全 文 ：性［8］，FS是体内产生的一种生物活性物质，对肝细胞增殖具有促
进作用［9］，其肝聚集性特点提示了它可能具有良好的应用前景。
王振常教授认为，湿热瘀毒残留难尽是肝炎肝纤维化、肝硬
化启动因子和持续因素，湿热瘀毒残留所引起的人体气血阴阳不
和，脏腑功能失调，三焦气化不利为生(湿浊)痰瘀之本，痰(湿
浊)毒瘀阻络反过来影响气道的通畅，肝肾阴虚是内因和转
归［10］。治疗上以健脾益肾滋阴柔肝之为主，兼顾解毒活血化痰
软坚散结，黄芪、苡仁益气健脾运湿;黄精、枸杞子、黑枣补肾柔
肝，肝脏阴血充盈，则坚自消而得柔润，功能始恢复;鳖甲、生牡
蛎、土鳖虫活血化痰软坚散结;杏仁、橘红化痰醒脾，通调三焦，气
行则痰(瘀)自消;泽兰善通肝脾之血脉，活血而不伤正，养血不
滋腻，药力在中焦，横向运行，对所说“门静脉循环障碍”确有通
达之功;佐以虎杖、丹皮清热凉血解毒以除潜伏未清的湿热余邪;
肝硬化患者已有内虚，如不加调理之品亦难取效，方中内金不仅
在消积化瘀并助前药消积之力，且有消导调中、健脾开胃之功，其
意亦在于此。本方抓住痰 气 瘀(毒)的病理实质，调整肝脾肾三
脏的实质损害带来的功能性障碍，以扶正为主是其特点，兼清余
邪，禁用克伐攻逐之品以免损伤正气。不但消除化散瘀结的痰
(毒)血，而且阻断了生痰致瘀之源，以求治治其根源，治痰瘀之
妙寓意颇深。
柔肝化纤颗粒正是根据肝纤维化的发病机制与病理环节组
方，本实验结果显示柔肝化纤颗粒治疗组较模型组纤维化程度明
显减轻，治疗组肝组织 ACT A的表达、细胞的凋亡低于模型组(P
＜0． 05或 P ＜0． 01) ;各治疗组血清 FS水平均显著高于模型组(P
＜0． 01) ，提示柔肝化纤颗粒能够显著改善肝纤维化大鼠肝组织的
病理变化，具有明显的抗肝纤维化作用，且有一定的量效关系(即
大、中剂量组疗效优于小剂量组) ，其作用机制可能与调控 ACT A
和 FS表达有关，从而减少肝细胞的凋亡，促进肝细胞再生。
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收稿日期:2012-04-26; 修订日期:2012-08-16
基金项目:广西壮族自治区科学基金资助项目( No．桂科自 0899012) ;广西壮族自治区卫生计划项目( No． Z2010268)
作者简介:李 江( 1970-) ，男( 汉族) ，四川金堂人，现任桂林医学院附属医院药学部副主任药师，硕士学位，主要从事天然药物与中药新药的研究开
发工作．
三叶青藤醇提物对胶原性关节炎大鼠关节肿胀率
和组织病理学作用的研究
李 江，罗昱澜，蔡小玲，童东锡
(桂林医学院附属医院药学部，广西 桂林 541001)
摘要:目的 研究三叶青藤醇提物对Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎关节肿胀率和病理改变作用。方法 用 SD大鼠建立 CIA
动物模型，用三叶青藤醇提物从造模第 2 周开始灌胃给药，时间为 4 周，用毛细管放大法每周测量注射侧踝关节肿胀率，
并用苏木素 －伊红( HE) 染色方法，观察注射侧踝关节病理组织学改变。结果 三叶青藤醇提物能显著减轻胶原性关节
炎大鼠的关节肿胀率，但对关节组织病理学没有明显的改善作用。结论 三叶青藤醇提物对大鼠胶原性关节炎有一定抑
制作用，其机制与非特异性抗炎作用有关。
关键词:三叶青藤醇提物; 胶原性大鼠关节炎; 关节肿胀率; 组织病理学
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 11． 018
中图分类号:R285． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2012) 11-2707-02
The Arthroncus Rates and Histopathology Effects of the Ethanol Extracts of Illigera rho-
dantha Hance． in Collagen － induced Rat Arthritis
LI Jiang，LUO Yu-lan，CAI Xiao-ling，TONG Dong-xi
( Department of Pharmacology，The Affiliated Hospital of Guilin Medical College，Guangxi Guilin 541001，Chi-
na)
Abstract: Objective To study the arthroncus rates and histopathology effects of the ethanol extracts of Illigera rhodantha Hance．
