0.20 μg (r=0.999 3)。 其回收率为 99.94%(RSD=
0.98%)。结论　所建方法准确 、简便 ,为科学地评价香青兰药材的质量提供了依据。
[ 关键词] 　香青兰;阿魏酸;色谱法 ,液相
[ 中图分类号] 　R931.6　　[ 文献标志码] 　A　　[ 文章编号] 　1008-0341(2010)06-0528-03
DETERMINATIONOF FERULIC ACID CONTENT IN MOLDAVICA DRAGONHEAD BY RP-HPLC 　 WANG X IAO-J I AN , GE
L IANG　(Qingdao Universi ty Medical C ol lege , Qingdao 266071 , China)
[ ABSTRACT] 　Ob jective　T o establis h a method for determination of the content of ferulic acid in moldavica dragonh ead.
Methods　The chromato bar of Kromasi l C 18(4.6 mm×150.0 mm , 5 μm), mobile phase of acetonit rile -5% f ormic acid(31∶
69), detection w avelen gth of 280 nm , f low rate of 1.0 m L ·min-1 , and colum n tem peratu re of 30 ℃w ere u sed in the study.　Re-
sul ts　T he con tent of ferulic acid in moldavica dragonh ead detected w ith a good linear cor relation , th e lin ear range being 0.04-
0.20μg (r=0.999 3).It s recovery rate w as 99.94%(RSD=0.98%).　Conclusion　Th e meth od created is accurate and conve-
nien t , w hich of fers an evidence for scient ifi c as ses sment of the quali ty of medicinal subs tances of moldavica dragonhead.
[ KEY WORDS] 　dracoophalun mololariea L;f erulic acid;st ratography , liquid
　　香青兰是唇形科青兰属植物 ,维吾尔名为巴德
兰吉布牙 ,在新疆地区为常用的维药之一[ 1] 。其药
性根据维医药理论属二级温热 ,有很强的香味 ,具有
补益心脑 、活血化瘀 、通路开窍等功能。我国资源十
分丰富 ,其主要化学成分为挥发油 、萜类 、黄酮类 、氨
氢酸 、微量元素等[ 2] 。在维吾尔族广泛用于治疗冠
心病及血液质旺盛(高血压)、寒性神经性头痛 、寒性
感冒 、气管炎等疾病[ 3] 。研究表明 ,黄酮类化合物不
但可以降血脂 、抑制血小板聚集 ,而且还具有保肝 、
抗炎 、抗病毒 、抗菌等作用[ 4] 。本研究采用反相液相
色谱法测定香青兰药材中阿魏酸的含量 ,旨在进一
步为香青兰的研究开发奠定基础。
1　材料与方法
1.1　仪器
岛津半制备高效液相色谱仪(LC-6AD高压泵 ,
S PD-20A 型紫外线检测器 , CBM-20A 色谱工作
站);KQ-400DB型数控超声波清洗器(昆山市超声
仪器有限公司);梅特勒 A L 204电子天平(梅特勒-
托利多仪器上海有限公司)。
1.2　样品与试剂
阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定所);香
青兰药材采自吉木萨尔县二宫乡维吾尔药种植基
地 ,经新疆自治区中医院李永和主任药师鉴定为唇
形科植物香青兰(Dracocephalum moldavical L.)的