in collagen － induced rat arthritis．Methods Collagen － induced arthritis model in Sprague Dawley rats was established，the ethanol
extracts of Illigera rhodantha Hance． were used to treat CIA rats for 4 weeks from the second week． The changes of swelling rate
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL ． 23 NO． 11 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 11 期
and histopathology of direct injected ankle joint were observed． Results The ethanol extracts of Illigera rhodantha Hance． could
decrease the arthroncus rates significantly，but could not improve histopathology of ankle joint． Conclusion The ethanol extracts of
Illigera rhodantha Hance． have some anti － inflammatory effects which may correlate with its unspecified anti － inflammatory mechanism．
Key words: The ethanol extracts of Illigera rhodantha Hance; Collagen － induced rat arthritis; Arthroncus rates; Histopa-
thology
三叶青藤为青藤科植物红花青藤 Illigera rhodantha Hance．
的干燥地上部分，为壮医常用药材，在广西有较长的使用历史。
其性味微甘、辛、涩、温，功能祛风散瘀、消肿止痛，壮族民间用于
风湿性关节炎、跌打肿痛、小儿麻痹后遗症等的治疗［1］。本课题
组已对其镇痛及对非特异性炎症方面的作用进行了实验性研究，
证明三叶青藤醇提取物对非特异性炎症具有一定的抗炎作
用［2］。现对其在Ⅱ型胶原诱导的大鼠免疫性关节炎症中的作用
进行考察，为三叶青藤的临床开发应用提供科学依据。
1 材料与仪器
1． 1 药物 三叶青藤，购自广西玉林市药材市场，经桂林医学院药
学系天然药物化学教研室唐爱莲副教授鉴定为青藤科植物红花青
藤 Illigera rhodantha Hance．的干燥茎。药材粉碎后过 10 ～ 20 目
筛，采用 10倍量 95%乙醇加热回流提取，每次 1． 5 h，共 3次，过滤
后合并滤液，减压回收乙醇，继续减压浓缩至稠膏状，在 50℃真空
干燥，干燥物得率为 2． 64% ，临用时用吐温 － 80 研磨溶解后再加
水稀释成所需浓度的药液。雷公藤多苷片，贵州汉方制药有限公
司，批号 0900501，用 1%羧甲基纤维素钠配成混悬液。
1． 2 动物 Sprague Dawley(SD)大鼠，SPF 级，♂性，体质量(120
± 10)g，购自桂林医学院实验动物中心，实验动物使用许可证号:
SCXK2007 － 0001。
1． 3 试剂 牛Ⅱ型胶原(CⅡ) ，sigma 公司出品;弗氏完全佐剂
(CFA) ，sigma公司出品;冰醋酸，汕头市西陇化工厂有限公司出
品，批号 0812182;其它试剂均为分析醇。
1． 4 仪器 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂) ;小型真空干燥
箱(郑州长城科工贸有限公司) ;离心机(美国雅培) ;电热恒温水
浴箱(上海医疗器械七厂) ;UV27504 紫外可见分光光度计(上海
欣茂仪器有限公司)。
2 方法
2． 1 CIA大鼠模型的诱导［3，4］ 将一定量 CⅡ溶于 0． 1 mol /L 的
冰醋酸，浓度为 4mg· ml －1，在 4℃下搅拌充分溶解，置 4℃冰箱
过夜，再与弗氏完全佐剂在冰水浴中 1∶ 1 充分混和乳化，制成 C
Ⅱ乳剂(即 CⅡ浓度为 2 mg· ml －1)。置 4℃冰箱保存备用。造
模时每只大鼠于尾根部或脊背部 2 点、左后足 1 点皮内注射