干燥根 。
1.3　对照品溶液制备
精密称取阿魏酸对照品 2.00 mg 放入 100 mL
容量瓶中 ,加入甲醇溶液制成 0.02 g/L 的阿魏酸对
照品溶液。
1.4　样品溶液制备
精密称取香青兰粗粉约 1.0 g ,加甲醇 10 mL ,
超声处理 30 min ,放冷 、滤过 ,滤液置 25 mL 量瓶
中 ,用少量甲醇分次洗涤容器和残渣 ,溶液滤入同一
量瓶中 ,加入甲醇溶液定容至刻度 ,摇匀 ,用 0.45μm
微孔滤膜滤过 ,即得。
1.5　色谱条件
色谱柱为 Kromasi l C18(4.6 mm×150.0 mm ,
5 μm);流动相为乙腈-50 g/ L 甲酸(31∶69);检测
波长 280 nm ;流量 1.0 mL/min;柱温 30 ℃;进样量
10 μL 。阿魏酸与其他组分基线分离 , R>1.5。以
阿魏酸峰计算柱效 ,其理论塔板数≥3 300 ,拖尾因
子为 0.99 。
1.6　线性关系分析
分别精密吸取 0.02 g/L 阿魏酸对照品溶液 2 、
4 、6 、8 、10μL ,分别进样 ,以浓度(X)为横坐标 ,峰面
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积(Y)为纵坐标 ,进行线性回归分析 。
1.7　精密度实验
精密吸取阿魏酸对照品溶液 5 μL ,连续进样 6
次 ,测定阿魏酸峰面积。
1.8　稳定性实验
精密吸取香青兰样品溶液 5 μL ,分别在 0 、2 、4 、
8 、12与 24 h 进样 ,测定阿魏酸峰面积 。
1.9　重复性实验
精密称取香青兰粗粉 1.0 g ,共 6份 ,按样品测
定法测定阿魏酸含量 。
1.10　加样回收率实验
精密称取已知含量的香青兰粗粉 0.5 g ,共 6
份 ,分别精密加入一定量的阿魏酸对照品 ,按照上述
色谱条件进样测定其平均回收率。
1.11　样品的测定
按“1.4”方法制备样品溶液 3份 ,精密吸取阿魏
酸对照品溶液 10 μL ,样品溶液 10 μL ,分别注入高
效液相色谱仪 ,测定色谱峰峰面积 ,计算其含量。
2　结　　果
精密吸取阿魏酸对照品溶液和香青兰样品溶液
各 10 μL ,采用岛津半制备高效液相色谱仪检测香
青兰中阿魏酸的含量 ,色谱结果见图 1 、2。
2.1　线性关系
经回归分析显示 ,阿魏酸在 0.04 ～ 0.20 μg 内
有良好的线性关系 ,回归方程为Y =13 425 140X -
65 123 , r=0.999 3。
2.2　精密度实验
阿魏酸对照品溶液进样后测定阿魏酸峰面积 ,
其 RSD为 1.59%。
2.3　稳定性实验
香青兰样品溶液进样后测定阿魏酸峰面积 , 其
RSD值为 1.71%。
2.4　重复性实验
香青兰粗粉 6份按样品测定法测得的阿魏酸含
量分别为 5.21 、5.36 、5.29 、5.33 、5.41与 5.38 mg/
g ,其平均值为 5.33 mg/g , RSD为 1.35%。
2.5　加样回收率实验
其平均回收率为 99.94%, RSD 为 0.98%。结
果见表 1。
2.6　样品的测定结果
本文方法测得香青兰药材中阿魏酸的平均含量
为5.47 mg/g , RSD为 1.72%。
图 1　阿魏酸标准品色谱图
图 2　香青兰样品色谱图
表 1　阿魏酸加样回收率
样品 药材质量(m/ g)
样品含量
(m/m g)
加入量
(m/ g)
测得量
(m/ g)
回收率
(χ/ %)
1 0.484 2.58 2.60 5.20 100.77
2 0.490 2.61 2.60 5.18 98.85
3 0.495 2.64 2.60 5.23 99.62
4 0.492 2.62 2.60 5.19 98.85
5 0.486 2.59 2.60 5.22 101.15
6 0.493 2.63 2.60 5.24 100.38
3　讨　　论
在实验中 ,我们比较了 3种香青兰药材中阿魏酸
提取方法 ,即回流提取法 、超声提取法 、浸渍法 ,因超
声提取法简单 、提取物含量高而作为本研究香青兰的
提取方法。本实验流动相采用乙腈-50 g/L 甲酸(31