CⅡ乳剂致炎，每点 0． 1 ml，1 周后尾根部 2 点加强注射。同时，
另设正常对照组，相同部位注射等量生理盐水。
2． 2 分组及给药 造模后第 14 天筛选左足肿胀率在 30%以上
者大鼠 18 只，按体质量随机分为三组:模型组、造模 +雷公藤多
苷组、造模 +三叶青藤醇提物组，每组 6 只，与正常对照组一起开
始灌胃给药，每天 1 次，连续 4 周。模型组和正常对照组灌胃
5%的吐温 － 80 溶液 1 ml，造模 +雷公藤多苷组灌胃雷公藤多苷
混悬液 10 mg·kg －1·d －1，造模 +三叶青藤醇提物组灌胃三叶青
藤醇提物 16 mg·kg －1·d －1。
2． 3 关节肿胀率的测定 采用毛细管放大法，在造模致炎前 1 d
测量大鼠左足足 的容积，作为基础值。以后每周测量一次，
记录容积值。肿胀率(%)=(造模后足容积 － 造模前足容积)/
造模前足容积 × 100%。
2． 4 关节组织病理学研究［5］ 给药结束后，处死大鼠，将左侧踝
关节剥除皮肤后，放入 10%的甲醛溶液中固定 48 h 以上，20%
的乙二胺四乙酸(EDTA)脱钙 30d 后，常规梯度乙醇脱水，石蜡
包埋，切片，分别行苏木素 －伊红(HE )染色，在显微镜下观察各
组大鼠关节滑膜增生、炎性细胞浸润、血管翳形成及软骨破坏的
情况。
2． 5 统计学方法 数据的统计分析运用 EXCEL软件的数据分析
功能，数据结果以 珋x ± s表示，不同组间均数比较采用 t检验。
3 结果
3． 1 三叶青藤醇提物对 CIA大鼠关节肿胀的影响 由表 1 可见，
模型组大鼠左足足拓的肿胀率在造模后第 3 周达到峰值，而造模
+雷公藤多苷组的左足拓肿胀率在第 2 周达到峰值后，随后快速
下降。造模 +三叶青藤醇提物组的左足拓肿胀率在第 3 周达到
峰值后开始下降，且肿胀率减轻的程度比模型组更大，到第 5、6
周时与模型组比较已存在显著性差异(P ＜ 0． 05)。
表 1 三叶青藤醇提物对 CIA大鼠关节肿胀的影响(珋x ± s) %
组别
造模后不同的时间的足肿胀率
第 1 周 第 2 周 第 3 周 第 4 周 第 5 周 第 6 周
正常对照 7． 06 ± 5． 44 12． 14 ± 6． 80 13． 83 ± 5． 94 21． 15 ± 3． 49 22． 06 ± 3． 27 28． 25 ± 4． 10
模型 55． 22 ± 4． 95b 67． 52 ± 6． 67b 75． 29 ± 4． 66b 74． 60 ± 5． 07b 72． 60 ± 6． 76b 68． 94 ± 6． 37b
造模 +雷公藤多苷 56． 68 ± 6． 55b 71． 07 ± 6． 85b 66． 47 ± 6． 58bc 62． 09 ± 6． 35bd 56． 18 ± 6． 97bd 49． 95 ± 8． 18bd
造模 +三叶青藤醇提物 55． 05 ± 4． 08b 68． 49 ± 6． 83 b 71． 74 ± 4． 82b 67． 46 ± 6． 52b 62． 92 ± 6． 16bc 59． 06 ± 5． 61bc
与正常对照组比较，aP ＜ 0． 05，bP ＜ 0． 01 ;与模型组比较，cP ＜ 0． 05，dP ＜ 0． 01;n = 6
3． 2 三叶青藤醇提物对 CIA 大鼠关节组织病理的影响 RA 对
大鼠机体的危害很大程度反映在大鼠关节病变上。对关节炎大
鼠踝关节切片进行病理学观察，可以直观了解药物的疗效。实验
结果:正常对照组大鼠踝关节囊腔光滑，滑膜衬里层 1 ～ 2 层细
胞，细胞排列规则，表面光滑，无炎细胞浸润;模型组大鼠滑膜下
组织弥漫性炎性细胞浸润和血管翳形成，滑膜增生非常明显，甚
至形成绒毛状突起;造模 +雷公藤多苷组滑膜炎症反应减弱，增
生程度减轻，滑膜组织结构较模型组明显改善，滑膜细胞呈轻度
增生。造模 +三叶青藤醇提物组大鼠关节组织病理表现与模型
组相似，未有明显的改善作用。
4 讨论
本研究考察了三叶青藤醇提物对牛Ⅱ型胶原诱导的大鼠免
疫性关节炎的作用。从实验结果来看，三叶青藤醇提物一定程度
上能减轻胶原性关节炎大鼠的关节肿胀率，但对关节炎大鼠关节
组织病理组织学没有明显的改善作用，说明三叶青藤醇提物抗炎
作用机制以非特异性的抗炎作用为主，我们的前期研究已证实三
叶青藤醇提物对炎症部位的 PGE2 有抑制作用，但对 IL － 1、TNF
－ α等炎症因子的影响仍不清楚，有待于进一步的研究。
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 11 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 11