∶69)时 ,其分离效果均比较好 ,取得了良好的检测精
密度和回收率 ,完全能满足香青兰中阿魏酸含量的测
定 ,且便于推广应用 。实验结果表明 ,本实验方法可
作为香青兰药材中阿魏酸含量的测定方法 ,并可用于
香青兰药材的质量控制 ,本实验为维吾尔药材香青兰
有效成分的研究提供了基础。 (下转第 531页)
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选择 F-CAT 模式 ,输入相关参数及由鹰视 Wave-
lig ht-ALLEGRO Toplyze 获得的 K值数据以后 ,由
Q1Q2自动生成 ,选择目标 Q 值参数并存盘;再将病
人左眼选择标准模式 ,输入相关数据 ,光学区(OZ)
均为 6.5 mm ,角膜瓣厚度为 110 ～ 130 μm ,计算切
削量 ,保证剩余角膜厚度>250 μm 。分别应用德国
鹰视酷眼准分子激光机及法国 Moria M2旋转式自
动板层角膜刀行双眼激光切削 ,蒂位于上方 ,复位角
膜瓣 ,放置隐形眼镜 ,所有手术均由同一医师完成 。
1.4　术后处理
术后常规局部点滴眼液[ 3] , 123例(246眼)病人
随访时间>6 个月 ,复查裸眼视力 、屈光度 、最佳矫
正视力 、角膜地形图等。
1.5　统计分析
实验结果采用 PPMS 1.5[ 4] 统计软件进行统计
处理 ,计量资料的比较采用 t检验;率的比较采用 χ2
检验 ,以 P<0.05为差异有显著性 。
2　结　　果
2.1　术后视力
Q值引导组术后裸眼视力达到 5.0 以上者为
96.75%,标准组为 94.31%;Q 值引导组术后裸眼
视力比术前最佳矫正视力下降一行者为 3.25%,标
准组为 5.69%,两组比较差异无显著性(P>0.05)。
2.2　不同手术方式术后 Q 值比较
手术前 ,Q 值引导组和标准组病人的 Q 值分别
为-0.202±0.151和-0.198±0.147 ,两组比较差
异无显著意义(P>0.05)。分别行 Q 值引导个体化
LASIK 切削程序治疗或标准 LASIK切削程序治疗
6个月后 ,Q 值引导组和标准组病人的 Q 值分别为
0.113±0.287 、0.480±0.269 ,两组比较差异具有显
著性(t=40.86 , P<0.05)。
2.3　不同手术方式病人术后视觉生活质量满意度
比较
病人经不同手术方式处理 6 个月后 , Q 值引导
组的病人视觉生活质量满意度为 83.73%,标准组
为 70.73%,两组比较差异具有显著性(χ2 =16.97 ,
P <0.05)。
2.4　术后不良反应
术后第 1天 ,两组病人均有异物感 、畏光 、流泪 ,
第 2 ～ 3天症状消失。
3　讨　　论
准分子激光手术术后裸眼视力的提高是衡量治
疗效果的重要指标[ 5] ,本文两组病人术后随访均>6
个月 ,裸眼视力≥5.0者超过 94%,证明 LASIK 治
疗近视及散光的安全稳定性和可预测性 ,正常人眼
角膜前表面整体的形态呈非球面 ,呈现中央陡而周
边平的特点 ,存在一定量的球差。标准准分子激光
角膜手术后 ,角膜前表面的形态发生显著变化 ,由术
前横椭圆非球面形变为长椭圆非球面形 ,这是造成
部分病人复视 、暗视力下将 、眩光等症状的主要原
因 。随着屈光手术的普遍开展 ,许多研究者已经提
出 Q 值的重要性 ,与标准 LASIK 相比 ,Q 值引导的
个体化 LASIK更有助于维持角膜生理性的非球面
性 。本文对 123例(246眼)随访时间>6 个月的近
视病人的观察显示 , Q 值引导的个体化 LASIK 治
疗近视 ,在有较好的临床预测性与准确性的同时 ,能
使视觉生活质量提高 ,增加了病人的满意度 ,值得在
临床上推广应用。
[参考文献]
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(本文编辑　厉建强)
(上接第 529页)
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(本文编辑　厉建强)
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